Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela símica

Orientaciones provisionales
23 de mayo de 2022

Puntos destacados
• El objetivo de la respuesta mundial al brote multipaís de viruela símica es su interrupción.
• Se deberían ofrecer pruebas a toda persona cuya situación se ajuste a la definición de caso presunto de viruela símica.
• El tipo de muestra recomendada para confirmar el diagnóstico de viruela símica en los casos presuntos es material tomado de la
lesión cutánea, en particular hisopados del exudado de las lesiones, los bordes superiores (techos) de más de una lesión o las
costras de las lesiones.
• La confirmación en laboratorio de las muestras de un presunto caso se realiza mediante pruebas de amplificación de ácidos
nucleicos (PAAN), como la prueba de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) convencional o en tiempo real. Las PAAN
pueden ser genéricas para los ortopoxvirus (OPXV) o específicas para el virus de la viruela símica (MPXV, preferiblemente).
• Todas las manipulaciones realizadas en laboratorio de muestras procedentes de casos presuntos, probables o confirmados de
viruela símica deberían realizarse de acuerdo con un enfoque basado en los riesgos.
• Además de las PAAN, la secuenciación es útil para determinar el clado del virus y comprender la situación epidemiológica. Se
alienta encarecidamente a los Estados Miembros que compartan los datos de las secuencias genéticas del MPXV en las bases
de datos disponibles y de acceso público.
• Se pide a los Estados Miembros que, en virtud del Reglamento Sanitario Internacional (RSI) 2005, notifiquen de inmediato a la
OMS los resultados positivos obtenidos en laboratorio, así como las pruebas de laboratorio genéricas para la detección de OPXV
que todavía no se hayan confirmado.
• La OMS puede prestar asistencia a los Estados Miembros para acceder a pruebas mediante derivación. De ser necesario, los
Estados Miembros pueden ponerse en contacto con la oficina regional pertinente de la OMS.

Introducción
El virus de la viruela símica (MPXV) es un virus de ADN bicatenario perteneciente al género Orthopoxvirus de la familia Poxviridae. Los poxvirus
provocan enfermedades en los seres humanos y en muchos animales; por lo general la infección da lugar a la formación de lesiones, nódulos
cutáneos o exantema diseminado. Otras especies de Orthopoxvirus (OPXV) patógenas en los seres humanos son el virus de la viruela de las
vacas y el virus variólico (que provoca la viruela, una enfermedad que ya se ha erradicado). El virus de la vaccinia (Vaccinia virus) es también un
OPXV utilizado para vacunar y fue esencial en la erradicación de la viruela, conseguida en 1980. El MPXV debe su nombre a que se detectó por
primera vez en monos. Se encuentra principalmente en roedores, si bien el reservorio todavía no está determinado. Se conocen dos clados de
MPXV, uno endémico en África occidental y un segundo en la región de la cuenca del Congo.

La manifestación típica de la viruela símica está bien descrita y consiste en un breve periodo prodrómico febril seguido de la aparición progresiva
de un exantema clásico con lesiones induradas y umbilicadas (deprimidas centralmente), que dan comienzo en la cabeza o el rostro y progresan
hacia las extremidades y el tronco. Todas las lesiones progresan en la misma etapa pasando de máculas a pápulas, vesículas y pústulas para
finalmente evolucionar hacia costras que se secan y caen al cabo de dos a cuatro semanas. En muchas ocasiones aparecen enantemas (llagas
o úlceras) en la boca y las lesiones pueden afectar a los ojos y/o la zona genital. La hinchazón de los ganglios linfáticos es típica de la viruela
símica. Las lesiones pueden ser hemorrágicas o fusionarse en ampollas grandes. En este brote multipaís se ha sugerido la posible evolución
atípica de las lesiones, que se inician en la zona genital. Puede que a muchas de las personas con esta afección se les hayan realizado pruebas
para otras enfermedades infecciosas en el momento de la detección.

