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Epigenética espermática e influencia de

factores ambientales

Ida Donkin, Romain Barrès*

RESUMEN

Fondo:La programación del desarrollo del embrión está controlada por la información genética pero también dictada por la información epigenética contenida en los
espermatozoides. El estilo de vida y los factores ambientales no solo influyen en la salud de un individuo, sino que también pueden afectar el fenotipo de las siguientes
generaciones. esto es mediadoa través deherencia epigenética, es decir, transmisión gamética de información epigenética impulsada por el medio ambiente a la
descendencia. Se está acumulando evidencia de que la exposición preconcepcional a ciertos estilos de vida y factores ambientales, como la dieta, la actividad física y el
tabaquismo, afecta el fenotipo de la próxima generación a través de la remodelación del modelo epigenético de los espermatozoides.
Alcance de la revisión:Esta revisión resumirá el conocimiento actual sobre las diferentes señales epigenéticas en los espermatozoides que responden a factores
ambientales y de estilo de vida y que son capaces de afectar el desarrollo embrionario y el fenotipo de la descendencia más adelante en la vida.
Principales conclusiones:Al igual que las células somáticas, el epigenoma de los espermatozoides ha demostrado ser dinámicamente reactivo a una amplia variedad de factores estresantes
ambientales y de estilo de vida. La consecuencia funcional sobre la embriogénesis y el fenotipo de la próxima generación sigue siendo en gran parte desconocida. Sin embargo, está
surgiendo a gran escala una fuerte evidencia de factores epigenéticos transmitidos por el esperma impulsados por el medio ambiente, que son capaces de alterar el fenotipo de la próxima
generación.
- 2018 Los Autores. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

Palabras claveEsperma; Espermatozoide; epigenético; herencia epigenética; ARN pequeño; metilación del ADN; Histona

1. INTRODUCCIÓN
Los factores del estilo de vida, como la dieta, la actividad física, el tabaquismo y el consumo
de alcohol, son bien conocidos por influir en la predisposición a la obesidad, la diabetes tipo
2, las enfermedades cardiovasculares y el cáncer, que representan una extraordinaria carga
de morbilidad en todo el mundo. Si bien el estilo de vida de una persona claramente afecta
la salud y la esperanza de vida a nivel individual, estudios epidemiológicos recientes han
proporcionado evidencia de que el estilo de vida de una generación puede modificar el
riesgo de desarrollar enfermedades crónicas en las generaciones posteriores a través de los
llamadosefectos de los padres.De hecho, la posible influencia de los factores ambientales
preconcepcionales en el fenotipo de las próximas generaciones no es una idea nueva. Las
teorías evolutivas de Jean-Baptiste Lamarck y Charles Darwin han sugerido durante mucho
tiempo que, a nivel de población, los factores ambientales seleccionan fenotipos
particulares. Sin embargo, lo que representa un cambio de paradigma es el descubrimiento
de que los efectos de los padres pueden afectar a la descendencia de la generación sucesiva,
a través de mecanismos que parecenindependientede factores genéticos. La investigación
separada de los efectos paternos (donde el macho solo está expuesto a un entorno
específico antes de la concepción), ha proporcionado más evidencia que indica que los
factores transmitidos por el esperma que responden a los cambios en el estilo de vida
pueden modular la programación del desarrollo de la descendencia mediante los llamados
herencia epigenéticamiun término que se refiere a la modificación directa del epigenoma
gamético por el medio ambiente y la transmisión posterior a la siguiente generación[1]. Las
modificaciones epigenéticas de los gametos impulsadas por el medio ambiente
proporcionan una posible base molecular para explicar la transmisión de
plasticidad del desarrollo entre generaciones, así como un mecanismo para
comprender los factores de heredabilidad "faltantes" observados con ciertas
enfermedades. De hecho, en el contexto de las enfermedades metabólicas,
toda o parte de la heredabilidad no resuelta de la obesidad y la diabetes tipo 2
puede atribuirse a la herencia epigenética. Esto está respaldado por la
observación epidemiológica de que la disponibilidad de alimentos en la
infancia y la adolescencia influye en el riesgo de desarrollar enfermedades
cardiovasculares en la descendencia.[2]. Debe enfatizarse que la descendencia
de segunda y no la primera generación se ve afectada. Además, la transmisión
se produce a través de la línea paterna, eludiendo así posibles posibilidades
maternas oen el úteroefectos, que está en el origen de la hipótesis de que un
mensaje no genético se transmite a las siguientes generaciones a través de los
gametos[2]. Los modelos animales de herencia paterna han proporcionado
evidencia definitiva de que los factores dietéticos introducidos antes de la
concepción pueden afectar el metabolismo de la descendencia a través de la
herencia epigenética.[3mi5]. Por ejemplo, la sobrenutrición paterna aumenta
el peso corporal y la adiposidad y afecta la tolerancia a la glucosa y la
sensibilidad a la insulina en las crías adultas.[4]. En un estudio de seguimiento,
utilizando el mismo modelo animal de obesidad inducida por la dieta en los
padres, la alimentación con una dieta alta en grasas reprograma el epigenoma
de los espermatozoides, proporcionando así más evidencia para respaldar la
hipótesis de que los factores nutricionales modifican el fenotipo metabólico de
la descendencia. a través de la herencia epigenética[6]. En humanos, el estado
nutricional y los niveles de actividad física se asociaron con cambios
epigenéticos dinámicos en los espermatozoides[7mi9],
proporcionar evidencia para plantear la hipótesis de que los factores de estilo de vida antes de

The Novo Nordisk Foundation Center for Basic Metabolic Research, Facultad de Salud y Ciencias Médicas, Universidad de Copenhague, 2200 Copenhague, Dinamarca

* Autor correspondiente. Universidad de Copenhague, Blegdamsvej 3B, 2200 Copenhague, Dinamarca. Correo electrónico:barres@sund.ku.dk (R. Barrès).

Recibido el 25 de enero de 2018-Revisión recibida el 13 de febrero de 2018-Aceptado el 15 de febrero de 2018-Disponible en línea el 27 de febrero de 2018

https://doi.org/10.1016/j.molmet.2018.02.006

METABOLISMO MOLECULAR 14 (2018) 1mi11 -2018 Los Autores. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
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la concepción también puede modular la salud de la descendencia a través de
la herencia epigenética en humanos. Además de los factores nutricionales,
numerosos laboratorios destacados encuentran que otros factores
ambientales, como el ejercicio, los disruptores endocrinos y el estrés
traumático, influyen en la plasticidad del desarrollo de los fenotipos a través
de la herencia epigenética.Figura 1)[10mi12].
Por obvias limitaciones técnicas, pocos estudios han investigado el efecto de
los factores ambientales sobre el epigenoma del ovocito.[13,14]. Por ello, esta
revisión se centra en el epigenoma espermático, sobre el que existe mayor
conocimiento. Cuando se aborda experimentalmente la herencia epigenética,
se utilizan principalmente modelos paternos, ya que requieren menos
recursos experimentales y los factores de confusión son más fáciles de excluir.
En modelos de exposición materna, los factores ambientales, incluso si solo
están presentes antes de la concepción, pueden influir más tarde en el
entorno de desarrollo del embrión (p. ej., alterando la función placentaria).
Esto constituye una importante fuente de sesgo, ya que el fenotipo resultante
de la descendencia puede verse afectado por influencias gaméticas y los
efectos observados pueden ser simplemente de pura naturaleza.enterrar
origen generacional en comparación con transgeneracional Además, tanto la
F1yLa generación F2 está bajo la influencia materna duranteen el útero
desarrollo, ya que las células germinales de F1 se están desarrollando en el
estado embrionario. En consecuencia, para determinar el efecto deen el útero
exposición sobre la herencia epigenética de manera transgeneracional, las
investigaciones deben extenderse a la generación F3 (Figura 1)[5]. Sin
embargo, es suficiente estudiar la generación F2 en modelos paternos, como
el mencionadoen el úterolas influencias no están en juego.
Sin embargo, los modelos paternos no carecen de posibles factores de
confusión y no son autosuficientes para probar la herencia gamética.
(Figura 1). Por ejemplo, se especula que la contaminación de la microbiota
materna por parte del macho en el momento del apareamiento puede afectar
laen el úteroambiente[15]. Además, el líquido seminal puede enviar señales al
tracto materno y, en última instancia, afectar el desarrollo del embrión
(revisado en[dieciséis]). Enfoques utilizandoin vitrola fertilización (FIV) puede
representar un estándar de oro, con varios grupos replicando con éxito los
respectivos efectos parentales mediante FIV/ICSI o microinyección [10,17mi20]
. Sin embargo, se debe tener precaución al interpretar los resultados de los
estudios que utilizan el manejo previo de gametos, ya que los procedimientos
en sí mismos pueden inducir alteraciones epigenéticas significativas con el
potencial de afectar el fenotipo de la descendencia (revisado en[21]). Sin
embargo, en esta revisión, discutimos la evidencia actual que respalda el papel
del epigenoma del espermatozoide, en particular la metilación del ADN, la
cromatina y la expresión del ARN pequeño, como un potencial portador de la
herencia epigenética bajo las influencias del estilo de vida.
2. METILACIÓN DEL ADN EN ESPERMATOZOOS
La metilación del ADN controla numerosos procesos celulares, incluida la
diferenciación celular y el desarrollo embrionario. Durante el desarrollo
embrionario, la metilación del ADN participa en la regulación de la expresión
génica, el silenciamiento de transposones y secuencias retrovirales
endógenas, la inactivación del cromosoma X y la impronta genómica[22,23]. La
metilación del ADN está bajo el control de las ADN metiltransferasas (DNMT) y
las enzimas de la ruta de desmetilación, como la translocación Ten-Eleven
(TET), así como la timina.miADNmiglicosilasa (TDG) y la reparación por escisión
de base de ADN (BER)[24,25]. La gran mayoría de la metilación del ADN ocurre
en las citosinas en los genomas dentro

Figura 1: estilo de vida e influencias ambientales entre generaciones.El ejercicio en la generación F0 puede inducir la reprogramación epigenética del ovocito (1) y/o cambiar la fisiología de todo el cuerpo (2)
que, si aún persiste cuando se produce el embarazo, puede tener consecuencias en el medio extracelularen el útero (3). El embrión en desarrollo podría estar expuesto a los efectos del ejercicio, lo que afectaría
no solo a la F1 (el propio embrión) sino también a las células germinales primordiales que se desarrollan en el embrión. Las células germinales primordiales representan, en parte, la descendencia de segunda
generación, o F2. El ejercicio en la F0 también puede alterar el comportamiento y el metabolismo en la F1 para influir en la capacidad aeróbica o la inclinación a hacer ejercicio en la F1, lo que a su vez induce la
programación de los espermatozoides a través de la programación en serie. Alternativamente, el ejercicio en F0 puede reprogramar de manera estable los gametos a lo largo de generaciones (F0, F1, . ), lo que
lleva a una verdadera herencia epigenética transgeneracional. Probablemente, la generación F2 es una integración de toda la reprogramación epigenética que ocurre entre los antepasados.

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un contexto CpG[26]. Sin embargo, se ha descrito que la metilación en un
contexto no CpG (particularmente CpA) representa hasta el 25 % en algunos
tipos de células.[27mi29].
Los espermatozoides albergan metilación tanto CpG como no CpG, y la metilación no
CpG se acumula dentro y alrededor de las secuencias del transposón B1 SINE en las
células germinales masculinas durante el desarrollo fetal del ratón.[30]. La metilación
no CpG también se detecta en las regiones paternamente metiladas y en algunas
islas CpG, donde se alcanza la metilación máxima al nacer.
[30]. Tales patrones de cambio dinámico de metilación (de novometilación seguida de
pérdida de metilación hacia la etapa de espermatozoides maduros) contrasta notablemente
con la dinámica de metilación en CpG. De hecho, durante el desarrollo de los mamíferos, las
células de la línea germinal temprana están sujetas a un borrado de metilación del ADN casi
global.[31], un proceso de limpieza que se cree que borra la memoria celular y permite la
totipotencialidad del desarrollo. Las células germinales primordiales (PGC) se someten a una
desmetilación global de forma bifásica. Se produce una primera ola de pérdida de metilación
del ADN de aproximadamente el 70 % después de que las CGP han colonizado la región
gonadal en desarrollo en el día embrionario (E) 11,5 en el ratón.[32]y presumiblemente E37
en humanos[33]). La desmetilación global del ADN aumenta aún más y alcanza un máximo
de E13.5 en el ratón, con niveles de metilación global de CpG de hasta 3mi4%[34], y 8% en
humanos, donde el pico se observa en la semana 7 de desarrollo[35]. La pérdida de
metilación del ADN es luego seguida porde novoMetilación del ADN en todas las etapas de la
maduración de los espermatozoides, con niveles globales de metilación de CpG del 90 % en
espermatozoides de ratón y del 70 % en espermatozoides humanos completamente
maduros, lo que produce aproximadamente el 4 % de
citosinas totales metiladas[36,37]. A modo de comparación, los niveles de metilación
en los espermatozoides están en el rango más bajo en comparación con las células
somáticas, por ejemplo, el timo y el cerebro, que exhiben 15mi20% más de
metilación[38]. Por lo tanto, los espermatozoides maduros son "células
hipometiladas", con niveles de metilación globales comparables a los de las células
cancerosas.[39]. El borrado incompleto de las marcas de metilación del ADN durante
la reprogramación epigenética abre una ventana de tiempo biológica que permite la
transferencia de influencias ambientales de una generación a la siguiente. Varias
características genómicas escapan a la reprogramación epigenética, por ejemplo, los
transposones L1HS, que están altamente metilados en todas las etapas del
desarrollo de la línea germinal.[35]. Sin embargo, las secuencias de
retrotransposones parecen relativamente desprovistas de regiones genómicas que
escapan a la reprogramación (también acuñadas comofugitivos)[40]. Si bien el papel
de la metilación en los transposones o secuencias repetidas es desconocido y difícil
de predecir por naturaleza, la implicación funcional de la metilación en los escapes
ubicados en el extremo proximal de las regiones codificantes de proteínas es
obviamente más fácil de apreciar. En las células germinales primordiales humanas, el
análisis funcional de los genes cercanos a los fugitivos reveló un enriquecimiento de
los genes expresados en el cerebro y que controlan el desarrollo neural.[40]. Varios
estudios, incluidos los de nuestro grupo, observaron que los factores del estilo de
vida inducen la metilación diferencial del ADN en los espermatozoides, muy cerca de
los genes relacionados con el control de la neurogénesis y el desarrollo del sistema
nervioso central (Figura 2)[7,8]. Una intervención de entrenamiento de resistencia de
tres meses en humanos alteró la metilación de genes relacionados con el desarrollo
del sistema nervioso central, la neurogénesis y la diferenciación neuronal

Figura 2: Descripción general de las marcas epigenéticas susceptibles de ser remodeladas con insultos ambientales.Se representa una estructura secundaria simplificada del genoma del espermatozoide, en la
que la fracción de ADN unida a histonas representa menos del 15 % del genoma. La remodelación de la metilación del ADN aumenta en fracciones ricas en CG unidas a histonas en el esperma y también se
encuentra en elementos repetitivos. El posicionamiento de la histona en relación con las protaminas también puede estar regulado por factores ambientales. