Control de la Expresin Gnica

Control de la Transcripcin en Procariontes: Operones

Un grupo de genes bacterianos transcritos a partir de un mismo promotor. Cada uno de los cinco genes codifica una enzima diferente; todas ellas son necesarias para sintetizar el aminocido triptfano. Se transcriben como una sola molcula de mRNA, lo cual permite coordinar su regulacin. Los grupos de genes que se transcriben a partir de un slo promotor son habituales en bacterias. Cada uno de estos grupos se llama Opern. Dentro del promotor est el operador, una secuencia que regula la expresin de los genes del opern

Encendidio y Apagado de los Genes del Opern Triptfano (trp)

promotor

operador

inicio de transcripcin

triptfano represor inactivo RNA polimerasa

represor activo

GENES ENCENDIDIOS

GENES APAGADOS

Cuando el nivel intracelular de triptfano (trp) es bajo, la RNA polimerasa se une al promotor y transcribe los cinco genes del opern trp. Cuando el nivel de trp es alto, el represor de triptfano es activado para unirse al operador, donde bloquea la unin de la RNA polimerasa al promotor.

Mecanismos de Control de Expresin de Genes en Procariontes

REGULACIN NEGATIVA (REPRESIN) el represor unido previene la transcripcin
protena represora unida EL LIGANDO SE UNE PARA REMOVER LA PROTENA REGULATORIA DEL DNA
LA ADICIN DE LIGANDO ENCIENDE LA EXPRESIN DEL GEN REMOVIENDO LA PROTENA REPRESORA LA ADICIN DE LIGANDO APAGA LA EXPRESIN DEL GEN REMOVIENDO LA PROTENA ACTIVADORA

REGULACIN POSITIVA (ACTIVACIN) el activador unido promueve la transcripcin

protena activadora unida RNA polimerasa
GEN ENCENDIDO

GEN APAGADO

EL LIGANDO SE UNE PARA PERMITIR LA UNIN DE LA PROTENA REGULATORIA AL DNA

GEN APAGADO

GEN ENCENDIDO

LA REMOCIN DEL LIGANDO ENCIENDE LA EXPRESIN DEL GEN REMOVIENDO LA PROTENA REPRESORA

represor inactivo LA REMOCIN DEL LIGANDO APAGA LA EXPRESIN DEL GEN REMOVIENDO LA PROTENA ACTIVADORA

El Opern lac

Gen Regulador

Promotor Operador

Gen Z

Gen Y

Gen A

Enzimas de metabolizacin de lactosa

Represor lac

Sin Lactosa

La RNA polimerasa no se puede unir, la transcripcin se bloquea represor unido al operador

El Opern lac:

Transcripcin inducida por la remocin de un represor

represor activo

Con Lactosa
La lactosa induce transcripcin unindose al represor, el cual no se puede unir al operador

inductor (lactosa) inductor unido al represor

RNA polimerasa se une

Transcripcin procede

mRNA Transcrito

Baja Glucosa
complejo CAP-cAMP (activador) CAP
La RNA polimerasa se une al complejo del promotor

cAMP

El Opern lac:

Transcripcin activada por la unin de CAP al promotor

Transcripcin procede

CAP = catabolite activator protein Permite a las bacterias utilizar otras fuentes de carbono cuando la glucosa es escasa. Glucosa cAMP

mRNA transcrito

Alta Glucosa
La RNA polimerasa no se puede unir Los genes no son transcritos

SITIO DE UNIN DE PROMOTOR CAP

INICIO DE TRANSCRIPCIN

Control Dual del Opern lac

OPERN APAGADO porque no se une CAP

OPERN APAGADO porque no se une CAP y se une el represor lac OPERN APAGADO porque se une el represor lac

OPERN ENCENDIDO

Los niveles de glucosa y lactosa controlan la transcripcin desde el opern lac mediante sus efectos sobre la protena represora lac y CAP. La lactosa se une al represor y la remueve del DNA. LA adicin de glucosa disminuye la concentracin de cAMP y, como ste ya no une CAP, esta protena activadora se disocia del DNA, apagando la expresin. LacZ, el primer gen del opern lac, codifica para b-galactosidasa, que hidroliza lactosa a galactosa y glucosa.

La Regulacin del Opern de Triptfano Ocurre por 2 Mecanismos: Represin Atenuacin

atenuador

Bajos niveles de Trp

mRNA completo

Altos niveles de Trp

mRNA atenuado

Mecanismo de Atenuacin Transcripcional

Altos niveles de Trp

Bajos niveles de Trp

El mRNA trp se traduce mientras an est siendo transcrito. A altos niveles de Trp, el ribosoma traduce justo detrs de la RNA pol. Las regiones 3 y 4 forman una horquilla que provoca el final de la Transcripcin. A bajos niveles de Trp, el ribosoma se detiene en la regin 1, que contiene 2 codones adyacentes de Trp. Esto permite la formacin de una horquilla entre las regiones 2 y 3, evitando la horquilla entre 3 y 4, lo que permite que la transcripcin del opern prosiga ms all de la secuencia atenuadora.

Control Transcripcional en Eucariontes: Diferencias con Procariontes

RNA polimerasas de eucariontes requieren de factores generales de transcripcin, que se ensamblan en el promotor antes del inicio de transcripcin. Este proceso de ensamblaje puede ser regulada por diferentes factores. En procariontes, la RNA polimerasa puede iniciar la transcripcin por s sola. La mayora de las protenas regulatorias de eucariontes actan a distancia, es decir, unindose al DNA miles de nucletidos ro arriba del gen cuya expresin regulan. Por esto, un promotor es susceptible de ser regulado por una gran cantidad de elementos regulatorios esparcidos por el cromosoma. Estas son las secuencias enhancer (exacerbadoras o incrementadoras). Este fenmeno tambin ocurre en procariontes, pero constituye una excepcin. ESTRUCTURA DE UN GEN DE EUCARIONTE secuencias regulatorias promotor regin transcrita

DNA espaciador

La Regin de Control de la Expresin de un Tpico Gen Eucarionte

Regin de control de expresin del gen X

El Promotor es la secuencia donde se unen los factores generales de transcripcin y la RNA polimerasa. En la secuencias regulatorias se unen protenas regulatorias de expresin gnica, cuya presencia afecta el nivel de iniciacin de la transcripcin. Estas secuencias pueden estar ubicadas adyacentes al promotor, muy lejos ro arriba, dentro de intrones o ro debajo de la secuencia codificante del gen. Los factores generales de transcripcin son similares para todos los genes transcritos por la RNA polimerasa II, mientras que las protenas regulatorias y sus sitios de unin son diferentes para cada gen.

Factores Generales de Transcripcin

Ensamblaje de los factores generales de transcripcin requeridos para la iniciacin de transcripcin por la RNA polimerasa II. Primero TFIID se une a la caja TATA (~25 en eucariontes). TFIIB se une a este complejo, seguido por la RNA polimerasa II, escoltada por TFIIF. Luego TFIIE y TFIIH se ensamblan sobre el complejo. En presencia de ATP, TFIIH fosforila a la RNA polimerasa II, lo cual libera a la polimerasa de este complejo, para que pueda iniciar la sntesis de RNA. Las otras dos RNA polimerasas, I y III, requieren de otros factores generales de transcripcin y no dependen de una caja TATA.

Enhancers: Activacin Gnica a Distancia

Los factores generales de transcripcin y la RNA polimerasa no se ensamblan eficientemente por s solos en el promotor. Es necesaria la unin de una protena regulatoria a un incrementador, a una distancia de hasta decenas de miles de pares de nucletidos del inicio de transcripcin

Muchas Protenas Activadoras de Transcripcin Aceleran el Ensamblaje de los Factores Generales de Transcripcin
La mayora de las protenas activadoras poseen un dominio de unin al DNA y otro que se une a la maquinaria de transcripcin y acelera la velocidad de iniciacin de transcripcin (dominio de activacin). Ejemplo: La protena GAL4, unida al DNA ro arriba del gen, facilita la unin de TFIID al complejo de factores generales de transcripcin. Las protenas activadores de transcripcin incrementan la tasa de transcripcin tpicamente en hasta 1000 veces.

Secuencias Regulatorias en un Gen Eucaritico Tpico

Los factores generales de transcripcin y la RNA polimerasa II se ensamblan sobre el promotor. La caracterstica ms importante de los promotores de los genes transcritos por la RNA polimerasa II es la presencia de la Caja TATA, que acta como punto de inicio del ensamblaje de los factores generales de transcripcin. El punto en que la RNA polimerasa II inicia la transcripcin se encuentra generalmente 25 pares de nucletidos en direccin 3 de la caja TATA. Las secuencias regulatorias gnicas actan como lugares de unin de las protenas regulatorias cuya presencia en el DNA afecta la velocidad a la que se trasncriben los genes.

Modo de Accin de las Protenas Represoras de Genes de Eucariontes

Unin competitiva al DNA

protenas activadoras y represoras compiten por la unin a la misma secuencia regulatoria

enmascaramiento de la superficie de activacin

el represor se une al dominio de activacin del activador, evitando la unin de la ltima a la maquinaria de transcripcin

interaccin directa con factores generales de transcripcin

el represor acta sobre una etapa temprana del ensamblaje de los factores generales de transcripcin, bloqueando la continuacin del ensamblaje

La actividad de las protenas regulatorias de expresin gnica es regulada mediante diferentes mecanismos
SNTESIS DE PROTENAS UNIN DE LIGANDO FOSFORILACIN DE PROTENAS UNIN DE SEGUNDA SUBUNIDAD Subunidad de activacin Subunidad de unin al DNA

INACTIVA

ACTIVA

DESENMASCARAMIENTO

ESTIMULACIN DE ENTRADA AL NCLEO Protena inhibitoria

LIBERACIN DESDE LA MEMBRANA

INACTIVA

inhibidor

ACTIVA

Activacin Gnica en Procariontes y Eucariontes