CICLO DE VIDA DE ORIUS INSIDIOSUS, EFECTIVIDAD SOBRE TRIPS Y SENSIBILIDAD A BIOPLAGUICIDAS Elina Mass1, Dinorah Lpez1 y Orlando Rodrguez1.

Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5ta B y 5ta F, Playa. La Habana, Cuba. Email: emasso@inisav.cu INTRODUCCIN Los entomfagos durante mucho tiempo han sido el grupo ms importante dentro del conjunto de organismos que ejercen su accin como enemigos naturales, algunas especies dependen totalmente del consumo de otros insectos para su supervivencia (Nilda Prez, 2004). Orius insidiosus es un depredador polfago ampliamente distribuido, el cual se alimenta de importantes plagas de insectos. Es frecuentemente encontrado en nmero de cultivos agrcolas donde obtiene variedades de presas que incluyen: trips, caros, fidos, mosca blanca y huevos de lepidpteros. Thirps palmi (Karny) es una de las plagas ms severas que afecta a diferentes cultivos tales como: papa, pepino, pimiento, frjol, meln, entre otros. Su control mediante plaguicidas qumicos se dificulta ya que se caracteriza por una alta tasa de reproduccin, baja sensibilidad a los insecticidas comerciales, conductas de oviposicin en los tejidos de las plantas y pupacin en el suelo. Todo esto evidencia la utilidad de desarrollar un sistema de control biolgico para insertarlo en el MIP de esta plaga, por ello la necesidad de conocer aspectos de la biologa de Orius depredador eficaz para el combate de trips, as como el dao que le ocasionan los bioplaguicidas utilizados en los cultivos para su control y otras plagas. La cra y liberacin masiva de O. insidiosus y otras especies del gnero han sido propuestos para el control biolgico de T. palmi y Frankliniella occidentalis, debido a su alta eficiencia de bsqueda, su habilidad para incrementarse rpidamente cuando hay presas en abundancia y capacidad de agregarse a regiones con alta densidad de presas. Entre las mltiples ventajas de su uso como controlador biolgico estn que puede ser utilizado en un amplio rango de cultivos, ser introducido de forma preventiva en aquellos con polen y generalmente matan ms trips que los que realmente necesitan para su alimentacin Fue objetivo de este trabajo conocer aspectos de la biologa de Orius, su capacidad depredadora y la sensibilidad a bioplaguicidas. MATERIALES Y MTODOS Biologa de Orius insidiosus. Para iniciar las diferentes etapas de trabajo se realiz la colecta de adultos en campos de girasol (Hellianthus annus) En el municipio Gira de Melena Provincia La Habana. Se tomaron 200 individuos adultos que fueron almacenados en frascos de vidrio Fig. 1, en nmero de 30 chinches en cada recipiente, La temperatura fue de 26C, 70% de humedad relativa y un fotoperodo de 11:13 (luz: oscuridad),la alimentacin se realiz flores de romerillo (Bidens pilosa L) colectadas en el campo, las cuales tenan abundante presencia de trips (Frankliniella spp.) y polen. Para recoger las puestas, como sustrato de oviposicin se depositaron cuatro secciones de vaina de habichuela (Phaseolus vulgaris) de tres a cinco centmetros de longitud en cada frasco. El suministro de agua y alimento as como la sustitucin y estudio de las vainas de habichuela se realiz diariamente para determinar la presencia o no de huevos de O. insidiosus. Dos das despus de realizadas las colectas se observaron en el estereoscopio las primeras puestas de O. insidiosus en las secciones de vainas de habichuela, las cuales fueron colocadas individualmente en viales plsticos suministrndole alimento (flores de romerillo) y un algodn humedecido como fuente de humedad. Estos fueron chequeados a diario y las ninfas que emergan se individualizaron con alimento y humedad, 60 de estas ninfas fueron observadas diariamente para determinar diferentes aspectos de su biologa como:dimorfismo sexual, perodo de incubacin, estadios ninfales y tiempo de desarrollo.

Fig. 1- Frasco de vidrio con Orius

Las hembras adultas que sobrevivieron (30) fueron apareadas con machos adultos colectados en el campo, se pusieron en las jaulas de oviposicin Fig. 2 Las dietas y secciones de habichuela se cambiaron a diario y stas ltimas fueron examinadas diariamente para detectar los huevos de O. insidiosus. Estos se mantuvieron en las jaulas de desarrollo ninfal Fig. 3, a 26C. 70% de humedad relativa y un fotoperodo de 11:13. La longevidad y produccin diaria de huevos de las hembras fue registrada.

Fig. 2. Jaula de ovoposicin

Fig. 3 Jaula de desarrollo ninfal.

