NOMBRE DE LA EMPRESA: LABORATORIOS SAN ANGEL SA.

NOMBRE DE LA PRUEBA: Determinación Cuantitativa en microplaca de

Actividad de 17α-OHP (17 alfa Hidroxiprogesterona), en sangre total de
13906740-5 (es) neonatos colectada en papel filtro. CLAVE DE LA PRUEBA: 40.50.003
1

3305-0010
®
GSP
Neonatal 17α-OH-
progesterone kit
Fluoroinmunoensayo a tiempo resuelto

Instrucciones de uso. Reactivos para 1152 ensayos.

Fabricado por:
Wallac Oy,
Mustionkatu 6, FI-20750 Turku, Finlandia

PARA DIAGNÓSTICO IN VITRO

2 13906740-5 (es)
SIMBOLOS

In vitro diagnostic medical device / Dispositif médical de diagnostic in vitro /

In-Vitro-Diagnostikum / Producto sanitario para diagnóstico in vitro /
Dispositivo medico-diagnostico in vitro / Medicinteknisk produkt för in vitro-
diagnostik / Para uso diagnóstico in vitro / In vitro-diagnostisk medisinsk
utstyr

Batch code / Code du lot / Chargenbezeichnung / Código de lote / Codice

del lotto / Lot nummer / Número do lote / Partikode

Packing number / Numéro d’emballage / Packnummer / Número de

envase / Numero confezioni / Förpackningsnummer / Número de
embalagem / Pakkenummer

Catalog number / Référence du catalogue / Bestellnummer / Número de

catálogo / Numero di catalogo / Katalognummer / Código / Katalognummer

Use by / Utiliser jusqu’au / Verwendbar bis / Fecha de caducidad / Utilizzare

entro / Använd fore / Data limite de utilização / Brukes innen

Temperature limitation / Limites de température / Temperaturbegrenzung /

Limite de temperatura / Limiti di temperatura / Temperaturbegränsning /
Limite de temperatura / Temperaturbegrensning

Contains sufficient for <n> tests / Contenu suffisant pour ”n” tests / Inhalt
ausreichend für <n> Prüfungen / Contenido suficiente para <n> ensayos /
Contenuto sufficiente per “n” saggi / Räcker till “n” antal tester / Conteúdo
suficiente para <n> testes / Innholdet rekker til <n> tester

Consult instructions for use / Consulter les instructions d'utilisation /

Gebrauchsanweisung beachten / Consulte las instrucciones de uso /
Consultare le istruzioni per l'uso / Se bruksanvisningen / Consultar
Instruções de uso / Les bruksanvisningen

Manufacturer / Fabricant / Hersteller / Fabricante / Fabbricante / Tillverkare /

Fabricado por / Produsent

This way up / Haut / Diese Seite oben / Este lado arriba / Questo lato
in alto / Denna sida upp / Este lado para cima / Denne side opp

Recyclable / Recyclable / Recyclebar / Reciclable / Riciclabile /

Återvinningsbart / Reciclável / Resirkulerbar
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TABLA DE CONTENIDO

SIMBOLOS .......................................................................................................................... 2
TABLA DE CONTENIDO ..................................................................................................... 3
FINALIDAD DEL KIT............................................................................................................ 5
RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO....................................................................... 5
PRINCIPIOS DEL ENSAYO ................................................................................................ 5
CONTENIDO DEL KIT ......................................................................................................... 6
Reactivos ......................................................................................................................... 7
MATERIAL NECESARIO PERO NO SUMINISTRADO CON EL KIT .................................. 8
TOMA Y MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS ................................................................ 9
CUIDADOS Y PRECAUCIONES ....................................................................................... 11
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO ..................................................................................... 11
Estabilidad de los componentes ..................................................................................... 11
Calibración ..................................................................................................................... 12
Procedimiento del ensayo .............................................................................................. 12
Procedimiento para ensayos con placas incompletas .................................................... 13
NOTAS DE PROCEDIMIENTO ......................................................................................... 13
CÁLCULO DE RESULTADOS........................................................................................... 14
Control de elución .......................................................................................................... 14
Control de calidad .......................................................................................................... 14
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO .......................................................................... 14
VALORES ESPERADOS E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS ....................... 15
Notificación de resultados .............................................................................................. 16
CARACTERÍSTICAS ANALÍTICAS DEL ENSAYO ........................................................... 17
Precisión ........................................................................................................................ 17
Límite inferior de detección ............................................................................................ 18
Linealidad ....................................................................................................................... 19
Interferencia ................................................................................................................... 19
Comparación de los métodos......................................................................................... 19
Rendimiento del cribado................................................................................................. 21
Reacción cruzada .......................................................................................................... 25
GARANTÍA ........................................................................................................................ 25
REFERENCIAS ................................................................................................................. 26
PATENTES ........................................................................................................................ 28
Resumen del protocolo del ensayo GSP® Neonatal 17-OHP ............................................ 29
4 13906740-5 (es)
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GSP® Neonatal 17α-OH-progesterone kit

FINALIDAD DEL KIT

Este kit sirve para la determinación cuantitativa de la 17α-OH-progesterona humana en

muestras de sangre seca en papel de filtro, como ayuda para la detección de la
hiperplasia adrenal congénita (HAC) en los recién nacidos mediante el instrumento GSP®.

RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO

Existen diversos defectos enzimáticos congénitos de la biosíntesis de esteroides que

