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Aspectos de inters tecnolgico sobre la enzima celulasa

CELULOSA
Polmero ms abundante sobre la Tierra. Aprovechamiento de sus azcares mediante degradacin de los polmeros de celulosa. Degradacin por bacterias, protozoos y hongos filamentosos (Manjarrs et al., 2011).

Bayer et al., 2006

Gran importancia de la celulosa por la cantidad de carbono que representa. Polmeros de glucosa hidrolizables. Polmero de celulosa formado por unidades de glucosa mediante enlaces 1,4 glucosdicos (Guarnizo et al., 2009).

Bayer et al., 2006

CELULASAS

3 grandes tipos, -1,4-endoglucanasa (EC 3.2.1.4), exoglucanasa (EC 3.2.1.91) y celodextrinasa (EC 3.2.1.74), y -glucosidasa (EC 3.2.1.21). Secretadas en forma libre (fngicas) o en complejos multienzimticos en bacterianas (celulosomas) (Dixon, 2013).

A) Celulosoma (bacteriano). B) Enzimas libres (fngicas).

Dixon, 2013

Bayer et al., 2006

Actan hidrolizando glucosa de extremos reductores (III-1), removiendo celobiosa (III-2) o hidrolizando celobiosa (III-3) (Ward, 2011).

PRODUCCIN

Fermentacin sumergida Crecimiento en medio lquido en condiciones ptimas para la bacteria. Fermentacin en estado slido Crecimiento sobre una matriz slida en ausencia o bajo contenido de agua (Costa et al., 2010).

Uso de pretratamientos en algunos casos segn la fuente de obtencin de azcares (reduccin de tamao, tratamientos cidos o bsicos). Recuperacin y caracterizacin. Determinacin de actividad por mtodo del cido dinitrosaliclico (DNS) o papel filtro (FPA) (Nordmark et al., 2007; Casablanca et al., 2009).

Cultivo sumergido

Fermentacin en estado slido

FP Assay modificado

Eveleigh et al., 2009

MTODO DE DNS

Casablanca et al., 2009

ESTUDIOS CINTICOS

Condiciones ptimas de crecimiento del microorganismo y produccin y actividad de la enzima (Juhsz et al., 2004).

REA ALIMENTARIA

Produccin de jarabes. Uso como probiticos para la digestin de fibras. Soporte de medicamentos en rea farmacutica.

Ovando-Chacn et al., 2005

BIOCOMBUSTIBLES

Hidrlisis de azcares fermentables procedentes de diversas fuentes (maderas, cereales, etc.). Produccin de etanol a partir de la fermentacin de azcar. Sacarificacin simultnea (hidrlisis y fermentacin).

MEJORAMIENTO GENTICO

Agregado de tolerancia a factores extremos mediante modificaciones genticas. Produccin de enzimas a partir de la insercin de genes con caractersticas deseadas a ciertas condiciones.

DISCUSIONES

Produccin de biocombustibles con compromiso a la suficiencia alimentaria. El uso de fuentes lignocelulsicas tales como maderas, cascarillas y otros desechos son una buena fuente de obtencin. Los parmetros de produccin deben cuidarse segn el tipo de fermentacin que se utilice.

PERSPECTIVAS

La gentica y las herramientas biotecnolgicas juegan un rol importante en la produccin de enzimas que cumplan ciertos requerimientos de los procesos hidrolticos. Se siguen perfeccionando los procesos de sacarificacin para hacerlos ms redituables.

BIBLIOGRAFA

Bayer, E.A.; Shoham, Y.; Lamed, R. 2006. Cellulose-decomposing Bacteria and their Enzyme Systems. En The Prokaryotes. Dworkin, M.; Falkow, S.; Rosenberg, E.; Schleifer, K.H.; Stackebrandt, E. Springer Science, pp: 568-577. Casablanca Alarcn Esther, Ros Manrquez Neida, Teresa lvarez Mara, Terrazas Siles Enriquen. Optimizacin de las condiciones de cultivo anaerbico termfilo para aumentar la produccin enzimtica de xilanasas con cepas bacterianas encapsuladas y libres. BIOFARBO [revista en la Internet]. 2009 [citado 2013 Jun 24] ; 17(2): 51-59. Disponible en: http://www.scielo.org.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S181353632009000200007&lng=es. Costa, M.; Torres, M.; Magarios, H.; Reyes, A. 2010. Produccin y purificacin de enzimas hidrolticas de Aspergillus ficuum en fermentacin slida sobre residuos agroindustriales. Revista Colombiana de Biotecnologa. XII (2): 163-175. Dixon, R.A. 2013. Break down the walls. Nature. 493: 36-37.

Eveleigh, D. E.; Mandels, M.; Andreotti, R.; Roche, C. 2009. Measurement of saccarifying cellulase. Biotechnology for Biofuels. 2: 21. DOI: 10.1186/1754-6834-2-21 Guarnizo F., A.; Martnez Y., P.N.; Valencia S., H.A. 2009. Pretratamientos de la celulosa y biomasa para la sacarificacin. Scientia et Technica. 42: 284-289. Juhsz, T.; Szengyel, Z.; Szijrt, N.; Rczey, K. 2004. Effect of pH on Cellulase Production of Trichoderma reesei RUT C30. Applied Biochemistry and Biotechnology. 113-116: 201-211. Manjarrs, K.; Pieros, Y.; Rodrguez Sandoval, E. 2011. Evaluacin del complejo enzimtico producido mediante el cocultivo de Aspergillus sp. y Trichoderma sp. en fase slida sobre residuos de Palma. Bioagro. 23 (1): 19-26. Ovando-Chacn, S.L.; Waliszewski, K.N. 2005. Preparativos de celulasas comerciales y aplicaciones en procesos extractivos. Universidad y Ciencia. 42 (21): 113-122. Ward, R. 2011. Cellulase Engineering for Biomass Saccarification. En: Routes to Cellulosic Ethanol. Buckeridge, M.S.; Goldman, G.H. (eds.). Springer Science, pp. 135-151.

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