Capacidad depredadora Para ello se tomaron 10 recipientes plsticos de tres cm de dimetro por cuatro de alto y tapa de cartn, en el fondo de cada uno se puso papel de filtro humedecido, luego se coloc en el interior de cada recipiente un foliolo de la hoja de papa con 30 trips de diferentes edades y un adulto de Orius. A las 24 horas de colocados los foliolos se cont el nmero de trips muertos o daados sin posibilidad de recuperacin. Este procedimiento se realiz durante tres das cambiando diariamente los foliolos con trips. Estos ensayos se replicaron en tres ocasiones. Para conocer la capacidad depredadora se sigui el mtodo utilizado por Rijo, en el 2001, que consisti en colocar diariamente hojas infestadas con el fitfago y cuantificar lo consumido por el depredador diariamente Sensibilidad de Orius a bioplaguicidas Para el estudio de la sensibilidad de Orius a bioplaguicidas, se utilizaron insectos provenientes del pie de cra fomentado en condiciones de laboratorio. Siendo evaluados tres bioplaguicidas, los cuales fueron: Beauveria bassiana 1x107, Metharizium anisopliae 1x107 y Verticillium lecanii(Lecanicillium sp.) 1x107, la aplicacin de estos, se hizo mediante el mtodo de aspersin de la flor con un spray y para ello se tomaron 5 flores de romerillo por tratamiento. La evaluacin del efecto de los tres biopreparados sobre el depredador Orius, se realiz colocando en potes de 25 cc de capacidad (tres cm de dimetro y cuatro de altura) flores con trips y 5 adultos de Orius para un total de 25 por variante; a estos se les aplic la solucin del biopreparado. En el interior del pote se deposit una pequea mota de algodn embebido en agua como fuente de humedad. A partir del tercer da de aplicados los biopreparados se evalu el efecto de estos sobre el depredador, contando los vivos y los muertos, stos fueron colocados en cmara hmeda y previo a ello fueron desinfectados con hipoclorito de sodio al 2% y lavados con agua estril, fueron observados diariamente hasta la aparicin de las esporas causantes de la muerte y adems se utiliz un testigo, el cual fue tratado con agua. La mortalidad se evalu mediante la formula de Abbot y la toxicidad de estos biopreparados se compar mediante la escala utilizada por la Organizacin Internacional para el Control Biolgico e Integrado de los Animales y Plantas perjudiciales para los Cultivos (OILB) (Jacas et al. 1993), para ensayos residuales de laboratorio, la que se relaciona a continuacin: Categora 1 Inocuo < 30% Categora 2 Ligeramente txico 30-70% Categora 3 Moderadamente txico 80-99% Categora 4 Txico > 99% RESULTADOS Biologa de Orius insidiosus Los huevos son insertados en la epidermis de la planta hospedera en un ngulo casi perpendicular a la superficie, observndose slo el collar del oprculo afuera que es de color blanco. Si el huevo no est totalmente insertado en la superficie del tejido de la planta es visible a travs del coriom, los ojos rojos y el cuerpo amarillo naranja del embrin en desarrollo. Ninfa: presenta cinco estadios, que poseen ojos compuestos rojo brillante El 1er, 2do y 3er estadio ninfal son amarillentos y tienen una distintiva glndula odorfera naranja y dorsal sobre el tercer, cuarto y quinto

