Biorremediación

Puede realizarse para contaminantes orgánicos e

inorgánicos

(elementos radioactivos, metales, HC, explosivos, pesticidas)

– Se puede realizar in-situ

– También ex-situ mediante bio-reactores, biopilas,

bioleaching etc.
2
1-2 m3  1 m3

1.5- 3.2 t

14-22 m3 
22 – 35 t

Cubicar el suelo
Densidad real suelos minerales ≈ 2.65 t m-3
Suelos estructurado Densidad aparente: 300 m3 
1-1.8 t m-3
460 t
 Inciso; Traslado a vertedero, residuos inertes y peligrosos
Residuos sólidos inertes; valor medio aproximado muy variable 60 €/t

los residuos peligrosos no

reciclables que se
producen en España son:

exportados a terceros
países (Ej. Residuos
nucleares van a Francia,
coste 60.000 euros/día)

Coste
0,24 y 1,05 euros kg-1

o, en el caso de industrias
irresponsables, dejados en
vertederos de inertes.

Media UE: 160 €/t, el máximo en Noruega, ≈ 270 €/t (es más barato reciclar).
fraude del tratamiento de residuos en Chiloeches
La trama camuflaba supuestamente los residuos peligrosos para hacerlos pasar
por desechos de construcción y ahorrarse el coste del tratamiento correcto
Biorremediación /Hidrocarburos
Empleo de seres vivos para
recuperar el suelo mediante:
transformación, volatilización,
movilización o inmovilización
de contaminantes

objetivo: acelerar la capacidad

natural de recuperación del
suelo

http://www.epa.gov/superfund/remedytech/remed.htm
http://www.frtr.gov/matrix2/section2/tab_2_3.html
En cualquier caso…
Cuantos más microorganismos haya,
mayor será la eficiencia en la
biorremediación, ¿cómo se consigue?

Bioestimulación
Bioaumentación
la biodegradación tardará más tiempo cuanto menor
sea la biodegradabilidad del contaminante y cuanto
mayor sea la cantidad vertida.
En las Biopilas (bio-remediación ex situ)
•Se acelera o posibilita la atenuación natural de la
contaminación
•Se estimula la actividad microbiana añadiendo
nutrientes, minerales y agua y oxígeno

•La biopila se diferencia del land farming en:

– Es ex-situ
– Tiene aireación forzada (en vez de remoción del suelo)
– Requiere menor superficie

•Puede usarse para contaminantes e inorgánicos, en

este último caso, se deben recoger los lixiviados.
13
 Biopila

El suelo debe estar aislado: debe apilarse sobre una

superficie impermeable y debe ser cubierto por una capa
impermeable 14
Bio-lixiviado para inorgánicos. “Biominería”
• Se usan sobre todo para Cu y para extraer Au de ciertos minerales
que presentan dificultades a la extracción con cianuros. Su uso en Zn y Ni es minoritario.
• La pila de suelo/mineral triturado se riega con una solución diluida de ácido sulfúrico que contiene
bacterias y nutrientes. La solución drena a través de la pila y se recoge en canales de lixiviado. El
lixiviado se reutiliza hasta que está suficientemente enriquecido del metal. Después se hace una
extracción convencional, ejemplo, electrocinética.
• Las bacterias deben ser termófilas (temperatura pila 45-60ºC) y vivir a pH ~ 2
• Es necesario airear la pila
• Es necesario controlar la
temperatura. Se usan
geotextiles para cubrir la pila
para reducir la pérdida de
calor. (> T ºC > lixiviación).
• Aunque los microorganismos
pueden reproducirse
libremente, es aconsejable
inocular de tiempo en tiempo
nuevas poblaciones y
proporcionar sus
correspondientes condiciones
(aire, humedad, nutrientes).
• % Recuperación 70-90%, para
leyes <1% en 4-7 meses
 Biopila

Descontaminación de suelos de HIDROCARBUROS

16
videos biopilas

1.3 min
https://www.youtube.com/watch?v=8T_TbliM3GM

6 min:
https://www.youtube.com/watch?v=33xLVo_4dR0

Biorremediación. Video 32’