provocan la hiperplasia adrenal congénita (HAC). Son genéticamente diferentes, pero
todos ellos se transmiten de un modo autosómico recesivo. Los tipos más frecuentes son
la deficiencia de la 21-hidroxilasa (alrededor del 80% de los casos) y la deficiencia de la
11ß-hidroxilasa (aproximadamente el 15% de los casos). Existen otros tipos, como son la
hiperplasia adrenal lipoide, la deficiencia de la 20α-hidroxilasa o la deficiencia de la 3ß-
hidroxiesteroide deshidrogenasa, si bien son muy raras. La frecuencia global de la HAC
en la población general varía según las razas. En Europa se calcula que el porcentaje se
encuentra entre 1:10.000 y 1:15.000 de los recién nacidos (1,2,3). La 17α-OH-
progesterona, precursor del cortisol, aumenta en la deficiencia de la 21- y 11ß-hidroxilasa,
pero no en los otros tipos. Así pues, su determinación resulta útil como método para
diagnosticar los dos tipos más frecuentes de HAC o para aproximadamente el 95% de
todos los casos. La 17α-OH progesterona también se produce en la placenta como un
metabolito de la progesterona. Por lo tanto, los niveles son altos en la sangre del cordón
umbilical y en la sangre extraída a todos los recién nacidos normales. No obstante, en el
caso de los recién nacidos normales la concentración desciende rápidamente a lo largo
de los primeros días de vida. Por el contrario, en el caso de niños con HAC, los niveles se
mantienen altos o incluso aumentan. En el momento en el que se recoge la sangre del
papel de filtro para realizar el cribado, los niveles de 17α-OH-progesterona siguen siendo
más altos que los de bebés o niños de más edad. Es preciso realizar una cuidadosa
estandarización del valor de corte para separar los niños normales de los afectados por la
HAC (4,5,6,7,8,9). Si se diagnostica HAC en el procedimiento de cribado, a continuación
debe realizarse la diferenciación entre la deficiencia de 21- y 11ß-hidroxilasa. La HAC no
clásica de aparición tardía no se detecta de forma infalible por el cribado neonatal (10,11).

PRINCIPIOS DEL ENSAYO

El kit GSP Neonatal 17α-OH-progesterone (17-OHP) es un ensayo en fase sólida,

fluoroinmunométrico de tiempo resuelto, basado en la reacción de competencia entre la
17-OHP marcada con europio y la 17-OHP de la muestra por un número limitado de sitios
de unión en los anticuerpos policlonales específicos de la 17-OHP (derivados del conejo).
El danazol facilita la liberación de la 17-OHP de las proteínas de unión (12). Un segundo
anticuerpo, dirigido contra la IgG de conejo, recubre la fase sólida y permite la separación
del antígeno unido al anticuerpo del antígeno libre.

El inductor DELFIA Inducer disocia los iones de europio del antígeno marcado en una
solución donde éstos forman con los componentes de dicha solución quelatos altamente

GSP es una marca registrada de PerkinElmer, Inc.

6 13906740-5 (es)
fluorescentes. A continuación, se mide la fluorescencia en cada pocillo. La fluorescencia
producida en cada muestra es inversamente proporcional a la concentración en la
muestra de 17-OHP (13,14).

17-OHP en
la muestra

17-OHP
marcada
IgG anti-conejo con Eu IgG Incubación
en la fase sólida anti-17-OHP y lavado

DELFIA
Inducer

Medición de la
fluorescencia

CONTENIDO DEL KIT

Cada kit GSP Neonatal 17-OHP contiene reactivos para 1152 ensayos.

La fecha de caducidad del kit sin abrir viene indicada en una etiqueta exterior. Almacenar
a +2–+8 °C.
13906740-5 (es) 7
Reactivos

Componente Cantidad Almacenamiento y caducidad

Neonatal 17-OHP Calibrators 7 cassettes de papel Almacenar en la bolsa

(Calibradores de de filtro (Whatman, original en refrigeración y
Neonatal 17-OHP) nº 903) con 1 juego de protegido de la humedad y la
(valores aprox.) manchas de sangre luz. Estable a +2–+8 °C hasta
seca la fecha de caducidad
ng/mL nmol/L indicada en la etiqueta.
de suero de sangre
A 0 0
B 4 6
C 10 14 Las concentraciones exactas de 17-OHP se indican en
D 25 34 el certificado de control de calidad específico del lote,
E 75 103 incluido en el kit.
F 220 300

Neonatal 17-OHP Controls 5 cassettes de papel Almacenar en la bolsa

(Controles de Neonatal 17-OHP) de filtro (Whatman, original en refrigeración y
(valores aprox.) nº 903) con 2 juegos protegido de la humedad y la
de manchas de sangre luz. Estable a +2–+8 °C hasta
ng/mL nmol/L seca la fecha de caducidad
de suero de sangre indicada en la etiqueta.

C1 17 20
C2 45 60 Los valores de los controles del kit medidos por el
C3 100 140 fabricante se indican en el certificado de control de
calidad específico del lote, incluido en el kit. Cada
laboratorio debe establecer su propio intervalo y valor
medio aceptables.

Los calibradores y los controles se han preparado a partir de sangre humana con un
valor de hematócrito del 50–55% y se han calibrado utilizando métodos gravimétricos.

Factores de conversión: 1 nmol/L de sangre = 0.33 ng/mL de sangre

1 nmol/L de sangre = 0.73 ng/mL de suero
(suponiendo un 55% de hematócrito)

17-OHP-Eu tracer 3 viales, 2.8 mL +2–+8 °C hasta la fecha de

stock solution caducidad indicada en la
(Solución madre de trazador etiqueta del vial.
17-OHP-Eu) (~ 6 nmol/L)

El trazador listo para usar es una solución salina tamponada con Tris-HCl (pH 7.8), que
contiene albúmina sérica bovina, y < 0.1% de azida sódica como conservante.
8 13906740-5 (es)

17-OHP antiserum 3 viales, 2.8 mL +2–+8 °C hasta la fecha de

stock solution caducidad indicada en la
(Solución madre de antisuero etiqueta del vial.
17-OHP) (conejo policlonal)

El antisuero listo para usar es una solución salina tamponada con Tris-HCl (pH 7.8), que
contiene albúmina sérica bovina, y < 0.1% de azida sódica como conservante.

17-OHP Assay Buffer 3 frascos, 120 mL +2–+8 °C hasta la fecha de

(Tampón del ensayo 17-OHP) caducidad indicada en la
etiqueta del frasco.

Solución salina lista para usar, tamponada con Tris-HCl (pH 7.8), que contiene albúmina
sérica bovina, Tween 40, polietilenglicol 6000, CaCl 2 , danazol, un colorante rojo inerte, y
< 0.1% de azida sódica como conservante.

