DENGUE

Lic. Javier O. Ruz M

Lic. Aricela Subilla de Miller
Encargada de la Seccin de Inmunoserologia
Policlinica J. J. Vallarino Caja Seguro Social
Dengue (Fiebre rompe huesos)
Agente etiolgico:
Flavivirus - virus de una sola cadena de RNA.
Morfologa - esfrica.
Envoltura - pleomrfica.
Hay 4 tipos inmunolgicos 1, 2, 3, 4.
Es endmico en China, Vietnam, Asia, Africa, Amrica Latina:
Caribe, Amrica Central, Mxico, Venezuela, Brasil, etc.
Es ms frecuente en tiempos de lluvia, en aguas limpias
,temperaturas altas ,baja altitud y alta humedad.
Artrpodo transmisor: Aedes aegypty - urbana, Aedes
albopictus - rural
Mapa de regiones con Dengue y Dengue
Hemorrgico. Los puntos amarillos
indican epidemias recientes.(datos de
OMS)

Dengue (Fiebre rompe huesos)
Mapa con la distribucin de Aedes aegypti
Dengue
Aedes: es una especie hematfaga diurna .con un km de radio de
accin.[ altitud 1300mts y 25 a 40 grados C ]
Pica 2 horas antes del amanecer y antes de que oscurezca.
Mosquito se vuelve infectante 8 a 12 das despus de alimentarse
de sangre infectada.
Dengue clsico:
Perodo de incubacin 4 a 10 das.
Enfermedad febril aguda. de 2 a 7 das
Sabor herrumbroso en la boca
Cefalea intensa, anorexia.
Mialgias, artralgias.
Dolor retroorbital, erupcin y eritema facial
Vmitos, alteraciones gastrointestinales.
Husped - seres humanos, primates, mosquitos.
Dengue Clsico
Linfadenopatas.
Leucopenia con linfocitosis.
Trombocitopenia (menos de 100.000 pl/mm3).
TSGO y TSGP - ligeramente altas.
Diagnstico diferencial:
Sarampin, rubola, influenza, leptospira.
Diagnstico del laboratorio:,
Serologa - inhibicin de hemoaglutinacin
F de C.
ELISA.[ 4 das IgM alto y 5 dia el Ac Ig G empieza a subir ]
PCR [ viremia 5 a 6 das antes de los sntomas ].
Neutralizacin para detectar el serotipo.
Aislamiento del virus:
Aislamiento de sangre en cultivo de tejido, celular o en mosquito.
Inculo ratn (parlisis flcida).
Dengue Hemorrgico
Forma clnica con sangrado:
Aumento de permeabilidad vascular.
Trombocitopenia - petequias -
equimosis - gingivorragia.
Hipovolemia.
Elevacin del hematocrito.
Vmitos, dolor abdominal, hemorragia
gastrointestinal.
Derrame serosas.
Shock y muerte.
Dengue Hemorrgico
Hemorragia es el resultado de varios factores plaquetarios
vasculares y coagulopticos.
Slo se produce coagulacin intravascular diseminada en un
nmero reducido de pacientes ms en nios.
Otros hallazgos de laboratorio:
Hiponatremia., hipoproteinemia
Fibrinogeno alto
Albuminuria
TSGO y TSGP ligeramente elevados.
Complemento.disminuido
Linfocitos atpicos
Tiempo de protombina elevado.
Dengue Hemorrgico - Mecanismo
Monocito
Clula blanco
+
Paciente
Ac contra
algn serotipo
Infeccin por
otro serotipo
Los Ac anteriores favorecen penetracin
celular y replicacin viral
INMUNO AMPLIFICACION
Liberacin de
MEDIADO RES
Permeabilidad vascular

Tromboplastina
Dengue
Signos clnico - humorales Dengue Clsico FHD (nios)
(adultos)

Fiebre + + + + + + + +
Prueba del lazo positiva + + + + + +
Petequias o equimosis + + +
Rash petequial confluente 0 +
Hepatomegalia 0 + + + +
Rash maculopapular + + +
Mialgia / artralgia + + + +
Linfadenopata + + + +
Leucopenia + + + + + +
Trombocitopenia + + + + + +
Shock 0 + +
Hemorragia gastrointestinal 0 +
Materiales Provistos para el ELISA de
Captura del Dengue Ig M

Microplatos con anticuerpos anti-human IgM

Dengue 1-4 Antgeno recombinante.

Concentrado de Buffer de lavado.

Diluente de Suero.

Diluente de Antgeno.

HRP Conjugado Anticuerpo Monoclonal Tracer.

Tetrametilbenzidina TMB.

Suero Control Ig M Positivo.

Suero Calibrador Ig M.

Suero Control Ig M Negativo.

Solucin Stop.
Materiales Provistos para el ELISA de
Captura del Dengue Ig G

Microplatos con anticuerpos anti-human IgG.

Viales liofilizados de antgenos virales 1,2,3,4 de
Dengue.

Concentrado de Buffer de lavado.

Diluente de Suero.

Buffer reconstituyente para el Antgeno.

HRP Conjugado Anticuerpo Monoclonal Tracer.

Tetrametilbenzidina TMB.

Suero Control Ig G Positivo.

Suero Calibrador Ig G.

