TEMA 8

Antes de realizar la gua deber revisar: 1. Ultraestructura del cloroplasto. 2. Espectro electromagntico y espectro visible. 3. Concepto de autotrofa Evaluacin:

FOTOSINTESIS

1. En la microfotografa indique tilacoides, granas, estroma y membrana interna y externa.

2. Revise la naturaleza de la radiacin electromagntica. La teora mecanocuntica de la radiacin afirma que la luz tiene dos aspectos: el de onda y el de partcula. Qu entiende por longitud de onda?Qu es un fotn?

Analice en el grfico la relacin que existe entre la energa por mol de fotones y la longitud de onda en relacin con las energas de varios enlaces qumicos. 3. Qu organismos auttrofos conoce adems de los vegetales?

GUIA DE CLASE
1. Para facilitar su estudio, la fotosntesis se divide en dos etapas o fases: la fase luminosa y la fase de fijacin de CO2. Indique en qu lugar del cloroplasto ocurre cada fase. FASE LUMINOSA 2. A continuacin se representan las frmulas de -caroteno, xantofila y clorofila. Dnde se localizan estos pigmentos?

clorofila

3. Abajo aparecen los espectros de absorcin de algunos pigmentos. A partir del anlisis de los espectros de absorcin de los diferentes pigmentos, explique porqu se benefician los organismos fotosintticos con esa diversidad.

4. Qu ocurre cuando un pigmento fotosinttico absorbe luz? 5. Para comprender la fase luminosa de la fotosntesis es til analizar el proceso a travs de la clsica representacin conocida como diagrama Z

a. Localice en el esquema las molculas antena y los centros de reaccin. b. Describa la diferencia entre la funcin de una antena y un centro de reaccin. c. Qu ocurre a nivel del centro de reaccin luego de recibir la energa de excitacin de la antena? d. Indique qu entiende por fotosistema y qu molculas lo forman. f. Dnde se sitan los pigmentos y los transportadores de e- ? g. Con los elementos que cuenta, explique ahora la figura.

6. a. Explique qu entiende por fotlisis e indique a qu fotosistema est asociado ese proceso. b. Cul es el destino de los electrones, protones y del oxgeno del H2O?

7. Durante la fase luminosa de la fotosntesis se produce ATP por fotofosforilacin acclica y cclica. a. En qu se diferencian estas dos formas de generacin de ATP? b. A partir del esquema que se presenta abajo explique el mecanismo de formacin de ATP.

FASE DE FIJACION DE CO2 El mecanismo de carboxilacin a partir del CO2 atmosfrico es comn a todas las plantas y se realiza a travs del ciclo de Calvin y Benson o Ciclo C3. Sin embargo existen estrategias adicionales de fijacin de CO2 tales como el Ciclo de Hatch y Slack o Ciclo C4 y la adaptacin de las plantas de tipo CAM. 8. A partir del anlisis de la representacin del ciclo C3 que aparece a continuacin a. Describa en general el ciclo (considere las etapas carboxilativas, reductoras, reacciones endergnicas y productos). b. Analice y resuma la reaccin de carboxilacin catalizada por la Rubisco (Ribulosa bifosfato carboxilasa oxigenasa). c. Considere sustrato, producto y localizacin, subunidades, codificacin, actividad ptima y pH de la enzima). 9. a. Plantee los destinos del gliceraldehdo 3 P generado en el Ciclo C3 y los del almidn. b. Si se suministra 2H2O se encuentra glucosa marcada con 2H? Por si o por no, explique

6 CO2
RubisCO

6C (36C)