Anti-Rabbit IgG Microtitration 12 placas +2–+8 °C hasta la fecha de

Strips caducidad indicada en la
(Tiras para microtitulación con etiqueta.
IgG anti-conejo). 8 x 12 pocillos
recubiertos con IgG anti-conejo
(desarrollados en cabra)

Extra barcode labels 6 unidades Nota: los códigos de barras

for the plate son específicos del lote.
(Etiquetas de código de barras
adicionales para la placa)

Lot-specific 1 unidad
quality control certificate
(Certificado de control de
calidad específico del lote)

MATERIAL NECESARIO PERO NO SUMINISTRADO CON EL KIT

Este kit GSP Neonatal 17-OHP se debe usar con el instrumento GSP. Se necesitan los
siguientes componentes, que se pueden obtener de Wallac Oy o de PerkinElmer, Inc. y
sus distribuidores.

1. Instrumento GSP (no de ref. 2021-0010)

2. Wash Concentrate (Concentrado de lavado) (no de ref. 4080-0010)
3. DELFIA Inducer (Inductor) (no de ref. 3304-0010)
4. Puntas de pipeta (no de ref. 1235-402 y no de ref. no. 2021-4010)
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5. Wallac DBS Puncher (no de ref. 1296-071), Wallac MultiPuncher™ 1 (no de ref. 1296-
081) o Wallac AutoPuncher™ 2 (no de ref. 1296-091), o un taladro manual para cortar
los discos de papel de filtro con un diámetro de 3.2 mm (1/8 de pulgada)

Además, se necesita lo siguiente:

- agua desionizada
- tarjetas de muestras con papel de filtro que cumple las normativas locales vigentes

TOMA Y MANIPULACIÓN DE LAS MUESTRAS

Para el cribado neonatal es preferible tomar una muestra de sangre mediante punción en
el talón con aplicación directa en el papel de filtro (15).

El tratamiento con dexametasona, hidrocortisona o prednisona de la madre o el recién

nacido podría producir falsos negativos (16).

Los programas de cribaje neonatal difieren entre sí en el tipo de muestra requerida. En

Estados Unidos, la recomendación es una mancha de sangre, de aproximadamente
12.7 mm (1/2 de pulgada) de diámetro, obtenida mediante una punción en el talón y
recogida en papel de filtro. La punción de sangre neonatal en el talón se obtiene
habitualmente de 2 a 6 días después del nacimiento, pero puede que en algunos
programas de cribado los tiempos y el número de muestras sean distintos. Consulte las
normativas de carácter local para conocer los tiempos y las tomas de muestras de cribado
adecuados. El dispositivo de toma de muestras debe cumplir las normativas nacionales.
Los métodos basados en muestras de sangre seca requieren de una obtención,
manipulación y transporte adecuados. El documento LA4-A5 (15) del CLSI describe la
técnica de toma de muestra, cuyos principales puntos se exponen a continuación:

- Limpiar la piel con una gasa mojada en alcohol y dejar secar al aire.

- Realice una punción en el talón del recién nacido con una lanceta estéril o con un
dispositivo de incisión en el talón hasta una profundidad de 1.0–2.0 mm. En los niños
pequeños una punción realizada a mayor profundidad puede causar daños óseos.

- Limpiar la primera gota de sangre. Colocar suavemente el papel de filtro sobre una
gota grande de sangre y, en un solo paso, dejar que se absorba una cantidad de
sangre suficiente como para llenar completamente el círculo preimpreso en el papel
de filtro. Examinar ambos lados del papel de filtro para comprobar que la sangre ha
penetrado y ha impregnado el papel. Si se aprieta excesivamente el sitio de punción,
podría causar hemólisis de la muestra o la mezcla de líquidos tisulares con la
muestra. No colocar varias gotas sucesivas en el círculo (esto ocasiona la formación
de capas).

- Dejar secar la muestra de sangre al aire en posición horizontal durante al menos

3 horas a temperatura ambiente (+18–+25 °C), sin exponer a la luz directa. No
caliente ni apile las muestras durante el proceso de secado.

1
MultiPuncher es una marca comercial de PerkinElmer, Inc.
2
AutoPuncher es una marca comercial de PerkinElmer, Inc.
10 13906740-5 (es)
- Comprobar que se ha rellenado la información necesaria en la tarjeta de toma de la
muestra. La información preimpresa mínima necesaria sobre el dispositivo de toma de
muestras incluye:

- apellido (y nombre si está disponible), sexo, fecha de nacimiento (opcional: hora

de nacimiento), peso al nacer y edad; (indicar si tiene menos de 24 h), y número
de identificación del paciente
- nombre y apellido de la madre
- fecha de toma de la muestra (opcional: hora de toma de la muestra)
- nombre y dirección del remitente (opcional: centro en el que ha nacido)
- nombre y número de teléfono del médico (profesional de atención sanitaria)
- nombre y dirección del programa de cribado de neonatos
- cada tarjeta debe tener un número de serie único y una fecha de caducidad

- Antes de colocar las muestras en un contenedor para transporte, las manchas de

sangre seca de las tarjetas de toma de muestras deben separarse mediante una
barrera física o girarse 180° con respecto a las tarjetas que están inmediatamente
encima o debajo. También se pueden proteger las muestras de sangre colocando un
papel o cartón doblado que las cubra o bien papel cristal entre las mismas.

- Para el embalaje y transporte de la muestra siga las normativas locales de correo y

transporte. Las muestras no deben colocarse en recipientes sellados herméticamente
(por ejemplo, bolsas de plástico o aluminio). Si es necesario, deben incluirse bolsas
desecantes en número suficiente. La humedad y el vapor son perjudiciales para la
muestra de sangre seca.

- Envíe por correo u otro medio de transporte la muestra al laboratorio antes de que
transcurran 24 horas desde que se tomó, a no ser que el laboratorio de cribado lo
determine de otra forma.

Algunos laboratorios de cribado pueden solicitar información adicional en la tarjeta, por

ejemplo si el bebé fue anterior o posterior al término y, en este caso, en qué grado, si fue
un parto gemelar, información acerca de la alimentación y posibles antibióticos, y si se
realizó alguna transfusión de sangre. Consulte las normativas de carácter local y las
políticas institucionales para conocer las desviaciones con respecto a la información
mínima necesaria sobre el dispositivo de toma de muestras.