segmento abdominal. Los muones alares estn totalmente ausentes en el primer estadio ninfal y en el segundo slo estn presentes en el metatrax. En el tercero estn presentes tanto en el mesotrax como en el metatrax. El cuarto y quinto estado ninfal son de color carmelita claro a oscuro y la glndula odorfera dorsal es mucho menos discernible que en los estados ms tempranos. Todos los estados ninfales poseen ojos compuestos rojo-brillantes. En el dimorfismo sexual se determin que las diferencias fundamentales se encuentran en las hembras que son ms robustas y de mayor longitud que los machos y en la parte ventral de los tres ltimos segmentos abdominales de la hembra aparece el aparato ovipositor, el cual es claramente visible. En la Tabla 1 se observa la duracin del ciclo de vida de O. insidiosus, a 260C y la dieta a base de polen y trips Tabla1.Algunos aspectos del ciclo de vida de Orius insidiosus a 26C con dieta de trips y polen. Incubacin Periodo Longevidad Huevos/ Huevos/ huevo adulto hembra das ninfal 3-5 13,5 22 42 2 As mismo Bush (1993) determin un perodo de oviposicin de 3.8 a 4.7 das en chinches criadas con huevos de H. virences y las vainas de habichuelas como sustrato de oviposicin y un tiempo de desarrollo de 11.1 das. Los huevos por da/hembras fueron 6.8 y la fecundidad de 121.1 y la longevidad de la hembra de 26.1 da. La diferencia entre el tiempo de desarrollo, huevos por da/hembras y fecundidad entre este trabajo y y los resultados obtenidos por Bush (1993) debe estar dada por la dieta utilizada, ya que los huevos de lepidpteros son considerados la dieta ms efectiva para la cra de antocoridos. Sin embargo Salas en 2005 seala que la fecundidad de las hembras oscila entre los 100 y 150 huevos/hembra dependiendo de la alimentacin y las condiciones climticas, no coincidiendo con los obtenidos en este ensayo que fue de 42 por hembra. En los trabajos realizados por Rodrguez (1998) se comprob que Orius necesita para su desarrollo de una dieta balanceada que contenga trips, caros y polen. Capacidad depredadora Los resultados obtenidos sobre la capacidad depredadora de Orius sobre Trips en condiciones de laboratorio durante tres das se aprecian en la Tabla 2. Tabla 2. Cantidad de Trips muertos por Orius en condiciones de laboratorio. Evaluacin a las 24 horas Variantes Primer ensayo Segundo ensayo Tercer ensayo 1ra. 2da. 3ra. 1ra. 2da. 3ra. 1ra. 2da. 3ra. 1 18 27 20 15 14 -* 20 26 15 2 20 26 21 20 18 19 21 20 -* 3 21 14 18 18 21 20 18 18 20 4 20 20 19 30 26 21 30 24 -* 5 15 18 20 19 20 18 29 23 23 6 25 21 22 22 25 16 22 25 20 7 30 20 23 20 23 22 17 21 19 8 18 -* -* 18 29 20 20 14 21 9 19 29 15 21 24 23 18 28 11 10 22 23 16 25 14 15 25 29 22 Total 208 198 174 208 214 174 220 218 151 Prom/Da 20.8 22.0 19.3 20.8 21.4 19.3 22.0 21.8 18.8 *Adulto de Orius muerto En el anlisis estadstico realizado, se determin que no hay diferencias significativas entre las medias de las variables analizadas, La desviacin estndar fue de 2,79 el promedio de trips consumido fue de 21 con un intervalo de confianza de 1 (el promedio que el adulto come diario est entre 20 a 22 trips de diferentes edades) y CV de 13,45. No hubo diferencias en cuanto al consumo diario de los adultos de Orius durante los tres das en los cuales ellos se alimentaron con trips de diferentes estado de desarrollo. Segn Solas 1995, Orius insidiosus ha sido sealado a nivel mundial alimentndose de numerosas presas que incluye varios ordenes de insectos y caros, en la regin Centro Occidental de Venezuela se ha encontrado depredando T. tabaci y T. palmi en sus fases inmaduras y adultas y que la capacidad depredadora de un Orius adulto est alrededor de los 20 trips por da, siendo algo menor en los estadios