12

3 Fosfoglicerato

3C

ATP ADP

Ribulosa 1-5 P

5C

(30C) ADP ATP

12

1-3 Fosfoglicerato

3C

NADPH.H NADP P

Ribulosa 5 P

5C

12

Gliceraldehido 3 P

3C
Glucosa

Almidn

(6C)
Dihidroxicetona 3 P

3C

ESTROMA CITOPLASMA P
Gluclisis Dihidroxicetona 3 P

3C
Hexosas P Sacarosa

10. La Rubisco adems de catalizar la carboxilacin de la ribulosa 1,5 bifosfato, tambin produce su oxigenacin en un proceso conocido como fotorrespiracin ( se anexa un esquema que muestra los principales pasos de este proceso). a. Complete el esquema de Fotorrespiracin. b. Indique cules son las principales consecuencias de este proceso. c. Qu espera qu ocurra con plantas de tipo C3 si se aumenta la pCO2 de 0.03% (concentracin normal) a 0.1% durante el crecimiento de las mismas? Fundamente su respuesta.

CICLO C2, FOTORRESPIRACIN

(2) Ribulosa 1,5 difosfato (5C) 2O2 (2) 3-fosfoglicerato 3-fosfoglicerato (3C) (3C) ADP ATP Glicerato (3C) CLOROPLASTO

(2) 2-fosfoglicolato (2C) 2 H2O 2Pi (2) Glicolato (2C)

(2) Glicolato (2C) 2O2 2 H2O2 (2) Glioxilato (2C) 2 Glutamato

Glicerato (3C) NAD

+

NADH Hidroxipiruvato (3C)

PEROXISOMA

2 -cetoglutarat o (2) Glicina (2C) Serina (3C)

Glicina (2C) NAD+ NADH CO2 H4-folato Metileno H4-folato

Serina (3C) H2O + Glicina (2C) MITOCONDRIA

NH3

11. En 1979 Hatch y Slack describieron el ciclo C4, caracterstico de algunas plantas de origen tropical y subtropical, como el maz y caa de azcar, entre otras. Este tipo de plantas se denominan plantas C4. a. A partir del esquema describa en general el mecanismo de fijacin de CO2 por una planta C4. La representacin simplificada del ciclo que aparece a continuacin puede ayudar a responder. Es importante que en la descripcin atienda las enzimas responsables de fijar CO2.

OAA 4C CO2 Pi PEP carboxilasa PEP 3C

AMP ATP

NADPH.H NADP

MALATO 4C

CICLO C4

M E S O F I L O

PIRUVATO 3C

MALATO 4C

CO2 CICLO C3

NADPH.H

NADP

GLUCOSA

V A I N A

VASO

b. Explique por qu las plantas C4 son ms eficientes que las C3 en la fijacin de CO2? 12. Establezca las principales, diferencias en el mecanismo de fijacin del CO2, entre las plantas C4 y las plantas CAM y las ventajas de las mismas en climas ridos respecto a las C3 o C4.

13. Porqu plantas de la misma especie, crecidas en las mismas condiciones, pero a dos concentraciones de O2 presentan las diferencias en la produccin de biomasa que aparece en la figura?

90 80 70 Biomasa en Kg 60 50 40 30 20 10 0 20% O2 40%

Regulacin de la fijacin de CO2

14. La enzima Rubisco se activa en presencia de luz por incremento del pH en el estroma del cloroplasto. Por qu el pH del estroma del cloroplasto se alcaliniza como consecuencia de la actividad de los fotosistemas? Revise fase luminosa.

15. La actividad de algunas enzimas del ciclo C3 es regulada por el poder reductor generado en los fotosistemas. Las enzimas reguladas por este mecanismo presentan grupos disulfuro (-S-S-) susceptibles de ser reducidos a sulfhidrilos (-SH). El mecanismo de la ferredoxina tiorredoxina oxido-reductasa (FTO) aparece en el esquema de la pgina siguiente. a. Explique el proceso. b. Es correcto decir que el poder reductor (e-) para la activacin de la enzima proviene del H2O?

16. Si se enriquece la atmsfera donde crece una planta con 14 C? Por si o por no, explique.

14

CO2 aparecer glucosa

17. A una planta se le suministra un inhibidor que acta entre fotosistema I y II, qu consecuencias tendr este hecho sobre su metabolismo?