Se sabe que la 17-OHP es bastante estable en muestras de sangre seca. Se ha

demostrado que a temperatura ambiente 17-OHP es estable durante 7 meses (17),
8 meses (18) y un año (19). Para mejorar la estabilidad, almacenar a +4 °C en
condiciones desecantes (17). En caso de almacenamiento prolongado, si la muestra no se
ha desecado correctamente los resultados del ensayo pueden ser incorrectos
13906740-5 (es) 11
CUIDADOS Y PRECAUCIONES

Para diagnóstico in vitro.

Este kit debe ser utilizado únicamente por personal cualificado.

Este kit contiene calibradores y controles fabricados a partir de componentes de sangre

humana. La sangre humana se ha sometido a métodos de ensayo aprobados por la FDA
o equivalentes, y se han obtenido resultados negativos para el antígeno de superficie de
la hepatitis B, anticuerpos anti-hepatitis C y anticuerpos anti-VIH 1 y 2. No obstante,
deben seguirse todas las precauciones recomendadas para la manipulación de derivados
sanguíneos. Consultar la publicación "Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories" del U.S. Department of Health and Human Services o las normas locales o
nacionales.

Tratar todas las muestras de pacientes como potencialmente infecciosas.

Los reactivos contienen azida sódica (NaN 3 ) como conservante. La azida sódica puede
reaccionar con el plomo o el cobre de las tuberías, formando azidas metálicas muy
explosivas. Al limpiar los reactivos, dejar correr gran cantidad de agua para evitar la
formación de azidas.

Todos los residuos se deben eliminar siguiendo la normativa en vigor.

PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO

Consulte el manual del usuario de GSP y el manual del usuario de GSP Workstation para
obtener más información. Antes de cargar los reactivos, lea los códigos de barras del
certificado de control de calidad para introducir la información específica del lote en el
software GSP Workstation. Las muestras y las placas se pueden dejar a temperatura
ambiente (+19 a +25 °C) antes de su uso, pero las botellas y los viales de reactivos deben
cargarse refrigerados (+2 a +8 °C) en el instrumento.

Estabilidad de los componentes

Reactivos líquidos:

Los viales y botellas de reactivos deben cargarse en el instrumento llenos y sin usar. A
continuación, los reactivos deben almacenarse en el carrusel de reactivos hasta que se
usen o hasta que caduquen (máximo 14 días).

Tiras:

Una vez abiertas, las tiras son estables durante 2 semanas, cuando se almacenan con
desecante a una temperatura entre +2 y +8 °C en su envase original o en una bolsa de
plástico que se pueda sellar.
12 13906740-5 (es)
Calibradores and controles:

Una vez abiertos, los calibradores y los controles son estables durante 2 semanas,
cuando se almacenan a una temperatura entre +2 y +8 °C y se protegen de la humedad.

Se ha demostrado que las placas que contienen calibradores y controles perforados en

los pocillos se mantienen estables en el instrumento GSP hasta 15 horas.

Calibración

Debe realizarse una curva de calibración por duplicado para cada lote del kit y lote de
inductor DELFIA Inducer. Después, la curva de calibración será válida durante 24 horas o
hasta que se realice una nueva curva de calibración.

Procedimiento del ensayo

NOTA: Las muestras de sangre seca deben perforarse en las placas antes de la carga.

1. Retire los tapones de las botellas o viales de reactivos y coloque los reactivos en el
cassette de reactivos tal como muestra la siguiente figura. Asegúrese de que los
códigos de barras son visibles a través de las ranuras del cassette de reactivos.
Coloque tapones antievaporación negros en los viales de trazador y de antisuero.

Tapones antievaporación
Trazador o antisuero
Trazador o antisuero

Tampón

2. Coloque los cassettes de reactivos en el carrusel de reactivos.

3. Perfore los calibradores, los controles y las muestras en los pocillos. Para reducir al
mínimo la variación de los calibradores y los controles, es recomendable evitar los
bordes exteriores de las manchas de sangre seca; es decir, perforar un máximo de
4 discos de cada mancha de sangre seca en los cassettes de calibradores y
controles.

4. Lea el código de barras de la placa e introduzca la información acerca de las

muestras y los controles en el software GSP Workstation.

5. Comprobar que todos los pocillos tengan un disco de papel de filtro y que aparecen
en horizontal en la parte inferior de los pocillos. Cargue las placas en la cámara de
modo que todos los códigos de barras de las mismas estén orientados en la misma
dirección.
13906740-5 (es) 13
6. Coloque la cámara en el cargador de entrada de modo que los códigos de barras de
las placas estén orientados hacia fuera.

7. Espere hasta que se complete la carga y se organicen todas las placas. Si fuera
necesario, cargue más reactivos o consumibles tal y como indique la pantalla.
Después, el ensayo comienza automáticamente.

8. Retire las placas del cargador de salida al final del ensayo.

Procedimiento para ensayos con placas incompletas

Si no se utiliza una placa completa, retire la cantidad de tiras necesarias, colóquelas sobre
un bastidor y coloque el adhesivo del código de barras adjunto tal como se muestra en la
siguiente figura. Si el número de tiras es impar, añada una tira adicional. Debería ser una
tira dummy. Nota: Abra la lámina únicamente desde tres lados, dóblela y guárdela
dejando la información específica de la placa en el embalaje. Vuelva a colocar las tiras
restantes en el embalaje y vuelva a presionar la cubierta de aluminio hasta que esté bien
cerrada. Deje el secante en el embalaje. También puede guardar las tiras restantes en
una bolsa de plástico que se pueda sellar e incluya el secante.

Coloque la etiqueta
adhesiva de código de
La etiqueta barras en la placa, de
adhesiva de manera que el pocillo
código de barras A1 quede en este lado

NOTAS DE PROCEDIMIENTO

1. Para usar este kit, es necesario leer detenidamente este folleto, el manual del usuario
de GSP y saber utilizar el software GSP Workstation. Los reactivos suministrados con
este kit están pensados para utilizarlos como una sola unidad. No mezcle reactivos de
kits que tengan diferentes números de lote. No usar los reactivos de un kit después de
la fecha de caducidad impresa en la etiqueta del mismo.

2. No se pueden utilizar dos lotes de kits diferentes que tengan el mismo número de lote
de placa simultáneamente en el instrumento.

