METABOLISMO

ARMIDA HERNANDEZ ASCENCIO LABORATORIO CLINICO 6 F MATUTINO VALORACION METABOLICA Q.F.B.
MIGUEL ANGEL QUIJANO COUHO
INTRODUCCION
TEORIA
Importancia de los parmetros de Qumica Sangunea Clasificacin de los carbohidratos Metabolismo de la glucosa Compuestos nitrogenados Ciclo de la Ornitina Formula de la urea Creatinina Acido rico Funcionamiento renal Perfil de lpidos Perfil cardiaco Perfil heptico Metabolismo de las bilirrubinas Tipos de ictericia Protenas totales
PRACTICAS Y REPORTES DE LABORATORIO

PRACTICA Y REPORTE DE LABORATORIO 1
GLUCOSA
COLESTEROL TRIGLICERIDOS
CREATININA ACIDO URICO
BILIRRUBINAS ALBUMINA PROTEINAS TOTALES
PERFIL CARDIACO
EVIDENCIAS BIBLIOGRAFIA
El metabolismo es el conjunto de reacciones bioqumicas y procesos fsico-qumicos que ocurren en una clula y en el organismo. stos complejos procesos interrelacionados son la base de la vida a escala molecular, y permiten las diversas actividades de las clulas: crecer, reproducirse, mantener sus estructuras, responder a estmulos, etc. El metabolismo se divide en dos procesos conjugados: catabolismo y anabolismo. Las reacciones catablicas liberan energa; un ejemplo es la gluclisis, un proceso de degradacin de compuestos como la glucosa, cuya reaccin resulta en la liberacin de la energa retenida en sus enlaces qumicos. Las reacciones anablicas, en cambio, utilizan esta energa liberada para recomponer enlaces qumicos y construir componentes de las clulas como lo son las protenas y los cidos nucleicos. El catabolismo y el anabolismo son procesos acoplados que hacen al metabolismo en conjunto, puesto que cada uno depende del otro. La economa que la actividad celular impone sobre sus recursos obliga a organizar estrictamente las reacciones qumicas del metabolismo en vas o rutas metablicas, donde un compuesto qumico (sustrato) es transformado en otro (producto), y este a su vez funciona como sustrato para generar otro producto, siguiendo una secuencia de reacciones bajo la intervencin de diferentes enzimas (generalmente una para cada sustrato-reaccin). Las enzimas son cruciales en el metabolismo porque agilizan las reacciones fsico-qumicas, pues hacen que posibles reacciones termodinmicas deseadas pero "desfavorables", mediante un acoplamiento, resulten en reacciones favorables. Las enzimas tambin se comportan como factores reguladores de las vas metablicas, modificando su funcionalidad y por ende, la actividad completa de la va metablica en respuesta al ambiente y necesidades de la clula, o segn seales de otras clulas. El metabolismo de un organismo determina qu sustancias encontrar nutritivas y cules encontrar txicas. Por ejemplo, algunas procariotas utilizan sulfuro de hidrgeno como nutriente, pero este gas es venenoso para los animales. La velocidad del metabolismo, el rango metablico, tambin influye en cunto alimento va a requerir un organismo. Una caracterstica del metabolismo es la similitud de las rutas metablicas bsicas incluso entre especies muy diferentes. Por ejemplo: la secuencia de pasos qumicos en una va metablica como el ciclo de Krebs es universal entre clulas vivientes tan diversas como la bacteria unicelular Escherichia coli y organismos pluricelulares como el elefante. Esta estructura metablica compartida es probablemente el resultado de la alta eficiencia de estas rutas, y de su temprana aparicin en la historia evolutiva.
Los valores de referencia pueden definirse como los valores de una variable obtenidos de un grupo de individuos sanos (o de un nico individuo) en un determinado estado de salud. Considerando dos tipos de valores de referencia: Los basados en el grupo, y Los basados en el sujeto Wisten ha dividido los diversos grupos de edad en la siguiente categora: Recin nacidos Grupo prepuberal Poblacin de adultos Poblacin de ancianos
SUSTANCIAS RELACION DE VALORES MEDIOS Bilirrubina 7.5 Fosfatasa 2.5 alcalina Amoniaco 2.0 Fosforo 1.9 Potasio 1.5 Colesterol 0.5 Inmunoglobulina 0.1 IgM Amilasa 0.1
TABLA 1- Proporcin de sustancias en la sangre de recin nacidos respecto a las de los adultos.
SEXO: los valores medios de los niveles sricos de acido rico, creatinina y urea son mayores en los varones sanos que en las mujeres. Antes de la sexta dcada, los varones presentan niveles mayores de triglicridos, colesterol, sodio y calcio en el suero; sin embargo, despus de la quinta dcada, las mujeres generalmente muestran niveles sricos mayores de colesterol, calcio, fosforo inorgnico y fosfatasa alcalina. EMBARAZO: Las mujeres gestantes mostraron valores medios significativamente menores de calcio, glucosa, urea, protenas totales y albumina en el suero, sin embargo, el acido rico, colesterol, lactato deshidrogenasa, aspartato aminotransferasa y fosfatasa alcalina en el
suero resultaron ms altos. La diferencia de los valores de FAL se debe a la presencia de la isoenzima placentaria de la fosfatasa alcalina en el suero de las mujeres embarazadas.
Los glcidos, carbohidratos o sacridos son molculas orgnicas compuestas por carbono, hidrogeno y oxigeno. Son solubles en agua y se clasifican de acuerdo a la cantidad de carbonos, por el grupo funcional aldehdo y por su composicin molecular. Estos pueden sufrir reacciones de esterificacin, animacin, reduccin y oxidacin, lo cual otorga a cada una de las estructuras una propiedad especfica (solubilidad).
= ESTRUCTURA QUIMICA =
Los carbohidratos son compuestos formados en su mayor parte por tomos de carbono e hidrogeno y en una menor cantidad de oxigeno. Los glcidos tienen enlaces qumicos difciles de romper llamados covalentes, mismos que posees gran cantidad de energa que es liberada al romperse estos enlaces.
Glucosa forma dextrgira
Fructosa forma dextrgira
Ribosa forma furanosa
La designacin D o L es realizada de acuerdo a la orientacin del carbono asimtrico ms alejados del grupo carbonilo: si el grupo hidroxilo est a la derecha de la molcula es un azcar
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D, si est a la izquierda es un azcar L. Como los D azcares son los ms comunes, usualmente la letra D es omitida.
= TIPOS DE CARBOHIDRATOS =
Los carbohidratos se dividen en monosacridos, disacridos, oligosacaridos y polisacridos.
MONOSACARIDOS:
son los ms simples, estn formados por una sola molcula; no pueden hidrolizarse a glcidos ms pequeos. La formula qumica general de un monosacrido no modificado es CH2Nn. poseen un grupo carbonilo en uno de sus tomos de carbono y grupos hidroxilo. Son la principal fuente de combustible para el metabolismo, cuando no son necesitados son convertidos en otra forma. Estos se clasifican de acuerdo a tres caractersticas:
1. La posicin de grupo carbonilo 2. El numero de tomos que contiene 3. Su quiralidad Si el grupo carbonilo es un aldehdo el monosacrido es una aldosa; si el grupo carbonilo es una cetona, el monosacrido es una cetosa. Los monosacridos ms pequeos son los que poseen tres tomos de carbono, y son llamados triosas; aquellos con cuatro son llamados tetrosas, lo que poseen cinco son llamados pentosas, seis son llamados hexosas y as sucesivamente. Los sistemas de clasificacin son frecuentemente combinados; por ejemplo, la glucosa es una aldohexosa (un aldehdo de seis tomos de carbono), la ribosa es una aldopentosa (un aldehdo de cinco tomos de carbono) y la fructosa es una cetohexosa (una cetona de seis tomos de carbono).
DISACARIDOS: son glcidos formados por dos monosacridos, estos se unen mediante
un enlace covalente (enlace glucidico) tras una reaccin de deshidratacin que implica la prdida de un tomo de hidrgeno de un monosacrido y un grupo hidroxilo del otro monosacrido, de manera que la frmula de los disacridos no modificados es C12H22O11. La sacarosa es el disacrido ms abundante, est compuesta de una molcula de fructosa, el nombre sistemtico de la sacarosa O--D-glucopiranosil-(1 2)--D-fructofuransido sugiere cuatro cosas: 1. Bajo monosacridos: Glucosa y fructosa. 2. Disposicin de las molculas en el espacio: La glucosa adopta la forma piranosa y la fructosa una furanosa. 3. Unin de los monosacridos: El carbono anomrico uno (C1) de -glucosa est enlazado en alfa al C2 de la fructosa formando 2-O-(alfa-D-glucopiranosil)-beta-D-fructofuransido y liberando una molcula de agua. 4. El sufijo -sido indica que el carbono anomrico de ambos monosacridos participan en el enlace glicosdico.
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La lactosa est compuesta por una molcula de galactosa y una molcula de glucosa. Su nombre sistemtico es O--D-galactopiranosil-(1 4)-D-glucopiranosa. Otro disacrido notable incluye la maltosa (dos glucosas enlazadas -1,4) y la celobiosa (dos glucosas enlazadas -1,4). OLIGOSACARIDOS: estn compuestos de entre 3 y 9 molculas de monosacridos que al hidrolizarse se liberan. Frecuentemente se encuentran unidos a protenas, formando las glucoproteinas como una forma comn de modificaciones tras las sntesis proteicas. . Estas modificaciones post traduccionales incluyen los oligosacridos de Lewis, responsables por las incompatibilidades de los grupos sanguneos, el eptope alfa-Gal responsable del rechazo hiperagudo en xenotrasplante y O-GlcNAc.
Estaquiosa, tetrasacrido formado por una glucosa, dos galactosas y una fructosa.
POLISACARIDOS: son cadenas ramificadas o no, de ms de 10 monosacridos,

resultan de la condensacin de muchas molculas de monosacridos con la prdida de varias molculas de monosacridos con la prdida de varias molculas de agua. Su formula emprica es: C6H10O5. Los polisacridos representan una clase importante de polmeros biolgicos. El almidn es usado como una forma de almacenar monosacridos en las plantas, siendo encontrado en la forma de amilasa y la amilopectina (ramificada). En animales, se usa el glucgeno en vez de almidn el cual es estructuralmente similar pero ms densamente ramificado. Las propiedades del glucgeno le permiten ser metabolizado ms rpidamente, lo cual se ajusta a la vida activa de los animales con locomocin. La celulosa y la quitina son ejemplos de polisacridos estructurales. La celulosa es usada en la pared celular de plantas y otros organismos y es la molcula ms abundante sobre la tierra. La quitina tiene una estructura similar a la celulosa, pero tiene nitrgeno en sus ramas incrementando as su fuerza. Se encuentra en los exoesqueletos de los artrpodos y en las paredes celulares de muchos hongos. Tiene diversos de usos, por ejemplo en hilos para sutura quirrgica. Otros polisacridos incluyen la callosa, la lamina, la rina, el xileno y la galactomanosa .
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AMILOPECTINA
= CLASIFICACION DE LOS CARBOHIDRATOS =

Los carbohidratos se clasifican en simples y complejos:
Los simples, son azucares de rpida absorcin y son energa rpida. Estos generan la inmediata Secrecin de insulina. Se encuentran en los productos hechos o, con azucares refinados azcar, miel, Mermeladas, jaleas, golosinas, leche, hortalizas y frutas etc. Algo para tener en cuenta es que los Productos elaborados con azucares refinados aportan caloras y poco valor nutritivo, por lo que su Consumo debe ser moderado. Los complejos, son de absorcin ms lenta, y actan mas como energa de reserva por la anterior razn. Se encuentra en cereales, legumbres, harinas, pan, pastas.
CLASIFICACION DE CARBOHIDRATOS
MOSACARIDOS DISACARIDOS POLIOLES OLIGOSACARIDOS POLISACARIDOS Glucosa, fructosa y maltosa Sacarosa, lactosa y maltosa Isomaltosa, sorbitol y maltitol Maltodrextina, y fruto-oligosacaridos Sin almidn: celulosa, pectinas e hidrocoloides
= FUNCION DE LOS CARBOHIDRATOS =