Suero Control Ig G Negativo.

Solucin Stop.
Materiales Adicionales Requeridos y no provistos
por el Kitt.

Micropipetas ajustable de (5 1000 l de capacidad).

Agua destilada.

Sistema de lavado de microplatos.

Lector de microplatos con longitud de onda de 450nm.

Reloj.

Probeta.

Tubos de plstico para pre dilucin de los sueros.

Tubos de plstico o vial para pre dilucin del antgeno.

Tubos con Suero de los pacientes a evaluar.
Metodologa


Toma de muestra; recomendaciones de la seccin de Virologia del Instituto
Conmemorativo Gorgas.

A la hora de la realizacin de la prueba en nuestra policlnica se utiliz la tcnica
de ELISA de Captura para Dengue Ig M y Dengue Ig G (panbio diagnostics).

Para los lavados se utiliz el lavador Biotek (ELx50)

Para la lectura de las absorbancias se utiliz el lector Biotek (ELx800) el cual tiene
programado la prueba de panbio Dengue Ig M e Ig G.
RESULTADOS


Muestra de la poblacin atendida en nuestra policlnica (J.J.
Vallarino). Fue de 50 pacientes atendidos en el Cuarto de
Urgencias y consulta externa.

A los 50 pacientes tomados para realizar este trabajo se les
realiz la prueba en bsqueda de los dos tipos de
Inmunoglobulinas tanto M como G contra el virus del
Dengue; para as poder determinar si la infeccin por Dengue,
en el caso de darse resultados positivos, era de tipo primaria o
de tipo secundaria, dndose as un estudio analtico
descriptivo, de los cuales se obtuvieron los siguientes
resultados.
Negativo Positivo Total
Dengue Ig M 7 3 10
Dengue Ig G 8 2 10
Tabla 1. Pacientes de 1 toma (0-3 das)
0
1
2
3
4
5
6
7
8
Negativo Positivo
Dengue Ig M
Dengue Ig G
Tabla 2. Pacientes de 2 toma (> 8 das)
Negativo Positivo Total
Dengue Ig M 10 30 40
Dengue Ig G 11 29 40
0
5
10
15
20
25
30
Negativo Positivo
Dengue Ig M
Dengue Ig G
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
DENGUE PRIMARIO DENGUE
SECUNDARIO
INFECCIONES NO
DENGUE
PORCENTAJES POR POBLACIN
PORCENTAJES POR POBLACIN
Dengue
CONCLUSIONES


Para los primeros 10 pacientes a los cuales se les tom la muestra a los 3 das:

3 de estos pacientes presentaban una infeccin de tipo primaria.
2 pacientes presentaban una infeccin de tipo secundaria.
5 pacientes estaban negativos para Ig M e Ig G contra Dengue.

Para los 40 pacientes restantes a los cuales se les tom la muestra a los 8 das o ms:

29 pacientes presentaban una infeccin de tipo secundaria.
1 paciente con infeccin de tipo primaria.
10 pacientes negativos para Ig M e Ig G contra Dengue.


CONCLUSIONES


Esto nos lleva a la conclusin que el 62 % de nuestra poblacin estudiada presenta
una infeccin secundaria.
El 8 % present una infeccin primaria
El 30 % present una infeccin de sintomatologa parecida al Dengue pero de
etiologa distinta.
Este dato es de vital importancia ya que como vemos es un porcentaje alto de
pacientes a los cuales probablemente se les pudo haber tratado como pacientes
con dengue lo cual pudo ser un error por parte del mdico ya que la informacin o
los resultado de las pruebas slo se utilizan como datos epidemiolgicos y no
como diagnstico y los pacientes se merecen un diagnstico diferencial para poder
darles el tratamiento correcto hacia su enfermedad.
RECOMENDACIONES


Existen por lo menos dos razones para la vigilancia del dengue basado en el laboratorio.

La primera porque se requiere confirmar los casos teniendo en cuenta que existen
enfermedades clnicamente semejantes. El Dengue Hemorrgico hay que hacer la
diferenciacin de otras infecciones.

La segunda porque se ha demostrado que el riesgo de epidemias de dengue e
incremento de casos hemorrgicos puede depender del serotipo del virus que est
circulando.

Cuando la vigilancia se realiza con un nico suero el estimativo es impreciso como se ha
comprobado en diferentes estudios.

Por las dificultades logsticas, es difcil establecer una vigilancia activa para recoleccin
de sueros pareados.

Como consecuencia la muestra recomendada sera el suero colectado despus
del sptimo da porque se aumenta la probabilidad de confirmar los casos. Sin
embargo, esto tiene los siguientes inconvenientes:

1. La mayora de pacientes reciben asistencia mdica durante la etapa aguda y
son pocos con quienes se tiene contacto despus de sta. Por lo cual no
retornan para la toma de la segunda muestra.

2. La posibilidad de conocer los virus circulantes disminuye significativamente
porque el aislamiento es exitoso del suero de los primeros 3 das de inicio de
sntomas.

3. Infecciones recientemente pasadas se podran informar como agudas
considerando que la IgM se puede detectar hasta por 3 meses. Vaughn et al.
11

Hola soy el mosquito Aedes aegypti
y soy un asesino en potencia crees que puedas detenerme?