3. Cualquier desviación del procedimiento de ensayo puede afectar a los resultados.

4. Es importante evitar la contaminación de europio por el aumento de fluorescencia que

comportaría. El cambio del frasco de inductor DELFIA Inducer debe hacerse con
cuidado, evitando tocar los tubos.
14 13906740-5 (es)
5. Manipule las placas con precaución y evite tocar o contaminar la parte inferior de la
placa.

CÁLCULO DE RESULTADOS

El sistema GSP incorpora programas para la reducción de datos, y los resultados (curvas
de calibración, concentraciones de las muestras, etc.) se guardan en el software GSP
Workstation.

Control de elución

El software de GSP contiene una función denominada 'Control de elución'. La finalidad del
'Control de elución' es detectar si faltan discos de sangre en los pocillos después de la
medición de fluorescencia. Se realiza una medición adicional y, si se sospecha que falta
un disco de sangre, se envía un mensaje de notificación. En este caso, es necesario
volver a analizar las muestras.

Control de calidad

Se recomienda el uso de muestras de control para cerciorarse de la validez de los

resultados día a día. Los controles deben procesarse de la misma manera que las
muestras. El kit incluye controles a tres niveles distintos. Estos controles deben
procesarse en cada ensayo; si el ensayo incluye más de una placa, procesar controles en
cada placa. Cada laboratorio debe establecer su propio intervalo y valor medio
aceptables. La media establecida debe estar en ± 20% de los valores indicados en el
certificado de control de calidad. Se recomienda que los laboratorios establezcan sus
propios controles a diferentes niveles, además de los controles incluidos en el kit. Sólo se
deben notificar los resultados de las muestras si los resultados de los controles del
ensayo cumplen los criterios de aceptación establecidos por el laboratorio (20,21).
Asegúrese de que se cumplan los requisitos locales y nacionales aplicables.

Asimismo, se recomienda la participación en programas de control de calidad externos.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Al igual que con cualquier otra prueba de análisis in vitro, los datos obtenidos con el
inmunoensayo en manchas de sangre GSP Neonatal 17-OHP deben utilizarse
únicamente como una ayuda a otros procedimientos médicos establecidos, y sus
resultados deben interpretarse en conjunción con otros datos clínicos de los que disponga
el facultativo.

El tratamiento con dexametasona, hidrocortisona o prednisona de la madre o el recién

nacido podría producir falsos negativos (16).

Se reconocen los siguientes factores como causantes de resultados anormales en el

ensayo analítico:
- muestras de manchas que no estén impregnadas de sangre uniformemente
- muestras de manchas taladradas demasiado cerca del borde de la mancha de sangre
13906740-5 (es) 15
- muestras obtenidas o secadas incorrectamente
- manchas de sangre que no se eluyen debido al deterioro de la muestra, causado por
la exposición al calor y a la humedad
- contaminación del papel de filtro de la mancha de sangre con materia fecal

El espectro de enfermedad de la HAC oscila entre las formas “clásica, grave” con pérdida
de sal, “clásica, menos grave” virilizante simple y “moderada, no clásica”. El cribado
neonatal de la HAC no pretende detectar los casos moderados, aunque sí se detectan
algunos. A pesar del ajuste de las concentraciones de corte del 17-OHP en base al peso
al nacer y a la edad, los recién nacidos prematuros o con bajo peso al nacer y las
muestras tomadas con menos de 1 día de edad son factores muy importantes para la
obtención de falsos positivos (22).

Ver también la sección "NOTAS DE PROCEDIMIENTO".

VALORES ESPERADOS 3 E INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

El cribado del déficit de 21-OH mediante la medición de las concentraciones de 17-OHP

requiere determinar la política de cribado y definir las etapas, los valores de corte y el
seguimiento. La concentración de 17-OHP en recién nacidos depende de variaciones
demográficas, de la edad, del peso, si es prematuro y de si el parto fue gemelar
(16,23,24,25,26). El peso al nacer, la edad gestacional o ambos, son las categorías más
comunes de los programas de cribado. El laboratorio debe establecer sus propios valores
de corte, que pueden basarse en percentiles o en un intervalo normal (10). Los niveles de
corte relacionados, por ejemplo, con la edad gestacional, la edad del recién nacido y el
peso al nacer (16,27,28,29), deben validarse para cada población de cribado. Los valores
basados en el percentil proporcionados en esta sección sólo deben ser tratados como un
punto de referencia.

NOTA: No use un valor de corte basado en los datos recopilados en otro lugar o
mediante otro productos de 17-OHP que no sea el kit 3305-0010 GSP Neonatal
17-OHP kit.

El kit GSP Neonatal 17-OHP se probó en un laboratorio de cribado de rutina mediante la

medición de la concentración de GSP 17-OHP en un total de 1991 recién nacidos. Las
muestras eran muestras de cribado de rutina. Los resultados se analizaron teniendo en
consideración el peso al nacer de los recién nacidos, y se clasificaron según las
categorías de peso al nacer utilizadas generalmente en los laboratorios de cribado. La
gran mayoría de las muestras (98%) se tomó de recién nacidos con una edad
comprendida entre los 4 y los 5 días. 4 El número de muestras de cribado
correspondientes a la categoría de peso inferior no era suficiente para realizar el cálculo
de percentiles (n = 13). Por este motivo, los resultados también se analizaron
considerando la edad gestacional de los recién nacidos y se clasificaron en función de dos
categorías de edad gestacional. Los percentiles calculados para las dos categorías de

3
Estudio realizado para Wallac Oy, Turku, Finlandia.
4
La edad se calcula de la siguiente forma: fecha de recogida de la muestra – fecha de nacimiento +1.
16 13906740-5 (es)
peso y las dos categorías de edad gestacional se muestran en las tablas 1 y 2, a
continuación.

Tabla 1. Percentiles calculados para las categorías de peso al nacer

Percentiles
Peso al nacer GSP 17-OHP GSP 17-OHP
n
(g) (ng/mL de suero) (nmol/L de sangre)
90 95 99 90 95 99
1250–2249 50 20.7 41.6 na 5 28.4 57.0 na 6
≥ 2250 1928 4.75 5.73 9.56 6.51 7.85 13.1

Tabla 2. Percentiles calculados para las categorías de edad gestacional

Percentiles
Edad
gestacional n GSP 17-OHP GSP 17-OHP
(semanas) (ng/mL de suero) (nmol/L de sangre)
90 95 99 90 95 99
≤36 semanas 142 20.4 26.9 na 7 27.9 36.8 na 8
>36 semanas 1849 4.43 5.16 7.11 6.07 7.07 9.74

Los valores obtenidos en el caso de los recién nacidos con un peso muy bajo al nacer o
una edad gestacional muy corta pueden ser notablemente más altos, especialmente si la
edad en el momento en que se toma la muestra es poca.