Los carbohidratos desempean diversas funciones, entre las que destacas la energtica y estructural: CARBOHIDRATOS ENERGETICOS: Los mono y disacridos, como la glucosa, actan como combustibles biolgico, aportando energa inmediata a las clulas; es la responsable de mantener la actividad de los msculos, la temperatura corporal, la
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tensin arterial, el correcto funcionamiento del intestino y la actividad de las neuronas. Tambin sirven para nutrirnos y prevenir enfermedades. CARBOHIDRATOS ESTRUCTURALES: Algunos polisacridos forman estructuras esquelticas muy resistentes, como las celulosa de las paredes de clulas vegetales y la quitina de la cutcula de los artrpodos. OTRAS FUNCIONES: la ribosa y la desoxirribosa son constituyentes bsicos de los nucletidos, monmeros del ADN y ARN.
= METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS =
Los carbohidratos representan las principales molculas almacenadas como reserva en los vegetales. En el tubo digestivo los polisacridos de la dieta son hidrolizados por las glucosidasas de los jugos digestivos, rindiendo monosacridos; estos son absorbidos por las clulas del epitelio intestinal e ingresan al hgado a travs de la circulacin portal, donde, alrededor del 60% son metabolizados. En el hgado, la glucosa tambin se puede transformar en lpidos que se transportan posteriormente al tejido adiposo.
Las principales rutas metablicas de los glcidos son:
GLICOLISIS: oxidacin de la glucosa a piruvato. GLUCONEOGENESIS: Sntesis de la glucosa a partir de precursores no glucidicos. GLUCOGENESIS: sntesis de glucgeno. CICLO DE LAS PENTOSAS: Sntesis de pentosas para los nucletidos.
En el metabolismo oxidativo encontramos rutas comunes con los lpidos como son el ciclo de Krebs y la cadena respiratoria. Los oligosacaridos y polisacridos son derivados inicialmente a monosacridos por enzimas llamadas glucsido hidrolasas. Entonces los monosacridos pueden entrar en las rutas catablicas de los monosacridos. La principal hormona que controla el metabolismo de los carbohidratos es la insulina.
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El msculo es un tejido en el que la fermentacin representa una ruta metablica muy importante ya que las clulas musculares pueden vivir durante largos perodos de tiempo en ambientes con baja concentracin de oxgeno. Cuando estas clulas estn trabajando activamente, su requerimiento de energa excede su capacidad de continuar con el metabolismo oxidativo de los hidratos de carbono puesto que la velocidad de esta oxidacin est limitada por la velocidad a la que el oxgeno puede ser renovado en la sangre. El msculo, al contrario que otros tejidos, produce grandes cantidades de lactato que se vierte en la sangre y retorna al hgado para ser transformado en glucosa.
El metabolismo de la glucosa o proceso de glucolisis, es la va metablica encargada e oxidar la glucosa con la finalidad de obtener energa para la clula. Consiste en 10 reacciones enzimticas consecutivas que convierten a la glucosa en dos molculas de piruvato. El tipo de glucolisis ms comn y ms conocida es la Va de Embden Meyerhof, explicada inicialmente por Gustav Embden y Otto Meyerhof.
= FUNCION DE LA GLUCOLISIS =
1.- La generacin de molculas de alta energa (ATP) adenin-trifosfato y (NADH) como fuente de energa celular en procesos de respiracin aerbica (en presencia de oxigeno) y fermentacin (ausencia de oxigeno). 2.- La generacin de piruvato que pasar al ciclo de Krebs, como parte de la respiracin aerbica. 3.- La produccin de intermediarios de 6 y 3 carbonos que pueden ser utilizados en otros procesos celulares. Reaccin global de la gluclisis
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El ATP (adenosin trifosfato) es la fuente universal de energa de la clula. NADH Y H+, otorgan la capacidad de reducir otros compuestos pertenecientes a otras vas metablicas, o bien para metabolizar ATP. El piruvato es la molcula que seguir oxidndose en el Ciclo de Krebs, como parte de la respiracin arobica, donde dara origen a mas molculas de NADH, que pasaran a sintetizar ATP en la mitocondria.
= ETAPAS DE LA GLUCOLISIS =
La glucolisis se divide en dos partes importantes y diez reacciones enzimticas, como las describo a continuacin: FASE DE GASTO DE ENERGIA (ATP): Esta primera etapa de la glucolisis consiste en transformar una molcula de glucosa en dos molculas de gliceraldehido, donde solo se consume energa de ATP.
1. Hexoquinasa
La primera reaccin de la gluclisis es la fosforilacin de la glucosa, para activarla (aumentar su energa) y as poder utilizarla en otros procesos cuando sea necesario. Esta activacin ocurre por la transferencia de un grupo fosfato del ATP, una reaccin catalizada por la enzima hexoquinasa,6 la cual puede fosforilar a molculas similares a la glucosa, como la fructosa y manosa.
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La hexoquinasa slo fosforila las D-hexosas, y utiliza de sustrato MgATP2+, ya que este catin permite que el ltimo fosfato del ATP (fosfato gamma, -P o P) sea un blanco ms fcil para el ataque nucleoflico que realiza el grupo hidroxilo (OH) del sexto carbono de la glucosa, lo que es posible debido al Mg2+ que apantalla las cargas de los otros dos fosfatos.1 7 Las ventajas de fosforilar la glucosa son 2: La primera es hacer de la glucosa un metabolito ms reactivo. La segunda ventaja es que la glucosa-6-fosfato no puede cruzar la membrana celular -a diferencia de la glucosa-ya que en la clula no existe un transportador de G6P. De esta forma se evita la prdida de sustrato energtico para la clula. Esta reaccin posee un G negativo, y por tanto se trata de una reaccin en la que se pierde energa en forma de calor. En numerosas bacterias esta reaccin esta acoplada a la ltima reaccin de la gluclisis (de fosfoenolpiruvato a piruvato) para poder aprovechar la energa sobrante de la reaccin: el fosfato del fosfoenolpiruvato se transfiere de una a otra protena de un sistema de transporte fosfotransferasa, y en ltima instancia, el fosfato pasar a una molcula de glucosa que es tomada del exterior de la clula y liberada en forma de G6P en el interior celular.
2. Glucosa 6 isomerasa
Aqu se define la geometra molecular que afectar los dos pasos crticos en la gluclisis: El prximo paso, que agregar un grupo fosfato al producto de esta reaccin, y el paso 4, cuando se creen dos molculas de gliceraldehido que finalmente sern las precursoras del piruvato.1 En esta reaccin, la glucosa-6-fosfato se isomeriza a fructosa-6-fosfato, mediante la enzima glucosa 6 fosfato isomerasa. La isomerizacin ocurre en una reaccin de 4 pasos, que implica la apertura del anillo y un traspaso de protones a travs de un intermediario cis-enediol8
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Puesto que la energa libre de esta reaccin es igual a +1,7 kJ/mol la reaccin es no espontnea y se debe acoplar.
3. Fosfofructoquinasa
Este fosfato tendr una baja energa de hidrlisis. Por el mismo motivo que en la primera reaccin, el proceso es irreversible. El nuevo producto se denominar fructosa-1,6-bifosfato. La irreversibilidad es importante, ya que la hace ser el punto de control de la gluclisis. Como hay otros sustratos aparte de la glucosa que entran en la gluclisis, el punto de control no est colocado en la primera reaccin, sino en sta. La fosfofructoquinasa tiene centros alostricos, sensibles a las concentraciones de intermediarios como citrato y cidos grasos. Liberando una enzima llamada fosfructocinasa-2 que fosforila en el carbono 2 y regula la reaccin.
4. Aldolasa
La enzima aldolasa (fructosa-1,6-bifosfato aldolasa), mediante una condensacin aldlica reversible, rompe la fructosa-1,6-bifosfato en dos molculas de tres carbonos (triosas): dihidroxiacetona fosfato y gliceraldehdo-3-fosfato. Existen dos tipos de aldolasa, que difieren tanto en el tipo de organismos donde se expresan, como en los intermediarios de reaccin. .
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Esta reaccin tiene una energa libre (G) entre 20 a 25 kJ/mol, por lo tanto en condiciones estndar no ocurre de manera espontnea. Sin embargo, en condiciones intracelulares la energa libre es pequea debido a la baja concentracin de los sustratos, lo que permite que esta reaccin sea reversible.
5. Triosa fosfato isomerasa

Esta reaccin posee una energa libre en condiciones estndar positiva, lo cual implicara un proceso no favorecido, sin embargo al igual que para la reaccin 4, considerando las concentraciones intracelulares reales del reactivo y el producto, se encuentra que la energa libre total es negativa, por lo que la direccin favorecida es hacia la formacin de G3P.
ste es el ltimo paso de la "fase de gasto de energa". Slo se ha consumido ATP en el primer paso (hexoquinasa) y el tercer paso (fosfofructoquinasa-1). El 4to paso (aldolasa) genera una molcula de gliceraldehdo-3-fosfato, mientras que el 5to paso genera una segunda molcula de ste. De aqu en adelante, las reacciones a seguir ocurrirn dos veces, debido a las 2 molculas de gliceraldehido generadas de esta fase. Hasta esta reaccin hay intervencin de energa (ATP).
= FASE DE BENEFICIO ENERGETICO =
6. Gliceraldehdo-3-fosfato deshidrogenasa 15
Esta reaccin consiste en oxidar el gliceraldehdo-3-fosfato utilizando NAD+ para aadir un ion fosfato a la molcula, la cual es realizada por la enzima gliceraldehdo-3-fosfato deshidrogenasa o bien, GAP deshidrogenasa en 5 pasos, y de sta manera aumentar la energa del compuesto. El grupo aldehdo se oxida a un grupo acil-fosfato, que es un derivado de un carboxilo fosfatado. Este compuesto posee una energa de hidrlisis sumamente alta (cercana a los 50 kJ/mol) por lo que se da inicio al proceso de reacciones que permitirn recuperar el ATP ms adelante. Mientras el grupo aldehdo se oxida, el NAD+ se reduce, lo que hace de esta reaccin una reaccin redox. El NAD+ se reduce por la incorporacin de algn [H+] dando como resultado una molcula de NADH de carga neutra.
7. Fosfoglicerato quinasa
En este paso, la enzima fosfoglicerato quinasa transfiere el grupo fosfato de 1,3-bisfosfoglicerato a una molcula de ADP, generando as la primera molcula de ATP de la va. Como la glucosa se transform en 2 molculas de gliceraldehido, en total se recuperan 2 ATP en esta etapa. Ntese que la enzima fue nombrada por la reaccin inversa a la mostrada, y que sta opera en ambas direcciones.
ADP ATP Fosfoglicerato quinasa 1,3-Bisfosfoglicerato + ADP 3-Fosfoglicerato + ATP
sta manera de obtener ATP sin la necesidad de O2 se denomina fosforilacin a nivel de sustrato.
8. Fosfoglicerato mutasa
Se isomeriza el 3-fosfoglicerato procedente de la reaccin anterior dando 2-fosfoglicerato, la enzima que cataliza esta reaccin es la fosfoglicerato mutasa. Lo nico que ocurre aqu es el
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cambio de posicin del fosfato del C3 al C2. Son energas similares y por tanto reversibles, con una variacin de energa libre cercana a cero.
3-Fosfoglicerato
2-Fosfoglicerato
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9. Enolasa
La enzima enolasa propicia la formacin de un doble enlace en el 2-fosfoglicerato, eliminando una molcula de agua formada por el hidrgeno del C2 y el OH del C3. El resultado es el fosfoenolpiruvato.
2-Fosfoglicerato
5
Fosfoenolpiruvato + H2O
10. Piruvato quinasa

Desfosforilacin del fosfoenolpiruvato, obtenindose piruvato y ATP. Reaccin irreversible mediada por la piruvato quinasa. El enzima piruvato quinasa es dependiente de magnesio y potasio. La energa libre es de -31,4 kJ/mol, por lo tanto la reaccin es favorable e irreversible. El rendimiento total de la gluclisis de una sola glucosa (6C) es de 2 ATP y no 4, ya que se consumen 2 ATP en la primera fase, y 2 NADH (que dejarn los electrones Nc en la cadena de transporte de electrones para formar 3 ATP por cada electrn). Con la molcula de piruvato, mediante un paso de oxidacin intermedio llamado descarboxilacin oxidativo, mediante el cual el piruvato pasa al interior de la mitocondria, perdiendo CO2 y un electrn que oxida el NAD+, que pasa a ser NADH ms H+ y ganando un CoA-SH (coenzima A), formndose en acetil-CoA gracias a la enzima piruvato deshidrogenasa, se ciclo de Krebs. puede entrar al
Fosfoenolpiruvato
Piruvato
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De los compuestos nitrogenados con un enlace simple C N, los ms importantes son las aminas que son derivados del amoniaco en los que uno o mas hidrgenos son sustituidos por un grupo alquilo. Las aminas, como el NH3 tiene una estructura piramidal con tres enlaces (sp3) y un par de electrones no compartidos. Los orbtales tienen hibridacin sp3 y estn dirigidos como el C, hacia los vrtices de un tetraedro, en el NH3los ngulos de enlace HN son de 107. 3 pero en las aminas los sustituyentes distorsionan la pirmide ensanchndola. La presencia del par de electrones da a las aminas propiedades fsicas y qumicas caractersticas como veremos ms adelante.
= CLASIFICACION DE LAS AMINAS =

Segn el numero de hidrgenos que se substituyan se denominan aminas primarias, secundarias o terciarias. Las aminas comprenden algunos de los compuestos biolgicos ms importantes que se conocen. Ellos funcionan en el organismo como biorreguladores, neurotransmisores en mecanismos de defensa y en muchas otras funciones ms. Debido a su alto grado de actividad biolgica muchas aminas se emplean como medicamentos.
Dicho de otra manera, el nmero de grupos orgnicos unidos al tomo de nitrgeno determina que la molcula sea clasificada como amina primaria (un grupo orgnico), secundaria (dos grupos) o terciaria (tres grupos).
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Si al menos uno de los grupos sustituyentes es un grupo arilo, entonces la amina independientemente de ser primaria, secundaria o terciaria, ser aromtica.
Ejemplos:
Las aminas comprenden algunos de los compuestos biolgicos ms importantes que se conocen. Ellas funcionan en los organismos vivos como biorreguladores, neurotransmisores, en mecanismos de defensa y en muchas otras funciones ms. Debido a su alto grado de actividad biolgica muchas aminas se emplean como medicamentos. A continuacin, se muestran las estructuras y los usos de algunas aminas biolgicamente activas.
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= ESTRUCTURA Y PROPIEDADES FISICAS DE LAS AMINAS =