17
http://www.youtube.com/watch?v=-31_lof3xbM
Coste: 30-200 €/tonelada

muy variable, depende del tipo de

suelo, concentración del
contaminante, facilidad de accesos,
complejidad de las instalaciones
 Fuente:
Pasos para construir una biopila

• Estudio de caso: emplazamiento con importante actividad industrial

durante más de 70 años, con derrames y pérdidas de combustibles
(aceites hidráulicos, fuel oil y diesel) desde 11 tanques enterrados
• Tras la caracterización del subsuelo (la tipología de los contaminantes,
grado de afección y su extensión espacial), se procedió a la elaboración de
un estudio de evaluación de riesgos, para establecer los objetivos de
limpieza para suelos y aguas subterráneas en el emplazamiento para un
uso industrial
• Se evaluaron distintas alternativas de remediación, en base a criterios de
coste, tiempo necesario para alcanzar los objetivos, condicionantes
ambientales, etc.
• Una vez analizadas distintas alternativas de limpieza (landfarming, lavado
de suelos, vertedero, etc.), se optó por la excavación selectiva de suelos y
su posterior tratamiento mediante biopilas aireadas
Con carácter previo a la redacción del Proyecto de Remediación, se realizaron
ensayos de biotratabilidad, para determinar la capacidad del suelo contaminado a ser
biodegradado y establecer qué condiciones eran las óptimas para el tratamiento.
 Fuente:

Los ensayos de biotratabilidad

(imagen 1), se dividieron en dos
tipos:
• Ensayos de Nivel I:
principales características
físico-químicas del suelo (pH,
conductividad, capacidad de
campo, COT, contenidos en
nutrientes, etc.).
• Ensayos de Nivel II:
profundizar en los aspectos
de la biodegradación. Se
distinguen 3 grandes grupos
de ensayos realizados dentro
del Nivel II: • Respirometrías.
• Determinación de hidrocarburos.
• Determinaciones microbiológicas
 Fuente:

Biopila
• Base (imagen 2) de material limo-
arcilloso, compactado y nivelado
cimiento de la biopila.
• + manta geotextil
• + geomembrana (imagen 3) de
polietileno de alta densidad (PEAD,
1.5 mm espesor y termosoldadura)
para impermeabilizar
• + capa de drenaje (imagen 4) de
gravas silíceas y un tubo de drenaje
central.
• La construcción se completó con la
instalación del sistema de recogida
de lixiviados y de aireación
Simultáneamente a la construcción del
cimiento de las tres biopilas, se realizaron

• las excavaciones de los suelos, después

un proceso de homogeneización,
desterronado, aireación (imagen 5) y
• adición de nutrientes

• Estos suelos aireados y con nutrientes y

agua se colocan sobre la base descrita y
se tapan con láminas PEAD (imagen 7).

• La geometría final  pirámide

truncada (base 37 m de largo por 28 m
de ancho y 2 m altura), volumen~ 1.800
m³ de suelos.
• El conjunto se tapa con otra
geomembrana Fuente:
 Fuente:

• Mensualmente se realizan muestreos

con hand auger (barrena manual)
desde la parte superior de la biopila
para comprobar la concentración de
hidrocarburos de los suelos y
establecer el grado de biodegradación
alcanzado

señal

tiempo
La reducción de los distintos
compuestos del aceite hidráulico
contaminante, hasta una
concentración próxima a los objetivos
de este caso concreto de uso
industrial (1.900 mg/Kg).
 PARÁMETROS NECESARIOS PARA EVALUAR LA
EFECTIVIDAD DE LAS BIOPILAS

EN EL SUELO
EN EL CLIMA
•Población microorganismos EN EL CONTAMINANTE
•pH •Temperatura
•Temperatura •Volatilidad •Régimen de lluvias
•Humedad •Composición química •viento
•Nutrientes •Concentración
•Textura y estructura •Toxicidad

Volatilidad y biodegradabilidad

Contenido de arcillas, Tipo y concentración del HC

limos y arenas Presencia de metales
Porosidad
Permeabilidad
Densidad aparente
Nitratos, Fosfatos, relación C/N
otros iones