Las presentes orientaciones tienen por objeto ofrecer recomendaciones provisionales a los laboratorios y otras partes interesadas que intervienen
en el diagnóstico de la viruela símica. La OMS se ha ocupado de su elaboración tras consultar a expertos en la materia que trabajan en
laboratorios y tienen experiencia en la manipulación y detección de MPXV y OPXV, así como a especialistas en el desarrollo de ensayos
diagnósticos para los OPXV, y someter las recomendaciones a su examen. Si los países disponen de normas de reglamentación que se aplican
a las pruebas clínicas de laboratorio realizadas con muestras humanas, tales normas deberán observarse debidamente. La OMS sigue de cerca
la evolución de la situación en relación con este brote y revisará las recomendaciones y publicará actualizaciones cuando sea necesario. A menos
que se revise, la validez del presente documento será de un año (mayo de 2023).

Indicaciones para la realización de pruebas

Se deberían ofrecer pruebas a toda persona cuya situación se ajuste a la definición de caso presunto de viruela símica (1). La decisión de realizar
pruebas debe basarse en factores tanto clínicos como epidemiológicos, vinculados a una evaluación de la probabilidad de infección. Debido a la

-1-
 Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela símica: Orientaciones provisionales

variedad de afecciones que causan erupciones cutáneas y dado que el cuadro clínico puede ser atípico más a menudo en este brote, quizá sea
difícil diferenciar la viruela símica únicamente en función del cuadro clínico, especialmente en los casos con manifestaciones atípicas. Por tanto
es importante considerar otras posibles causas ante lesiones cutáneas aisladas o un exantema diseminado. Ejemplos de otras etiologías de
lesiones cutáneas de apariencia similar en las diferentes etapas de evolución son el virus del herpes simple, el virus de la varicela-zóster, el virus
del molusco contagioso, los enterovirus, el sarampión, la sarna, el Treponema pallidum (causante de la sífilis), las infecciones cutáneas
bacterianas, las alergias a medicamentos, los parapoxvirus (causantes del ectima contagioso y afecciones conexas) y el chancroide o chancro
blando (2).

Recogida, envío y almacenamiento de muestras

Procedimientos de seguridad. Debe garantizarse la observancia de los procedimientos operativos normalizados y debe formarse al personal de
laboratorio para que se ponga y se quite correctamente el equipo de protección personal (EPP) y para la recogida, almacenamiento,
envasado/embalaje y transporte de las muestras. Todas las muestras recogidas para su análisis en laboratorio deben considerarse
potencialmente infecciosas y manipularse con precaución. Deben tomarse medidas con arreglo a la evaluación de riesgos para reducir al
mínimo el riesgo de transmisión en laboratorio al analizar sistemáticamente muestras clínicas de pacientes confirmados o con presunta viruela
símica. Entre las medidas pueden incluirse las siguientes: limitar el número de operarios que procesen las muestras a tan solo los operarios
con competencia demostrada, llevar puesto el EPP adecuado, utilizar precauciones normalizadas aplicadas rigurosamente y evitar todo
procedimiento que pueda generar aerosoles infecciosos. Si es adecuado y se dispone vacunas, se alienta a considerar la vacunación del
personal. Entre los desinfectantes eficaces se incluyen los compuestos de amonio cuaternario y un 0,5% (o 200 ppm) de lejía (recién
fabricada).
Se debe garantizar el cumplimiento riguroso de las directrices de prevención y control de infecciones durante la recogida y la manipulación de
muestras (las orientaciones sobre el manejo clínico y sobre la prevención y control de infecciones están en proceso de elaboración).