El tomo de nitrgeno de la molcula de amoniaco contiene un par de electrones libres, de manera que la forma de esta molcula, considerando en ella al par de electrones no enlazantes, es tetradrica ligeramente distorsionada (piramidal). El par aislado de electrones no enlazantes ocupa una de los vrtices del tetraedro. El ngulo del enlace H-N-H del amoniaco es de 107(, y tanto la forma de la molcula como el valor anterior se pueden explicar admitiendo una hibridacin sp3 en el tomo de nitrgeno. El par electrnico libre provoca una compresin del ngulo que forman entre s los orbitales hbridos sp3, reducindolo de 109(a 107(grados. En las aminas, como la trimetilamina ((CH3)3N:), el ngulo del enlace C-N-C no est tan comprimido como en el amoniaco porque los grupos alquilo, ms voluminosos que los tomos de hidrgeno, abren ligeramente el ngulo (efecto estrico), como se muestra a continuacin.
Las aminas, al igual que el amonaco, son polares porque el momento dipolar del par aislado de electrones se suma a los momentos dipolares de los enlaces C-N y H-N. Adems, las aminas primarias y secundarias tienen enlaces N-H que les permiten formar puentes de hidrgeno entre sus molculas. Las aminas terciarias, como no tienen enlace N-H, no pueden formar este tipo de enlaces intermoleculares. Como el nitrgeno es menos electronegativo que el oxgeno, el enlace N-H est menos polarizado que el enlace O-H. Por lo tanto, las aminas forman puentes de hidrgeno ms dbiles que los alcoholes de masas molares semejantes y por tanto tienen puntos de ebullicin menores que los de los alcoholes anlogos. Las aminas terciarias, que no pueden formar puentes de hidrgeno, tienen temperaturas de ebullicin ms bajos que los de las aminas primarias o secundarias de masas molares semejantes. No obstante las aminas poseen temperaturas de ebullicin mayores que las de los hidrocarburos de masa molar semejante ya que estos ltimos son apolares y las fuerzas de interaccin intermoleculares son muy dbiles. Todas las aminas, incluso las terciarias, forman puentes de hidrgeno con el agua y los alcoholes. Por esta razn, las aminas de baja masa molar (hasta 6 tomos de carbono) son relativamente solubles en agua y en alcoholes. Las aminas, por su conjunto de propiedades, fsicas y qumicas, as como por su interaccin con el organismo humano, ocupan un lugar importante en las ciencias bsicas de las carreras de ciencias
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mdicas, su conocimiento permite una mejor comprensin de las transformaciones qumicas que a nivel celular tienen lugar y por otra parte su conocimiento es bsico para el estudio de los aminocidos y protenas en particular y de la bioqumica en general.
La Ornitina es un aminocido producido por la descomposicin de la arginina, otro aminocido. Este reparto se produce durante el ciclo del acido ctrico, que es una parte del proceso de los residuos de expelacion humanos. Durante este ciclo, interacta L-aginine con la enzima arginasa para crear tanto Ornitina y urea. La Ornitina no es un aminocido esencial, y no desempea ningn papel en la sntesis de protenas. Puesto que no es esencial, el cuerpo humano puede generar sin una fuente externa. La Ornitina protege el hgado del dao que provocan los medicamentos y sustancias qumicas, a la vez que estimula su regeneracin. Fortalece el sistema inmunolgico estimulando la produccin de glbulos blancos ms activos y efectivos. La Ornitina contribuye a la quelacin (eliminacin) de metales pesados. Cuando el cuerpo experimenta traumas severos - como lesiones, ciruga o quemaduras, o porque no, un entrenamiento con pesas - ste entra en lo que se llama estado catablico En esta condicin temporal, el cuerpo tiende a destruirse en lugar de reconstruirse. La hormona catablica cortisona tiene una funcin importante para inducir el catabolismo. En el estado catablico, el cuerpo no tiene xito para utilizar las protenas que se encuentran en la alimentacin y aparecen altos niveles de productos protenicos daados en la orina. Los niveles de calcio en la orina tambin aumentan, conforme los huesos comienzan a debilitarse. Lo contrario del estado catablico es un estado anablico, en el cual el cuerpo tiende a reconstruirse a s mismo. Estudios hechos en pacientes hospitalizados recuperndose de lesiones o enfermedades graves sugieren que las OKG bloquean los efectos catablicos de la cortisona y tambin estimulan directamente la actividad anablica. Aminocido dibsico que se obtiene por una transaminacin peculiar catalizada por la ornitncetocido aminotransferasa. Es el precursor biosinttico de la arginina. La Ornitina se degrada por intermedio del semialdehdo glutmico, utilizando la misma va que la prolina y el cido glutmico. En el organismo, la Ornitina es necesaria para crear la prolina y la citrulina, los cuales son esenciales en el suministro de energa a las clulas. Este acido es tambin especulativa ligada a un aumento de la hormona de crecimiento y los niveles de insulina, los cuales ayudan a construir musculo. Por esta razn, los complementos Ornitina a menudo se comercializan para los culturistas. La creencia popular sostiene que la Ornitina es dos veces tan eficaz como la arginina a
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estimular los niveles de la hormona del crecimiento, y los suplementos que contienen ambos compuestos se consideran redundantes. Es importante sealar que hay estudios en humanos han llevado a cabo para verificar la relacin entre el crecimiento del musculo y este aminocido.
La urea es un compuesto qumico cristalino e incoloro, de frmula CO(NH2)2. Se encuentra abundantemente en los riones y en la materia fecal. Es el principal producto terminal del metabolismo de protenas en el hombre y en los dems mamferos. La orina humana contiene unos 20g por litro, y un adulto elimina de 25 a 39g diariamente.
En cantidades menores, est presente en la sangre, en el hgado, en la linfa y en los fluidos serosos, y tambin en los excrementos de los peces y muchos otros animales. Tambin se encuentra en el corazn, en los pulmones, en los huesos y en los rganos reproductivos as como el semen. La urea se forma principalmente en el hgado como un producto final del metabolismo. El nitrgeno de la urea, que constituye el 80% del nitrgeno en la orina, procede de la descomposicin de las clulas del cuerpo pero, sobre todo, de las protenas de los alimentos. La urea est presente tambin en los hongos as como en las hojas y semillas de numerosas legumbres y cereales.
Es soluble en agua y en alcohol, y ligeramente soluble en ter. Se obtiene mediante la sntesis de Whler, que fue diseada en 1828 por el qumico alemn Friedrich Whler, y fue la segunda sustancia orgnica obtenida artificialmente, luego del oxalato de amonio. Normalmente se determina su concentracin en una muestra de sangre. El objetivo de esta prueba diagnstica es determinar si los riones funcionan normalmente, si una enfermedad renal existente ha empeorado, para vigilar el tratamiento de una enfermedad renal o para determinar si una persona est deshidratada o no.
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VALORES DE REFERENCIA 17 49 mg/ dL
La creatinina es un compuesto orgnico generado a partir de la degradacin de la creatina (que es un nutriente til para los msculos). Es un producto de desecho del metabolismo normal de los msculos que usualmente es producida por el cuerpo en una tasa muy constante (dependiendo de la masa de los msculos), y normalmente filtrada por los riones y excretada en la orina. La medicin de la creatinina es la manera ms simple de monitorizar la correcta funcin de los riones. La creatinina es el resultado de la degradacin de la creatina, que es un componente de los msculos. La creatinina puede ser transformada en ATP que una fuente de alta energa para las clulas. La produccin de creatinina depende de la modificacin de la masa muscular, y ello vara poco y los niveles suelen ser muy estables. En el metabolismo muscular, la creatinina se sintetiza en forma endgena a partir de la creatina y el fosfato de creatina. La mayora de los mtodos para la realizacin o determinacin de creatinina en una muestra se basan en la reaccin de Jaffe descrita por Popper y colaboradores, y modificada por Bartlest. En un test cintico y colormetro, en el cual la creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato en solucin alcalina, formando un complejo amarillo naranja cuya intensidad de color depende de la concentracin de creatinina en la muestra la cual se puede medir mediante la fotometra.
Valores de referencia:
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MUJERES: O,5 A 0.90 mg/ dl
HOMBRES: 0,70 A 1,20 mg/ dl
El cido rico es un compuesto orgnico de carbono, nitrgeno, oxgeno e hidrgeno. Su frmula qumica es C5H4N4O3. Este es un producto de desecho del metabolismo de nitrgeno en el cuerpo humano, y se encuentra en la orina en pequeas cantidades. El aumento de los niveles de cido rico en la sangre no slo puede estar relacionado con la gota, sino que puede ser simplemente una hiperuricemia, que presenta algunos de los sntomas anteriores o puede ser asintomtica. Sin embargo cuanto mayor es el aumento de cido rico en sangre mayores son las posibilidades de padecer afecciones renales, artrticas, etc. El cido rico son sustancias que se forman principalmente en el hgado a partir de los ncleos celulares animales como la carne o el pescado, y que se eliminan a travs de la orina. Si su produccin es muy abundante, por ejemplo en un consumo excesivo de carne, entonces no se elimina completamente, acumulndose sobre todo en la inmediacin del cartlago, y por lo tanto produciendo enfermedades tan molestas y dolorosas como es la propia gota.
= DEGRADACION DE PURINAS =
Los cidos nucleicos ya existentes en el organismo son hidrolizados por endo y exonucleasas que dan mononucleotidos que a su vez son degradados a nuclesidos por la fosfomonoesterasa, esta enzima libera guanosina y adenosina. Estos 2 nuclesidos no pueden seguir exactamente la misma va. La adenosina debe ser desaminada por la adenosina desaminasa previamente para formar inosina. Sobre la inosina acta la *nuclesido fosforilasa que la despoja de su ribosa y da hipoxantina. Esta enzima acta directamente sobre la guanosina liberando guanina. Desde la hipoxantina y la guanina se forma un compuesto llamado xantina, que da origen al cido rico. Estos ltimos 2 pasos son catalizados por la xantina oxidasa. (esta contiene FAD, molibdeno y hierro no hemo) dando lugar al cido rico y luego al urato monosdico.
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VALORES DE REFERENCIA: HOMBRES: 3.4 7.0 mg/ dL MUJERES: 2.4 5.7 mg/dL ORINA: 0.5 1.0 g/ dia
El rin es un rgano fundamental en el mantenimiento del equilibrio del medio interno, al cual contribuye mediante un intenso proceso de filtracin del plasma a travs de los glomrulos y de una reabsorcin y secrecin selectiva de agua y sustancias a lo largo de las distintas porciones del tbulo. Las unidades funcionales del rin son las nefronas, unos sistemas compuestos por vasos sanguneos, capilares glomerulares y tbulos, donde se desarrollan tres procesos bsicos para la formacin de la orina: La filtracin de la sangre que llega a los capilares glomerulares. La reabsorcin tubular de sustancias que no deben ser eliminadas. La secrecin tubular de sustancias que pueden sufrir tambin los dos procesos. El rion esta encargado de la secrecin de las siguientes hormonas:

Secrecin de eritropoyetina, que regula la produccin de eritrocitos en la mdula sea. Secrecin de renina, que es una parte clave del sistema renina-angiotensina-aldosterona. Secrecin de las formas activas de la Vitamina D, calcitriol, y prostaglandinas. cido titulable: es un trmino que describe los cidos como el cido fosfrico o el cido sulfrico, los cuales estn involucrados en la fisiologa renal. Su uso excluye explcitamente al amonio (NH4+) como una fuente de cido, y es parte del clculo de la excrecin neta de cidos. El trmino proviene del uso del NaOH en la titulacin cido-base para estimar la cantidad de cido titulable.
= MECANISMOS DE LA FUNCION RENAL =

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La habilidad del rin para realizar muchas de sus funciones depende de tres funciones fundamentales de filtracin, reabsorcin, y secrecin.
FILTRACION:
La sangre es filtrada por las nefronas, las unidades funcionales del rin. Cada protena plasmtica insignificante para entrar al espacio de Bowman. La filtracin es conducida por las Fuerzas de Starling. El ultrafiltrado es pasado a travs, a su vez, por el tbulo proximal, el Asa de Henle, el tbulo contorneado distal , y una serie de ductos colectores para formar la orina.
REABSORCION: La reabsorcin tubular es el proceso por el cual los solutos y el agua son removidos desde el fluido tubular y transportados en la sangre. Es llamado reabsorcin (y NO absorcin) porque estas sustancias han sido absorbidas ya una vez(particularmente en los intestinos). La reabsorcin es un proceso de dos etapas que comienza con la extraccin activa o pasiva de sustancias desde el fluido tubular hacia el intersticio renal (el tejido conectivo que rodea las nefronas), y luego el transporte de estas sustancias desde el intersticio hacia el torrente sanguneo. Estos procesos de transporte son conducidos por las Fuerzas de Starling, por difusin, y por Transporte Activo. UMBRAL PLASMATICO RENAL: El umbral plasmtico renal es la mnima concentracin en el plasma sanguneo de una sustancia que resulta en la excrecin de dicha sustancia en orina. Por ejemplo, el umbral plasmtico renal para la glucosa es 200 a 305 mg por cada 130 mL. La Glucosuria (azcar en orina) resulta cuando la concentracin plasmtica alcanza y excede el umbral plasmtico renal de la glucosa. Cuando la concentracin plasmtica de glucosa es muy alta, la glucosa filtrada puede saturar sus portadores y alcanzar el transporte mximo de esa molcula. Cualquier cantidad que pase el transporte mximo continuar a travs de los tbulos renales y ser excretado en orina. Cabe destacar la diferencia entre umbral plasmtico renal y transporte mximo, en el caso de la glucosa, este ltimo es de 370mg, en donde si la concentracin es superior se comienza a eliminar la glucosa de manera proporcionalmente directa a su concentracin en el plasma (situacin en que todos los transportadores estn saturados). Esto difiere del comportamiento del umbral renal, en el que pasado los 180mg, comienza una curva de excrecin no lineal.
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Reabsorcin indirecta
En algunos casos, la reabsorcin es indirecta. Por ejemplo, el bicarbonato (HCO3-) no tiene un transportador, por tanto su reabsorcin involucra una serie de reacciones en el lmen del tbulo y el epitelio tubular. Comienza con la secrecin activa de hidrogenin (H+) dentro del fluido tubular mediante un intercambiador Na/H:
En el lmen + o El H se combina con HCO3 para formar cido carbnico (H2CO3) o La anhidrasa carbnica luminal convierte enzimticamente H2O y CO2 en H2CO3 o CO2 difunde libremente hacia la clula. En la clula epitelial o La AC citoplasmtica convierte el CO2 y H2O (que es abundante en la clula) en H2CO3 + o H2CO3 se disoccia fcilmente a H y HCO3 o HCO3 es facilitado fuera de las membranas basolaterales de las clulas.
El perfil de lpidos consiste en la determinacin y cuantificacin de los diferentes componentes grasos que existen en la sangre. Las pruebas son capaces de determinar la cantidad de grasas totales, asi coo la cantidad de colesterol y triglicridos adems, se reporta la cantidad de colesterol de baja densidad (LDL) y el colesterol de alta densidad (LDH). LOS LIPIDOS SON: Biomolculas orgnicas formadas bsicamente por carbono e hidrgeno y generalmente tambin oxgeno; pero en porcentajes mucho ms bajos. Adems pueden contener tambin fsforo, nitrgeno y azufre . Los lpidos se clasifican en dos grupos, atendiendo a que posean en su composicin cidos grasos (Lpidos saponificables) o no lo posean (Lpidos insaponificables).
= FUNCIONES DE LOS LIPIDOS =

