Mtodos de desinfeccin y esterilizacin

Crecimiento bacteriano
Es importante conocer cmo se multiplican las bacterias, sus
requisitos de crecimiento y su metabolismo.

MULTIPLICACION, por fisin binaria, que es un proceso
asexual.

DESARROLLO BACTERIANO. Un cultivo bacteriano se
duplica cada 20 minutos, E. coli producira 2
144
bacterias en
24 horas

En condiciones ideales la mayora de los cultivos bacterianos se
multiplican en forma logartmica solo durante 3 a 5 h.,
agotan sus nutrientes esenciales y acumulan productos txicos
producto del metabolismo.
Razones
Prevenir la transmisin de enfermedades

Evitar la contaminacin de alimentos,
sanitarios, mobiliario, instrumental, etc.

Realizar una buena tcnica de estudio de
microorganismos.
Esterilizacin: Destruccin o remocin de todo ser
vivo.

Desinfeccin: matar, inhibicin o remocin de
orgasnismos patognicos
Usualmente en superficies
No es esterilizacin

Sanitacin: reduccin de poblaciones microbianas a
niveles aceptables de salud pblica
Definiciones
Antispticos: agentes qumicos aplicados a tejido
vivo para impedir crecimiento microbiano.

Desinfectante: agentes qumicos aplicados sobre
superficies para impedir crecimiento microbiano.

Antibitico: Medicamento qeu mata o inhibe el
crecimiento bacteriano.
Penicillina
Estreptomicina
Etc.
Esterilizacin: eliminacin de toda forma de vida,
includas las esporas.

Asepsia: tcnicas empleadas para impedir el acceso de
microorganismos al campo de trabajo.

Higienizacin: Agente que reduce la poblacin
bacteriana hasta niveles seguros para las exigencias de
la salud pblica.

Sanitizacin, limpieza.

Se aplica a objetos inanimados y matan el 99% de
los microbios en crecimiento.
Tambin se le da el nombre de condicin sanitaria

Antimicrobiano: agente que mata o inhibe el crecimiento de
los microorganismos (antibacteriano, antifngico, etc.).

Microbicida (Germicida): agente que mata formas
vegetativas, pero no necesariamente las esporas de un
microorganismo (bactericida, fungicida, alguicida, etc.).

Microbiosttico: agente que inhibe el crecimiento de
microorganismos (bacteriosttico, fungisttico, etc.).

Desinfeccin: es el proceso de destruccin de los agentes
infecciosos.

Desinfectante: Sustancias qumicas que matan las formas
vegetativas y no necesariamente las formas de resistencia
de los microorganismos patgenos.
Se refiere a sustancias empleadas sobre objetos
inanimados.
Antisepsia: Operaciones o tcnicas encaminadas a
crear un ambiente que impida el desarrollo de los
microorganismos e incluso pueda matarlos.

Antispticos: Sustancias qumicas que previenen el
crecimiento o accin de los microorganismos ya
sea destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y
actividad.
Se refiere a sustancias que se aplican sobre
el cuerpo

Antibiosis: fenmeno biolgico que detiene o
destruye el crecimiento microbiano debido a
sustancias producidas por otro ser vivo.



Antibiticos: sustancias producidas por un ser vivo que
se oponen a la vida de otro ser vivo.

Agentes teraputicos: antimicrobianos empleados en el
tratamiento de infecciones.

Agentes quimioteraputicos: sustancias qumicas
empleadas en el tratamiento de enfermedades
infecciosas o enfermedades causadas por la
proliferacin de clulas malignas.
Control Microbiano

Cuando una poblacin microbiana se expone a un agente letal, la
cintica de la muerte es casi siempre exponencial ya que el
nmero de supervivientes disminuye de forma geomtrica con el
tiempo.
Factores que afectan el control de los
microorganismos

El nmero de microorganismos
El tiempo de exposicin.
La concentracin del agente de control
Condiciones ambientales locales
El tipo de microorganismos
La temperatura
El estado fsico de el microorganismo
Modo de accin de los agentes microbianos:

Alteran la permeabilidad de la membrana

Daan las protenas y los cidos nucleicos
Mtodos fsicos
A.- Esterilizacin por calor hmedo
Autoclave
Tindalizacin
Pasteurizacin
Hervir

B.- Esterilizacin por calor seco
Horno
Incineracin


La alta temperatura combinada con un alto grado de
humedad es uno de los mtodos ms efectivos para destruir
microorganismos.


El calor hmedo mata los microorganismos porque coagula
sus protenas siendo ms rpido y efectivo que el calor seco
que los destruye al oxidar sus constituyentes qumicos.
consideraciones
Medios fsicos
Calor hmedo
Autoclave
El calor en forma de vapor a saturacin y a presin proporciona
temperaturas superiores a las que se obtienen por ebullicin.

El aparato utilizado se llama autoclave (una olla que regula la
presin interna y el tiempo).

Es un proceso que reduce la poblacin microbiana de
un lquido.

La leche, nata y ciertas bebidas alcohlicas (cerveza y
vino), los jugos, se someten a tratamientos de calor
controlado que slo matan a ciertos tipos de
microorganismos pero no a todos.

Pasteurizacin tradicional: 63 a 65C por 30 min
Pasteurizacin Flash: el lquido se calienta a 72 C
por 15 s y rpidamente se enfra. Puede ser
adaptada a flujos continuos.
Ultrapasteurizacin: 150 o C por 1-3 seg

Pasteurizacin
Tambin llamada pasteurizacin fraccionada

Calentamiento del material de 80 a 100C hasta 1 h
durante 3 das con sucesivos perodos de incubacin.