24
Población de microorganismos
Las bacterias implicadas en la biorremediación de
contaminantes derivados del petróleo deben ser AEROBIAS O
FACULTATIVAS y Heterótrofas.
Tomando una pequeña muestra de
suelo se hace un cultivo bacteriano o
de hongos y se cuenta el número de
Unidades Formadoras de Colonias
(CFUs “colony forming units”)

Los valores normales oscilan

entre 104 y 107 CFU g-1 suelo

1g

Debido a la toxicidad de los HC en los suelos, en biopilas suele haber

menos, pero se necesita un mínimo de 103 (CFU/g suelo) para que los
procesos en la biopila sean efectivos 25
La velocidad de degradación del hidrocarburo en el
suelo es una función de procesos físicos (humedad del
suelo, porosidad, temperatura, volatilidad del
contaminante, etc. ) pero también depende de la
capacidad de biorremediación del suelo la existencia
de organismos vivos.

En ausencia de
toxicidad, la
degradación del HC
sigue una
distribución
exponencial
negativa
La Concentración final (Cf) tras la atenuación se puede calcular:

Cf = Co e-kt
Co= concentración inicial
k =tasa de reducción del contaminante
t= tiempo necesario para conseguir Cf

Para calcular la tasa de reducción suele emplearse un término

denominado tiempo medio de degradación (t1/2) o tiempo de
vida media, que supone el tiempo necesario para que la Cf se
reduzca a la mitad.
Cf = Co e-kt; Cf /Co = 1/2 = e-kt; L(1)-L(2) = -kt

L2
t1/2= L2/k ó k = ---------
t1/2
Ejemplo

Butaclor, herbicida de pre-emergencia

4 y 5 Litros por hectárea
DL50 ratas 3.1 g/kg

¿Cuál es cuál?
Co/2

The bacterial community was then inoculated into the

soils at the ratio of 1.3 x 105 CFU g-1 soil.
1º) cálculo de k utilizando el concepto de tiempo de vida media
K NRS = L2/23,2 = 0,029
K RS = L2/18,0 = 0,038
K IRS = L2 /10,8= 0,064

Podríamos calcular, por ejemplo,

2º) el tiempo necesario para

conseguir una concentración
Determinada, ej. 10 ppm
desde 100 ppm

Tratamiento Cf Co k t= -L(Cf/Co)/k

NRS 10 mg/kg 100 mg/kg 0,029 79 días

RS 10 mg/kg 100 mg/kg 0,038 61 días
IRS 10 mg/kg 100 mg/kg 0,064 36 días
pH efectivo: 6-8

T efectiva: 10-45ºC

30
 1999  derrame de combustible en la Estación Casey, Antártida.
Invierno -40ºC – verano +9ºC (Australian Antarctic Division)
La zona está bajo legislacion del Protocolo ambiental del Tratado Antártico
(Anexo III).
1. Tratamiento in situ, barrera permeable active en 2005
2. Biopila en 2010-11. Es previsible que sea efectiva en los veranos.
 80 160 250 330 420
Time (days from 18/2/2011). Modified from Whelan et al. 2013.
Humedad en el suelo la bio-remediación es
efectiva entre un 40 y
85% de la Capacidad
de Campo. Ej. en un
suelo franco limoso,
la humedad
recomendada estará
entre:

12 y 26%

Si la biopila (o el
suelo) tiene menos
del 40% de la CC
 riego
tiene más del 86%
CC  sistema de
drenaje
33
 Nutrientes
• Los nutrientes más importantes son N, P; pueden
aparecer en ratios C:N:P desde 100:10:1 a 100:1:0.5
(cmol+ kg-1)

34
 Textura
La textura es la distribución de las
partículas de tamaños Arena, Limo y
Arcilla

El drenaje, la capacidad de
transmisión será menor cuanto
mayor contenido en arcilla.
Funcionan mejor biopilas con
suelos de texturas más bien
arenosas.