Los lpidos desempean importantes funciones en los seres vivos, siendo estas las siguientes: a) ESTRUCTURAL: Son componentes estructurales fundamentales de los membranas celulares.
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b) ENERGETICA: Al ser molculas poco oxidadas sirven de reserva energtica ya que proporcionan una gran cantidad de energa, el doble de lo que proporcionan los carbohidratos. c) PROTECTORA: Ejemplo, las ceras impermeabilizan las paredes celulares de los vegetales y de las bacterias y tienen tambin funciones protectoras en los insectos y vertebrados. d) TRANSPORTADORAS: Sirven de transporte de algunas sustancias en los medios orgnicos. e) REGULADORA DEL METABOLISMO: Contribuyen al normal funcionamiento del organismo, desempean esta funcin con las vitaminas liposolubles. En las hormonas sexuales y las de la corteza suprarrenal tambin son lpidos. f) REGULADORA DE LA TEMPERATURA: Tambin sirven para regular la temperatura. Ejemplo: las capas de grasa de los mamferos acuaticos de los mares de agua fra.
SAPONIFICACION: Reaccion que se lleva a cabo con los acidos grasos o los lpidos que contegan acidos grasos en su molcula, reaccionando con bases fuertes como el hidrxido de sodio y el hidrxido de potasio obtenindose sales sdicas o potsicas que se encuentran en los jabones.
= PRINCIPALES TIPOS DE LIPIDOS =
COLESTEROL: Es un alcohol esteroideo insaturado. Constituye un componente estructural importante de las membranas de las clulas y un precursor de la biosntesis de los acidos biliares y las hormonas esteroideas. Dos tercios del colesterol plasmtico estn esterificados, en tanto el tercio restante esta libre. VALORES DE REFERENCIA: < 200 240 mg/Dl
TRIGLICERIDOS: son esteres de glicerol y, generalmente de tres cidos grasos distintos. Constituyen alrededor del 95% del tejido adiposo y representan la principal forma de almacenamiento en el humano. Los triglicridos son transportados en el plasma fundamentalmente en forma de quilomicrones y VLDL. Los triglicridos tambin provienen del alimento que se consume; el cuerpo usa las caloras de los carbohidratos para obtener energa inmediata, las caloras sobrantes se convierten en triglicridos y son almacenados en los adipocitos para su uso posterior. VALORES DE REFERENCIA: < 150 mg/dl 500 mg/dL
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FOSFOLIPIDOS: Son esteres del glicerol mas dos grupos acil y acido fosfatidico. Los principales fosfolipidos plasmticos son la esfingomielina, lecitina y cefalinas. Los fosfolipidos constituyen alrededor del 25% del total de LDL y aproximadamente el 30% del total de LDH. VALORES DE REFERENCIA: 150 250 mg/ dL
ACIDOS GRASOS NO ESTERIFICADOS (AGNE): Los AGNE son muy importantes como fuente de energa. Cuantitativamente representan una fraccin muy pequea del total de los lpidos plasmticos. Sin embargo, varios gramos de los AGNE rpidamente consumidos son tranportados a diario por el plasma, formando complejo con la albumina. VALORES DE REFERENCIA: O.12 0.24 g/l
= CLASIFICACION DE LOS LIPIDOS =

Los lpidos se clasifican en dos grupos, atendiendo a que posean en su composicin acidos grasos (lpidos saponificables) o no lo posean (lpidos insaponificables).
LIPIDOS SAPONIFICABLES: Saturados

ACIDOS GRASOS
Insaturados
ACILGLICERIDOS SIMPLES CERAS
LIPIDOS CON ACIDOS GRASOS COMPLEJOS
FOSFOLIPIDOS ESFINGOLIPIDOS GLUCOLIPIDOS

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LIPIDOS INSAPONIFICABLES
TERPENDOS: Son molculas lineales o cclicas que cumplen funciones muy variadas, entre los que se pueden citar:
Esencias vegetales como el mentol, el geranio, limoneno, alcanfor, eucalipto, vainillina. Vitaminas, como la vitamina A, E, K. Pigmentos vegetales, como la carotina y la xantofila.
ESTEROIDES: Esteroides. Son lpidos que derivan del esterano. Comprenden dos grandes grupos de sustancias: Esteroles: Como el colesterol y las vitaminas D. Hormonas esteroideas: Como las hormonas suprarrenales y las hormonas sexuales. PROSTAGLANDINAS: Son lpidos cuya molcula bsica est constituda por 20 tomos de carbono que forman un anillo ciclo pentano y dos cadenas alifticas. Las funciones son diversas. Entre ellas destaca la produccin de sustancias que regulan la coagulacin de la sangre y cierre de las heridas; la aparicin de la fiebre como defensa de las infecciones; la reduccin de la secrecin de jugos gstricos. Funcionan como hormonas locales.
En la practica diaria el perfil cardiaco es el que evidencia daos cardiacos. Estre ellos se reconocen los marcadores clsicamente utilizados y ampliamente conocidos como la (CPK), (LDH) y (GOT); y los indicadores mas especficos de lesin cardiaca miocitica, como la fracion MB de (CK-MB), mioglobina y troponinas.
= MARCADORES CLASICOS =
A. CPK (creatinfosfoquinasa): La creatina-quinasa cataliza la fosforilacin reversible de la
creatina por el adenosin- trifosfato (ATP). El papel fisiolgico de la creatin quinasa es: el principal componente fosforilado del musculo es la fosfocreatina, que esta, unas 8 veces mas excenso sobre el ATP. Cuando el musculo se contrae, el ATP se consume y la CREATIN QUINASA cataliza la fosforilacin del ADP para formar ATP, usando fosfocreatina coom reservorio de la fosforilacin.
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Los valores normales son, de hasta 190 U/L en hombres y hasta 166 U/L en mujeres..
B. LDH (lactato deshidrogenasa): La LD, LDH, L Lactato. Es una enzima localizada

exclusivamente en el citoplasma de la clula que transfiere H+ (deshidrogenasa) y cataliza la oxidacin reversible de L LACTATO a piruvato. Sus isoenzimas conocidas son LD1, LD2, LD3, LD4. LD5. La LDH esta presente en casi todas las cellas del organismo humano, principalmente en: hgado, miocardio, musculo esqueltico y hemates. Estos tejidos muestran diferentes composiciones isoenzimaticas. Sus subunidades son M y H, diferenciadas por el contenido y secuencia de aminocidos. Valores normales en adultos a 37 C: De 230 a 460 U/L.
C. AST o GOT (transaminasa glutmico - oxalacetico): La Aspartato Amino

Transferasa (AST). Es una enzima de localizacin mitocondrial y citoplasmtica que catalizala transferencia reversible del grupo amino desde el aspartato al cetoglutarato. Se encuentra elevada en suero, enfermedades hepticas, necrosis mioardica, pancreatitis aguda, etc. La velocidad de disminucin del NADH (substrato) se mide fotomtricamente (a 340 380 nm) y es directamente proporcional a la actividad de AST en la muestra problema o control.
= CK - MB Y SUBFORMAS =
La molcula de CK es un dimero compuesto por dos subunidades M y B. Estas subunidades son el producto de dos genes estructurales distintos, y puesto que la forma activa de la enzima es un dimero, solamente pueden existir tres pares distintos de subunidades.
CK BB : predomina en el cerebro, prstata, estomago e intestino, hgado, vejiga, tero,

placenta y tiroides.
CK MM : predomina en el musculo esqueltico y cardiaco CK MB : Esta presente en el musculo cardiaco y tambin en menor grado, en el musculo
esqueltico.
D. TROPONINAS: Son biomarcadores miocrdicos, comprenden un grupo de tres protenas

(C, I y T) que interaccionan con la tropomiosina para formar el complejo troponinatropomiosina. Este complejo es parte del componente estructural del aparato contrctil del msculo estriado
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= NUEVOS MARCADORES CARDIACOS =

INFLAMATORIOS: Los marcadores inflamatorios estudiados en pacientes con dolor precordial son
las citoquinas, la mieloperoxidasa, la protena C reactiva y la P-selectina. La mieloperoxidasa ha sido ligada con todas las etapas del desarrollo de placas vulnerables, desde los estadios iniciales con el depsito de lpidos hasta la ruptura de placas y el desarrollo de complicaciones trombticas. La mieloperoxidasa es liberada por leucocitos activados, se eleva y activa de manera cataltica en placas vulnerables.
PROTEINA C REACTIVA: Esta protena reacciona con el polisacrido somtico C de Streptococcus

pneumoniae. Tiene un papel importante en la inflamacin ya que reacciona con receptores de la superficie celular, facilita la opsonisacin y la fagocitosis. Es producida primariamente por el hgado, en respuesta a las citoquinas inflamatorias, como la interleukina-6.
LAS CITOQUINAS:
Son mediadores directos que se incrementan en numerosas enfermedades
inflamatorias y en los sndromes coronarios agudos. La interleukina 6 es un regulador importante de estos procesos inflamatorios y trombticos, incluyendo la produccin de fibringenos y otros reactantes de fase aguda.
LAS INTERLEUKINAS:
Las interleukinas se encuentran en placas aterosclerticas, incluyendo
aquellas con gran infiltrado de macrfagos; tambin se observaron valores elevados en pacientes con angina inestable, con implicancia pronostica. La interleukina 8 posee actividad procoagulante y antiinflamatoria.
PEPTIDOS NATRIURETICOS:
El pptido natriurtico tipo B (BNP) es un pptido de 32
aminocidos liberado en respuesta al incremento del estrs parietal. El BNP es producido como prehormona y procesado a prohormona, la cual es clivada en BNP (N-terminal BNP = NT-BNP) y BNP (Cterminal BNP = C-BNP) [79-81].
El hgado es el rgano ms voluminoso de la anatoma y uno de los ms importantes por su actividad metablica. Desempea funciones muy importantes, como la sntesis de protenas plasmticas, funcin desintoxicante, almacena vitaminas, glucgeno, entre otros para el buen funcionamiento del sistema inmunolgico, etctera.
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Adems, es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias que pueden resultar nocivas para el organismo, transformndolas en otras inocuas. Este se localiza en la regin del hipocondrio derecho del abdomen, en el epigastrio y una porcin en el hipocondrio izquierdo, llenando el espacio de la cpula diafragmtica, donde puede alcanzar asta la quinta costilla y se relaciona con el corazn a travs del centro frenetico, a la izquierda de la cava inferior. Su consistencia es blanda y depresible, esta cubierta por una capsula fibrosa, sobre la cual se aplica el peritoneo, parte de las sperficie del hgado.
= ASPECTOS GENERALES =
FORMA: Se compara con la mitad superior del ovoide horizontal, de gran extremo derecho, alargado transversalmente. COLORACION: Rojo pardo CONSISTENCIA: Frgil. Est constituido por un parnquima, rodeado por una fina cpsula fibrosa, llamada cpsula de Glisson. LONGITUD: 26 X 15 cm (anteroposterior) y 8 cm de espesor a nivel del lbulo derecho. PESO: 2 kg. Aproximadamente.
ESTA DIVIDIDO EN CUATRO LOBULOS:
LOBULO DERECHO: Situado a la derecha del ligamento falciforme. LODULO IZQUIERDO: Extendido sobre el estomago y situado a la izquierda del ligamento falciforme. LOBULO CUADRADO: Visible solamente en la cara inferior del hgado, no se encuentra limitado por el surco umbilical, lecho vesicular izquierda y el hilio por detrs.
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LOBULO DE SPIEGEL: Situado entre el borde posterior del hilio hapatico por delante, la vena cava por detrs.
Cara superior del hgado
Cara inferior del hgado
La base del hgado da entrada al hilio heptico, que no es sino la zona de entrada de la vena porta, la arteria heptica y la salida del conducto heptico. El omento (epipln) menor (fijado en una prominencia de la cara inferior denominada tubrculo omental) reviste el fondo de los surcos de la base del hgado (surco del ligamento venoso, surco del ligamento redondo) y alcanza el borde posterior de la cara inferior, donde el peritoneo que lo recubre pasa a revestir el diafragma y la pared posterior, formando el ligamento hepatorrenal. Por delante, el peritoneo reviste la cara diafragmtica hasta su lmite superior, donde salta a revestir la cara abdominal del diafragma. Entre los dos repliegues de peritoneo que saltan de la superficie del hgado al diafragma, queda comprendida la cara desnuda del hgado, zona en la que el peritoneo no recubre la cpsula heptica. Por esta zona la cava inferior se relaciona con el hgado y recibe las venas hepticas.
= FUNCIONES METABOLICAS DEL HIGADO =

METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS:
Homeostasis de la glucosa serica. Sntesis, almacenamiento y movilizacin de glucgeno. Gluconeogenesis a partir de lactato, glicerol y aminocidos, Catabolismo de hexosas, Glucolisis como va precursora de la sntesis de acidos grasos
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METABOLISMO DE LIPIDOS:
Sntesis de novo de acidos grasos y triglicridos. Sntesis / catabolismo colesterol (acidoss biliares). Sntesis / metabolismo de lipoprotenas plasmticas. Oxidacin de acidos grasos ( oxidacin). Produccin de cuerpos cetonicos en ayuno.
METABOLISMO NITROGENADO:
Sntesis de protenas plasmticas. Interconversion de aminocidos no escenciales. Gluconeogenesis / cetogenesis del esqueleto carbonado durante el ayuno. Produccin de urea a partir del N de los aminocidos. Catabolismo de bases puricas.
OTRAS FUNCIONES METABOLICAS:

Secrecin biliar Metabolismo de la bilirrubina Metabolismo de xenobioticos (detoxificacion) Catabolismo de hormonas Biosntesis del grupo hemo
El hgado es el rgano gluconeogenico por excelencia. Sus principales substratos son:
LACTATO ALANINA
GLICEROL AMINOACIDOS GLUCONEOGENICOS
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La bilirrubina es un pigmento biliar de color amarillo anaranjado que resulta de la degradacin de la hemoglobina. Esta biomolecula se forma cuando el eritrocito desaparece del aparato circulatorio. Su membrana celular se rompe y la hemoglobina liberada es fagocitada por los macrfagos tisulares del organismo, sobre todo los macrfagos del bazo, hgado y medula sea. En esta degradacin de la hemoglobina, se separan, por un lado, la molcula de globina y, por otro lado, el grupo hemo. La bilirrubina es poco soluble en agua, por lo que circula unida a albmina en el plasma. La bilirrubina es un compuesto potencialmente txico. En el hgado la bilirrubina es conjugada con cido glucurnico. Este paso origina la llamada bilirrubina conjugada (tambin llamada "directa"), que es soluble, no txica y que se excreta fcilmente a travs de la bilis.
La hemo oxigenasa degrada el grupo hemo en los macrfagos, abriendo el anillo tetrapirrolico Para dar origen a una molcula lineal de 4 anillos pirrolicos llamada biliverdina, esta es luego reducida por la enzima biliverdin reductasa para dar bilirrubina. Los macrfagos liberan el hierro de la hemoglobina que ser transportado por la transferrina hasta la medula sea, o almacenado en el hgado en forma de ferritina. Los macrfagos de los tejidos transforman la porfirina de la hemoglobina en bilirrubina que viaja unida a la albumina srica por el torrente sanguneo al hgado, donde se separan, y la bilirrubina se secreta por la bilis y se degrada. Cuando el nivel de bilirrubina en la sangre aumenta, se acumula en los tejidos, sobre todo en aquellos con mayor numero de fibras elsticas. Si es mayor de 2 a 2.5 mg/dL. Se observa una coloracin amarillenta en la piel y mucosa, este fenmeno es conocido como ictericia. La estructura qumica de la bilirrubina contiene subgrupos polares (con hidrgeno), que se encuentran ms hacia el interior de la molcula. Por esto la molcula de la bilirrubina inicial es extremadamente poco hidrosoluble. Para poder circular en el plasma, debe ir unida a albmina (protena). Para poder ser eliminada, debe ser solubilizada. VALORES DE REFERENCIA:
BILIRRUBINA TOTAL: 1.2 mg/ dL
BILIRRUBINA DIRECTA:
0.5 mg/ dL
= TIPOS DE BILIRRUBINA =
La mayor parte de la bilirrubina proviene de la ruptura del grupo hemo de los glbulos rojos degradados como se ha indicado. Existen dos tipos de bilirrubina:
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BILIRRUBINA CONJUGADA O DIRECTA: Dado que la bilirrubina libre es muy insoluble en agua, requiere ser modificada con el fin de facilitar su eliminacin del organismo La birrulbina directa es conjugada por los hepatocitos, es decir, aquella que, despus de separarse de la albumina, penetra en la clula heptica donde se conjuga con el cido glucurnico por accin de la enzima UDP glucuronil transferasa (UGT 1A1) que utiliza como donador UPP - glucoronato. Este se origina por oxidacin de la ADP G. Esta se elimina y pasa al intestino donde es degradada por las bacterias intestinales a urobilinogeno, que en parte se oxida a urobilina.
BILIRRUBINA NO CONJUGADA O INDIRECTA: La bilirrubina en su forma simple (no conjigada) no es soluble, por lo que en la sangre se asocia a una protena plasmtica, la albumina srica para permitir su transporte al hgado. Una vez all la bilirrubina se conjuga con el acido glucoronico, formando diglucoronido de bilirrubina, o simplemente bilirrubina conjugada, para hacerlo soluble en agua. Esta se excreta del hgado a travs de los conductos biliares y csticos como parte de la bilis.
En el colon, las bacterias intestinales desconjugan y reducen la bilirrubina y la convierten en:
UROBILINOGENO: Esta parcialmente se absorbe, pasa a la circulacin general, y se elimina

por va renal. En el adulto sano la eliminacin diaria de urobilingeno por orina es <5mg/da. Se incrementa en enfermedades con un catabolismo alto de la hemoglobina (anemia falciforme, talasemias, anemia hemoltica).
ESTERCOBILINAS: El urobilingeno y urobilina no absorbidos se convierten en

estercobilina, pigmento que confiere a las heces su color caracterstico.
= METABOLISMO DE LAS BILIRRUBINAS =
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La bilirrubina es un compuesto potencialmente txico especialmente en recin nacidos. A partir del grupo HEM, que est en un 80% en los eritrocitos senescentes y en un 20% en citocromo P450, mioglobina y otros; se genera la mayor parte de la bilirrubina (pigmento). Un glbulo rojo tiene una vida del orden de 120 das. En los recin nacidos, la bilirrubina es un compuesto txico, que puede impregnar y daar ciertas estructuras del SNC. La bilirrubina ataca ciertas estructuras del cerebro, pero no la corteza (provoca movimientos descoordinados, pero inteligencia normal). El organismo tiende a deshacerse de este pigmento, por su potencial dao. La bilirrubina se utiliza en el diagnstico de muchas enfermedades. La bilirrubina se forma en macrfagos (por facocitosis de glbulos rojos) de bazo, mdula sea e hgado (clulas de Kupffer). Los eritrocitos se transforman en biliverdina, de corta existencia, y otra enzima la transforma en bilirrubina indirecta. La produccin diaria de bilirrubina es de 250 300 mg. al da en adultos. La bilirrubina no conjugada (indirecta) es extremadamente poco soluble en agua. En el plasma va ligada a albmina. El hepatocito solubiliza a la bilirrubina insoluble (mediante la enzima hemooxigenasa _ transforma el grupo HEM de otras protenas [no hemoglobina] en bilirrubina), transformndola en bilirrubina directa que pasa a la bilis. El grupo HEM de la hemoglobina es un anillo que tiene fierro en su interior. La hemooxigenasa rompe el anillo, apareciendo biliverdina. Esta tiene aparicin bastante fugaz, ya que la enzima biliverdin-reductasa transforma a la biliverdina en bilirrubina. sta enzima tiene mltiples otras acciones: metabolismo de la glucosa, estrs oxidativo, crecimiento celular, apoptosis y regulacin de algunos genes. La estructura qumica de la bilirrubina contiene subgrupos polares (con hidrgeno), que se encuentran ms hacia el interior de la molcula. Por esto la molcula de la bilirrubina inicial es extremadamente poco hidrosoluble. Para poder circular en el plasma, debe ir unida a albmina (protena). Para poder ser eliminada, debe ser solubilizada. Una parte muy pequea de bilirrubina no hidrosoluble entra a la clula heptica por difusin pasiva. La mayor parte se separa de la albmina, e ingresa a la clula por el transportador OATP (organic anion transporter protein). Dentro del hepatocito existe una sustancia (ligandina A _ glutation-s-transferasa), a la cual la bilirrubina se une. As impide que la bilirrubina vuelva al plasma. La bilirrubina es solubilizada por unin a un cido glucurnico (por glucuronil transferasa). As, la bilirrubina mono o diglucuronido es soluble. Es capaz de salir al plasma, como bilirrubina conjugada. La mayor parte de la bilirrubina es transportada hacia el canalculo biliar, a travs del transportador MRP2 (miltidrug resistance-related protein).
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La ictericia es la coloracin amarillenta de la piel y mucosas debida a un aumento de la bilirrubina que se acumula en los tejidos, sobre todo aquellos con mayor nmero de fibras elsticas (paladar, conjuntiva). Se hace clnicamente evidente cuando la bilirrubina es mayor de 2 a 2,5 mg/dl. Este aumento puede ser a expensas de la fraccin no conjugada o "indirecta" de la bilirrubina (BI); sta es liposoluble y no se filtra por el rin, por lo que no aparece coluria. Cuando el aumento es a expensas de la bilirrubina conjugada o "directa" (BD), al ser sta hidrosoluble, se filtra por el rin, apareciendo coluria. Puede haber aumentos de ambas fracciones y se habla entonces de hiperbilirrubinemia mixta. La bilirrubina no conjugada es la relacionada a ictericia preheptica y no hay coluria ni acolia, mientras que la bilirrubina conjugada est relacionada a la ictericia heptica y post heptica. La ictericia en s misma no es una patologa, sino un signo externo de un proceso patolgico subyacente que ocurre en algn punto de la va fisiolgica normal del metabolismo de la bilirrubina, por lo que para comprender cmo se genera la ictericia es importante conocer el metabolismo de esta sustancia en el organismo. Cuando los glbulos rojos han completado su ciclo vital normal (unos 120 das), o cuando estn daados, sus membranas se vuelven frgiles y se rompen con facilidad. A medida que atraviesan los rganos del sistema reticuloendotelial (los ganglios linfticos y el bazo), los glbulos rojos frgiles se rompen, y su contenido celular, incluyendo la hemoglobina (la molcula que transporta el oxgeno), se libera en la sangre. Los macrfagos fagocitan la hemoglobina, degradndola en sus componentes: la globina y el grupo hemo. La globina es un fragmento proteico que se degrada en aminocidos y no tiene ningn efecto en el desarrollo de la ictericia. El grupo hemo sufre dos reacciones:
Primero una oxidacin catalizada por la enzima microsomal hemo-oxigenasa. producindose biliverdina (un pigmento de color verde), hierro y monxido de carbono.
El siguiente paso es la reduccin de la biliverdina por la enzima citoslica biliverdina reductasa en un pigmento tetrapirrlico de color amarillo, la bilirrubina. Cada da se generan aproximadamente 4 mg por kg de bilirrubina.
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= TIPOS DE ICTERICIA =
Existen tres tipos de ictericia:
A. ICTERICIA PRE HEPATICA: Se debe a la liberacin de bilirrubina no conjugada por

destruccin de eritrocitos (anemia hemoltica) o por el aumento de bilirrubina libre a causa de bajos niveles de albmina, su principal transportador (hipoalbuminemia). Algunos ejemplos son la enfermedad de Gilbert, la hemlisis debido a esplenomegalia y la eritropoyesis inefectiva. Si se realiza un perfil heptico, no se ven alteradas las enzimas indicadoras de dao heptico. Por lo tanto los niveles de transaminasas (ALT(citoplasmtico) y AST(mitocondrial)) estarn normales al igual que los niveles de Fosfatasa Alcalina. En pacientes que cursan con ictericia pre - heptica, su orina es de un color rojizo producto de la hemoglobina presente. El rin estar en riesgo ya que la hemoglobina a nivel renal es txica.
B. ICTERICIA HEPATICA: Se debe a problemas con el rbol biliar dentro del hgado que
puede ser por destruccin de los hepatocitos, as como alteraciones del flujo por estos conductos. Algunos ejemplos son la cirrosis heptica, la hepatitis viral aguda y la hepatitis crnica. En este tipo de ictericia los niveles de ALAT y ASAT estarn elevados pero no as la fosfatasa alcalina, esta ltima solo podra verse elevada si producto de una inflamacin de hepatocitos ocurre una obstruccin del canalculo biliar, provocando una colestasis (la fosfatasa alcalina no es exclusiva para indicar que hay colestasis, tambin se ve alterada en otros procesos patolgicos no relacionados a la ictericia.) La orina en estos pacientes se torna de un color oscuro similar al del caf y en estos casos al igual que en la orina roja producto de la hemoglobina, el rin tambin estar en riesgo de fallar.
C. ICTERICIA POST HEPATICA: Se debe a la obstruccin del coldoco (Colestasis),

ya sea por un clculo a nivel de la vescula biliar o incluso por la compresin originada por un cncer de cabeza de pncreas. Algunos ejemplos son la coledocolitiasis y el cncer de cabeza de pncreas.
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Las protenas son un constituyente muy importante de las clulas y los tejidos del cuerpo humano. Se componen de aminocidos. Hay diferentes tipos de protenas con diferentes funciones, son asi protenas algunas enzimas, algunas hormonas, la hemoglobina, el LDL, el fibringeno, el colgeno e inmunoglobulinas. Son biomolculas formadas bsicamente por carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno. Pueden adems contener azufre y en algunos tipos de protenas, fsforo, hierro, magnesio y cobre entre otros elementos. Pueden considerarse polmeros de unas pequeas molculas que reciben el nombre de aminocidos y seran por tanto los monmeros unidad. Los aminocidos estn unidos mediante enlaces peptdicos. La unin de un bajo nmero de aminocidos da lugar a un pptido; si el n: de aa. Que forma la molcula no es mayor de 10, se denomina oligopptido, si es superior a 10 se llama polipptido y si el n: es superior a 50 aa. Se habla ya de protena. Aminocidos. Se caracterizan por poseer un grupo carboxilo (COOH) y un grupo amino (NH2). Enlace peptdico. Los pptidos estn formados por la unin de aminocidos mediante un enlace peptdico. Es un enlace covalente que se establece entre el grupo carboxilo de un aa. Y el grupo amino del siguiente, dando lugar al desprendimiento de una molcula de agua. El enlace peptdico tiene un comportamiento similar al de un enlace doble, es decir, presenta una cierta rigidez que inmoviliza en un plano los tomos que lo forman.
= ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS =

La organizacin de una protena viene definida por cuatro niveles estructurales denominados:
Estructura primaria Estructura secundaria Estructura terciaria

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Estructura cuaternaria.
Cada una de estas estructuras informa de la disposicin de la anterior en el espacio.
ESTRUCTURA PRIMARIA: Es la secuencia de aa. De la protena. Nos indica qu aas.

Componen la cadena polipeptdica y el orden en que dichos aas. Se encuentran. La funcin de una protena depende de su secuencia y de la forma que sta adopte.
ESTRUCTURA SECUNDARIA: Es la disposicin de la secuencia de aminocidos en el

espacio. Los aas., a medida que van siendo enlazados durante la sntesis de protenas y gracias a la capacidad de giro de sus enlaces, adquieren una disposicin espacial estable, la estructura secundaria.
ESTRUCTURA TERCIARIA: Informa sobre la disposicin de la estructura secundaria

de un polipptido al plegarse sobre s misma originando una conformacin globular.
ESTRUCTURA CUATERNARIA: Esta estructura informa de la unin , mediante

enlaces dbiles ( no covalentes) de varias cadenas polipeptdicas con estructura terciaria, para formar un complejo proteico. Cada una de estas cadenas polipeptdicas recibe el nombre de protmero.
= CLASIFICACION DE LAS PROTEINAS =

Las protenas totales se separan en dos grandes grupos:
LA ALBUMINA: Es la protena de mas concentracin en la sangre, transporta muchas

molculas pequeas (bilirrubina, progesterona) y tiene la funcin de mantener la presin sangunea ya que favorece la presin osmtica coloidal para mantener liquidos en el torrente sanguneo y que no pasen a los tejidos, manteniendo un equilibrio.
LAS GLOBULINAS: Se pueden dividir en alfa 1, alfa 2, beta y gamma globulinas. La

albumina representa el 60% de las protenas que contiene el suero, el resto son las globulinas.
TAMBIN SE PUEDEN CLASIFICAR EN: Haloprotenas: Globulares, fibrosas Heteroprotenas: Glucoproteinas, lipoprotenas, nucleoprotenas, cromoprotenas
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VALORES DE REFERENCIA: PROTEINAS TOTALES: ALBUMINA: 6 8 g/ dL 3.8 5. 1 g/ dL
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44
PRACTICA DE LABORATORIO 1
(GLUCOSA)
FUNDAMENTO
La determinacin de los niveles de glcosa fue el primer procedimiento empleado en el laboratorio clnico medico. La metodologa de glucosa oxidasa fue introducida por Keilin y Hartree en 1948 mas tarde keston reporto el uso de un reactivo combinado glucosaoxidasa peroxidasa, seguido por el de Teller adicionando un reactivo cromogemico al procedimiento de kreston. En particular, el mtodo del reactivo de glucosa stanbio esta basado en la tcnica descrita por Trinder et al. La glucosa es oxidasa en presencia de glucosa oxidasa (GOD). El perxido de hidrogeno formado, reacciona bajo la influencia de peroxidasa (POD) con fenol y 4 aminoantipirina para formar un complejo rojo violeta de quinona. La intensidad del color es proporcional a la concentracin de glucosa.
REACTIVOS
Glucosa L iquicolor 4 aminoantipirina Glucosa oxidasa Peroxidasa Fenol 0.2 mmol/L 15.0 mmol/L 1.2 U/L 4.0 mmol/L
Estndar de glucosa (100 mg/dL) 100 mg/ Dl (5.56 mmol/L) de glucosa en solucin acuosa de acido benzoico.
PROCEDIMIENTO MANUAL
1. Coloque en cubetas los siguientes volmenes (mL) y mezcle bien.
REACTIVO BLANCO (RB)
ESTANDAR (E) 1.0 0.01 ---
MUESTRA (M) 1.0 --0.01
REACTIVO ESTANDAR MUESTRA
1.0 -----
2. Incube las cubetas a 310 K (37C) por 5 minutos o a temperatura ambiente 288 303 k (15 30 C) por 10 minutos.
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3. Lea E y M contra RB a 500 nm antes de 60 minutos.
(TRIGLICERIDOS)
FUNDAMENTO
La determinacin de los niveles de triglicridos, cuando se lleva a cabo en conjunto con otros ensayos de lpidos, proporciona una ayuda en el diagnostico de hiperlipoproteinemia primaria y secundaria. Tambin es til para dar seguimiento a la diabetes mellitus, nefrosis, obstruccion biliar y varias anormalidades metabolicas que resultan de disturbios endocrinos. 1. El glicerol y los acidos grasos se forman en una primera etapa por la accin de la lipasa sobre los triglicridos. 2. El glicerol se fosforila por el adenosin 5 trifosfato (ATP) para producir glicerol 3 fosfato (G-3-P) y adenosin 5 difosfato (ADP)en una reaccin catalizada por la glicerol quinasa (GK).
REACTIVOS
Reactivo de triglicridos Estndar de triglicridos
1. Coloque en las cubetas los siguientes volmenes (mL) y mezcle bien. REACTIVO BLANCO (RB) 2.0 ----ESTANDAR (E) 2.0 0.O1 --MUESTRA (M) 2.0 --0.01
2. Incube todas las cubetas por 5 minutos a 37 C o incube a temperatura ambiente por 10 minutos. 3. Lea E y M contra RB a 500 nm antes de 60 minutos.
VALORES DE RERFERENCIA
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30 150 mg/dL
(COLESTEROL)
FUNDAMENTO
El objetivo de este estudio es la de realizar una prueba que permita identificar y valorar los niveles de colesterol tanto bueno como malo (LDH y LDL) que estn presente en la sangre y los cuales adquirimos y consumismos en los alimentos diarios de nuestra dieta.
MATERIAL Y EQUIPO
o o o
Tubos de ensaye Centrifuga Pipetas serolgicas
o o o
Pipeta semiautomtica Bao mara Espectrofotmetro
PROCEDIMIENTO
1. Marcar 2 tubos de ensaye como M y St, que corresponden a los tubos de muestra y estndar respectivamente. 2. Obtener 3 ml de sangre venosa del paciente y depositar la sangre en un tubo de ensaye. 3. Esperar a que la sangre se coagule completamente. 4. Remover el coagulo de las paredes del tubo y llevar a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos. 5. Extraer el suero obtenido de la muestra y depositarlo en un tubo de ensaye limpio con la ayuda de una pipeta serolgica. 6. Con una pipeta semiautomtica extraer 1 ml del suero muestra y colocarla en el tubo de ensaye limpio marcado como tubo (M) muestra.
7. Aadir al tubo M 20 ml del reactivo de muestra e incubar a 37 C en el bao maria durante 10 minutos.
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8. Transcurridos los 10 minutos se lee la muestra en el espectrofotmetro contra el tubo de l BR (blanco de reactivo). a una longitud de onda de 500 nm. 9. Anotar los resultados y hacer los clculos correspondientes.
(CREATININA DIRECTA)
FUNDAMENTO
En 1886 Jaffe describe un mtodo para la determinacin de creatinina haciendo reaccionar un filtrado libre de protenas con acido pcrico en una solucin alcalina. Aunque desde entonces se han descrito muchos mtodos, la reaccin clsica de Jaffe es la mas utilizada. Esta reaccin esta sujeta a interferencias a causa de varias sustancias, como protenas y glucosa. Para combatir esta desventaja, se han desarrollado algunas modificaciones. Los mtodos cinticos son los mas utilizados por ser mas rpidos, simples y sin interferencias. La creatina reacciona con el acido pcrico en un medio alcalino para formar un complejo de color sobre el cual absorbe a 510 nm. La velocidad de formacin del color es proporcional a la concentracin de creatinina en la muestra.
REACTIVOS Y MATERIAL BIOLOGICO

Creatinina Acida Creatinina Base Estndar de Creatinina 5 mg/ dL 3 mL de sangre sin EDTA
MATERIAL REQUERIDO
A. Espectrofotmetro B. Cronometro C. Tubos de ensaye D. Pipetas serolgicas E. Agitador
1. Coloque las celdillas del espectrofotmetro a 310 k (37C).
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2. Lleve a 0 el espectrofotmetro con un blanco de agua a 510 nm. 3. Pipetee 1 mL del reactivo en cada tubo de ensaye y preincube por 3 minutos a 37 C. 4. Transfiera 50 L del estndar en el tubo de ensaye, mezcle inmediatamente y pase a una celdilla de lectura. 5. Transcurridos exactamente 20 segundos, lea y registre la absorbancia (A1). 6. Exactamente 60 seg. despus de la lectura inicial lea y registre la absorbancia final (A2). 7. Calcule el cambio de absorbancias A restando (A2 A1). 8. Corra los controles y las muestras de los pacientes como se indica en los pasos 1 7.
(ACIDO URICO)
FUNDAMENTO
La uricasa actua sobre el acido urico para formar perxido de hidrogeno y alantoina. El H 2O2 es ledo cuantitativamente por su reaccin con el acido 3,5 dicloro 2 hidroxibenzosulfonico (DCHB) en presencia de peroxidasa y 4 aminofenazona, para formar un complejo quinoneimina de color rojo violeta.

Acido Urico Enzimatico (liquido) Estandar de Acido Urico enzimtico 3 Ml de sangre sin EDTA
MATERIALES REQUERIDOS
o Espectrofotomestro o Cubetas de 10 o 12 x 75 mL o Bao maria a 37 C o Pipetas serolgicas automaticas o Mezclador vortex o Cronometro
1. Pipetear en cubetas los siguientes volmenes (mL) y mezcle bien.
REACTIVO BLANCO (RB) ESTANDAR (E) 2.0 0.04 --MUESTRA (M) 2.0 --0.04 49
2.0 -----
2. Incube todas las cubetas a 37 C por 5 minutos y deje enfriar o incube a temperatura ambiente por 15 min. 3. Lea E y M contra RB a 520b nm antes de 15 minutos.
( NITROGENO DE UREA )
FUNDAMENTO
La urea es el principal producto de desecho del catabolismo de protenas. Es sintetizada en el hgado a partir del amonio, el cual es producido como resultado de la desaminacion de aminocidos. Normalmente, el nitrgeno de urea en la sangre comprende solo el 45% del nitrgeno no proteico. La importancia de la determinacin del nitrgeno de urea es su valor como buen indicador del funcionamiento heptico y renal. La disminucin de los niveles de nitrgeno urea (BUN) se ha visto en la nefritis, destruccin heptica aguda. Amiloidosis y embarazo. Valores elevados de BUN se han visto en casos de nefritis aguda y crnica, obstruccion urinaria e intestinal, uremia, envenenamiento por metales, nuemonia, enfermedad de Adison, peritonitis, shok en cirujia y fallas cardiacas.