Notificación de resultados

Se ha demostrado que el intervalo de medición es de 0.9 ng/mL de suero (1.2 nmol/L de

sangre) a 220 ng/mL de suero (300 nmol/L de sangre). Las muestras con valores
inferiores a 0.9 ng/mL de suero (1.2 nmol/L de sangre) deben calificarse como "inferiores
a 0.9 ng/mL de suero" o "inferiores a 1.2 nmol/L de sangre". Estos resultados no deben
considerarse exactos, pero sí pueden considerarse negativos para la HAC.

Las muestras con valores superiores a 220 ng/mL de suero (300 nmol/L de sangre) deben
calificarse como "superiores a 220 ng/mL de suero" o "superiores a 300 nmol/L de
sangre". Estos resultados no deben considerarse exactos, pero sí pueden considerarse
positivos para la HAC.

Existen varios protocolos de cribado que utilizan 17-OHP como el principal analito en el
cribado neonatal de la HAC. El algoritmo de seguimiento recomendado para el cribado de

5
na = no aplicable debido al reducido número de muestras de cribado
6
ver arriba
7
ver arriba
8
ver arriba
13906740-5 (es) 17
HAC es el descrito por el American College of Medical Genetics (Colegio estadounidense
de genética médica) (30).

CARACTERÍSTICAS ANALÍTICAS DEL ENSAYO 9

A continuación se muestra una curva de calibración típica obtenida con el kit 3305-0010
GSP Neonatal 17-OHP.

Precisión

La precisión se determinó de acuerdo con el documento EP5-A2 del NCCLS (31).

La variación del ensayo de 3305-0010 GSP Neonatal 17-OHP se determinó utilizando

manchas de sangre seca enriquecidas, tres lotes de kits diferentes y tres sistemas GSP.
El estudio se realizó durante 23 días, con 27 ensayos cada uno compuestos por 2 placas
y 4 replicados por muestra. Se utilizó el análisis de la varianza para calcular los siguientes
resultados:

9
Estudio realizado en Wallac Oy, Turku, Finlandia.
18 13906740-5 (es)
Tabla 3. Datos de precisión 17-OHP al emplear una curva de calibración completa en
cada placa:

Concentración Variación dentro Variación

media de Variación total
Muestra n del ensayo dentro del lote
17-OHP (ng/mL
de suero) 10 DE CV% DE CV% DE CV%
1 5.3 216 0.5 9.7 0.6 11.4 0.7 12.7
2 16.3 216 1.2 7.3 1.6 9.6 1.6 9.7
3 60.3 216 4.6 7.6 5.3 8.7 5.6 9.2
4 93.2 216 6.4 6.8 9.1 9.8 9.8 10.5
5 134 216 12.7 9.5 13.8 10.3 15.0 11.2
6 166 216 13.0 7.8 14.7 8.9 15.6 9.4

Tabla 4. Datos de precisión 17-OHP al emplear una curva de calibración válida durante
24 horas:

Concentración Variación dentro Variación

media de Variación total
Muestra n del ensayo dentro del lote
17-OHP (ng/mL
de suero) 11 DE CV% DE CV% DE CV%
1 5.4 216 0.5 10.1 0.6 12.1 0.7 13.2
2 16.3 216 1.3 7.7 1.8 10.8 1.8 10.9
3 60.8 216 4.7 7.7 5.2 8.6 5.6 9.2
4 94.1 216 6.5 6.9 8.9 9.5 9.6 10.2
5 135 216 13.1 9.7 14.7 10.9 15.7 11.6
6 167 216 13.4 8.0 14.7 8.8 15.5 9.3

Límite inferior de detección

Los límites de blanco, detección y cuantificación se determinaron de acuerdo con el

documento EP17-A del NCCLS (32).

El límite de blanco (LoB) de la 17α-OH-progesterona es de 0.42 ng/mL de suero

(0.58 nmol/L de sangre), definido como el percentil 95 de una distribución de muestras del
blanco (n = 120). El límite de detección (LoD) es de 0.9 ng/mL de suero (1.2 nmol/L de
sangre), basado en 120 determinaciones de 5 muestras de nivel bajo. El límite de
cuantificación (LoQ) es de 0.9 ng/mL de suero (1.2 nmol/L de sangre), definido como la
concentración más baja con un CV total igual o inferior al 20%.

10
Tenga en cuenta que para valores comparables de nmol/L en sangre (7.3, 22.3, 82.6, 128, 184 y 227), la
precisión medida como CV% es la misma.
11
Tenga en cuenta que para valores comparables de nmol/L en sangre (7.4, 22.3, 83.3, 129, 185 y 229), la
precisión medida como CV% es la misma.
13906740-5 (es) 19
Linealidad

La linealidad se determinó de acuerdo con el documento EP6-A del NCCLS (33).

Para la 17α-OH-progesterona, se ha demostrado que el método es lineal de 0.9 ng/mL de

suero (1.2 nmol/L de sangre) (LoQ) a 229 ng/mL de suero (314 nmol/L de sangre).

Interferencia

El kit GSP Neonatal 17-OHP se evaluó con el fin de determinar posibles interferencias de
acuerdo con el documento EP7-A2 del CLSI (34).

Las muestras ictéricas (bilirrubina no conjugada igual o inferior a 342 µmol/L, equivalente
a 20 mg/dL, y bilirrubina conjugada igual o inferior a 237 µmol/L, equivalente a 20 mg/dL),
lipémicas (Intralipid igual o inferior a 3000 mg/dL) y hemolíticas (hemoglobina adicional
igual o inferior a 0.5 g/dL) no interfieren en el ensayo. Las muestras que contienen hasta
12.5 mg/mL en sangre de EDTA, 0.0645 mol/L en sangre de citrato de sodio o 1.0 mg/mL
en sangre de heparina de litio, no interfieren con el ensayo.

