Universidad de Talca Doctorado en Ciencias mencin Ingeniera Gentica Vegetal Seminario bibliogrfico

Iniciacin radicular en el embrin

Cristian Lpez Barreaux 10 de Junio 2011

Introduccin

En Arabidopsis el sistema de races es iniciado en el embrin por la especificacin de una clula llamada hipfisis.

La raz es uno de los tres rganos ms importantes de las plantas. Absorcin de agua y nutrientes. Anclaje de la planta. Permite monitorear el suelo para un amplio rango de condiciones ambientales.

Diferentes tipos de races

Anatoma tpica de la raz

Taiz and Zeiger. Plant Phisiology. 2002. 3rd Ed.

Formacin de la raz en el embrin

Divisin celular asimtrica Diferenciacin celular Presencia de auxinas Factores de transcripcin

Iniciacin de la raz
Divisin celular asimtrica del cigoto. 2 clulas hijas.

Produce 2 niveles de 4 clulas que contribuyen a las regiones centrales y apicales del embrin = SAM e hipocotilo.

Produce el suspensor, de 6 a 9 clulas, la superior corresponde a la hipfisis. Posteriormente RAM

Abrash, E. and Bergmann, D. 2009. Developmental Cell 16.

Durante el inicio de la embriognesis, el meristema de la raz es determinado por divisin asimtrica de la hipfisis.
Dar origen al centro quiescente y a una clula hija basal ms larga que ser destinada a clulas de la Columella.

Abrash, E. and Bergmann, D. 2009. Developmental Cell 16.

Factores de transcripcin asociados a la especificacin de la hipfisis

La especificacin y la formacin de la raz embrionaria depende de un gen AUXIN RESPONSE FACTOR 5 (ARF5)/MP que codifica un factor de transcripcin que media la expresin de genes que responden a auxinas. La degradacin dependiente de auxina de BODENLOS (BDL) permite liberar a MP de su inhibicin y activar sus genes blanco.

MP y BDL no se acumulan en la hipfisis.

Weijers, D. et al. 2006. Developmental Cell. 10.

MP y BDL actan transitoriamente en la Iniciacin de la Raz embrionaria. La interaccin de MP y BDL en el proembrin promueve el transporte de auxinas a la hipfisis para la iniciacin de la raz al activar a PIN1. La mutante bdl produce plntulas con races defectuosas.

La sobreexpresin de MP rescata el fenotipo sin raz.

bdl homocigota

bdl homocigota expresando RPS5A::MP

Weijers, D. et al. 2006. Developmental Cell. 10.

Hamman, T. et al. 1999. Development. 126.

Es requerida la sealizacin clulaclula. MP est expresado en clulas adyacentes.

An existen Seales S para descifrar MP promueve el transporte de auxinas de PIN1

Schlereth, A. et al. 2010. Nature. 464

Se piensa que existen genes que son target de MP que participan en la diferenciacin de la hipfisis para la iniciacin de la raz.

Identificacin de genes blanco de Monopteros (TMO) en el embrin

Porqu? Descifrar S Cmo? microarreglo para genes blanco de MP utilizando mutantes:

mp
Protena mutante bdl dependiente de DEX, (pRPS5A::GR-bdl)

Schlereth, A. et al. 2010. Nature. 464

GR: Receptor de glucocorticoide de rata, dominio de unin a esteroides

96 genes expresados diferencialmente

Respuesta a auxina Homeostasis de hormonas Enzimas metablicas Un alto nmero de factores de transcripcin (16/96 =17% vs 5% en el genoma)

Validacin de Factores de transcripcin con qPCR para verificar target de MP. (8/16) Slo 4 mostraron expresin dependiente en plantas mutantes mp.

CRF2

PRE3/ATBS1

Schlereth, A. et al. 2010. Nature. 464

Para determinar si los genes TMO eran regulados por enlace directo de MP a sus promotores se realiz un ensayo ChIP con MP-GFP y TMOx-YPF

Schlereth, A. et al. 2010. Nature. 464

Schlereth, A. et al. 2010. Nature. 464

En resumen:

Inicialmente TMO3, TMO5, TMO6 y TMO7 son expresados en clulas adyacentes a la hipfisis. Se observa que la expresin de TMO3, TMO5, TMO6 y TMO7 est presente durante todo el desarrollo embrionario. TMO7 altamente relacionado con la formacin del Centro Quiescente del RAM

Adicionalmente:

Al sobreexpresar MP, los niveles de expresin de TMO7 fueron significativamente inducidos.

Schlereth, A. et al. 2010. Nature. 464

En Conclusin:

La divisin celular asimtrica dada por POL/PLL1 y las seales en la hipfisis de MP y factores de transcripcin TMO en presencia de auxinas, permiten formar las clulas precursoras de la raz ubicadas en el RAM del embrin.

Compilado de varios autores

Estado de corazn del embrin

SAM

Cotiledones

Primordio tejido vascular Epidermis Tejido del suelo RAM Centro quiescente
Adaptado de: Jrgens, G. 2001. The EMBO Journal. 20(14):3609-3916

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Iniciacin radicular en el embrin

FIN

Cristian Lpez Barreaux Junio 2011

El centro quiescente es el organizador de los meristemas de la raz. Mantiene el pool de clulas madres de la raz en un estado indiferenciado, los que se activan una vez que comienza la germinacin

Hamman, T. et al. 1999. Development. 126.