Muestras que deben recogerse. El tipo de muestra recomendada para confirmar en laboratorio la viruela símica es material tomado de la lesión
cutánea, en particular hisopados de la superficie o del exudado de las lesiones, los bordes superiores (techos) de más de una lesión o las costras
de las lesiones. Se frotará la lesión vigorosamente con el hisopo para garantizar la recogida de ADN vírico adecuado. Los hisopados se pueden
colectar en tubos secos o en tubos con medios de transporte para virus (MTV). Deben recogerse en un solo tubo dos lesiones del mismo tipo,
preferiblemente de diferentes lugares del organismo y que difieran en apariencia. Los líquidos de las lesiones, las costras y las vesículas no
deben mezclarse en el mismo tubo. Si los recursos lo permiten, podrá recogerse material en dos tubos para reducir al mínimo el riesgo de que
las muestras o los inhibidores no sean adecuados, si bien solo se analizará una muestra y la segunda solo se utilizará si la primera no ofrece
resultados concluyentes. Además de una muestra de las lesiones, se recomienda la recogida de un hisopado orofaríngeo. Ahora bien, como no
se dispone de muchos datos sobre la precisión de este tipo de muestras para el diagnóstico de la viruela símica, una muestra de hisopado de
garganta negativa debe interpretarse con precaución.
Debido a que el brote actual aún está en proceso de estudio, puede considerarse la recogida de otros tipos de muestras con fines de investigación
si lo permite la junta de examen ético pertinente, y se dispone de suficientes conocimientos médicos y de laboratorio especializados para su
recogida, manipulación y almacenamiento en condiciones de seguridad. Pueden ser muestras de orina, semen e hisopados rectales y/o genitales
a partir de las indicaciones basadas en el cuadro clínico, en particular la ubicación de las lesiones. La sangre en EDTA puede facilitar la detección
del MPXV pero puede que no contenga el número elevado de virus detectado en las muestras de lesiones, ya que cualquier viremia ocurre
temprano en el curso de la infección, por lo general en el periodo prodrómico, y antes de que las lesiones cutáneas se manifiesten. Se considerará
la posibilidad de efectuar una biopsia de la lesión durante la etapa macular solo si está indicada clínicamente, y solo podrá realizarla personal
con la capacitación adecuada. Estos otros tipos de muestras no están destinados a las pruebas diagnósticas de rutina y no deben recogerse
fuera de los entornos de investigación. En el anexo se incluyen datos adicionales sobre la recogida y almacenamiento de las muestras.
La detección de anticuerpos a partir de plasma o suero no debería utilizarse como único método para diagnosticar la viruela símica. Ahora bien,
la detección de IgM en pacientes que han pasado recientemente la fase aguda de la enfermedad o de IgG en muestras de suero emparejadas,
recogidas con un intervalo de al menos 21 días, la primera de las cuales se habrá recogido durante la primera semana de la enfermedad, puede
ayudar al diagnóstico si las muestras analizadas no ofrecen resultados concluyentes. Haberse vacunado recientemente puede interferir con las
pruebas serológicas.
Envasado/embalaje y envío de muestras clínicas. Las muestras deben almacenarse refrigeradas o congeladas en el plazo de una hora desde
su recogida y transportadas al laboratorio lo antes posible tras su obtención. La manipulación y almacenamiento correctos de las muestras
durante el transporte son esenciales para que la prueba diagnóstica sea precisa (véase el anexo). El transporte de muestras debe cumplir toda
normativa nacional y/o internacional aplicable, incluida la Reglamentación Modelo de las Naciones Unidas y cualesquiera otras normativas
aplicables en función del modo de transporte que se utilice. Para el transporte internacional, las muestras procedentes de casos presuntos,
probables o confirmados de MPXV, incluidas las muestras clínicas, las cepas víricas aisladas y los cultivos, deben transportarse como
categoría A, UN2814 («sustancia infecciosa que afecta al ser humano»). Todas las muestras que se transporten deben contar con un sistema
de triple envasado/embalaje, etiquetado y documentación adecuados. Para el envío se requiere un expedidor con certificado para el transporte
de mercancías peligrosas. Para más información sobre los requisitos de transporte de sustancias infecciosas, consúltese la Guía sobre la
reglamentación relativa al transporte de sustancias infecciosas 2021-2022 (3).
Almacenamiento de las muestras. Las muestras recogidas para el estudio del MPXV deben refrigerarse (entre 2 ºC y 8 ºC) o congelarse (a -20 ºC
o menos) en un plazo de una hora desde la recogida. Si el tiempo de transporte hasta el análisis de la muestra es superior a 7 días, las muestras
deberían almacenarse a -20 ºC o menos. Se recomienda el almacenamiento de muestras a largo plazo (>60 días desde la recogida) a -70 ºC. El
ADN vírico presente en el material de lesiones cutáneas es relativamente estable si se conserva en un entorno oscuro y frío, lo cual puede
considerarse si no es posible mantener la cadena de frío (4), pero no se recomienda transportar la muestra a temperatura ambiente hasta que