Comparación de los métodos

La comparación de los métodos se determinó de acuerdo con el documento EP9-A2 del

NCCLS (35).

Se comparó el kit 3305-0010 GSP Neonatal 17-OHP (y) con el kit B024-112 AutoDELFIA
Neonatal 17-OHP (x) utilizando muestras de manchas de sangre enriquecidas y de
cribado de rutina dentro del intervalo de 1.5 a 187 ng/mL de suero (2.1 a 255 nmol/L de
sangre) con el kit B024-112, y de 1.5 a 180 ng/mL de suero (2.1 a 245 nmol/L de sangre)
con el kit 3305-0010. La correlación fue:

ng/mL de suero: y = 0.98x + 0.01; r = 0.98; (n = 177)

nmol/L de sangre: y = 0.98x + 0.02; r = 0.98; (n = 177)

Además, el kit GSP Neonatal 17-OHP se comparó con el kit B024-112 AutoDELFIA
Neonatal 17-OHP en un laboratorio de cribado de rutina midiendo la concentración de
17-OHP en un total de 2002 recién nacidos. Las muestras eran muestras de cribado
rutinario y retrospectivo. Los resultados se analizaron tomando en consideración el peso
al nacer y la edad gestacional de los recién nacidos.
20 13906740-5 (es)

Las tablas 5 y 6 presentan los datos de la comparación de ambos métodos

correspondientes a muestras de cribado de rutina según la categoría de peso al nacer.

Tabla 5. Resultados de las muestras de cribado de rutina por categoría de peso al nacer
obtenidos con el kit 3305-0010 GSP 17-OHP

Peso al 17-OHP (ng/mL de suero) 17-OHP (nmol/L de sangre)

n
nacer (g) Media Mediana Media Mediana
1250–2249 50 11.3 6.30 15.4 8.63
≥ 2250 1928 3.00 2.55 4.11 3.50

Tabla 6. Resultados de las muestras de cribado de rutina por categoría de peso al nacer
obtenidos con el kit B024-112 AutoDELFIA 17-OHP

Peso al 17-OHP (ng/mL de suero) 17-OHP (nmol/L de sangre)

n
nacer (g) Media Mediana Media Mediana
1250–2249 50 11.4 6.11 15.6 8.38
≥ 2250 1928 3.13 2.72 4.29 3.73
13906740-5 (es) 21
Las tablas 7 y 8 presentan los datos de la comparación de ambos métodos
correspondientes a muestras de cribado de rutina según la categoría de edad gestacional.

Tabla 7. Resultados de las muestras de cribado de rutina por categoría de edad

gestacional obtenidos con el kit 3305-0010 GSP 17-OHP

Edad 17-OHP (ng/mL de suero) 17-OHP (nmol/L de sangre)

gestacional n
(semanas) Media Mediana Media Mediana
≤36 semanas 142 11.2 6.10 15.4 8.31
>36 semanas 1849 2.81 2.50 3.85 3.43

Tabla 8. Resultados de las muestras de cribado de rutina por categoría de edad

gestacional obtenidos con el kit B024-112 AutoDELFIA 17-OHP

Edad 17-OHP (ng/mL de suero) 17-OHP (nmol/L de sangre)

gestacional n
(semanas) Media Mediana Media Mediana
≤36 semanas 142 11.7 6.26 16.0 8.57
>36 semanas 1849 2.94 2.66 4.03 3.65

Rendimiento del cribado

Utilizando los datos de muestras no afectadas, los valores de corte de los kits 3305-0010
GSP 17-OHP y B024-112 AutoDELFIA Neonatal 17-OHP se determinaron calculando las
concentraciones de 17-OHP correspondientes a los percentiles de población 90, 95 y 99
en ambos estudios.

Los resultados del cribado que incluyen las muestras de cribado retrospectivo
diagnosticadas de HAC, se muestran en las siguientes tablas.

El total de muestras para el estudio de casos de HAC confirmados fue de 11. Todas ellas
fueron muestras retrospectivas.

Datos del rendimiento del cribado por categoría de peso al nacer, tablas 9–13:

Tabla 9. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de peso de 1250 a

2249 g, percentil 90

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
20.7 ng/mL 20.7 ng/mL
+ + 5 1 4
+ – 1 0 1
– + 1 0 1
– – 44 0 44
Total 51 1 50
22 13906740-5 (es)
Tabla 10. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de peso de 1250 a
2249 g, percentil 95

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
41.6 ng/mL 44.0 ng/mL
+ + 3 1 2
+ – 1 0 1
– + 1 0 1
– – 46 0 46
Total 51 1 50

Tabla 11. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de peso ≥ 2250 g,

percentil 90

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
4.75 ng/mL 4.87 ng/mL
+ + 160 10 150
+ – 42 0 42
– + 43 0 43
– – 1693 0 1693
Total 1938 10 1928

Tabla 12. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de peso ≥ 2250 g,

percentil 95

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
5.73 ng/mL 5.78 ng/mL
+ + 85 10 75
+ – 22 0 22
– + 19 0 19
– – 1812 0 1812
Total 1938 10 1928
13906740-5 (es) 23
Tabla 13. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de peso ≥ 2250 g,
percentil 99

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
9.56 ng/mL 10.3 ng/mL
+ + 26 10 16
+ – 4 0 4
– + 2 0 2
– – 1906 0 1906
Total 1938 10 1928

Datos del rendimiento del cribado por categoría de edad gestacional, tablas 14-18:

Tabla 14. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de edad gestacional

≤ 36 semanas, percentil 90

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
20.4 ng/mL 20.4 ng/mL
+ + 14 1 13
+ – 1 0 1
– + 2 0 2
– – 126 0 126
Total 143 1 142

Tabla 15. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de edad gestacional

≤ 36 semanas, percentil 95

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
26.9 ng/mL 26.2 ng/mL
+ + 8 1 7
+ – 0 0 0
– + 0 0 0
– – 135 0 135
Total 143 1 142
24 13906740-5 (es)
Table 16. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de edad gestacional
> 36 semanas, percentil 90

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
4.43 ng/mL 4.59 ng/mL
+ + 152 10 142
+ – 41 0 41
– + 43 0 43
– – 1623 0 1623
Total 1859 10 1849

