Acta zoológica lilloana 50 (1–2): 135–137, 2006
COMUNICACIÓN
Actividad de γ-glutamil-transpeptidasa en leche de camélidos
sudamericanos
Medina, Mirta 1 ; Silvia Saad 1 ; Karina Cansino
1 Facultad de Ciencias Naturales e IML, U.N.T.
2 INTA Abra Pampa, Jujuy.
3 Instituto de Fisiología Animal, Fundación Miguel Lillo. Miguel Lillo 205, Tucumán.
fisiocompa@sinectis.com.ar
“ γ -glutamyl-transpeptidase activity in milk of South American camelids”.
K EYWORDS : milk, γ -glutamyl-transpeptidase, camelids.
P ALABRAS CLAVE : leche, γ -glutamil-transpeptidasa, camélidos.
En trabajos anteriores se ha comproba-
do la asociación existente entre la activi-
dad de γ-glutamil-transpeptidasa (GGT) y
los compartimientos de la secreción láctea
en doce especies de mamíferos de nuestra
fauna sudamericana (Saad et al., 2002;
Saad y Fernández, 2002). En los mencio-
nados trabajos no estaban incluidos datos
referentes a los camélidos sudamericanos.
Investigaciones llevadas a cabo reciente-
mente permitieron ampliar la lista de ani-
males estudiados con los representantes
regionales de esta Familia. Es propósito
del presente trabajo determinar: a) la ac-
tividad de GGT en el lactosuero (LS) de
de las cuatro especies, llama, alpaca, gua-
naco y vicuña; b) la actividad total y por
compartimiento en leche de guanaco y
vicuña; c) el Km en vicuña y guanaco. Por
razones derivadas de la cantidad de
muestra, no se determinaron en llama y
alpaca, las correspondientes actividades
totales, ni se establecieron los K m . Para
determinar la actividad de la citada enzi-
ma se utilizó un kit de Laboratorios Wie-
ner (Argentina) que se basa en el método
cinético de hidrólisis del sustrato γ-gluta-
mil-p-nitroanilida, leyéndose espectrofoto-
métricamente la cantidad de p-nitroanili-
na liberada. El K m se determinó mediante
el método de Cleland (Henderson, 1998).
Se utilizaron animales pertenecientes al
INTA Abra Pampa (Jujuy), a criadores
particulares de los Valles Calchaquíes y al
Parque Fitozoológico Carlos Pellegrini de
San Pedro de Colalao. Cabe aclarar que
las muestras de alpaca corresponden a un
135
2 y Francisco M. Fernández 1-3
animal descendiente de un híbrido con un
porcentaje de sangre de llama inferior a
un 12,5%.
Los resultados encontrados en LS mos-
traron los siguientes valores de actividad
de GGT: llama 185 U/L; alpaca 517 U/L;
guanaco 790 U/L; vicuña 540 U/L.
La actividad de la enzima en los dis-
tintos compartimientos en guanaco y vicu-
ña, mostró que el primero posee una ac-
tividad de 1090 U/L asociada a los glóbu-
los grasos y caseínas, lo cual equivale a
un 58% del total y a un 42% en el LS,
que corresponde a lo mencionado en el
párrafo anterior. Para la vicuña, se obser-
vó una actividad de 540 U/L asociada a
los glóbulos grasos y caseínas, que corres-
ponde a un 50% del total y el 50% res-
tante corresponde a la actividad en el LS.
La determinación del Km de la GGT en
el lactosuero dio los siguientes resultados:
guanaco 40 μM y vicuña 36,5 μM.
