INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología

21 de enero del 2021.
Tercer examen parcial de Métodos Cuantitativos

Carreón Morales Luis Diego GRUPO:

Primer Apellido Segundo Apellido Nombre 3BM2
INSTRUCCIONES. La resolución del examen la debes hacer con procesador de palabras (Word) y editor de ecuaciones; en el
caso de los gráficos hacerlos en Excel y pegarlos en el documento de Word. Ya resuelto el examen, transformar el documento
a formato PDF y subirlo en el espacio asignado en la plataforma. NOTA: Solo se evaluarán documentos en formato PDF.

1. Cromatografía (Valor 15 puntos).

El siguiente cromatograma se obtuvo con una columna de las siguientes características 0.46 cm de diámetro interno, 25 cm de
longitud y 5 µm de tamaño de partícula. La velocidad de flujo de la fase móvil fue de 1.0 mL/min.

a) Definir el tiempo muerto, escribir su ecuación y calcularlo.

El tiempo muerto proporciona una medida de la velocidad de migración promedio de la fase móvil y es un parámetro
importante para identificar los picos del analito.

𝜋𝑟 2 𝐿
𝑡𝑚 = 0.6
𝐹

𝜋 ∗ 0.232 ∗ 25
𝑡𝑚 = 0.6
1

𝑡𝑚 = 2.49 𝑚𝑖𝑛
b) Estimar el tiempo de retención para cada pico (emplear el cromatograma).

𝑡𝑟1 = 20.2
𝑡𝑟2 = 24.7
𝑡𝑟3 = 27.5

c) Definir factor de capacidad, escribir su ecuación y calcularlo para los tres picos.

Describe la migración de una especie química a través de una columna cromatográfica.

𝑡𝑟 − 𝑡𝑚
𝑘′𝐴 =
𝑡𝑚
 20.2 − 2.49
𝑘′𝐴1 =
2.49
𝑘 ′𝐴1 = 7.11

24.7 − 2.49
𝑘′𝐴2 =
2.49
𝑘′𝐴2 = 8.91

27.5 − 2.49
𝑘′𝐴3 =
2.49
𝑘 ′𝐴3 = 10.04

d) Estimar el ancho de banda en la base para cada pico (emplear el cromatograma).

𝑤1 = 0.7 𝑚𝑖𝑛
𝑤2 = 0.9 𝑚𝑖𝑛
𝑤2 = 1 𝑚𝑖𝑛

e) Definir plato teórico, escribir su ecuación y calcularlo para los tres picos.

La teoría del plato explica con éxito la forma gaussiana de los picos cromatográficos y su velocidad de desplazamiento a
través de la columna

𝑡𝑟 2
𝑁 = 16 ( )
𝑤

20.2 2
𝑁1 = 16 ( )
0.7
𝑁1 = 13323.75

24.7 2
𝑁2 = 16 ( )
0.9
𝑁2 = 12051.16

27.5 2
𝑁3 = 16 ( )
1
𝑁3 = 12100

f) Definir altura de plato, escribir su ecuación y calcularlo para los tres picos.

Medida del grado de ensanchamiento de una banda cromatográfico.

𝐿
𝐻=
𝑁

20.2
𝐻1 =
13323.75
𝐻1 = 0.0015 𝑚𝑖𝑛

24.7
𝐻2 =
12051.16
𝐻2 = 0.002 𝑚𝑖𝑛
 20.2
𝐻3 =
12100
𝐻3 = 0.0016 𝑚𝑖𝑛

g) Definir factor de separación, escribir su ecuación y calcularlo para los picos 1–2 y 2–3.

El factor de separación es la retención relativa calculada para dos picos adyacentes.

𝑘 ′𝐴
𝛼=
𝑘′𝐵

7.11
𝛼1−2 =
8.91
𝛼1−2 = 0.7979

8.91
𝛼2−3 =
10.04
𝛼2−3 = 0.887

NOTA: Para estimar los tiempos de retención y la base de los picos, imprime el cromatograma y emplea regla o escalímetro
para realizar tus equivalencias de tal forma que tus mediciones resulten las más adecuadas.

2. Espectroscopia Uv-Vis.
A) (Valor 5 puntos). Un colorante A de concentración 0.0001M presenta una absorbancia de 0.982 a 420 nm y de 0.216 a 505
nm empleando una celda de 1.00 cm. Un colorante B de concentración 0.0002M presenta una absorbancia de 0.362 a 420
nm y de 1.262 a 505 nm empleando una celda de 1.00 cm. La absorbancia de una mezcla de los dos colorantes es de 0.820 a
420 nm y de 0.908 a 505 nm empleando una celda de 1.00 cm.
a) Calcular los coeficientes de absortividad molar del colorante A a 420 nm y 505 nm

𝐴
𝜀=
𝑏𝑐

0.982
𝜀=
(0.0001)(1)
A 420nm= 0.0000982 L mol-1 cm-1

0.216
𝜀=
(0.0001)(1)
A 505nm= 0.0000216 L mol-1 cm-1

b) Calcular los coeficientes de absortividad molar del colorante B a 420 nm y 505 nm.

0.362
𝜀=
(0.0002)(1)
A 420nm= 0.0000724 L mol-1 cm-1

1.262
𝜀=
(0.0002)(1)
A 505nm= 0.0002524 L mol-1 cm-1

c) Calcular la concentración de cada uno de los componentes en la mezcla de colorantes.

 B) (Valor 5 puntos). Para un indicador químico ácido-base, se leyeron las absorbancias del compuesto a una longitud de onda
de 530 nm a diferentes valores de pH como se muestra en la siguiente tabla

pH A

Ácido 2.00

4.00 1.78
4.60 1.40
5.00 0.92
5.40 0.48

6.00 0.16
Básico 0.00

a) Trazar el gráfico resultante del estudio logarítmico para determinar el pKa del indicador.

b) ¿Cuál es el valor del pKa del indicador?

pKa=4.929

c) ¿Cuál es el valor de la constante de acidez del indicador?

Ka=1.178𝑥10−5

3. Espectroscopia FTIR (Valor 5 puntos).

Para el siguiente espectro de infrarrojo:
a) Describir detalladamente el proceso para analizarlo.

Se comparan las bandas del espectro de infrarrojo con los valores de la tabla.

b) Indicar, de acuerdo con él análisis, a cuál de los siguientes compuestos corresponde:

Isopropanol.
Propanol.
La primera banda se ubica entre 3400 y 3300 con características de banda ancha por la vibración de enlace O-H.

La segunda banda se ubica en 3000 nos indica que es alqueno, y el espectro es por las vibraciones de tensión entre los enlaces C-H.

La tercera banda de espectro, que se ubica en 1500, son las vibraciones de tensión de CH 2.

La cuarta banda de espectro, que se ubica entre 1000-1250 indica que es un alcohol primario.

De acuerdo con lo observado podemos concluir que es un isopropanol.