GENTICA MICROBIANA

JUAN JOS GUILLERMO ALBITRES

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Los microorganismos presentan DNA y RNA. El DNA sirve como almacn de informacin gentica El flujo de informacin gentica fluye desde el DNA a travs del RNA hasta las protenas. Genoma hace referencia a todo el DNA presente en una clula o virus Los procariotas normalmente tienen un nico juego de genes; es decir son haploides. Adems, a menudo contienen elementos genticos extracromosmicos denominados plsmidos.

El DNA est organizado en forma de crculo cerrado en todas las Archaea y la mayora de las bacterias.

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La replicacin del ADN es un proceso muy complejo que implica muchas etapas y varias protenas. Se requiere al menos 30 protenas para replicar el cromosoma de E. coli Durante la replicacin del DNA, las dos cadenas de la doble hlice estn separadas; cada una sirve entonces como molde para la sntesis de la cadena complementaria. Cada una de las dos molculas de DNA resultantes consiste en una cadena nueva y una cadena vieja; por lo tanto la replicacin del DNA es semiconservativa.

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PLMIDOS Y EPISOMAS -Elementos genticos constituidos por ADN de doble cadena superenrrollado y cerrado covalentemente. -Los Episomas pueden integrarse al genoma bacteriano, quedando bajo su control de replicacin. -Plsmidos codifican bsicamente 3 grupos de genes: los de replicacin, los de caract. fenotpicos, los de formacin de pili. -En E.coli es bien conocido el plsmido del factor F (fertility) que se puede transferir y adems integrarse en el cromosoma-episoma.

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ELEMENTOS TRANSPONIBLES: TRANSPOSONES

Los genes en los seres vivos no son estticos, pudiendo en algunos casos cambiar su secuencia bajo ciertas condiciones: ej, secuencias de insercin. Para la insercin se produce la rotura de las cadenas sencillas, mediante la enzima transposasas. Los transposones o genes saltarines son segmentos de ADN capaces de moverse desde una posicin a otra en el genoma, o desde el ADN cromosmico a un plsmido o viceversa. El transposon se une a los extremos de las cadenas sencillas y se reparan las mismas que resultan de la replicacin. La importancia de la transposicin viene dada porque estos elementos mviles pueden insertarse en plsmidos y favorecer la aparicin de resistencia a antimicrobianos.

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VENTAJAS DEL USO DE BACTERIAS EN GENTICA Alto nmero de individuos Tiempos de generacin cortos Se les puede someter a presiones selectivas drsticas Son haploides (n)

CONCEPTOS: Fenotipo Genotipo

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VARIACIONES FENOTPICAS -Caractersticas: *Cambios ambientales *No afectan genoma *Afectan mayora de poblacin *Son reversibles -Tipos: *Morfolgicas *Cromgenas *Enzimticas *Patognicas

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VARIACIONES GENOTPICAS (V. Genticas) -Caractersticas: *No afectada por cambios ambientales *Afectan al genoma *Afectan a bacterias individualmente *Dificilmente reversibles -Tipos: *Mutaciones *Fenmenos de transferencia gentica

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MUTACIONES

Caractersticas:
*Baja frecuencia *Especificidad *Estabilidad *Espontaneidad

Tipos: morfolgicas, bioqumicas, patognicas, letales,

sensibilidad/resistencia a fagos, etc.

Las mutaciones se produce de forma espontnea o inducida por agentes mutagnicos (fsicos o qumicos). La tasa de mutacin espontnea del material gentico es de 105 1011 La tasa de mutaciones inducidas es 108 1012

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TIPOS DE MUTACIONES

Pueden ser puntuales , en una sola base o por sustitucin, insercin o deleccin de varias bases. En sustitucin se denomina transiciones, si se produce un cambio entre las bases del mismo grupo (pricas o pirimdicas), y si el fenmeno ocurre a la inversa transversiones. Al cambiar la secuencia de los codones pueden traducirse para aminocidos distintos, obteniendo como resultado una protena mutada o no afectar a la traduccin.