EL FUNCIONAMIENTO DEL APARATO FOTOSINTTICO PUEDE SER EVALUADO A TRAVS DE MEDIDAS DE FLUORESCENCIA La radiacin que incide sobre una hoja puede ser absorbida por los pigmentos o perdida mediante reflexin o trasmisin (la radiacin que atraviesa a la hoja sin ser absorbida). Sin embargo, no todos los fotones absorbidos por los pigmentos son utilizados en los procesos fotoqumicos. La capacidad de una planta de utilizar los fotones absorbidos en los procesos fotoqumicos es limitada y depende de factores, los estreses causados por las condiciones ambientales (sequa, helada, etc.). El exceso de energa que no se utiliza en las reacciones fotoqumicas debe ser eficientemente disipada mediante procesos no fotoqumicos. Tales procesos incluyen la emisin de calor y la re-emisin de la energa absorbida con longitudes onda ms largas, que van del rojo al rojo lejano. Esta re-emisin de luz se denomina fluorescencia de la clorofila. Cada uno de los procesos mencionados antes son competitivos y cualquier cambio en la utilizacin de la energa por alguno de estos procesos producir un cambio complementario en los otros. Este hecho posibilita que la fluorescencia de la clorofila pueda ser usada como una forma confiable y no invasiva de evaluar los procesos fotoqumicos. Si se realiza un espectro de fluorescencia sobre una hoja se podrn observar dos mximos, uno a 685 nm que corresponde a fluorescencia del PSII y otro ms pequeo a los 730 nm atribuido al PSI. A temperatura fisiolgica, aproximadamente un 95% de la seal de la fluorescencia de la clorofila deriva de las molculas de clorofila asociadas al fotosistema II. La seal de la fluorescencia de tejidos iluminados puede ser detectada con un equipo pticoelectrnico (fluormetro). La forma tpica de realizar la medida de fluorescencia consiste en iluminar una hoja intacta, previamente adaptada a la oscuridad, con una luz de baja intensidad y luego aplicar un pulso de luz saturante, el registro de la fluorescencia emitida se realiza a lo largo del tiempo como se muestra en la figura. El nivel Fo corresponde a la prdida de una parte de la energa absorbida por las molculas antenas antes que stas hayan podido transferir la energa de excitacin hacia los centros de reaccin. El aumento de la fluorescencia desde Fo a Fm, su valor mximo, se debe a la reduccin total del pool de QA, el primer aceptor electrnico del FSII. Los parmetros Fo y Fm permiten calcular la eficiencia cuntica mxima del FSII, que est dada por la relacin Fv/Fm = (Fm-Fo)/Fm. En hojas saludables, este valor es cercano a 0.8. Un valor inferior indica que una proporcin de centros de reaccin del FSII estn daados, un fenmeno llamado fotoinhibicin. Herbicidas y transporte fotosinttico de electrones
Algunos herbicidas actan inhibiendo la fotosntesis en alguna reaccin del transporte de electrones. Entre estos herbicidas se encuentran diversos derivados de la urea, en especial el monurn o CMU (3-p-clorofenil-1,1-dimetilurea) y diurn o DCMU (3-[3,4-diclorofenil]-1,1dimetilurea), que se aplican en el suelo, y por el xilema llegan a las hojas y bloquean el transporte de electrones fotosinttico (ver figura).