Regulador de BUN Enzima BUN (R2) Estandar de BUN 30 mg / dL 3 mL de sangre
1. Prepare el reactivo de trabajo de BUN de acuerdo al instructivo 2. Calibre a 0 el espectrofotmetro a 340 nm con agua destilada 3. Por cada muestra y control, agregar 1.0 ml de reactivo de trabajo a la cubeta o tubo de prueba y llevar a 310 k (37C) por tres minutos. 4. Adicionar 10 L (0.010 mL) de suero a cada tubo respectivamente y agitar levemente. 5. Leer y anotar la absorbancia (A1), exactamente despus de 30 segundos.
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6. Exactamente a los 60 segundos despus de leer (A1), lea y registre la absorbancia (A2). 7. Calcule el cambio de absorbancia por minuto (A) mediante la resta de (A1 A2 ) 8. Procese las muestras de pacientes y controles siguiendo los pasos del 4 al 7.
CALCULO DE RESULTADOS
BUN suero (mg/dL) = Au x 30 Au
( BILIRRRUBINAS )
FUNDAMENTO
La mayora de los procedimientos clnicos de rutina para la determinacin de bilirrubina srica, estn basados en la clsica reaccin Diazo de Ehrlich. Cando una solucin de acido sulfanilico en acido clorhdrico diluido es combinada con nitrito de sodio, se forma acido nitroso.
MATERIAL Y EQUIPO
Espectrofotomtero Tubos de ensaye Pipetas automaticas Agitador Cronometro Canula
PROCEDIMIENTO (Bilirrubina Total)

1. Pipetear en cubetas o tubos de ensaye los volmenes en ml mezclando bien cada tubo.
BLANCO DE REACTIVO (RB) 2.O 2 0.10 --CALIBRADOR (C) 2.0 2 -0.10 -BLANCO DE MUESTRA (BM) 2.0 - -0.10 MUESTRA (M) 2.0 2 - 0.10
REACTIVO DE BT OXIDANTE AGUA CALIBRADOR MUESTRA
2. Permitir que las cubetas se incuben a temperatura ambiente por lo menos 3 minutos. 3. Ajustar a 0 el espectrofotmetro con el reactivo una longitud de onda de 540 nm. 4. Leer C y M MB vs RB a 540 nm en el transcurso de 30 minutos.
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PROCEDIMIENTO (Bilirrubina Directa)

1. Pipetear en tubos de ensaye los siguientes volmenes en ml mezclando bien cada tubo.
BLANCO DE REACTIVO (RB) 2.0 2 0.2 --CALIBRADOR (C) 2.0 2 -0.2 -BLANCO DE MUESTRA (BM) 2.O - -0.2 MUESTRA (M) 2.0 2 - 0.2
REACTIVO DE BD OXIDANTE AGUA CALIBRADOR MUESTRA
2. Permitir que las cubetas se incuben a temperatura ambiente por 3 minutos. 3. Ajustar a 0 e espectrofotmetro con el reactivo a una longitud de onda de 540 nm. 4. Leer C y M MB vs RB a 540 nm en el transcurso de 30 minutos.
(ALBUMINA)
FUNDAMENTO
El verde de Bromocresol (BCG) es til en la ddeterminacion cuantitativa de albumina srica. Esta tcnica de unin es un procedimiento colorimtrico inverso BCG especifico para la albumina a un pH de 7.05 y 615 nm. El mtodo presentado es esencialmente el de Dumas, Watson y Biggs modificado por el uso de citrato en lugar del regulador de succinato, un reguladodr de baja concentracin y una lectura de color final a 550 nm en lugar de 630 nm.
MATERIAL Y EQUIPO
Tubos de ensaye Cubetas Pipetas serolgicas Cronometro Canula Centrifuga Reactivos de albumina
PROCEDIMIENTO
1. Pipetear en cubetas los siguientes volmenes en ml y mezclar bien.
REACTIVO BLANCO (RB) 2.0 -ESTANDAR (S) 2.0 0.02 MUESTRA (U) 2.0 -52
REACTIVO ESTANDAR
MUESTRA
--
--
0.02
2. Mezclar el contenido en cada cubeta. El color se desarrolla inmediatamente. 3. Ajustar a 0 el espectrofotometro con el reactivo a una longitud de onda de 550 nm. 4. Incubar todas las cubetas a 37 C o a temperatura ambiente por 30 segundos. 5. Inmediatamente leer S y U contra RB a 550 nm antes de 15 minutos.
VALORES DE REFERENCIA 3.8 a 5.1 g/ dL
( PROTEINAS TOTALES )
FUNDAMENTO
La protena presente en la muestra reacciona con los iones de cobre (II) en medio alcalino, originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometra.
MATERIAL Y EQUIPO
Analizador Espectrofotmetro Pipetas serolgicas Canula Tubos de ensaye Centrifuga
PROCEDIMIENTO
1. 2. 3. 4. Extraer muestra de sangre venosa y esperar que coagule por completo. Con una canula deprender el coagulo de las paredes del tubo y centrifugar Separar el suero obtenido transfirindolo a otro tubo de ensaye. Pipetear en tubos de ensaye los siguientes volmenes en ml y agitar suavemente.
BLANCO 20 l --1.0 ml PATRON -20 l -1.0 ml MUESTRA --20 l 1.0 ml 53
AGUA DESTILADA PATRON PROTEINA (S) MUESTRA REACTIVO
5. Agitar bien y dejar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente. 6. Leer absorbancia (A) del patrn y de la muestra frente al blanco a 545 nm. 7. El color es estable durante al menos 2 horas. 8. Realizar los clculos correspondientes.
VALORES DE REFERENCIA
AMBULATORIO: 64 83 g/L RECOSTADO: 60 78 g/ L
(PERFIL CARDIACO) = DETERMINACION DE AST =
FUNDAMENTO
Los procedimientos de ensayo de estambio para la medicin de AST es similar al mtodo recomendado por la Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC). La AST cataliza la transferencia del grupo amino aspartato a 2 oxoglutarato para producir oxolactato y glutamato. El lactato deshidrogenasa se incluye en el reactivo para convertir el piruvato endgeno a lactato.
MATERIAL Y EQUIPO
Tubos de ensayo Pipetas serolgicas Cronometro Cubetas
Canula Bao maria Centrifuga Espectrofotmetro
PROCEDIMIENTO
1. Se extraen 3 ml de sangre venosa y se deposita en un tubo de ensaye y esperar a que la sangre coagule completamente.
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2. Introducir la cnula para desprender el coagulo del tubo y llevar a centrifugar a 3 600 rpm durante 5 minutos. 3. Separar el suero obtenido del resto de la muestra y depositarla en un tubo limpio. 4. Preparar el reactivo de trabajo de AST. 5. Calibrar a 0 el espectrofotmetro y luego a 340 nm. 6. Agregar 2 ml de reactivo e incubar durante 3 minutos a 37 C luego adicionarle 200 l de suero y agitar levemente.
7. Leer y anotar el resultado (absorbancia) a los 3 minutos de ser incubado.
8. Determinar el promedio de la absorbancia por minuto.
= DETERMINACION DE ALT =
FUNDAMENTO
Los reactivos de ALT se basan en una formulacin modificada por la IFCC y los mtodos de Bergmeyer. La Alanina Aminotranferasa (ALT), cataliza la transferencia del grupo amino de la alanina al 2 oxoglutarato para producir piruvato y glutamato. El piruvato formado es reducido a lactato en presencia de la LDH, con la oxidacin simultanea de (NADH) reducido.
REACTIVOS Y SU PREPARACION
AGUA - ENZIMA ALT DESTILADA Preparar el reactivo de trabajo en una proporcin de 5 partes de Buffer por 1 de enzima ALT BUFFER -
MATERIAL Y EQUIPO
Tubos de ensayo Pipetas serolgicas Cronometro Cubetas Cnula Bao mara Centrifuga espectrofotmetro
PROCEDIMIENTO
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1. Extraer 3 ml de sangre venosa y depositarla en un tubo de ensaye, esperar a que la sangre coagule por completo. 2. Con ayuda de una canula desprender el coaguo de las paredes del tubo y llevarlo a centrifugar a 3 600 rpm durante 5 minutos. 3. Luego sacamos el tubo de la centrifuga y el suero obtenido se deposita en otro tubo de ensaye limpio. 4. Agregar 2 ml de reactivo de trabajo a la muestra e incubar a 37C en el bao mara durante 3 minutos.
5. Adicionar .10 ml de suero al tubo de muestra, se mezcle bien e incubar nuevamente a 37 C durante 1 minuto. 6. Ajustar a 0 el espectrofotmetro con agua destilada. 7. Leer y anotar el incremento de la absorbancia a intervalos de 1 minuto durante 3 minutos. 8. Realizar los clculos correspondientes.
= DETERMINACION DE LDH =
FUNDAMENTO
La LDH cataliza la oxidacin de lactato a piruvato con la subsecuente reduccin del NAD a NADH. La velocidad a la cuel se forma la NADH es proporcional a la actividad de la LDH. El mtodo directo determina el aumento de absorbancia por minuto a 340 nm.
MATERIAL Y EQUIPO
Tubos de ensaye Pipetas serolgicas Canula Bao mara Cromonetro Cubetas Centrifuga Espectrofotmetro
PROCEDIMIENTO
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1. Extraer 3 ml de sangre por medio de la venopuncion, depositarla en un tubo de ensaye limpio y esperar a que coagule completamente. 2. Con ayuda de una canula, remover el coagulo de sangre de los bordes del tubo y centrifugar a 3600 rpm durante 5 minutos. 3. Sacar el tubo de la centrifuga y separar el suero obtenido depositndolo en otro tubo de ensaye completamente limpio. 4. Preparar el reactivo de trabajo del ALT. 5. Calibrar a 0 el espectrofotmetro con una ongitud de onda de 340 nm con agua destilada. 6. Agregar al tubo de muestra 2 ml del reactivo de trabajo y llevar a incubar por 3 minutos a una temperatura de 37 C. 7. Transcurrido ese tiempo adicionar .20 ml de suero al tubo de muestra y agitar levemente. 8. Llevar a leer la absorbancia de la muestra a los 3 minutos de ser incubada en el bao mara a 37 C y determinar el resultado de la absorbancia. 9. Una vez determinado el resultado (A / min) se multipliica por el factor 1746 para obtener los resultados en /L.
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58
REPORTE DE PRACTICA 1
(GLUCOSA)
Primero extraemos 3 ml de sangre venosa, la depositamos en un tubo de ensaye limpio y esperamos a que esta coagulara. Luego con ayuda de una canula, separamos la sangre de las paredes del tubo y se llevo a centrifugar a 1 500 rpm durante 5 minutos, transcurrido ese tiempo sacamos el tubo de la centrifuga y con ayuda de una pipeta serolgica extremos el suero obtenido y se deposito en otro tubo de ensaye limpio y esteril. Luego colocamos en las cubetas los siguientes volmenes de los reactivos y mezclamos bien para obtener una solocion homognea y consistente.
REACTIVO BLANCO (RB)
ESTANDAR (E) 1.0 0.01 ---
MUESTRA (M) 1.0 --0.01
1.0 -----
Incubamos las cubetas a 37C por 5 minutos o a temperatura ambiente por 10 minutos. despues ajustamos a 0 el espectrofotmetro y leemos los tubos de estndar y muestra en el espectrofotmetro contra el reactivo blanco a una longitud de onda de 500 nm . Anotamos los resultados de la absorbancia y realizamos los clculos correspondientes.
RESULTADO
AM = 0.130 AE = 0.178
CALCULO (mg/ dL) = 0.130 x 100 = 73
0.178
VALOR DE REFERENCIA: 70 105 mg/ dL
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REPORTE DE PRCTICA 2
(COLESTEROL)
Iniciamos con la extraccin de 3ml de la muestra biolgica (sangre venosa) del paciente, se coloca la sangre en un tubo seco y se espera a que esta coagule, una vez coagulada se lleva a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos, transcurrido ese tiempo se procede a extraer el suero obtenido y lo colocamos en otro tubo seco, luego con ayuda de una pipeta semiautomtica, se extrae 1 m de suero muestra y se coloca en un tubo seco marcado como tubo muestra (M) y se le aade 20 ml del reactivo muestra, se lleva a incubar al bao mara a una temperatura de 37 C durante 10 minutos. Se lee el tubo estndar (realizado por otro equipo de trabajo) y una vez transcurridos los 10 minutos se lee la muestra contra el RB (blanco de reactivo) a una longitud de onda de 500 nm en el espectrofotmetro. RESULTADO: ESTANDAR: 0.257 mg/ dl MUESTRA: 0.203 mg/ dl CALCULO: .203 (mg/dl) X 200 = 157 mg/dl .257
(TRIGLICERIDOS)
Primero, se extrajeron 3 ml de sangre mediante la venopuncion del paciente y se depossito la sangre extraida en un tubo de ensaye limpio y se espero a que la sangre coagulara, una vez coagulada la sangre se desprende el coagulo de las paredes del tubo y se lleva a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos. Luego con ayuda de una pipeta serolgica se separa el suero obtenido y se deposita en otro tubo seco, el cual contiene 20 ml del reactivo muestra y se lleva a incubar al bao mara a una temperatura de 37 C por 10 minutos. Finalmente se lee el tubo estndar (elaborado por otro equipo) y muestra contra el blanco de reactivo a una longitud de onda de 500 nm. Anotamos los resultados y se realizaron los calcuos correspondientes.
RESULTADO: ESTANDAR: .209 mg / dl MUESTRA : .109 mg/ dl
CALCULO: .109 mg/dl (200) = 104.30 mg/dl .209
60
(CREATININA)
Extraemos 3 ml de sangre venosa, la depositamos en un tubo seco y esperamos a que coagulara, una vez coagulada la sangre, con una canula se deprendi el coagula de las paredes del tubo y se llevo a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos. Luego con una pipeta serolgica se separo el suero obtenido y se deposito en un tubo seco. Luego colocamos las celdillas del espectrofotmetro a (37C) y llevamos a 0 el espectrofotmetro con un blanco de agua a 510 nm. Pipeteamos 1 mL del reactivo en cada tubo de ensaye y preincubamos por 3 minutos a 37 C, se transfiri 50 L del estndar en el tubo de ensaye, mezclamos inmediatamente y pasamos a una celdilla de lectura, transcurridos exactamente 20 segundos, leemos y registramos la absorbancia (A1), exactamente 60 seg. despus de la lectura inicial se lee y registra la absorbancia final (A2). Se calculo el cambio de absorbancias A restando (A2 A1). RESULTADO: 0.9 mg / dl
(ACIDO URICO)
Extraemos 3 ml de sangre venosa, se deposita en un tubo seco y se deja coagular, se lleva a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos, luego el suero obtenido se separa con una pipeta serolgica y se deposita en un tubo seco y se pipetean los siguientes reactivo en los tubos de ensaye tal y como se demuestra a continuacin:
REACTIVO BLANCO (RB) ESTANDAR (E) 2.0 0.04 --MUESTRA (M) 2.0 --0.04
2.0 -----
Incubamos todas las cubetas a 37 C por 5 minutos y se dejo enfriar a temperatura ambiente por 15 min. Leemos E y M contra RB a 520b nm antes de 15 minutos. Y se anotan los resultados.
RESULTADO: 4.6 mg / dl
61
(NITROGENO DE LA UREA)
Primero se extraen 3 ml de sangre venosa del paciente, la sangre es depositada en un tubo seco y esperamos a que esta coagulara, despus de que la sangre se coagulo, con la ayuda de una canula se desprenden de las paredes del tubo el coagulo y se lleva a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos, luego el suero obtenido es separado con la ayuda de una pipeta seologica y es depositado en otro tubo seco, se prepara el reactivo de trabajo de BUN de acuerdo al instructivo y con agua destilada se calibra a 0 el espectrofotmetro con una longitud de onda de 340 nm. Por cada muestra y control, agregamos 1.0 ml de reactivo de trabajo a la cubeta o tubo de prueba y se llevo a incubar a 37 C durante 3 minutos, se adicionaron 10 L (0.010 mL) de suero a cada tubo respectivamente y se agito levemente.Leemos y anotamos la absorbancia (A1), exactamente despus de 30 segundos. Exactamente a los 60 segundos despus de leer (A 1), se ley y registro la absorbancia (A2). Se calculo el cambio de absorbancia por minuto (A) mediante la resta de (A1 A2 ). Y se repite el procedimiento para los dems tubos de prueba.
RESULTADOS: MUESTRA: 0.045 mg / dl ESTANDAR: 0.090 mg / dl
CALCULO:
0.045 mg / dl (30) = 15 mg / dl 0.090
VALORES DE REFERENCIA: 8 23 mg / dl
62
(BILIRRUBINA)
Se extraen 5 ml de sangre venosa del paciente y se deposita en un tubo de ensaye y se espera a que se coagule la muestra, luego con una canula se desprenden de las paredes el tubo el coagulo y se lleva a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos, el suero obtenido es depositado en otro tubo con la ayuda de una pipeta serolgica y se inicia la practica. Dado que se realizaran varias prueba esta muestra de sangre tambin ser utilizad para los dems parmetros a estudiar.
BILIRRUBINA TOTAL
Primero se pipetea en tubos de ensaye marcados como RB (blanco de reactivo), C (calibrador) y MB (muestra) los volmenes indicados en la hoja de practica y se incuban los tubos a temperatura ambiente durante 3 minutos, se ajusta a 0 el espectrofotmetro leyendo a 540 nm con el reactivo. Se lee el calibrador y muestra contra el blanco de reactivo y se anota el resultado de la absorbancia.
BILIRRUBINA DIRECTA
Se pipetea en el tubo de ensaye marcado como RB (blanco de reactivo), C (calibrador), MB (blanco de muestra) y M (muestra), los volmenes de reactivo indicados en la hoja de practicas, se incuban las cubetas durante 3 minutos a temperatura ambiente, ajustamos a 0 el espectrofotmetro con una longitud de onda de 540 nm y se leen las cubetas. Se anotan los resultados obtenidos y se realizan los calcuos correspondientes.
RESULTADOS BT: 1.3 mg / dl BD: .57 mg / dl BI: 0.73 mg / dl
63
(ALBUMINA)
Se utilizan los 5 ml de sangre venosa del paciente y se deposita en un tubo de ensaye y se espera a que se coagule la muestra, luego con una canula se desprenden de las paredes el tubo el coagulo y se lleva a centrifugar a 2 500 rpm durante 5 minutos, el suero obtenido es depositado en otro tubo con la ayuda de una pipeta serolgica y se inicia la practica. Esta es la muestra de sangre de la anterior practica. Luego en un 3 er tubo se coloca 2 ml de reactivo de albumina y 20 l de muestra y se lleva a incubar al bao mara durante 1 minuto a 37 C y se lleva a leer al espectrofotmetro contra el estndar a una longitud de onda de 550 nm, se anota el resultado y se realiza el calculo correspondiente. RESUTADO: Mt. 0.586 (g/dl) X 10 = 11.83 g/dl St. 0.495
(PROTEINAS TOTALES)
Dado que se utiliza la misma muestra de suero omotire la parte de extraccin y proceimiento de obtencin del suero. Se pipetean en 3 tubos de ensaye marcados de la siguiente manera los reactivos: BLANCO: 40 l de agua destilada y 2 ml del reactivo. PATRON: 40 l de agua destilada y 2 ml del reactivo. MUESTRA: 40 l de suero y 2 ml del reactivo. Se agitan bien los tubos con movimientos suaves y circulares; dejando reposar 10 minutos a temperatura ambiente. Se ley a absorbancia del patrn y tubo de muestra contra el blanco en el espectrofotmetro a una longitud de onda de 545 nm. RESULTADO: 5 g/dl
64
(ENZIMAS CARDIACAS)
= DETERMINACION DE AST =
Primro se extrajeron 3 ml de sangre venosa, se deposito en un tubo de ensaye y esperamos a que la sangre coagulara completamente. Introducimos la cnula para desprender el coagulo del tubo y se llevo a centrifugar a 3 600 rpm durante 5 minutos. Separamos el suero obtenido del resto de la muestra y se deposito en un tubo limpio. Preparamos el reactivo de trabajo de AST. Se calibro a 0 el espectrofotmetro a una longitud de onda de 340 nm. Se Agrego 2 ml de reactivo e incubamos durante 3 minutos a 37 C luego se le adiciono 200 l de suero y agitamos levemente los tubos. Se leyo y anoto el resultado (absorbancia) a los 3 minutos de ser incubado. Se determinar el promedio de la absorbancia por minuto.
RESULTADO:
/L = A/ min x 0.042 = 77.4 /L 0.062 0.029
= DETERMINACION DE ALT =
Extraer 3 ml de sangre venosa y depositarla en un tubo de ensaye, esperar a que la sangre coagule por completo. Con ayuda de una canula desprender el coaguo de las paredes del tubo y llevarlo a centrifugar a 3 600 rpm durante 5 minutos. Luego sacamos el tubo de la centrifuga y el suero obtenido se deposita en otro tubo de ensaye limpio. Agregar 2 ml de reactivo de trabajo a la muestra e incubar a 37C en el bao mara durante 3 minutos. Adicionar .10 ml de suero al tubo de muestra, se mezcle bien e incubar nuevamente a 37 C durante 1 minuto.Ajustar a 0 el espectrofotmetro con agua destilada. Leer y anotar el incremento de la absorbancia a intervalos de 1 minuto durante 3 minutos. Realizar los clculos correspondientes.
65
RESULTADO:
/L = A / min x 0,039 = 109.998 /L 0.024 0.026
= DETERMINACION DE LDH =
Se extrajeron 3 ml de sangre por medio de la venopuncion, deposito en un tubo de ensaye limpio y esperamos a que coagulara completamente. Luego con ayuda de una canula, se removio el coagulo de sangre de los bordes del tubo y lo llevamos a centrifugar a 3600 rpm durante 5 minutos, se saco el tubo de la centrifuga y separamos el suero obtenido depositndolo en otro tubo de ensaye completamente limpio.se preparo el reactivo de trabajo del ALT. Calibramos a 0 el espectrofotmetro con una longitud de onda de 340 nm con agua destilada. Se agrego al tubo de muestra 2 ml del reactivo de trabajo y se llevo a incubar por 3 minutos a una temperatura de 37 C. Transcurrido ese tiempo le adicionamos .20 ml de suero al tubo de muestra y agitamos levemente. Llevamos a leer la absorbancia de la muestra a los 3 minutos de ser incubada en el bao mara a 37 C y determinamos el resultado de la absorbancia. Una vez determinado el resultado (A / min) se multipliica por el factor 1746 para obtener los resultados en /L.
RESULTADO:
/L = A / min x 0,053 = 85.99 /L 0.075 0.018
66
67
DIAGNOSTICO Y TRATAMIENTO CLINICOS POR EL LABORATORIO TODD STANFORD DAVIDSOHN
FUNDAMENTOS DE INTERPRETACION CLINICA DE LOS EXAMENES DE LABORATORIO GUILLERMO RUIZ REYEZ
FUNDAMENTOS DE HEMATOLOGIA G.J. RUIZ ARGUELLES
MANUAL DE QUIMICA CLINICA JOSEPH J. MAZA
68
MICROBIOLOGIA MEDICA MURRAY ROSENTHAL
WWW.SCRIBD.COM WWW.TUOTROMEDICO.COM
69