-2-
 Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela símica: Orientaciones provisionales

se realicen nuevos estudios que aporten evidencias de que la calidad de las muestra no se ve afectada. Se deben evitar ciclos repetidos de
congelación-descongelación porque pueden reducir la calidad de las muestras. *Además de los materiales específicos de recogida indicados en
el anexo, pueden que se necesiten otros materiales y equipos como: contenedores de transporte y bolsas y embalajes/envases triples para la
recogida de muestras, neveras y bolsas de conservación en frío o hielo seco, equipos estériles de extracción de sangre (por ejemplo, agujas,
jeringas y tubos), etiquetas y marcadores permanentes, EPP y materiales para la descontaminación de superficies.

Métodos y algoritmo para las pruebas de laboratorio

Las pruebas de detección del MPXV deben realizarse en laboratorios debidamente equipados, a cargo de operarios capacitados en los
procedimientos pertinentes técnicos y de seguridad. La confirmación de la infección por MPXV se basa en pruebas de amplificación de ácidos
nucleicos (PAAN), utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) convencional o en tiempo real, para la detección de secuencias
específicas de ADN vírico. La PCR se puede usar sola o en combinación con la secuenciación. Varios grupos de investigación han elaborado
protocolos de PCR validados para la detección de OPXV y más específicamente MPXV, algunos de los cuales incluyen la distinción de los clados
de la cuenca del Congo y de África occidental (5-9). Algunos protocolos implican dos pasos, en los que la primera reacción de PCR detecta el
OPXV, pero sin identificar la especie. Este puede ir seguido de un segundo paso, que puede basarse en PCR o utilizar secuenciación, para
detectar específicamente el MPXV. Antes de utilizar un ensayo para analizar muestras clínicas humanas en un laboratorio, el ensayo debería ser
validado y/o verificado por personal debidamente capacitado.

Reactivos. Los reactivos deben almacenarse con arreglo a las recomendaciones del fabricante. En la bibliografía científica se han publicado
varios conjuntos de secuencias del cebador y la sonda para PCR de detección de OPXV y específicamente de MPXV que pueden utilizarse para
la elaboración interna de ensayos en laboratorios con las capacidades adecuadas (5–7). Se están preparando kits de PCR que detectan OPXV
o específicamente MPXV (10, 11), pero en estos momentos no se dispone de kits de PCR o de serología comerciales que estén ampliamente
disponibles. Se puede solicitar material de control positivo para PCR a iniciativas especializadas (12). Las mejores prácticas aconsejan que el
control positivo se incluya en una concentración baja (por encima del umbral de detección) pero fácilmente detectable; incluir cuando sea posible
materiales de control de la calidad puede contribuir a controlar los problemas que puedan surgir en los ensayos. Los controles deberían facilitar
información sobre 1) la calidad de las muestras, 2) la calidad del ácido nucleico, y 3) la calidad del proceso. Las PCR pueden ser sumamente
sensibles, de modo que debería hacerse lo posible por limitar la contaminación, y deberían utilizarse controles negativos en cada tanda para
verificar que no haya habido contaminación. Los controles de la integridad de las muestras (por ejemplo, RNase P), y los controles de extracción,
resultados positivos e inhibición pueden ayudar a distinguir un falso negativo de un negativo verdadero. Los controles deberían utilizarse con
arreglo a los procedimientos operativos normalizados de los laboratorios. Si alguno de los controles de los ensayos falla, deberá repetirse la
prueba.

Eliminación de desechos. Todos los desechos que puedan contener MPXV deben descontaminarse antes de su eliminación con un método
aprobado, como la esterilización en autoclave o la desinfección con agentes químicos, según dispongan los procedimientos específicos del
laboratorio.