Se utiliza cuando las sustancias qumicas no pueden
calentarse por encima de 100 C sin que resulten
daadas.

Las esporas resistentes germinarn durante los
perodos de incubacin y en la siguiente exposicin al
calor las clulas vegetativas son destruidas.
Tindalizacin
Medios fsicos
Calor seco
La esterilizacin seca se logra a 160-170 C por
2 - 3 h.

El calor seco se utiliza principalmente para esterilizar
material de vidrio y otros materiales slidos estables al
calor.

Para el material de vidrio de laboratorio se consideran
suficientes dos horas de exposicin a 160 C.
Horno
La destruccin de los microorganismos por
combustin o cremacin.

En los laboratorios, las asas de siembra se calientan a
la llama de mecheros Bunsen.

La incineracin tambin se utiliza en la eliminacin de
residuos hospitalarios.
Incineracin
Medios qumicos
Desinfectantes
Desinfectantes
Mecanismos de accin

Desnaturalizacin y coagulacin de protenas

Oxidacin

Alteracin de permeabilidad de la membrana

Combinacin radicales de protenas y cidos
nucleicos

Naturaleza de los microorganismos
Potencia de los desinfectantes

Alto nivel:
bacterias vegetativas
micobacterias, hongos, virus
no esporas bacterianas
Nivel intermedio:
bacterias vegetativas
hongos y virus
dificultad virus desnudos de pequeo tamao
no esporas bacterianas
Bajo nivel:
no todos los hongos
no virus desnudos de pequeo tamao
No esporas bacterianas
Condiciones fsico-qumicas


Tiempo de exposicin

Temperatura

Concentracin

pH
Medios qumicos - Desinfectantes
Presencia de materia orgnica


Puede captar e inactivar al desinfectante (Ej. Derivados del Cl)


Puede dificultar el contacto del desinfectante con los microorganismos


Imprescindible limpiar material antes de la desinfeccin!!!
Medios qumicos - Desinfectantes
Desinfectantes ms usados:

Alcoholes
Agentes oxidantes (Cloro, Yodo, Ac. Paractico, H2O2)
Agentes surfactantes
Derivados fenlicos
Aldehdos
Oxido de etileno
Alcoholes: Etanol e isopropanol


Mecanismo de accin: desnaturalizacin de protenas
y alteraciones en la membrana
Nivel intermedio
Escasa toxicidad
Usos:
antispticos cutneos en forma de sol. acuosa al
70-90 %
desinfectantes de objetos semicrticos y no crticos

Inactivacin por la materia orgnica
Derivados del Cloro: Hipoclorito sdico en
sol. acuosa

Mecanismo de accin: Oxidacin
Alto o bajo nivel (en funcin de la concentracin)
Muy txico y corrosivo
Usos:
Tratamiento de aguas
Desinfeccin de superficies ambientales en general

Inactivacin por la materia orgnica e inestabilidad


Yodo y Yodforos (Povidona yodada)


Mecanismo de accin: Oxidacin (< Cl) y halogenacin
Nivel intermedio
Poco txicos
Usos: Antispticos de mayor uso (piel intacta, heridas,
colutorios, lavado quirrgico de manos,...)

Inactivacin por la materia orgnica. Proteger de la luz


Acido paractico


Mecanismo de accin: Oxidacin y alteracin de la
permeabilidad de la membrana
Alto nivel y esterilizante
Txico y corrosivo de metales
Usos:
Esterilizacin de endoscopios
Desinfeccin de instrumental

Se mantiene activo en presencia de materia orgnica


Perxido de hidrgeno


Mecanismo de accin: Oxidacin
Potencia variable (en funcin de la concentracin y T)
Soluciones concentradas son txicas y corrosivas
Usos:
Desinfeccin de lentes de contacto (3%)
Desinfeccin de equipos mdicos limpios (6%)
Esterilizacin con PLASMAGAS



Plasmagas


Agente esterilizante.
H
2
O
2
vaporizado, sometido a radiaciones de alta
energa
Mecanismo accin: formacin de radicales libres
(oxgeno atmico) de alto poder microbicida.
Ventajas frente al xido de etileno:
No productos secundarios txicos.
Alta eficiencia.



Agentes surfactantes


Mecanismo de accin: Alteracin de la membrana
Bajo nivel
Poco txicos
Uso: Antispticos


Cloruro de benzalconio (Dvdo. Amonio cuaternario)
Paraclorometaxilenol

Derivados fenlicos


Mecanismo de accin: Alteracin de la membrana y
coagulacin de protenas
Nivel intermedio

Usos:
Descontaminacin ambiental
Antispticos:
Hexaclorofeno
Triclosan



Aldehdos (Glutaraldehdo y formaldehdo)


Mecanismo de accin: Agentes alquilantes
Alto nivel y esterilizantes
Muy txicos y potencialmente carcinognicos
Usos:
Esterilizacin de materiales no resistentes al calor
(glutaraldehdo)
Desinfeccin de cabinas de seguridad biolgica
(formaldehdo)


Oxido de etileno


Mecanismo de accin: Oxidacin y alquilacin

Alto nivel y esterilizante con rapidez de efecto

Muy txico (cmara hermtica y posterior aireacin)

Usos: Esterilizacin de materiales no resistentes al
calor ni a la humedad


Factores a considerar en la seleccin del
mtodo de desinfeccin

Microorganismos:
Grado de muerte microbiana requerido
Naturaleza microbiana (virus, bacterias...)

Instrumental
Uso al que se destine
Naturaleza del objeto a tratar
Costo del procedimiento

Facilidad/accesibilidad de la tcnica

Impacto medioambiental