36
Concentración de los hidrocarburos (NGR: 50 ppm)
Concentración Efectividad de la biopila
≤ 50.000 ppm SÍ es efectiva, pero si la concentración TPH > 10.000 ppm
debe mezclarse con suelo limpio para reducirla
≥ 50.000 ppm NO es efectiva, condiciones tóxicas que inhiben la
biorremediación. Imprescindible mezcla con otros suelos

TPH > 50.000 mg/kg se

consideran tóxicos, debe
procederse a un tratamiento
previo (térmico, lavado o
mezcla) para bajar la
concentración antes de llevar
a cabo la biorremediación en
biopilas

R% = (Co-Cf)/Co
Requerimientos de la concentración final
Concentración final requerida Efectividad de la biopila
> 0,1 ppm y reducción de la SÍ es efectiva
concentración TPH < 95%
≤ 0.1 ppm y reducción > 95% Dudoso, deben hacerse
estudios piloto para comprobar
el potencial de reducción

• Por experiencia se sabe que es muy difícil reducir la concentración de

TPH más del 95% de la concentración inicial. Es debido a la presencia
de HC no biodegradables.
• Parece existir un límite mínimo de 0,1 mg/kg TPH como eficiencia
máxima en biopilas.

• Si se requiere más del 95% de reducción o concentraciones menores

de 0.1 mg/kg la biopila no estará indicada.
38
> 700 mm lluvia

construcción de una biopila 39

 síntesis
• 2-3 m altura, longitud variable
• Amplio rango de temperaturas 10-45ºC
• pH neutros
• Texturas mejor arenosas
• Suelos húmedos (40-85% CC)
• Nutrientes C:N:P 100:10:1
• HC < 50.000 ppm
• Tasas de reducción > 100 mgHC/kg suelo y día
• Duración varias semanas
• Coste: barato 30-200 eur/t

40
Abstract
The aim  to restore diesel-contaminated soils by means of a biological process
and to determine microbial metabolism which accompanies biodegradation of
hydrocarbons. Restoration of diesel-contaminated soil was achieved using the
biopile technique. (…) after 40 days The predominant microbes recovered from the
microcosms were bacteria and the achieved rate of soil decontamination was 70%.
Synergy was recorded between yeasts and bacteria for diesel biodegradation (…)
cometabolism. (…). Original results were obtained consisting of two different bacteria
growth phases during the biodegration of diesel in the biopile.
60 kg

2 kg 2 kg TRATAMIENTOS

control
Biopila
 Biopila Control

2 kg

Pre-tratamiento
Adición de
• Nutrientes
• Agua
• Aire
• Mezcla continua 3 días

Biopila

+
• Nutrients
• Oxygen
Control pH y T
Mezcla tras 1-2 semanas
 Variables a medir:

•UFC de bacterias
heterótrofas, hongos y
levaduras
•C orgánico
•C inorgánico
(…) •N total
•P disponible
•K
Co - Cf
Rendimiento = -------------
Co

Bioaumentación:
•Bacterias y levaduras:
Muestra suelo cultivada en agar a 30ºC
24-48h
•Hongos:
Muestra suelo cultivada en agar
Saboureaud oxitetraciclina a 20ºC, 5 días
 El crecimiento de los
microorganismos
también es exponencial
mientras duran las
condiciones óptimas
para una comunidad
determinada

Como mínimo 106 /kg suelo

Óptimo: 106/g suelo

 pH

C/N

Rango
normal
N total (%) 0,2-0,5
P asimilable (ppm) 12-18
K (cmol+/kg) 0,6-0,9
 Hongos

1. En la biopila  predominan bacterias y

levaduras en la primera fase de crecimiento
2. Los hongos no degradan bien HC
3. Recuperan su número cuando hay sub-
productos de degradación de HC producido
por bacterias
4. En el control los hongos no desaparecen
5. Hay productos intermediarios tóxicos
generados por el metabolismo de bacterias y
levaduras en la biopila
 Cf por degradación en el suelo
sin tratamiento 5,3 g/kg

Rendimiento 9%

Cf por degradación en el suelo

con tratamiento 1,7 g/kg

Rendimiento 71%

R% = (Co-Cf)/Co

Rendimiento Control
5.8 - 5.3
= ------------- = 0.086 ~ 9%
5.8

Rendimiento Biopila
5.8 – 1.7
= ---------------- = 0.706 ~ 71%
5.8
 R% = (Co-Cf)/Co
Conclusions
Aromáticos

Alifáticos

En el microcosmos control el
rendimiento es 8-10%,
independientemente del tipo de HC

En el microcosmos biopila, el
rendimiento es, de media
50% para aromáticos
70% para alifáticos