Ciertos herbicidas a base de triazinas, como simazina y atrazina, as como otros a base de uracilos sustituidos, incluyendo el bromacil e isocil, parecen bloquear el mismo paso. Estos herbicidas desplazan la forma oxidada de la plastoquinona y ocupan el sitio de unin especfico de QB en el polipptido D1 del FSII. Los herbicidas no son capaces de aceptar electrones lo que provoca que las QA no puedan oxidarse. Por lo tanto la unin del herbicida efectivamente bloquea el flujo de electrones e inhibe la fotosntesis. Otros herbicidas como el paraquat o metil violgeno actan capturando electrones que van desde la ferredoxina al NADP (ver figura) y reducen al oxgeno formando superxido, una especie del oxgeno daina para los componentes de los cloroplastos. En las ltimas dcadas, muchas especies se han vuelto resistentes a las triazinas, lo que en gran parte se ha debido a la mutacin en el gen del cloroplasto que codifica el polipptido D1. En los genotipos salvajes, este polipptido se une tanto a QB como a las triazinas; en cambio en los mutantes, D1 se puede unir a QB pero no a triazinas. Discuta el efecto de la aplicacin del herbicida DCMU estimada por fluorimetra en plantas sobre la eficiencia cuntica.

DURANTE LA FOTOSNTESIS OCURRE FRACCIONAMIENTO ISOTPICO

El CO2 atmosfrico contiene los istopos de carbono que existen naturalmente 12C, 13C, y C en las proporciones 98.89%, 1.1%, y 0.01%, respectivamente. El 14CO2 est presente en pequeas cantidades que no tienen relevancia fisiolgica, pero el caso del 13CO2 es diferente. Las propiedades qumicas del 13CO2 son idnticas a las del 12CO2, pero debido a una leve diferencia en la masa (2.3%) la mayora de las plantas asimilan menos 13CO2 que 12CO2. En otras palabras, las plantas discriminan en contra del istopo pesado, y por lo tanto ellas tienen menores relaciones 13C a 12C que las encontradas en el CO2 atmosfrico. La composicin isotpica puede ser medida por medio de un espectrmetro de masa que proporciona la siguiente relacin: R= 13CO2/12CO2 La composicin isotpica de las plantas 13C se determina en base a un estndar y se expresa en unidades por mil (): 13C = [(R planta/ R estndar) -1] x 1000
14

Se ha encontrado que las plantas C3 tienen valores de 13C cercanos a 28 mientras que las plantas C4 tienen un valor promedio de 13C de 10. El signo negativo indica que tanto las plantas C3 como C4 tienen menos 13C que el estndar. La base fisiolgica para el enriquecimiento isotpico se debe al fraccionamiento del CO2 cuando este difunde de la atmsfera al sitio de carboxilacin de la rubisco en la hoja, debido a que el 12CO2 es ms liviano que el 13CO2, este difunde ms rpido hacia el sitio de carboxilacin. Sin embargo, la mayor discriminacin ocurre durante la reaccin de carboxilacin catalizada por la rubisco. Por razones an no comprendidas, esta enzima tiene un valor de discriminacin intrnseco de 30, mientras que la PEP carboxilasa tiene un efecto de discriminacin mucho menor (cercano a2 a 6). Las plantas CAM tienen valores de 13C intermedios a los de las plantas C3 y C4. En las plantas CAM que fijan CO2 durante la noche va PEP carboxilasa, el 13C es similar a las

plantas C4. Sin embargo, cuando las plantas CAM estn bien regadas, ellas cambian al modo C3 abriendo sus estomas y fijando CO2 durante el da mediante la rubisco. Bajo estas condiciones la composicin isotpica se acerca ms a las plantas C3. Entonces los valores 13 C/12C de las plantas CAM reflejan cuanto carbono es fijado va C3. Un hecho importante es que la composicin isotpica de las plantas C3 es proporcional a la presin parcial de CO2 en el espacio intercelular de las hojas (Ci). Una mayor discriminacin ocurre cuando Ci es alta, es decir cuando el estoma est abierto. Recordemos que cuando el estoma est abierto facilita la prdida de agua, por lo tanto la baja eficiencia en el uso del agua resulta en una mayor discriminacin en contra el 13C. En el colgeno de restos seos humanos encontrados en las tierras altas peruanas, en el Valle de Ayacucho, que datan de 500 a 1000 aos DC se ha encontrado un valor promedio de 13C de -10.7 . En base a este dato qu puede inferir acerca de la dieta de esta sociedad preincaica.