Tabla 17. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de edad gestacional

> 36 semanas, percentil 95

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
5.16 ng/mL 5.27 ng/mL
+ + 76 10 66
+ – 26 0 26
– + 26 0 26
– – 1731 0 1731
Total 1859 10 1849

Tabla 18. Resultados de cribado y diagnóstico real en la categoría de edad gestacional

> 36 semanas, percentil 99

GSP AutoDELFIA
3305-0010 B024-112 Total de HAC HAC no
valor de corte valor de corte individuos diagnosticada diagnosticada
7.11 ng/mL 7.36 ng/mL
+ + 26 10 16
+ – 3 0 3
– + 3 0 3
– – 1827 0 1827
Total 1859 10 1849
13906740-5 (es) 25
Reacción cruzada

La reacción cruzada se determinó de acuerdo con el documento EP7-A2 del CLSI (34).

En la siguiente tabla 19 se recoge la reacción cruzada (con un nivel de desplazamiento

del 50%) con otras sustancias:

Tabla 19. Reacción cruzada

Sustancia Reacción cruzada %

21-Deoxicortisol 0.84
17α-OH-Pregnenolona 0.80
Sulfato de 17α-OH-Pregnenolona 0.77
11-Deoxicortisol 0.49
Progesterona 0.20
Deoxicorticosterona 0.01
Cortisol <0.01
5ß-Dihidrocortisol <0.01
Cortisona <0.01
5ß-Dihidrocortisona <0.01
Dehidroisoandrosterona <0.01
Sulfato de dehidroisoandrosterona <0.01
Dexametasona <0.01
17ß-Estradiol <0.01
Estriol <0.01
Prednisona <0.01
Prednisolona <0.01
Pregnenolona <0.01
16α-OH-Pregnenolona <0.01
17α-OH pregnenolona glucurónida <0.01
16α-OH progesterona <0.01
20α-Dihidroprogesterona <0.01
Espironolactona <0.01
Testosterona <0.01

GARANTÍA

Los resultados aquí presentados se han obtenido por el procedimiento de ensayo

indicado. Cualquier cambio o modificación en el procedimiento no recomendado por el
fabricante puede afectar a los resultados, en cuyo caso Wallac Oy y sus filiales declinan
cualquier responsabilidad y garantía otorgada, expresa o tácita, sobre la comercialización
del producto y su uso.

En tal caso, Wallac Oy, sus filiales y sus distribuidores autorizados no asumen ninguna
responsabilidad por los daños o perjuicios directos o indirectos.
26 13906740-5 (es)
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28. Olgemöller, B., Roscher, A.A., Liebl, B., and Fingerhut, R. (2003): Screening for
congenital adrenal hyperplasia: Adjustment of 17-hydroxyprogesterone cut-off values
to both age and birth weight markedly improves the predictive value. Clin. Endocrinol.
Metab. 88 (12), 5790–5794.

29. Torresani, T., Grüters, A., Scherz, R., Burckhardt, J.J., Harras, A. and Zachmann, M.
(1994): Improving the efficacy of newborn screening for congenital adrenal hyperplasia
by adjusting the cut-off level of 17α-hydroxyprogesterone to gestational age.
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30. Newborn Screening Act Sheets and Confirmatory Algorithms. 06.09.2007 American
College of Medical Genetics http://www.acmg.net/resources/policies/ACT/Visio-
NBS_Elevated-17OHP_4-18-06.pdf.

31. National Committee for Clinical Laboratory Standards (2004): Evaluation of Precision
Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline – Second
Edition. NCCLS document EP5-A2. NCCLS, Wayne, Pennsylvania 19087–1898, USA.

32. National Committee for Clinical Laboratory Standards (2004): Protocols for
Determination of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline.
NCCLS document EP17-A. NCCLS, Wayne, Pennsylvania 19087–1898, USA.

33. National Committee for Clinical Laboratory Standards (2003): Evaluation of the
Linearity of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; Approved
Guideline. NCCLS document EP6-A. NCCLS, Wayne, Pennsylvania 19087–1898,
USA.

34. Clinical and Laboratory Standards Institute (2005): Interference Testing in Clinical
Chemistry; Approved Guideline–Second Edition. CLSI document EP7-A2. Clinical and
Laboratory Standards Institute, Wayne, Pennsylvania 19087-1898 USA.

35. National Committee for Clinical Laboratory Standards (2002): Method Comparison and
Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline – Second Edition.
NCCLS document EP9-A2. NCCLS, Wayne, Pennsylvania 19087–1898, USA.

PATENTES

Este equipo está protegido por las siguientes patentes:

US 7,211,440 y 7,381,567 y sus patentes correspondientes en los demás países.

Última revisión noviembre 2013

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Resumen del protocolo del ensayo GSP® Neonatal 17-OHP

USUARIO GSP
 Retire los tapones de los viales de
reactivos, coloque los reactivos en el
cassette de reactivos y ponga tapones
antievaporación en los viales de trazador y
de antisuero.
 Coloque los cassettes de reactivos en el
carrusel de reactivos.
 Perfore los calibradores, los controles y las
muestras en los pocillos.
 Introduzca los códigos de barras de las
placas y la información sobre las muestras
y controles en el software GSP
Workstation.
 Cargue las placas en el instrumento GSP.
 Espere a que se organicen todas las
placas. Si fuera necesario, cargue más
reactivos o consumibles.
El ensayo comienza automáticamente

 Dispensación de la solución tampón

(100 µL/pocillo)
 Dispensación de antisuero (5 µL/pocillo)
 Agitado e incubación (10 min)
 Dispensación de la solución tampón
(100 µL/pocillo)
 Dispensación del trazador (5 µL/pocillo)
 Agitado e incubación (3 h)
 Medición (control de elución)
 Retirada de discos
 Lavar (x 4)
 Dispensación del inductor DELFIA Inducer
(200 µL/pocillo)
 Agitado e incubación (5 min)
 Medición
 Retirada de líquidos
Al final del ensayo

 Retire las placas del cargador de salida

NOTA:
 El cassette de puntas debe cargarse completamente y el cassette de puntas de residuos
debe estar vacío cuando se inserte en el instrumento.