DETERMINACIN DE UN MTODO VOLTAMPEROMTRICO PARA LA CUANTIFICACIN DE SELENIO Lizbeth Campos Olazval Universidad Catlica Santa Mara, Urbanizacin san

Jos s/n Lizbeth Marianella Campos Olazval, Urb Las Orquideas L-19 (Cercado), liziway@hotmail.com, 5154223223

RESUMEN El selenio ocurre naturalmente en el ambiente y puede ser liberado desde procesos tanto naturales como de manufactura, este elemento entra al agua desde las rocas y el suelo, y desde desperdicios agrcolas e industriales. La Agencia de Proteccin Ambiental (EPA) limita la cantidad de selenio que se permite en suministros de agua potable a 50 partes de selenio total por billn de partes de agua (50 ppb). En el presente trabajo de investigacin se valid y estandariz un mtodo voltamperomtrico para la determinacin de selenio en muestras de agua potable. La tcnica que se emple consisti bsicamente en tratar las muestras de agua potable como el estndar de Se con una solucin de cido clorhdrico al 10% y con perxido de hidrgeno al 30% y despus fueron sometidos a bao mara. Las muestras fueron analizadas por voltametra de redisolucin catdica (CSV) en donde se utiliz un electrodo de mercurio de gota colgante (HMDE) como electrodo de trabajo, como electrodo de referencia Ag/AgCl y como electrodo de referencia el de platino. El mtodo fue estandarizado y validado mostrando una buena selectividad, linealidad con un R2 de 0.9991 y tambin demostr ser un mtodo que presenta una buena sensibilidad. La precisin fue determinada hallando el lmite de deteccin y de cuantificacin que fue de 5.2 mg/l (ppm) y 17.38 mg/l, respectivamente. Finalmente se determin cualitativamente y cuantitativamente el elemento selenio en una muestra de agua potable. Palabras claves: Selenio, agua potable, voltametra, estandarizacin

1.- INTRODUCCIN El selenio (Se) es un elemento mineral natural, ampliamente distribuido en la naturaleza en la mayora de las rocas y suelos. En forma pura, existe como cristales hexagonales gris metlicos a negros, pero en la naturaleza generalmente est combinado con sulfuro o con minerales de plata, cobre, plomo y nquel. La mayor parte del selenio que se procesa es usado en la industria electrnica, en la industria del vidrio, en la preparacin de medicamentos, en formulaciones de pesticidas y tambin es usado como suplemento nutritivo(1). Como se mencion anteriormente el selenio se encuentra de manera natural en el ambiente y puede estar presente en niveles bajos en el agua debido al desgaste de las rocas y del suelo, tambin puede ser incorporado por las plantas. El selenio elemental y otras formas insolubles de selenio se movilizan menos y generalmente permanecern en el suelo,

constituyendo un riesgo menor de exposicin. Los compuestos de selenio que pueden disolverse en agua son a veces muy mviles. De esta manera, la probabilidad de exposicin a estos compuestos es ms alta. El selenio puede entrar al agua superficial en el drenaje de aguas de regado. Hay cierta evidencia que indica que el selenio puede ser incorporado en los tejidos de organismos acuticos y aumentar en concentracin a medida que pasa a travs de la cadena alimentaria. Las concentraciones de selenio en organismos acuticos se han convertido en un problema a causa del flujo de aguas en ciertas reas ridas de los Estados Unidos(1,2). A nivel internacional, el selenio es reconocido como un elemento necesario para el metabolismo humano, siendo un micronutriente esencial para la nutricin y la salud en el hombre y en animales (3,4). La poblacin general puede estar expuesta diariamente a bajos niveles de selenio a travs de los alimentos y el agua. La exposicin breve a altas concentraciones de selenio puede producir nusea, vmitos y diarrea. La exposicin crnica a altas concentraciones de compuestos de selenio puede producir una enfermedad llamada selenosis. Los signos y sntomas principales de la selenosis son prdida del cabello, uas quebradizas y anormalidades neurolgicas (por ejemplo, adormecimiento y otras sensaciones extraas en las extremidades). Es por ello que en la presente investigacin se plantea estandarizar y validar una tcnica por voltametra para la determinacin de selenio en agua potable, para ello se evaluaran distintos parmetros como linealidad, lmite de deteccin y cuantificacin, selectividad, sensibilidad, etc.

