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Química Bioanalítica

La Química Analítica en la era de la genómica, proteómica y celómica

1.- Introducción a la química bioanalítica

Seguridad y riesgos en el laboratorio bioanalítico. La metodología bioanalítica. Herramientas


bioinformáticas. Obtención de muestras. Estructura de biomoléculas de interés bioanalítico: DNA,
anticuerpos, enzimas

2.- Producción de biorreactivos y marcación de biomoléculas

Síntesis de oligonucleótidos. Funcionalización de oligonucleótidos. Marcaciones isotópicas. Radioisótopos y


fluoróforos. Marcación enzimática directa e indirecta. Biotinilación. Agentes biotinilantes amino-, sulfidril-,
carboxil-, aldehído- y foto reactivos. Marcaciones con digoxigenina. Funcionalizaciones con moléculas
electroactivas. Funcionalización del DNA con nanopartículas metálicas. Quantum dots.
Síntesis de péptidos. Estrategias de marcación y modificación con grupos funcionales de proteínas y
enzimas.
Producción de anticuerpos monoclonales y policlonales. Síntesis de haptenos y principales estrategias de
modificación de haptenos. Conjugación de haptenos a enzimas. Producción de inmunógenos. Proteínas
portadoras. Marcaciones y modificaciones con grupos funcionales. Introducción de brazos espaciadores.

3.- Inmovilización de biomoléculas en soportes sólidos

Importancia de la inmovilización en química bioanalítica. Estrategias en fase sólida en química bioanalítica.


Tipos, características y naturaleza de soportes sólidos. Membranas: Polipropileno, nylon, nitrocelulosa.
Poliacrilamida y carboximetil celulosa. Agarosa, celulosa, cefadex. Fases estacionarias en cromatografía.
Esferas de vidrio. Esferas magnéticas: recubrimiento con grupo amino, carboxil, tosil, epoxi, proteína A y G,
avidina y estreptavidina.
Naturaleza de transductores en chips y sensores. Cristales piezoeléctricos, sílice, materiales
semiconductores. Metales conductores: oro, platino, plata. Materiales carbonáceos continuos: carbono
vitrificado, grafito pirolítico. Materiales compósitos.
Característica de la adsorción inespecífica en función de la naturaleza del soporte.
Estrategias de inmovilización de biomoléculas en soportes sólidos. Adsorción. Afinidad (Proteína A, G,
avidina/biotina. Monocapas autoensambladas. Enlace covalente. Atrapamiento: agentes bifuncionales.
Encapsulamiento. Soles/geles. Polímeros conductores electrogenerados. Los biocompósitos y la
inmovilización en volumen.

4.- Técnicas instrumentales en la detección de biomoléculas. Aplicaciones

Técnicas espectrofotométricas y fluorimétricas: espectroscopia de rayos X, UV-vis, turbidimetría y


nefelometría, espectroscopia atómica. Radiactividad y técnicas radioquímicas Técnicas espectroscópicas
de masas de biomoléculas. Descripción básica de la instrumentación. Fuentes de ionización suaves.
Bombardeo atómico/iónico rápido. Electrospray. MALDI (matriz-assisted laser desorption/ionization).
MALDI/TOF. Analizadores de masas. Detectores. Interpretación de los espectros de masas. Determinación
de la masa molecular de biomoléculas. Identificación proteica. Secuenciación de proteínas/péptidos.
Aplicaciones en ácidos nucleicos. Espectroscopia de masa bacteriana. Nuevas estrategias en HPLC y GC.
Técnicas electroanalíticas. Sensores químicos y Biosensores.
Calendario Curso QUÍMICA BIOANALÍTICA 2007

Presentación del Curso.


Distribución del Material (9 a 12)

Seminario (trabajo autónomo) *

Preparación entregable *

Tutorías (4 horas, de 9 a 13)

Laboratorio (6 horas)

Evaluación y Examen Final


(de 9 a 13 y de 15 a 19)

Días de entrega de trabajos e informes


(y evaluación de los mismos)

(*) Se deberá disponer de 2 horas diarias, con


flexibilidad horaria

Nota: Todo el material e información se podrá descargar en formato electrónico a partir del día 15 de julio desde la web del curso:
http://einstein.uab.es/ipividori/