inmaduros, Esta informacin coincide con los resultados obtenidos en este trabajo respecto a la cantidad de consumo diario del adulto de Orius que estuvo entre los 20 y 22 trips por da . Por otra parte Mituda y Calilung, (1989), al evaluar la capacidad depredadora de Orius en Filipinas, confirmaron un consumo de hasta 20 trips por da y un total de 205,71 presas aniquiladas durante su ciclo de vida, coincidiendo en cuanto al consumo diario que estuvo entre 18 a 22 trips diario,.no siendo as respecto a su ciclo pues en los trabajos del ciclo de vida realizados en este trabajo el adulto dura unos 22 das por lo que el consumo durante su vida estara entre 396 a 484 trips. Segn Doult y DeBach en 1968 (citado por Nilda Prez, 2004) los insectos depredadores se caracterizan por el hecho de que tanto los adultos como los inmaduros buscan su presa, la consumen de una vez, la muerte es inevitable y no existe una relacin clara entre el nmero de presas atacadas y el nmero de depredadores en la prxima generacin. Los depredadores juveniles aprovechan las presas para obtener los nutrientes que necesitan para su crecimiento y desarrollo y los adultos para mantenerse y para la reproduccin. Sensibilidad de Orius a plaguicidas biolgicos En la Tabla 3, se puede apreciar que los biopreparados utilizados tienen efecto sobre el depredador Orius, la mortalidad para los tres medios estuvo por encima de 45% y segn la escala que utiliza la OILB para ensayos de laboratorio, stos son txicos para el depredador ya que B. bassiana y M. anisopliae fueron ligeramente txicos y Verticillium moderadamente txico. Tabla 3- Efecto de los biopreparados sobre Orius insidiosus Variante Concentracin % mortalidad Toxicidad* 1x107 68 Ligeramente txico Beauveria bassiana 1x107 48 Ligeramente txico Metharizium anisopliae 1x107 72 Moderadamente txico Verticillium lecanii Testigo sin tratar 1 15 *Segn escala de la OILB Con los resultados obtenidos se debe tener presente que cuando se utilicen estos bioplaguicdas en las reas para combatir poblaciones de trips, ya que, se pueden afectar las poblaciones existentes de este enemigo natural, pues segn Jacas y Viuela (1993) la capacidad beneficiosa del depredador se puede afectar o disminuir con la aplicacin de los biopreparados y que se puede conseguir la selectividad de los plaguicidas utilizados los cuales sean de poca persistencia y que se apliquen en los momentos precisos, al anochecer o cuando el entomfago est protegido en su hbitat. Muchos pases han adoptado criterios para la aplicacin y utilizacin de plaguicidas en general, siguiendo para los medios biolgicos las directrices de la OILB ms los indicadores medio ambientales, Viuela et al, (2001). Segn Croft (1990) citado por Viuela et al (2001), el utilizar conjuntamente enemigos naturales y plaguicidas tiene un problema serio, y es que, al ser los enemigos naturales de menor talla que las especies plagas por lo general, tienen una mayor movilidad que stos para buscar la presa o el husped, y no sobrevivir en la mayora de los casos en ausencia de la presa o husped, los tratamientos fitosanitarios las afectan ms que a las mismas plagas. Por lo tanto, su uso conjunto debe pasar por una etapa previa imprescindible que es establecer los efectos secundarios que los plaguicidas causan. En cuanto a la causante de la muerte se observ la esporulacin de B. bassiana y de M. anisopliae en el cuerpo del artrpodo y en menor proporcin de V. lecanii. En la literatura consultada no se ha encontrado referencia del dao que pueden producir las aplicaciones de estos biopreparados sobre las poblaciones de Orius en las reas de cultivo, por ello debe tenerse presente estos resultados antes de realizar cualquier tipo de aplicacin. CONCLUSIONES El perodo de incubacin de la fase de huevo fue de 3-5 das, el desarrollo ninfal de13,5 das, el total de huevos por hembra 42 y el nmero de huevos por hembra/da 2. Los cinco estadios ninfales de O. insidiosus fueron reconocidos Se determin que el dimorfismo sexual existente en O. Insidiosus la hembra es ms robusta que el macho. La capacidad depredadora diaria de Orius insidiosus es entre 20 a 22 trips de diferentes estadios Un adulto de O. Insidiosus puede llegar a depredar de 396 hasta 484 trips.

Los tres biopreparados utilizados ejercieron mortalidad sobre Orius y pueden reducir o disminuir la capacidad depredadora. La mortalidad causada por B. bassiana fue de 68%, M. anisopliae de 48% y V. lecanii de 72%. RECOMENDACIONES - Evaluar el efecto de los biopreparados en cultivos donde se realicen liberaciones de Orius - Estudiar el efecto que producen los plaguicidas biolgicos sobre el desarrollo de Orius insidiosus BIBLIOGRAFA1. Prez C. Nilda. 2004. Manejo Agroecologico de Plagas, Los enemigos naturals, Editorial CEDAR, Cuba. 2. Rijo C. Esperanza, 2001. Evaluacin de la capacidad depredadora de Chrysopa exterior Navas de Bemisia tabaci (Guennadius) en condiciones de laboratorio. Fitosanidad, vol. 5, no. 2. pp 19-22. 3. Jacas, J.A., Viuela Elisa. 1993. Los efectos de los plaguicidas sobre los enemigos beneficiosos en la agricultura. II Fungicidas. PHYTOMA Espaa, no. 48, 45-56. 4. Bush, L., Kring, T.L. and Ruberson, J.R. (1993). Suitability of greenbugs, cotton aphids, and Heliothis virescens eggs for development and reproduction of Orius insidiosus. Entomol. Esp. Appl. 67, 217222. 5. Salas, J. 1995. Orius insidiosus (Hemiptera: Anthocoridae) su presencia en la regin centro occidental de Venezuela. Agronoma tropical 45 (4): 637-645) 6. Rodrguez B. Ilsa. 1998. Efectos de cuatro dietas sobre el desarrollo y la capacidad de oviposicin de Orius sauteri (Poppius) (Hemiptera: Anthocoridae). Instituto de Control Biolgico. Cademia China de Ciencias Agrcolas, Pekin, China 7. Mituda, E.C. and V.J. Calilung. 1989. Biology of Orius tantillus (Motschulsky) (Hemiptera: Anthocoridae) and its predatory capacity against Thrips palmi Karny (Thysanoptera: Thripidae) on watermelon. The Philippine Agriculturist. 72(2): 165-184 8. Viuela, Elisa, M. Gonzlez, H. Vogt, y J. Jacas, 2001 Efectos secundarios de los plaguicidas en los enemigos naturales. Necesidad de un estudio para la autorizacin de productos en Produccin Integrada y otros modernos sistemas productivos (I parte).133,pp 21-25