En relación a los K m medidos en el
compartimiento de glóbulos grasos, mos-
traron valores similares a los obtenidos en
lactosuero. De hecho, el método de Cle-
land para determinación del Km se basa en
la identificación del valor de la mediana
entre un conjunto de valores, cada uno de
los cuales corresponde a la intersección de
dos líneas que representan concentración y
velocidad inicial. Estos valores no tienen
una distribución normal. A partir de ello el
tratamiento estadístico no paramétrico de
los dos conjuntos de valores, con los cua-
les se determina el Km (por ejemplo “vicu-
ña” y “guanaco”), demostró que no difie-
136 M. Medina et al.: Actividad
ren significativamente (p = 0,25). De la
misma forma no hay diferencias significa-
tivas entre los datos utilizados para la de-
terminación de los Km entre GGT extraída
de glóbulos grasos y GGT del lactosuero,
como ya se ha mencionado.
El hecho que exista pequeña (o nula)
diferencia entre los valores de Km de dos
especies pertenecientes a esta Familia no
es de extrañar, dado que la separación
entre estas taxas parece ser relativamente
reciente en los camélidos sudamericanos
(Clutton-Brock, 1999). Por otra parte ob-
servaciones llevadas a cabo sobre pesos
moleculares y concentraciones absolutas
de lactoproteínas en las cuatro especies
mencionadas, demostraron que la simili-
tud entre ellas es altísima (Medina et al.,
2003).
De todas formas la diferencia observa-
da entre los Km de vicuña y guanaco,
aunque modesta, merece comentario. En
primer lugar se debe mencionar el hecho
que existen dos Km. Uno corresponde a la
hidrólisis del grupo glutamilo del resto de
la molécula, generalmente glutatión, ó γ-
glutamil-p-nitroanilida, para el caso del
método de determinación utilizado, que-
dando el glutamilo provisoriamente unido
a la enzima. El otro Km corresponde a la
transpeptidación de este grupo hacia el
aceptor, la glicilglicina en los métodos de
determinación. Numerosos trabajos han
demostrado la influencia de otros com-
puestos sobre la velocidad de la enzima y
del K m. Por ejemplo, los ácidos biliares,
como el colato y el deoxicolato, disminu-
yen el Km y aumentan la velocidad de la
hidrólisis mientras que algunos conjuga-
dos, como el taurocolato y el glicocolato,
actúan de forma contraria (Abbot y Meis-
ter, 1983). Cabe aclarar que es bastante
difícil establecer comparaciones entre los
valores de K m mencionados en distintos
trabajos, con frecuencia la información de
diversos autores corresponde a medicio-
nes llevadas cabo en diferentes condicio-
nes. Por ejemplo, en varios trabajos en
los que se mide el Km, la solubilización de
la enzima se efectúa mediante proteólisis
del sector hidrofóbico de la subunidad
mayor que permite su inserción en la
de γ-glumatil-transpeptidasa en leche de camélidos
membrana celular. En consecuencia, las
determinaciones no se realizan con la
enzima completa. De la misma manera,
en la generalidad de los casos, hay dife-
rencias en cuanto a la concentración de
componentes de los ensayos, a la tempe-
ratura utilizada, etc (Miller et al., 1976;
Karp et al., 2001; Stole et al., 1994). A lo
expresado hay que agregar que un gran
número de ensayos se llevan a cabo, y en
forma creciente, con animales o células
transgénicas (Carter et al., 1997; Harding
et al., 1997; Habib et al., 1996), los cua-
les muestran numerosas discrepancias con
los tipos salvajes. Otro aspecto que impi-
de hacer comparaciones rigurosas a partir
de los antecedentes de la bibliografía, lo
constituyen los propios métodos para es-
tablecer el Km, los cuales en general están
muy expuestos a la influencia de valores
atípicos en los puntos que generan las
pendientes, y en consecuencia producen
leves diferencias que distorsionan los re-
sultados.
A partir de lo expuesto se concluye
que: 1) las diferencias observadas entre
los Km de las especies estudiadas, no re-
presentarían diferencias biológicas reales;
2) la enzima presente en el glóbulo graso
es la misma que la existente en el LS en
cuanto a las características cinéticas y 3)
casi con seguridad, ambas son homólogas
y ortólogas entre sí.
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