METABOLISMO

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ARMIDA HERNANDEZ ASCENCIO LABORATORIO CLINICO 6 F MATUTINO VALORACION METABOLICA Q.F.B.

MIGUEL ANGEL QUIJANO COUHO

PRACTICAS Y REPORTES DE LABORATORIO

PRACTICA Y REPORTE DE LABORATORIO 2

PRACTICA Y REPORTE DE LABORATORIO 3

CREATININA ACIDO URICO

PRACTICA Y REPORTE DE LABORATORIO 4

BILIRRUBINAS ALBUMINA PROTEINAS TOTALES

PRACTICA Y REPORTE DE LABORATORIO 5

Glucosa forma dextrgira

Fructosa forma dextrgira

Ribosa forma furanosa

POLISACARIDOS: son cadenas ramificadas o no, de ms de 10 monosacridos,

= CLASIFICACION DE LOS CARBOHIDRATOS =

= FUNCION DE LOS CARBOHIDRATOS =

= METABOLISMO DE LOS CARBOHIDRATOS =

Las principales rutas metablicas de los glcidos son:

5. Triosa fosfato isomerasa

= FASE DE BENEFICIO ENERGETICO =

ADP ATP Fosfoglicerato quinasa 1,3-Bisfosfoglicerato + ADP 3-Fosfoglicerato + ATP

10. Piruvato quinasa

= CLASIFICACION DE LAS AMINAS =

= ESTRUCTURA Y PROPIEDADES FISICAS DE LAS AMINAS =

VALORES DE REFERENCIA 17 49 mg/ dL

MUJERES: O,5 A 0.90 mg/ dl

HOMBRES: 0,70 A 1,20 mg/ dl

= MECANISMOS DE LA FUNCION RENAL =

= FUNCIONES DE LOS LIPIDOS =

= PRINCIPALES TIPOS DE LIPIDOS =

= CLASIFICACION DE LOS LIPIDOS =

LIPIDOS SAPONIFICABLES: Saturados

LIPIDOS CON ACIDOS GRASOS COMPLEJOS

FOSFOLIPIDOS ESFINGOLIPIDOS GLUCOLIPIDOS

B. LDH (lactato deshidrogenasa): La LD, LDH, L Lactato. Es una enzima localizada

C. AST o GOT (transaminasa glutmico - oxalacetico): La Aspartato Amino

CK BB : predomina en el cerebro, prstata, estomago e intestino, hgado, vejiga, tero,

D. TROPONINAS: Son biomarcadores miocrdicos, comprenden un grupo de tres protenas

= NUEVOS MARCADORES CARDIACOS =

PROTEINA C REACTIVA: Esta protena reacciona con el polisacrido somtico C de Streptococcus

Son mediadores directos que se incrementan en numerosas enfermedades

Las interleukinas se encuentran en placas aterosclerticas, incluyendo

El pptido natriurtico tipo B (BNP) es un pptido de 32

ESTA DIVIDIDO EN CUATRO LOBULOS:

Cara superior del hgado

Cara inferior del hgado

= FUNCIONES METABOLICAS DEL HIGADO =

OTRAS FUNCIONES METABOLICAS:

El hgado es el rgano gluconeogenico por excelencia. Sus principales substratos son:

GLICEROL AMINOACIDOS GLUCONEOGENICOS

En el colon, las bacterias intestinales desconjugan y reducen la bilirrubina y la convierten en:

UROBILINOGENO: Esta parcialmente se absorbe, pasa a la circulacin general, y se elimina

ESTERCOBILINAS: El urobilingeno y urobilina no absorbidos se convierten en

= METABOLISMO DE LAS BILIRRUBINAS =

A. ICTERICIA PRE HEPATICA: Se debe a la liberacin de bilirrubina no conjugada por

C. ICTERICIA POST HEPATICA: Se debe a la obstruccin del coldoco (Colestasis),

= ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS =

Estructura primaria Estructura secundaria Estructura terciaria

Cada una de estas estructuras informa de la disposicin de la anterior en el espacio.

ESTRUCTURA PRIMARIA: Es la secuencia de aa. De la protena. Nos indica qu aas.

ESTRUCTURA SECUNDARIA: Es la disposicin de la secuencia de aminocidos en el

ESTRUCTURA TERCIARIA: Informa sobre la disposicin de la estructura secundaria

ESTRUCTURA CUATERNARIA: Esta estructura informa de la unin , mediante

= CLASIFICACION DE LAS PROTEINAS =

LA ALBUMINA: Es la protena de mas concentracin en la sangre, transporta muchas