Microscopia electrónica. Puede utilizarse la microscopia electrónica para evaluar si la muestra tiene poxvirus, pero dada la disponibilidad de
ensayos moleculares y las elevadas competencias técnicas e instalaciones requeridas, este método no se utiliza habitualmente para diagnosticar
poxvirus.

Cultivo vírico. El aislamiento del virus no se recomienda como procedimiento diagnóstico sistemático y solo debería efectuarse en laboratorios
con experiencia e instalaciones de confinamiento adecuadas. Dado que esos métodos no están recomendados como parte del diagnóstico
sistemático, los detalles específicos de dicha metodología no se tratan en el presente documento.

Interpretación de los resultados del laboratorio

Para confirmar la infección por MPXV debe tenerse en cuenta la información clínica y epidemiológica. La detección positiva mediante una PCR
para OPXV seguida de la confirmación de MPXV mediante PCR y/o secuenciación, o la detección positiva mediante una PCR para MPXV en
presuntos casos indican la confirmación de la infección por MPXV. Si bien es preferible realizar pruebas confirmatorias específicas de MPXV, la
detección positiva mediante PCR para OPXV se considera suficiente para la confirmación de presuntos casos en laboratorio. Se pide a los
Estados Miembros que notifiquen de inmediato a la OMS los casos confirmados en laboratorio.

Cuando el cuadro clínico y la epidemiología apuntan a una infección por MPXV pese a resultados negativos en las PCR, puede ser útil realizar
pruebas serológicas para investigar más a fondo una infección previa con fines epidemiológicos. Son varios los factores que pueden contribuir a
un resultado falso negativo, como la calidad deficiente de la muestra, la manipulación o el envío inadecuados, o razones técnicas inherentes a la
prueba, por ejemplo, la imposibilidad de extraer ADN.

Además de utilizar la secuenciación para el diagnóstico, los datos de las secuencias genéticas también pueden aportar información valiosa para
ayudar a comprender los orígenes, la epidemiología y las características del virus, por ejemplo, si los casos proceden de una única introducción
o de múltiples introducciones de otros lugares. En esta fase se recomienda la secuenciación de MPXV a partir de tantas muestras positivas de
diferentes pacientes como sea posible. La OMS alienta encarecidamente a los países y los laboratorios a compartir los datos de secuencias
genéticas, en particular datos brutos siempre que sea posible, de forma oportuna a través de las bases de datos de acceso público disponibles.
Los datos de las secuencias genéticas pueden generarse utilizando el método Sanger o métodos de secuenciación de nueva generación.

-3-
 Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela símica: Orientaciones provisionales

Gestión de los riesgos biológicos

Se recomienda que toda manipulación de muestras procedentes de casos presuntos, probables o confirmados de viruela símica en el laboratorio
se realice de acuerdo con un enfoque basado en los riesgos. Cada laboratorio debe realizar una evaluación local (es decir, institucional) del
riesgo. Al manipular muestras biológicas en el laboratorio, deben cumplirse los requisitos básicos de bioseguridad, similares a los anteriormente
denominados de nivel de bioseguridad 2, y deben aplicarse medidas de control reforzadas basadas en la evaluación local del riesgo.
Durante la etapa de procesamiento de muestras puede contraerse una infección por MPXV a partir de material contaminado o por procesos
inadecuados. Por tanto, se recomienda la aplicación de medidas de bioseguridad reforzadas además de los requisitos básicos, incluidos los
siguientes, para realizar ensayos clínicos sin peligro de propagación del virus:
• Las muestras de pacientes con presunta infección por MPXV deben manipularse en una cámara de bioseguridad de clase I o II que
funcione correctamente, antes de la inactivación de la muestra. Para las muestras debidamente inactivadas no se requiere una cámara
de bioseguridad.
• El personal de laboratorio debe usar EPP adecuado, especialmente para manipular las muestras antes de la inactivación.
• Cuando se requiera el uso de una centrifugadora para un procedimiento, se deben usar vasos de seguridad o rotores sellados.
Deberán considerarse otras medidas de control para procedimientos concretos, como los procedimientos que forman aerosoles, con arreglo a la
evaluación local del riesgo. Para más información sobre los requisitos básicos de bioseguridad y las medidas de control reforzadas, véase la
cuarta edición del Manual de bioseguridad en el laboratorio, publicado por la OMS (13).

Salud ocupacional
Varias vacunas antivariólicas, que contienen el virus de la vaccinia, ofrecen protección cruzada frente a otros OPXV, incluido el de la viruela
símica, y por tanto las autoridades nacionales de salud deben efectuar evaluaciones del riesgo y considerar la posibilidad de organizar la
vacunación de los trabajadores de atención de salud, incluido el personal del laboratorio, y de otro personal que corra el riesgo de exposición a
personas o muestras con MPXV (14). Para la prevención de la viruela (que se declaró erradicada en 1980) se aprobó en 2013 una vacuna no
replicante que contiene la cepa de Ankara de la vaccinia modificada, conocida como MVA-BN. En 2019, dos rigurosos organismos de
reglamentación la aprobaron también para la prevención de la viruela símica. Esta vacuna también puede considerarse para la prevención de la
viruela símica en entornos de trabajo. Asimismo, se ha aprobado un tratamiento antivírico contra la viruela y la viruela símica. Las orientaciones
sobre la vacunación y el tratamiento se facilitarán por separado.

Notificación de casos y de los resultados de las pruebas

Los laboratorios deben cumplir los requisitos nacionales en materia de notificación. Todos los resultados de las pruebas, ya sean positivos o
negativos, deben comunicarse de inmediato a las autoridades nacionales. Se recuerda a los Estados Partes en el RSI su obligación de compartir
con la OMS información de salud pública pertinente en relación con los eventos que hayan notificado a la OMS, utilizando para ello el instrumento
de decisión que figura en el anexo 2 del RSI (2005) (15).

Creación de redes mundiales de laboratorios

El acceso a pruebas de laboratorio rápidas y precisas a partir de muestras de los casos que se están investigando es una parte esencial del
diagnóstico y la vigilancia de esta infección emergente. Todos los países deberían tener acceso a pruebas fiables, bien en el ámbito nacional o
mediante derivación a laboratorios de otros países que estén dispuestos y en condiciones de realizar diagnósticos de OPXV o MPXV. A través
de sus oficinas regionales, la OMS puede prestar asistencia a los Estados Miembros para que accedan a pruebas a través de derivación. Cuando
sea adecuado y se lleve a cabo en condiciones de seguridad, la inactivación de las muestras en el laboratorio local puede facilitar la derivación
y simplificar las dificultades logísticas. Se alienta a los países a que compartan sus datos de secuencias con el fin de comprender mejor el brote
actual. Los Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades de los Estados Unidos es el centro colaborador de la OMS para la viruela
y otras poxvirosis (Estados Unidos de América) y la Institución Federal de Investigación Presupuestaria - Centro Estatal de Investigación sobre
Virología y Biotecnología, «VECTOR» (Federación de Rusia) es el centro colaborador de la OMS para el diagnóstico de las ortopoxvirosis y
depositario de cepas y ADN de virus variólico.

Proceso y metodología
El presente documento se elaboró en consulta con expertos externos mundiales en el ámbito de los OPXV y con otros conocimientos
especializados en materia de laboratorio. También se consultó a personal de toda la OMS con conocimientos especializados en diagnóstico de
laboratorio, epidemiología y manejo clínico. La presente versión de las orientaciones incorpora los últimos conocimientos y características del
virus y aborda las preguntas y cuestiones recibidas de las oficinas de la OMS en los países y las oficinas regionales y por otros canales.

-4-
 Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela símica: Orientaciones provisionales

Limitaciones
Las presentes orientaciones tienen por objeto proporcionar recomendaciones provisionales para el diagnóstico de la infección por MPXV en el
contexto del actual brote multipaís declarado en varias regiones del mundo (mayo de 2022). La OMS publicará actualizaciones a las presentes
orientaciones provisionales según sea necesario. Las orientaciones se actualizarán a medida que se disponga de información más concreta
sobre la epidemiología del presente brote.

Planes de actualización
La OMS colabora con expertos de todo el mundo y sigue atentamente la evolución de la situación por si hubiera cambios que pudieran afectar a
las presentes orientaciones provisionales. De ser así, la OMS publicará una nueva actualización. En caso contrario, la validez de las presentes
orientaciones provisionales será de un año a partir de la fecha de publicación.

Colaboradores
Colaboradores externos con conocimientos especializados en la materia: Lateefat Amao, Nigeria Centre for Disease Control (Nigeria); Daniel
Bailey, UK Health Security Agency (Reino Unido); Meera Chand, UK Health Security Agency (Reino Unido); Francesca Colavita, Spallanzani
Institute (Italia); Anna Rosa Garbuglia, Spallanzani Institute (Italia); Claire Gordon, UK Health Security Agency (Reino Unido); Susan Hopkins, UK
Health Security Agency (Reino Unido); Marion Koopmans, Erasmus Medical Centre (Países Bajos); Rinat Maksyutov, VECTOR (Federación de
Rusia); Emmanuel Nakouné, Institut Pasteur Bangui (República Centroafricana); Andreas Nitsche, Robert Koch Institute (Alemania); Richard
Njouom, Centre Pasteur in Cameroon (Camerún); Tommy Rampling, UK Health Security Agency (Reino Unido); Chantal Reusken, RIVM (Países
Bajos); Jacqueline Weyer, National Institute for Communicable Diseases (Sudáfrica).
Colaboradora externa: Christina Hutson, CDC (EE.UU.).
Colaboradores de la Sede de la OMS y personal de las oficinas regionales: Yahaya Ali Ahmed, Amal Barakat, Lisa Carter, Sébastien Cognat,
Belinda L Herring, Manish Kakkar, Kazunobu Kojima, Rosamund Lewis, Jairo Mendez-Rico, Karen Nahapetyan, Dhamari Naidoo, Bernard Onoja,
Mark D Perkins, Jilian Sacks, Satoshi Shimada, Lorenzo Subissi, Maria Van Kerkhove, Karin Von Eije y Pushpa Wijesinghe.

Declaración de intereses
Los expertos de la red cumplimentaron un acuerdo de confidencialidad y una declaración de intereses. Se examinaron los formularios de
declaración de intereses y no se observaron conflictos relacionados con el apoyo al presente de orientación.

-5-
 Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela símica: Orientaciones provisionales

Referencias
1. Organización Mundial de la Salud. Surveillance, case investigation and contact tracing for Monkeypox [Internet]. Disponible en:
https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/354486/WHO-MPX-Surveillance-2022.1-eng.pdf

2. Organización Mundial de la Salud. Managing epidemics: key facts about major deadly diseases. [Internet]. Disponible en:
https://apps.who.int/iris/handle/10665/272442

3. Organización Mundial de la Salud. Guía sobre la reglamentación relativa al transporte de sustancias infecciosas 2021-2022 [Internet] (en
inglés). Disponible en: https://www.who.int/publications/i/item/9789240019720. [La última versión en español es la de 2019-2020,
disponible en: https://apps.who.int/iris/handle/10665/327978].

4. McCollum AM, Damon IK. Human Monkeypox. Clinical Infectious Diseases. 2014 Jan 15;58(2):260–7.

5. Li Y, Zhao H, Wilkins K, Hughes C, Damon IK. Real-time PCR assays for the specific detection of monkeypox virus West African and
Congo Basin strain DNA. Journal of Virological Methods. 2010 Oct;169(1):223–7.

6. Schroeder K, Nitsche A. Multicolour, multiplex real-time PCR assay for the detection of human-pathogenic poxviruses. Molecular and
Cellular Probes. 2010 Apr;24(2):110–3.

7. Maksyutov RA, Gavrilova EV, Shchelkunov SN. Species-specific differentiation of variola, monkeypox, and varicella-zoster viruses by
multiplex real-time PCR assay. Journal of Virological Methods. 2016 Oct;236:215–20.

8. Ropp SL, Jin Q, Knight JC, Massung RF, Esposito JJ. PCR strategy for identification and differentiation of small pox and other
orthopoxviruses. J Clin Microbiol. 1995 Aug;33(8):2069–76.

9. Espy MJ, Cockerill III FR, Meyer RF, Bowen MD, Poland GA, Hadfield TL, et al. Detection of smallpox virus DNA by LightCycler PCR. J
Clin Microbiol. 2002 Jun;40(6):1985–8.

10. Li D, Wilkins K, McCollum AM, Osadebe L, Kabamba J, Nguete B, et al. Evaluation of the GeneXpert for Human Monkeypox Diagnosis.
Am J Trop Med Hyg. 2017 Feb 8;96(2):405–10.

11. Townsend MB, MacNeil A, Reynolds MG, Hughes CM, Olson VA, Damon IK, et al. Evaluation of the Tetracore Orthopox BioThreat®
antigen detection assay using laboratory grown orthopoxviruses and rash illness clinical specimens. Journal of Virological Methods. 2013
Jan;187(1):37–42.

12. European Virus Archive. Monkeypox virus [Internet]. Disponible en: https://www.european-virus-archive.com/search/node/monkeypox

13. Organización Mundial de la Salud. Manual de bioseguridad en el laboratorio, 4.ª edición [Internet]. 2020. Disponible en:
https://www.who.int/publications/i/item/9789240011311 (en inglés). [La 3.ª edición está disponible en español en:
https://apps.who.int/iris/handle/10665/43255].

14. Organización Mundial de la Salud. Meeting of the Strategic Advisory Group of Experts on immunization, November 2013 — conclusions
and recommendations = Réunion du Groupe stratégique consultatif d’experts sur la vaccination, novembre 2013 — conclusions et
recommandations [Internet]. Disponible en: https://apps.who.int/iris/handle/10665/242164

15. Organización Mundial de la Salud. Reglamento Sanitario Internacional (2005), tercera edición [Internet]. Disponible en:
https://www.who.int/es/publications/i/item/9789241580496

-6-
 Pruebas de laboratorio para el virus de la viruela símica: Orientaciones provisionales

Anexo. Recogida y almacenamiento de las muestras

Tipo de muestra Materiales de recogida Temperatura de almacenamiento Finalidad de la recogida

Material de la lesión cutánea, Hisopos floculados de dacrón Refrigerar (2 ºC-8 °C) o congelar Recomendado para el
incluidos: o poliéster con MTV o hisopo (-20 °C o menos) en un plazo de 1 diagnóstico
seco hora desde la recogida; -20°C o
− Hisopados del exudado menos a partir de 7 días
de lesiones
− Bordes superiores
(techos) de lesiones
− Costras de lesiones

Hisopados orofaríngeos Hisopos floculados de dacrón Véase más arriba Recomendado para el
o poliéster con MTV o hisopo diagnóstico, de ser factible,
seco además del material de la
lesión cutánea

Hisopados rectales y/o Hisopos floculados de dacrón Véase más arriba Se considerará para la
genitales o poliéster con MTV o hisopo investigación (con arreglo a
seco las directrices éticas)

Orina Tubo de recogida estéril Véase más arriba Se considerará para la

investigación (con arreglo a
las directrices éticas)

Semen Tubo de recogida estéril Temperatura ambiente durante <1h Se considerará para la
(posteriormente -20°C o inferior) investigación (con arreglo a
las directrices éticas)

Sangre entera Tubo de recogida estéril con Véase más arriba Se considerará para la
EDTA investigación (con arreglo a
las directrices éticas)

Suero Tubos de separación de suero Refrigerar (2 ºC-8 °C) o congelar
(-20 °C o menos) en un plazo de 1
hora desde la recogida; -20°C o
menos a partir de 7 días
Se considerará para la
serología como ayuda en el
diagnóstico o la investigación
(con arreglo a las directrices
éticas)

Plasma Tubo de recogida con EDTA Véase más arriba Se considerará para la
serología como ayuda en el
diagnóstico o la investigación
(con arreglo a las directrices
éticas)

© Organización Mundial de la Salud 2022. Algunos derechos reservados. Esta obra está disponible en virtud de la licencia CC BY-NC-SA 3.0
IGO.

WHO reference number: WHO/MPX/Laboratory/2022.1

-7-