La mutacin por insercin o deleccin de bases produce una modificacin de la secuencia de bases en el ADN, que cambia todos los tripletes a partir de la zona de dao. Se produce raramente de forma espontnea y es tpica de las radiaciones ionizantes y de determinados grupos de agentes qumicos.

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MUTGENOS: Agentes que producen o causan mutaciones. M. Fsicos: UV, rayos X, radiaciones gamma. M. Qumicos: HNO2, Bromuro de uracilo, Acridina, Hidroxilamina, Sulfonato.

HNO2: Produce mutaciones por desaminaciones, transformando las bases en otros compuestos: Citosina uracilo, 5-metilcitosina timina 5-bromouracilo: Al ser adicionado al medio se incorpora en lugar de T, pero se aparea con G en lugar de A, por lo cual se produce una mutacin puntual. Anaranjado de acridina: Se intercala en el ADN e induce delecciones o adicin, lo que se traduce en mutaciones de corrimiento de marco de lectura. LUZ UV: Produce la formacin de dmeros cuando se encuentran dos T vecinas en una misma hebra.

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EXPRESIN FENOTPICA DE LAS MUTACIONES

Las mutaciones producen en la cepa mutada la prdida de una o varias habilidades bioqumicas. Tales como: *Prdida en la utilizacin de una o varias fuentes de carbono. Son frecuentes los mutantes defectivos para la lactosa (Lac -) * Prdida de la capacidad de sntesis de uno varios aminocidos y vitaminas. * La adquisicin de resistencia a un antimicrobiano. * Alteraciones en la composicin de los componentes superficiales de las bacterias: Glucocliz, flagelos. *Prdidas de la sntesis principalmente de exotoxinas pero tambin de endotoxinas.

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TRANSFERENCIA GENTICA Las bacterias intercambian material gentico con otras especies a travs de tres mecanismos: -Transformacin -Conjugacin -Transduccin A estos mecanismos se les conoce como mecanismos parasexuales

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TRANSFORMACIN

Es cuando una bacteria introduce fragmentos de ADN de otra bacteria que se encuentran dispersos en el medio donde vive Fu descubierta por Griffith en 1928 estudiando la infeccin gonoccica en ratones. Griffith comprob que la virulencia del neumococo guardaba relacin con la presencia de una cpsula polisacrida. La transformacin puede ser natural o artificial. Algunas bacterias patgenas que se transforman en forma natural son Streptococcus peumoniae, Neisseria gonorrhoeae y Haemophilus influenzae. El desarrollo de la transformacin artificial fue esencial para el avance de la tecnologa del ADN, tambin llamada ingeniera gentica.

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CONJUGACIN

Implica la transferencia de ADN cromosmico o plasmdico (el caso ms frecuente), desde una bacteria donadora a una receptora, mediante contacto fsico. En bacterias Gram - la transferencia de ADN se hace a travs de un puente intercitoplasmtico denominado pili. En bacterias Gram +, las poseedoras de ADN transferible forman protenas de contacto (adhesinas) en la superficie celular para receptores de superficie (un cido lipoteicoico) de las clulas carentes de plsmidos, que obran como inductoras de adhesinas mediante la sntesis de feromonas ( Streptococcus faecalis). Se han encontrado plsmidos R (resistencia a los antibiticos) conjugadores en Gram + como Streptococcus, Streptomyces y Clostridium.

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TRANSDUCCIN

El agente transmisor, generalmente un virus, transporta fragmentos de ADN de la ltima bacteria parasitada, introducindolos en la bacteria receptora Los bacterifagos pueden infectar a las bacterias con replicacin masiva de los mismos ciclo ltico- o bien integrarse en su genoma ciclo lisognico, hacindose en este ltimo caso ms lenta la liberacin de los fagos. La transduccin generalizada o no especfica es la que generalmente se produce en el ciclo ltico. Cualquier secuencia genmica puede quedar unida a la del virus y convertirse en infectante para otras bacterias. La transduccin especializada tiene lugar preferentemente durante el ciclo lisognico y en la misma se transfiere uno o varios genes concretos. Un ejemplo , es el de fago lambda en E. coli.

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CONJUGACIN

GRACIAS