2.- MATERIALES Y MTODOS La experimentacin fue llevada a cabo en el laboratorio Proyecto Mercurio de la Universidad Catlica de Santa Mara y tuvo una duracin aproximada de 25 das. 2.1.- Reactivos y equipos Todos los reactivos qumicos que fueron empleados fueron de grado analtico. Todas las soluciones como el estndar de selenio de 0.5 ppm, el cido clorhdrico al 30%, el perxido de hidrgeno al 30%, la solucin estndar de cobre 1 ppm y solucin de sulfato de amonio 2N al 10%, fueron preparadas con agua de calidad ultra pura (18.2 M) obtenida con un equipo EASYpure II. Los equipos utilizados fueron una balanza analtica, la Estacin Potenciomtrica (Tritando 808) Metrohm, Voltmetro (VA 757 Computrance) Metrohm, compuesto de las siguientes partes: potenciostato, saturado con KCl 3M, electrodo Auxiliar: disco de platino, Software versin 2.0.

2.2.- Mtodos a) Pre-tratamiento del estndar Antes de la realizar cualquier anlisis se procedi a tratar tanto el estndar de Se de 0.5 ppm como la muestra con 0.1 ml de una solucin de cido clorhdrico al 10% y 0.05 ml de perxido de hidrgeno al 30%. Esta nueva solucin fue calentada en bao mara hasta alcanzar una temperatura de 901 C por 10 minutos. b) Validacin analtica del mtodo Selectividad: Para la determinacin de este parmetro se tom en cuenta el electrolito soporte, voltaje del pico para arsnico, proporcin de solventes utilizados para la determinacin voltamtrica y posible interferencia de algunos metales. Linealidad y rango: La linealidad es la capacidad del mtodo para proporcionar resultados que son directamente (o por medio de transformaciones matemticas) proporcionales a la concentracin del analito en la muestra dentro de un rango establecido(5). Para ello se realizaron mediciones por triplicado (cada determinacin con 6 adiciones de solucin estndar de Se) y la concentracin final se hall aplicando la Ecuacin 1. [ ] [ ]

En donde [ ] es la cocentracin final de selenio (mg/l), [ ] es la concentracin de estndar de selenio (mg/l), es el volumen de estndar adicionado (ml) y es el volumen final. Precisin: La precisin expresa el grado de concordancia entre una serie de medidas de mltiples tomas a partir de una misma muestra homognea. Repetibilidad: es importante considerar las siguientes condiciones: realizar por triplicado, por un nico operador, en el mismo laboratorio y finalmente en diferentes das. Sensibilidad: la sensibilidad corresponde a la mnima cantidad de analito que puede producir un resultado significativo. Lmite de deteccin: Se encuentra referido a la menor concentracin de analito que puede detectarse pero no necesariamente cuantificarse en una muestra, en las condiciones establecidas y se expresa en unidades de concentracin (%, ppm, ppb, etc); para ello se utiliz la Ecuacin 2.

 Lmite de cuantificacin: El lmite de cuantificacin se calcula con la Ecuacin 3 y expresa la menor concentracin de analito que puede determinarse con precisin y exactitud razonables en las condiciones establecidas, se expresa tambin en unidades de concentracin (6,7).

Donde es el estimador de la respuesta del blanco para calcular el LDD y LDC, es el estimador correspondiente a la desviacin estndar del blanco, b es la pendiente de la recta y n es el nmero de muestras.

c) Determinacin voltamperomtrica de selenio en agua potable En la celda voltamtrica se coloc 0.1 ml de la muestra, 2 ml de solucin de sulfato de amonio 2N al 10%, 0.1 ml de solucin estndar de cobre a 1 ppm y 10 ml de agua ultra pura. Posteriormente se adicion 0.1 ml del estndar de Se a 0.5 mg/L. Los parmetros voltamperomtricos trabajados fueron: tiempo inicial de purga: 300 s, potencial de deposicin: -0.4 V, tiempo de deposicin: 30 s, tiempo de equilibrio: 30 s, potencial de inicio: 0.45 V, potencial final: -0.75 V, amplitud de pulso: 0.05 V, tiempo de pulso: 0.04 s, paso de voltaje: 0.007935 V, tiempo de paso de voltaje: 0.4 s, velocidad de barrido: 0.0198 V/s. Todas las medidas fueron realizadas por voltamperometra de redisolucin catdica (CSV) usando la estacin voltamperomtrica. Adems se utiliz un electrodo de gota colgante de mercurio (HMDE) y un electrodo auxiliar de platino. Todos los potenciales fueron determinados con un electrodo de referencia Ag/AgCl/KCl 3M.

3.- RESULTADOS 3.1.- Validacin analtica del mtodo Todas las determinaciones que se realizaron para estandarizar y validar el mtodo fueron hechas por triplicado, para ello se utiliz 2 ml de solucin sulfato de amonio 2N al 10% a un pH de 2.2, 0.1 ml de estndar de cobre de 1 ppm, 10 ml de agua ultrapura y las adiciones estndar fueron hechas con el estndar de selenio de 0.5 mg/l.

 Linealidad La determinacin se llev a cabo por triplicado, y cada determinacin const de 6 adiciones de estndar de selenio. La Figura 1 muestra grfica obtenida para dicho parmetro.

Figura 1.- Determinacin de linealidad para Se

Despus de medir las intensidades de cada una de las adiciones y despus de sacar el promedio de dichas intensidades, se calcularon las concentraciones finales de Se que haba en la celda para cada adicin. Los datos calculados para la determinacin de la linealidad se observan en la Tabla 1. Tabla 1.- Parmetros calculados para la determinacin de la linealidad N de adicin 1 2 3 4 5 6
*N: nmero s: desviacin estndar

Concentracin final de Se, mg/l 0.004 0.008 0.012 0.016 0.020 0.024

Intensidad s, nA 13.243 1.571 35.287 6.824 59.102 14.623 77.560 19.939 101.445 25.124 119.908 29.749

Con los datos que se muestran en la tabla anterior se construy la grfica que se observa en la Figura 2, la cual tambin muestra la ecuacin de regresin lineal obtenida y el coeficiente de determinacin (R2) de 0.9991.

140.000 120.000 y = 5490.8x - 8.9199 R = 0.9991

Intensidad, nA

100.000 80.000 60.000 40.000 20.000 0.000 0

0.005

0.01

0.015

0.02

0.025

Concentracin, ppm Figura 2.- Representacin grfica de la linealidad del mtodo para la determinacin de selenio En la Figura 2 se muestra la relacin lineal que existe entre la concentracin final de Se expresada en ppm y la intensidad que se gener en cada adicin. De acuerdo, a la regresin realizada se obtuvo una pendiente (b) de 5490.8 y un intercepto de -8.9199. Posteriormente con los datos hallados se realiz el anlisis estadstico de la regresin como se muestra en la Tabla 2. Tabla 2.- Estadstica de la regresin Coeficiente de correlacin mltiple Coeficiente de determinacin (R2) R2 ajustado Error tpico Observaciones Precisin Dado que la precisin engloba diferentes tipos de estudios como la repetitividad, la precisin intermedia y la reproducibilidad; en el actual trabajo solo se realiz la repetitividad del mtodo. Para ello se tomaron en cuenta los datos obtenidos en la linealidad, ya que el parmetro de la repetitividad considera que se deben realizar las determinaciones por triplicado, por un mismo operador, en un mismo laboratorio y en distintos das. La Tabla 3 enmarca los valores calculados para la repetibilidad. 0.9995 0.9991 0.9988 1.3725 6

Tabla 3.- Datos calculados para el anlisis de repetibilidad Intervalos de confianza al 95%, Coeficiente nA de variacin, % Lmite Lmite inferior superior 11.865 9.204 17.283 19.338 17.746 52.827 24.743 21.511 96.692 25.707 26.306 128.814 24.766 36.863 166.027 24.810 43.437 196.380

N de adicin 1 2 3 4 5 6

Concentraci n final de Se, mg/l 0.004 0.008 0.012 0.016 0.020 0.024

Intensidad s, nA 13.243 1.571 35.287 6.824 59.102 14.623 77.560 19.939 101.445 25.124 119.908 29.749

*N: nmero s: desviacin estndar

Sensibilidad El lmite de cuantificacin y el de deteccin fueron obtenidos de los datos calculados para la linealidad, en la cual se obtuvo un valor de pendiente (b) de 5490.8 y de intercepto (Ybl) -8.9199. Luego para la obtencin de la desviacin estndar del blanco (Sbl) se grafic la recta correspondiente a la concentracin versus la desviacin estndar y despus se extrapol s a una concentracin cero, tal y como se ve en la Figura 3. Figura 3.- Grfica para la determinacin de la sensibilidad
35 30 y = 1472.5x - 4.2579 R = 0.9948

Desviacin estndar, s

25 20 15 10 5 0 0

0.005

0.01

0.015

0.02

0.025

Concentracin, ppm

3.2.- Determinacin voltamperomtrica de selenio en agua potable Una curva representativa de una lectura de la muestra se encuentra en la Figura 4, donde se ven los picos resultantes luego de las adiciones estndar de Se de 0.5 ppm. Figura 4.- Determinacin de selenio en agua potable

Despus de haber sido analizada la muestra de agua potable se encontr que sta tena una concentracin 158.7 2.633 g/l.

4.- DISCUSIN La voltametra de redisolucin catdica se basa en dos pasos bsicamente: el primer de ellos es la deposicin que involucra la oxidacin del electrodo de mercurio el cual reacciona con el analito para formar una pelcula insoluble en la superficie del electrodo, el segundo paso es el de redisolucin stripping, en el que el analito se est consumiendo catdicamente hacia el potencial ms negativo reduciendo el electrodo de mercurio y retornndolo a la solucin del analito. 4.1.- Estandarizacin y validacin del mtodo Una vez que el mtodo fue estandarizado se procedi a validarlo, para ello, como se mencion anteriormente, fueron calculados una serie de parmetros. Al utilizar como muestra agua potable se logr analizar la selectividad del mtodo porque dicha muestra no slo contena Se sino otros metales pesados y el mtodo slo fue selectivo con dicho metal. Como es bien conocido, un buen indicador para la determinacin de la linealidad es el coeficiente de correlacin representado por R2, en donde los valores mayores a 0.99 son aceptables para poder afirmar la correlacin lineal entre X e Y, en este caso, la concentracin y la intensidad de corriente. Sin embargo, el mejor indicador no es R sino

un test estadstico, como se observa en la Tabla 2, en la cual se calcul el valor F de 4270.09 y se compar con el valor crtico F de 3.285x10-7. En este caso la hiptesis nula es la no correlacin entre X e Y; como el valor de F es mayor al valor crtico F de tablas, se rechaz la hiptesis nula, sindola correlacin lineal significativa con la probabilidad calculada. Para la precisin y repetibilidad se tom en cuenta el coeficiente de variacin el cual debe encontrarse entre el 11% y 32%, es por ello que los resultados obtenidos, mostrados en la Tabla 3, demuestran que la tcnica es repetible. 4.2.- Determinacin voltamperomtrica de selenio en agua potable Con la tcnica desarrollada se logr la determinacin cualitativa y cuantitativa de Se en una muestra de agua potable, encontrndose un valor de 0.158 2.633 mg/l, el cual al ser comparado con el lmite mximo permisible (LMP) para selenio en aguas potables (0.010 mg/l), supera dicho valor, evidenciando que el agua para consumo humano no cumple con el LMP establecido en el Reglamento de la Calidad del agua para Consumo Humano aprobado en el DS N 031-2010-SA(8). 5.- CONCLUSIN De los resultados obtenidos se puede concluir que se ha estandarizado un mtodo para la determinacin de selenio, por lo tanto la voltametra es una tcnica efectiva para dicha determinacin, obteniendo como resultado un lmite de deteccin de 5.21 mg/l (ppm) y un lmite de cuantificacin de 17.38 mg/l, medibles de selenio.

6.- RECOMENDACIONES i. Todos los reactivos que se utilicen deben ser del mximo grado de pureza. ii. Tambin es importante realizar el pre- tratamiento de la muestra como del estndar ya que en caso contrario los parmetros para la estandarizacin del mtodo variaran en cada determinacin

7.- REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS (1) Agencia para Sustancias Txicas y el Registro de Enfermedades (ATSDR). Resea Toxicolgica del Selenio (edicin actualizada)(en ingls). Atlanta, GA: Departamento de Salud y Servicios Humanos de los EE.UU., Servicio de Salud Pblica. 2003 Nordberg, G. Enciclopedia de seguridad y salud en el trabajo. Metales: propiedades qumicas y toxicidad. Robles Mora G. Contenido de selenio en cabello y en alimentos consumidos por la poblacin juvenil de cuatro zonas del valle de Mxico [Tesis magistral]. Mxico: Centro interdisciplinario de investigaciones y estudios sobre medio ambiente y desarrollo (CIIEMAD-IPN). Instituto politcnico nacional. 2010.

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Acosta L. El selenio. Laboratorios Santa Elena.Uruguay Garca Gutirrez N. Zea Chvez A, Villanueva salas J. Estandarizacin de una tcnica voltamtrica para la determinacin de selenio. Programa Profesional de Farmacia y Bioqumica. Universidad Catlica Santa Mara. Per.2008. Kellner R. Mermet J. Otto M. Widmer H. Analytical Chemistry.1997. Harvey D. Modern Analytical Chemistry. 2000. Reglamento de la Calidad del agua para Consumo Humano. Ministerio de Salud. Direccin de salud Ambiental. 2010

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