Formato Proyecto, Teems

INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA
PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIÓN

Resolución de Creación: 00003 de Enero 05 de 2010
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Página web: www.iecolegioloyola.edu.co
Núcleo 920, Castilla, Medellín
HUMANISMO E INVESTIGACIÓN PARA LA VIDA
Proceso: GESTIÓN CURRICULAR
Nombre documento: PROYECTO Código: GCU-FR20 Versión: 01
Micorremediación de Cadmio en suelos de cultivo de cacao mediante Trichoderma Sp.
Mariana Arbelaez Restrepo

Mariana Calle Pinzon
Estefany Cardona Ochoa
Santiago Florez Presiga
Saray Lopez Gonzalez
TEEMS
Asesor(es)
Luis Alvaro Gomez Trejos
Dallany Milena Urrego Garcia
Institución Educativa Colegio Loyola para la Ciencia y la Innovación
Comité de Investigación Escolar
Medellín
2022
1
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
AGRADECIMIENTOS
Agradecemos al Sena y su institución por facilitarnos el espacio y los materiales
necesarios para llevar a cabo el desarrollo de este proyecto.
Agradecemos a nuestros asesores, pues sin ellos no hubiera sido posible la realización
de este. A Dallany Milena Urrego García, por ser de gran ayuda y utilidad para la
asesoría de todos los procesos realizados en los laboratorios del Sena, a la docente Anlly
Viviana Montoya Rodriguez, por ser quien ayudó y fomentó la idea de la realización de
este proyecto, corrigiendo y siendo un apoyo fundamental para el desarrollo de los
conceptos y factores claves de la investigación; por último al docente Álvaro Gómez
Trejos fue de gran ayuda a la hora de redactar el proyecto de una manera eficaz.
También agradecemos a nuestras familias por el apoyo sentimental y económico que
nos brindaron durante el transcurso de años.
2
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
CONTENIDO
Pág.
Resumen 5
1. Introducción 5
2. Descripción del problema y pregunta de investigación 5-6
3. Objetivo general y objetivos específicos 6-7
4. Justificación e impacto social/ambiental 7 - 11
5. Antecedentes y marco teórico
6. Ruta metodológica 12 - 13
7. Resultados y discusión
8. Conclusiones
Referencias bibliográficas
Anexos
3
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
LISTA DE TABLAS
Pág.
Tabla 1. Título de la tabla
LISTA DE FIGURAS
Pág.
Figura 1. Título de la figura
LISTA DE ANEXOS
Pág.
Anexo 1. Título del anexo
4
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Resumen
En Colombia los cultivos de cacao presentan una grave problemática, la alta
presencia de el metal pesado Cadmio (Cd) en los suelos, que lleva posteriormente a su
acumulación en las semillas de cacao ha ocasionado una gran variedad de problemas
socio - ambientales. El presente proyecto de investigación tiene como objetivo
determinar el potencial micorremediador del Trichoderma Sp. en tierra extraída de un
vivero especializado para el cultivo de esta planta. Para el desarrollo de este, se agregó
una disolución de esporas extraídas del hongo en cinco muestras de tierra contaminadas,
para posteriormente evaluar el porcentaje de reducción del Cadmio (Cd) mediante un
análisis estadístico; También se empleó la técnica de Espectroscopia Absorción atómica
(AA) siendo esta una herramienta que permite detectar y medir la concentración de
metales pesados en una muestra
Palabras clave
Micorremediación , Cadmio, Theobroma cacao, Trichoderma Sp.
Abstract
5
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
In Colombia, cocoa crops present a serious problem, the presence of Cadmium
in soils that leads to its accumulation in cocoa seeds, since the presence of this heavy
metal causes a great variety of socio-environmental problems. The present research
project aims to determine the mycoremediation potential of Trichoderma sp; in soil
extracted from a specialized nursery for the cultivation of this plant. For the
development of this, using concentrations of 15, 25 and 45 ml, a solution of spores
extracted from the fungus was added in 3 samples of contaminated soil, to then evaluate
the percentage of Cadmium reduced by means of the leaching technique.
Keywords
Mycoremediation, Cadmium, Theobroma cacao, Trichoderma Sp.
1. Introducción
La presencia de Cadmio ( Cd ) en los suelos para los cultivo de cacao a ocasionado
problemáticas en los frutos y árboles de Theobroma cacao plantados, estos sufren un
deterioro tanto en la raíz como sus hojas y semillas que posteriormente absorben el
metal pesado, en consecuencia, se presentan problemas de salud en las personas que
consumen productos derivados del cacao y se dificulta el proceso de exportación de los
6
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
frutos; en base a esto, el presente proyecto de investigación, busca micorremediar el Cd
presente en muestras de tierra contaminadas recolectadas de diversas zonas mediante
una solución de esporas provenientes del hongo Trichoderma Sp a nivel de laboratorio.
Para esto se germinaron y se sembraron semillas de cacao en 2 recipientes repartidos de
la siguiente manera: tierra contaminada por Cd, tierra contaminada por Cd e inoculada
con la solución de Trichoderma sp ; esto con el fin de evaluar los factores fisiológicos y
químicos de las plantas durante su crecimiento y las diferencias que presentan en un
periodo de prueba de 3 meses. Transcurrido este tiempo se tendrá en cuenta el estado de
las plantas sembradas en tierra natural y contaminadas con Cadmio, para comparar sus
condiciones con aquella que fue inoculada con el medio líquido de Trichoderma sp y
valorar la efectividad micorrmediativa de esta.
Con esta prueba experimental se espera que efectivamente se reduzca el porcentaje de
Cadmio sin afectar los procesos biológicos naturales en el crecimiento de las plantas y
sus frutos.
2. Descripción del problema y pregunta de investigación
En el territorio Colombiano hay millones de hectáreas de tierra con gran
fertilidad destinadas al cultivo de árboles cacaoteros; estos han brindado frutos de alta
7
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
calidad durante años; sin embargo, se ha presentado la aparición de metales pesados
como el Cadmio ( Cd ) en estás zonas, lo que perjudica estas siembras.
Gracias a esto, las semillas del árbol contienen altas cantidades de este metal
pesado en su interior, esto es un problema de alta incidencia para la exportación de
alimentos derivados del cacao, pues la cantidad máxima de Cadmio permitida en estos
es de 0,2 mg/Kg; ya que este representa un gran riesgo para la salud de las personas que
ingieren de manera frecuente productos derivados del cacao y para los agricultores y
encargados de producción de estas siembras al estar repetidamente expuestos al Cd ; por
lo tanto, procesos económicos procedentes del sector agrario se ven perjudicados
directamente .
Adicionalmente, el Cadmio en la tierra puede influenciar en los procesos del
suelo por parte de microorganismos y amenazar a todo este ecosistema, lo que tiene
como causa el desgaste, la erosión de las rocas, y el posterior transporte de grandes
cantidades del metal a los océanos, cuyo contenido es de alrededor 0,1 µg/kg.
Por otro lado, al tratarse de suelos, las alternativas más efectivas para solucionar
este problema son las derivadas de la biorremediación, pues se pueden trabajar una gran
8
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
variedad de microorganismos con propiedades curativas en la tierra. Por esto, la
propuesta del actual proyecto es micorremediar la tierra contaminada con Cd mediante
el uso de una solución de esporas de Trichoderma Sp.
En base a lo mencionado, nace la siguiente pregunta de investigación:
¿En qué medida la micorremediación y el esparcimiento de las esporas de Trichoderma
Sp pueden reducir el Cadmio (Cd) en una muestra de suelo contaminada?
3. Objetivo general y objetivos específicos
Objetivo general
Determinar el porcentaje de micorremediación en una muestra de suelos
contaminados con Cd, empleando Trichoderma Sp en cultivos de cacao.
Objetivos específicos.
- Calcular el porcentaje de Cd en una muestra de medio de cultivo
de Cacao mediante XRF.
- Analizar una solución de esporas del hongo Trichoderma sp
como agente de micorremediación de Cd en suelos de cultivo de Cacao.
9
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
- Evaluar el porcentaje de micorremediación de Cd empleando
Solución de esporas de Trichoderma sp mediante cultivo líquido.
4. Justificación e impacto social/ambiental
El presente proyecto de investigación pretende solucionar dificultades socio -
ambientales presentadas por la contaminación de Cadmio en la tierra donde se cultivan
árboles de cacao; el cual genera las semillas necesarias para la elaboración del
chocolate. Por su parte, los metales pesados son un conjunto de elementos químicos
que perjudican la salud ambiental. De manera que se determinó trabajar con el Cadmio
(Cd).
Para esto se pretende hacer uso de la micorremediación extrayendo esporas del
hongo Trichoderma Sp, las cuales cumpliran la función de reducir los niveles de Cd en
muestras de suelo para cultivos de cacao. Por su parte, se optó por trabajar con este
hongo, para evaluar sus resultados en muestras locales, teniendo en cuenta los
resultados de otras variedades de microorganismos que han demostrado capacidad de
biorremediación del Cd en antiguas investigaciones y la gran dificultad de obtención
que poseen estas especies.
10
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Este método se utilizará ya que es una manera natural de reducir los altos niveles
de Cd hallado en suelos y rocas . Beneficiando la fauna y flora afectada por la presencia
de este metal en la tierra, protegiendo a su vez, tanto a los trabajadores de estos cultivos,
como a los consumidores de cacao en Colombia de posibles problemas de salud.
En adición a esto, investigaciones similares a este proyecto, en su mayoría; se
han realizado en otros países de sudamérica, por lo cual este proyecto presentará una de
las pocas alternativas de solución a nivel del país.
Impacto social
Colombia es uno de los principales productores de chocolate, caracterizado por
su fino sabor y aroma, gracias a las condiciones agroecológicas del país; presentadas
principalmente en los municipios de siembra de árbol Cacaotero como Antioquia,
Arauca, Cauca, Chocó, Santander, Huila, Nariño y Tolima. Son muchas las economías
de los hogares colombianos que dependen de la siembra, recolecta, producción y
exportación de este producto agrícola. Impulsando la economía de Colombia, generando
un beneficio monetario tanto para el país como para su sociedad; sin embargo, se ha
presentado una problemática en el proceso de siembra, producción y exportación del
11
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
cacao incorporado en el chocolate, ya que en los terrenos donde se realiza su siembra, se
han presentado manifestaciones naturales de Cadmio (Cd) en la tierra, el cual se
traslada a las semillas de cacao, cuando el árbol lo absorbe en su proceso de
fermentación. Afectando los niveles de concentración de Cadmio (Cd), permitidos para
la exportación, venta y el consumo del producto ( 0,2 mg/Kg para productos de
chocolate, sucedáneos y demás derivados del cacao )
El impacto social que se pretende generar con este proyecto de investigación, es
mejorar el flujo habitual de las producciones de cacao, evitando las pérdidas agrarias y
económicas de los agricultores colombianos. Propiciando mayor estabilidad laboral,
económica y una calidad de vida más favorable. Todo esto, solucionando una de las
grandes preocupaciones del sector agropecuario de los últimos años; favoreciendo y
facilitando la siembra del cacao, reduciendo costos y pérdidas. Esto, en vista de que
Antioquia es uno de los mayores municipios de siembra de cacao, y a su vez
consumidor. Evitando las enfermedades generadas por el consumo de Cadmio (Cd)
como: irritación grave del estómago, lo que produce vómitos y diarrea y en ciertas
ocasiones la muerte; también, ingerir niveles de cadmio más bajos, durante un período
prolongado puede producir acumulación de Cadmio en los riñones y fragilidad en los
12
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
huesos; sin embargo, si se alcanza un nivel suficientemente alto, se producirá daño del
riñón y cáncer.
Impacto ambiental
El impacto ambiental que se espera generar con este proyecto de investigación
es reducir el daño provocado a la fauna y flora en los cultivos de cacao, evitando
procesos químicos perjudiciales para la naturaleza; buscando el mejoramiento a través
de la Micorremediación del Cadmio (Cd) en la tierra contaminada.
Tanto los microorganismos que habitan en la tierra, cómo en los árboles
cacaoteros, necesitan condiciones ambientales específicas para vivir; no obstante, el
mal manejo de estás tierras, el uso de productos químicos como plaguicidas y el Cadmio
contenido allí, causan daños en la estructura y en los procesos biológicos del suelo.
poniendo en vulnerabilidad la supervivencia de los factores bióticos y abióticos
presentes allí.
13
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Por esto; en vista a la necesidad de generar un cambio ambiental, se busca al
hongo Trichoderma Sp. , el cual no solo tiene la capacidad de reducir Cadmio (Cd), si
no también; al actuar como un mecanismo natural, protege la raíz del árbol creando una
clase de tela protectora alrededor de esta, apartando todo los microorganismos y
bacterias patógenas, peligrosas para el cultivo; permitiendo una mayor entrada de
vitaminas y minerales necesarios para el crecimiento del cultivo y fermentación de las
semillas.
5. Antecedentes y marco teórico
La primera investigación de interés es facilitada por Andrea, R (2012) La
cual se titula: “Efecto del tratamiento con 3 cepas de estreptomicetos en la
acumulación de cadmio en plantas de Theobroma Cacao L”. El artículo resalta los
resultados sobre la acumulación de cadmio en plantas de cacao y posibles métodos de
biorremediación; tiene como objetivo definir una metodología de preparación del
inóculo bacteriano en experimentos preliminares con plantas de Lactuca sativa para
determinar el efecto del cadmio en la biométrica de las plantas de Theobroma cacao L.
Esto es de vital importancia para la investigación, ya que demuestra las características
fisiológicas de plantas de cacao (Theobroma cacao L.) cuando están expuestas a Cd.
Entre las variables que se analizaron se encuentran la longitud de la planta, número de
14
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
hojas, tamaño de la raíz, el grosor del tallo, tamaño de la hoja y se estimó el estado
nutricional de la planta a través del color de las hojas. Por último, se cuantificó el
cadmio absorbido por la planta de cacao y se determinó la efectividad de las cepas en
impedir la absorción de cadmio.
La segunda investigación de identificada es de los autores Mayra Eleonora
B, P y Alida Marcela G, R (2016) La cual se titula: “Biorremediación de metales
pesados Cadmio (Cd), Cromo (Cr) y Mercurio (Hg), mecanismos bioquímicos e
ingeniería genética: una revisión.” El presente artículo es importante ya que referencia
y argumenta que cuando se presentan en altas concentraciones pueden formar
compuestos inespecíficos creando efectos citotóxicos y letales (Nies,1999; Soto et al,
2010). Es importante anotar que si bien algunos metales no tienen influencia
biológica,otros como el cadmio (Cd), el cromo (Cr), y el mercurio (Hg) son tóxicos
(Nessner y Esposito, 2010). Por otra parte, una vez los metales son emitidos se absorben
muy fácilmente a través de las membranas biológicas, por su elevada afinidad química a
las proteínas aumentando su bioacumulación, dificultando su degradación y eliminación
(Soto et al, 2010) lo que contribuye al planteamiento de la problemática expuesta en
esta investigación. Además presenta métodos para el tratamiento del Cadmio mediante
un catálogo de microorganismos implicados en procesos de micorremediación y
biorremediación de metales pesados.
15
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
La tercera investigación de interés es facilitada por José Cayotopa-Torres
(2021 ) La cual se titula: “Nuevos agentes de biorremediación de cadmio: Especies
de Trichoderma nativas de la rizósfera de árboles de cacao.” En este estudio, se
evaluaron cepas de Trichoderma spp. nativas con capacidad de remoción y tolerancia a
Cd, colectadas del suelo rizosférico de árboles de cacao; pues la absorción de cadmio
(Cd) por la planta de cacao y la mayor acumulación en granos, representa un problema
para las exportaciones y la industria chocolatera.
Acorde al artículo, para evaluar tales capacidades en condiciones in vitro, fueron
inoculadas 10 cepas Trichoderma spp. nativas en medio de cultivo papa dextrosa agar
(PDA) contaminado con tres concentraciones de Cd (25 ppm, 100 ppm y 250 ppm) y en
medio de cultivo papa dextrosa (PD) contaminado con 5 ppm de Cd. Los resultados
mostraron que Trichoderma spp. fueron sensibles a la presencia de Cd y capaces de
remover Cd. Este artículo representa una gran importancia para este proyecto de
investigación, pues evidencia el potencial micoremediador de las cepas de
Trichoderma, también se muestra la metodología de cultivo para Trichoderma sp y su
inoculación en muestras contaminadas con Cd.
1. Suelos:
1.1 ¿Qué son?
16
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Es una capa delgada en la parte superficial de la corteza terrestre que se ha
formado muy lentamente, a través de los siglos, con la desintegración de las rocas
superficiales por la acción del agua, los cambios de temperatura y el viento.
1.2. Componentes
Este está compuesto por minerales, materia orgánica, diminutos organismos
vegetales y animales, además del aire y el agua.
Lanly, J. P. (s. f.). Nociones ambientales básicas para profesores rurales y extensionistas.
fao.org.
https://www.fao.org/3/w1309s/w1309s04.htm#:%7E:text=El%20suelo%20est%
C3%A1%20compuesto%20por,de%20temperatura%20y%20el%20viento.
1.3. Agentes contaminantes
Como agentes contaminantes de suelos tenemos a los metales pesados, las
emisiones ácidas atmosféricas, microorganismos patógenos, hidrocarburos, plaguicidas,
basura, ácidos, la utilización de agua de riego salina, los fitosanitarios y aguas de relave,
entre otros.
Estela R, M. (2021, 10 febrero). Principales Contaminantes del Suelo (ejemplos).
ejemplos.co.
https://www.ejemplos.co/contaminantes-del-suelo/#ixzz51F9MmGTk
17
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
2. Cadmio:
2.1. ¿Qué es y cuáles son sus características?
El cadmio es un elemento químico poco abundante, que tiene una estrecha
relación con el zinc, con el que se encuentra asociado en la naturaleza. Es un metal
dúctil, de color blanco con un ligero matiz azulado. Es más blando y maleable que el
zinc, pero un poco más duro que el estaño.
2.3. Composición química
El cadmio es miembro del grupo 12 (zinc, cadmio y mercurio) en la tabla
periódica, y presenta propiedades químicas intermedias entre las del zinc metálico en
soluciones ácidas de sulfato. Se trata de una sustancia bastante tóxica y divalente en
todos sus compuestos estables y su ión (Zn +2) es incoloro.
Cd (Cadmio y compuestos) | PRTR EspaÃ±a. (s. f.). PRTR España.
https://prtr-es.es/Cd-Cadmio-y-compuestos,15605,11,2007.html
2.4. Afecciones a la salud humana.
Durante una exposición de corta duración, la sustancia es irritante para los ojos y
el tracto respiratorio, y su inhalación puede originar edema pulmonar y fiebre de los
humos metálicos. Estos efectos pueden aparecer en unas horas y se incrementarán con el
esfuerzo físico.
18
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Los pulmones pueden resultar afectados por la exposición prolongada o repetida
a las partículas de polvo que contengan cadmio, llegando incluso a producir la muerte.
En la sangre, el cadmio es transportado hacia el hígado, dónde se une a las proteínas
para formar complejos que son transportados hacia los riñones. Cuando éste se acumula
en los riñones, causa un daño en el mecanismo de filtración, que provoca la excreción
de proteínas esenciales y azúcares.
Otros efectos causados por el cadmio a elevadas concentraciones son:
● Diarreas, dolor de estómago y vómitos severos.
● Fractura de huesos.
● Fallos en la reproducción y posibilidad incluso de infertilidad.
● Daño al sistema nervioso central.
● Daño al sistema inmune.
● Desórdenes psicológicos.
● Posible daño en el ADN o desarrollo de cáncer.
Cd (Cadmio y compuestos) | PRTR EspaÃ±a. (s. f.). PRTR España.
https://prtr-es.es/Cd-Cadmio-y-compuestos,15605,11,2007.html
3. Trichoderma Sp. :
19
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
3.1. ¿Qué es y cuáles son sus características?
Trichoderma es un hongo aeróbico, con capacidad para resistir un amplio
intervalo de temperaturas. Es un hongo cuyo hábitat es el suelo y así mismo
Trichoderma ejerce su acción como antagonista y colonizador de las raíces de las
plantas, como son:
• Solubilización y absorción de nutrientes inorgánicos.
• Estimulación del crecimiento vegetal.
• Inducción de resistencia.
B. MartínezI , Danay InfanteI , Yusimy ReyesII (Ed.). (2013, enero).
Trichoderma spp. y su función en el control de plagas en los cultivos.
Revista de Protección Vegetal.
http://scielo.sld.cu/pdf/rpv/v28n1/rpv01113.pdf
3.2. Estructura:
( Detallar según el análisis microscópico de la Cepa C1 )
3.2.1. Fiálide:
Estructura con forma de botella, ubicada en el extremo de un conidióforo, sobre
la cual se producen esporas.
20
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Fiálide (Biología vegetal). (2013, 7 septiembre). Glosarios especializados.
https://glosarios.servidor-alicante.com/biologia-vegetal/fialide#:%7E:text
=Estructura%20con%20forma%20de%20botella,la%20cual%20se%20pr
oducen%20esporas.
3.2.2. Conidióforo:
En ciertos hongos, la conidiófora o conidióforo, es una estructura microscópica
especializada en la producción asexual de miles de esporas llamadas conidias. Se
localizan al extremo de hifas las cuales levantan la conidiofora en el aire con el fin de
esparcir las esporas con más eficiencia. Algunas conidioforas (en el Geotrichum
candidum, por ejemplo) son de un filamento, mientras que otras (en el Trichoderma
viride, por ejemplo) son ramificadas.
Conidióforo. (s. f.). Google Arts & Culture.
https://artsandculture.google.com/entity/g11bc5md7w2?hl=es
3.2.3.Conidios:
Esporas de origen asexual, no flageladas, formadas en el ápice o lados de una
célula esporógena (conidiógena) carente de pared esporangial. Diferenciadas de las
esporangiosporas porque no se forman por segmentación repetida y progresiva del
citoplasma, su morfología es muy variada, unicelulares o pluricelulares. La
21
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
conidiogénesis (Ontogenia de los conidios), se utiliza como base de la clasificación, hay
dos tipos generales de conidios:
● Taloconidios: conidios de tipo tálico o artroconidios: una célula hifal entera
preexistente se transforma en un conidio, puede haber un aumento de tamaño
tras la formación del septo.
● Blastoconidios: conidios de tipo blástico: surge únicamente de una parte de la
célula preexistente y aumenta de tamaño antes de formarse el septo, la
proliferación puede ser simpódica o aleatoria.
La formación de los conidios ocurre de forma individual, asiladamente o en grupos,
catenulados, producidos en cadena, la formación puede ser:
- Basípeta, el conidio más joven está en la base.
- Acrópeta, el conido más joven está en el ápice.
Plantas y Hongos. (2021, 6 mayo). plantasyhongos.es.
https://www.plantasyhongos.es/hongos/Ascomycota_conidios.htm
3.3. Taxonomía
22
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
La clasificación taxonómica del género Trichoderma sería Reino Mycetae (Fun-
gi), División Eumycota, Subdivisión Ascomycotina, Clase Euascomycetes, Orden
Hypocreales, Familia Hypocraceae y Género Trichoderma e Hypocrea.
Rosalba ARGUMEDO-DELIRA1, Alejandro ALARCÓN1*, Ronald
FERRERA-CERRATO1 y Juan José PEÑA-CABRIALES2. (2009). EL
GÉNERO FÚNGICO Trichoderma Y SU RELACIÓN CON C. Rev. Int.
Contam. Ambient. 2.
http://www.scielo.org.mx/pdf/rica/v25n4/v25n4a6.pdf
3.4. Cultivo
El cultivo es el proceso de proliferación de microorganismos al proporcionarles
un entorno con condiciones apropiadas. Los microorganismos en proliferación producen
réplicas de sí mismos y necesitan los elementos presentes en su composición química.
Los nutrientes deben proporcionar estos elementos en una forma que sea accesible
desde el punto de vista metabólico. Además, los microorganismos requieren energía
metabólica para sintetizar macromoléculas y mantener gradientes químicos esenciales a
través de sus
membranas. Los factores que deben controlarse durante la proliferación incluyen
nutrientes, pH, temperatura, aireación, concentración de sales y fuerza iónica del medio.
23
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Cultivo de microorganismos | MicrobiologÃa mÃ©dica, 27e | AccessMedicina |
McGraw Hill Medical. (s. f.). accessmedicina.
https://accessmedicina.mhmedical.com/Content.aspx?bookid=1837§ioni
d=128956048
4. Micorremediación
4.1. ¿Qué es la Micorremediación?
La micorremediación es una forma de biorremediación mediante el uso de
hongos. Varias especies de hongos tienen un alto grado de remediación (según la
especie y el contaminante), estimulando la actividad enzimática y microbiana.
La aplicación de la micorremediación para la biorremediación de un suelo, es
necesario estudiar las características físicas, geológicas y químicas del mismo, luego
determinar el origen del contaminante para poder elegir una o varias especies de hongos
que se adaptarán a las condiciones del suelo a tratar. La infinidad de especies de hongos
sin estudiar que podrían tener capacidad de remover contaminantes es muy amplia, es
por eso que para una correcta aplicación de esta técnica, se debe tener un máximo
seguimiento del hongo desde su trasplante hasta sus condiciones en su nuevo hábitat,
procurando asemejar las condiciones de su hábitat de origen.
24
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
4.2. Propiedades micorremediativas del trichoderma sp.
( Por detallar )
6. Ruta metodológica
- Se tomaron 5 kilos de muestra de suelo para el cultivo de theobroma cacao.
- Tamización de la tierra
- En la báscula se pesa 1k de tierra.
- Se transporta la tierra a una rejilla y se introduce en el horno, allí se

realiza secado de ésta a una temperatura de 110C° durante 24 h
- Se incorpora la tierra en el tamizador durante 10 minutos.
- Transcurrido el tiempo se separan las muestras del tamiz N4 al N30 y del

N50 al N200.
- Se pesa cada tamiz y el residuo de material en esto para hallar el

contenido neto de cada uno.
- Se separa el contenido en bolsas herméticas y se preparan para llevar a

cabo el lixiviado.
Siembra del cultivo en agar PDA
- Se realiza el cálculo Estequiométrico:
39 gPDA/ 1000 ml de Agua → 60 ml de Agua = 2.34gPDA
25
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Para determinar los ml de agua y los gramos de agar necesarios para

crear el cultivo.
- En una plancha de agitación se trabaja la disolución a 60 ° C durante 5

minutos.
- Se esterilizan 5 cajas de petri en el autoclave a 121 C° x 15 psi durante

15 minutos.
- Una vez se completó el proceso de esterilización de los materiales, se

sirven 20 ml del medio de cultivo en las cajas de petri.
Activación del hongo.
- Se calienta el agar PDA en la plancha de agitación durante 5 min.
- Se inoculan con Trichoderma sp, 5 cajas de petri con 20 ml de

Agar
- Se incuba la muestra a 25°C durante 7 días
- Se realiza un análisis macroscópico y se observa que la cepa de

control presentó un crecimiento radial y masivo; poseia micelio
de tono blanquecino en los bordes y verde en el centro, contaba
con una textura esponjosa y la pigmentación de los conidios era
verdecina.
- Se realiza un análisis microscópico y se observa que la misma

cepa posee
26
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Con el objetivo de poseer mayor cantidad de microorganismos útiles

para la muestra experimental, se realiza un Repique del hongo.
- Se esteriliza un asa de aro en el mechero durante 5 segundos.
- Se enfría el asa en un espacio libre del cultivo del hongo.
- Con el asa, en la parte más periférica del cultivo, se cercena 3

fragmentos de los micelios del hongo.
- Se adicionan los fragmentos amputados en el centro de 3

cajas de petri con cultivo PDA libre de sustancias
bacteriostáticas y se sellaron con papel vinitel.
- Se incuban las placas a 25ºC durante 7 días.
- Solución de esporas.
- Se realiza conteo de esporas en cámara de Neubauer para evaluar el

volumen de esporas.
- 671 esporas / 0.1 ml de Agua → 6710 esporas = 1 ml de agua
- Se esterilizan 5 tubos de ensayo en autoclave a 121°C, 15 psi durante 15

min.
- Se adicionan 15 mil de agua desionizada a cada tubo de ensayo.
- Se cercenan esporas con asa de aro y se inoculan al tubo de ensayo.
- Una caja de hongo por tubo de ensayo.
27
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
7. Resultados y discusión
Toma de muestras útiles para el realizamiento del lixiviado:
Muestra N1 ( Finca de cacao ubicada en Porce) ( Tierra con cultivo fructificado )
Contenido Neto: 2,819.26 g
Sección N1, lixiviado ( 30 µm - 200 µm )
Contenido Neto: 346.26 g
Sección N2, lixiviado ( 30 µm - 200 µm )
Contenido Neto:
Muestra N2 ( Vivero de cacao La Esperanza ubicado en el municipio de Samaná Caldas
) ( Tierra con cultivo no fructificado )
Sección única, lixiviado ( 30 µm - 200 µm )
Contenido Neto: 410.9g
28
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
Muestra N3 ( Vivero de cacao San José ubicado en el municipio de Samaná Caldas) (
Tierra con cultivo fructificado )
Sección N1 , lixiviado ( 30 µm - 200 µm )
Peso neto: 749.99 g
Peso neto: 408.12 g
Peso neto: 715.1 g
Sección S4 , lixiviado ( 30 µm - 200 µm )
Peso neto: 783.92 g
8. Conclusiones
9. Referencias bibliográficas
29
Cra. 65 No. 98A-75, Teléfono: 4405105
NIT: 900339251-3, DANE: 105001025984
10. Anexos
30

Formato Proyecto, Teems

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Formato Proyecto, Teems

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA

PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIÓN

Micorremediación de Cadmio en suelos de cultivo de cacao mediante Trichoderma Sp.

Mariana Arbelaez Restrepo

Luis Alvaro Gomez Trejos

Dallany Milena Urrego Garcia

Institución Educativa Colegio Loyola para la Ciencia y la Innovación

Comité de Investigación Escolar

Agradecemos al Sena y su institución por facilitarnos el espacio y los materiales

necesarios para llevar a cabo el desarrollo de este proyecto.

este proyecto, corrigiendo y siendo un apoyo fundamental para el desarrollo de los

conceptos y factores claves de la investigación; por último al docente Álvaro Gómez

También agradecemos a nuestras familias por el apoyo sentimental y económico que

nos brindaron durante el transcurso de años.

2. Descripción del problema y pregunta de investigación 5-6

3. Objetivo general y objetivos específicos 6-7

4. Justificación e impacto social/ambiental 7 - 11

5. Antecedentes y marco teórico

En Colombia los cultivos de cacao presentan una grave problemática, la alta

acumulación en las semillas de cacao ha ocasionado una gran variedad de problemas

socio - ambientales. El presente proyecto de investigación tiene como objetivo

determinar el potencial micorremediador del Trichoderma Sp. en tierra extraída de un

para posteriormente evaluar el porcentaje de reducción del Cadmio (Cd) mediante un

análisis estadístico; También se empleó la técnica de Espectroscopia Absorción atómica

metales pesados en una muestra

Micorremediación , Cadmio, Theobroma cacao, Trichoderma Sp.

In Colombia, cocoa crops present a serious problem, the presence of Cadmium

metal causes a great variety of socio-environmental problems. The present research

project aims to determine the mycoremediation potential of Trichoderma sp; in soil

development of this, using concentrations of 15, 25 and 45 ml, a solution of spores

the percentage of Cadmium reduced by means of the leaching technique.

Mycoremediation, Cadmium, Theobroma cacao, Trichoderma Sp.

La presencia de Cadmio ( Cd ) en los suelos para los cultivo de cacao a ocasionado

problemáticas en los frutos y árboles de Theobroma cacao plantados, estos sufren un

metal pesado, en consecuencia, se presentan problemas de salud en las personas que

consumen productos derivados del cacao y se dificulta el proceso de exportación de los

frutos; en base a esto, el presente proyecto de investigación, busca micorremediar el Cd

presente en muestras de tierra contaminadas recolectadas de diversas zonas mediante

una solución de esporas provenientes del hongo Trichoderma Sp a nivel de laboratorio.

Para esto se germinaron y se sembraron semillas de cacao en 2 recipientes repartidos de

químicos de las plantas durante su crecimiento y las diferencias que presentan en un

periodo de prueba de 3 meses. Transcurrido este tiempo se tendrá en cuenta el estado de

valorar la efectividad micorrmediativa de esta.

Con esta prueba experimental se espera que efectivamente se reduzca el porcentaje de

2. Descripción del problema y pregunta de investigación

En el territorio Colombiano hay millones de hectáreas de tierra con gran

calidad durante años; sin embargo, se ha presentado la aparición de metales pesados

como el Cadmio ( Cd ) en estás zonas, lo que perjudica estas siembras.

pesado en su interior, esto es un problema de alta incidencia para la exportación de

encargados de producción de estas siembras al estar repetidamente expuestos al Cd ; por

lo tanto, procesos económicos procedentes del sector agrario se ven perjudicados

Adicionalmente, el Cadmio en la tierra puede influenciar en los procesos del

como causa el desgaste, la erosión de las rocas, y el posterior transporte de grandes

variedad de microorganismos con propiedades curativas en la tierra. Por esto, la

propuesta del actual proyecto es micorremediar la tierra contaminada con Cd mediante

el uso de una solución de esporas de Trichoderma Sp.

En base a lo mencionado, nace la siguiente pregunta de investigación:

¿En qué medida la micorremediación y el esparcimiento de las esporas de Trichoderma

Sp pueden reducir el Cadmio (Cd) en una muestra de suelo contaminada?

3. Objetivo general y objetivos específicos

Determinar el porcentaje de micorremediación en una muestra de suelos

contaminados con Cd, empleando Trichoderma Sp en cultivos de cacao.

- Calcular el porcentaje de Cd en una muestra de medio de cultivo

de Cacao mediante XRF.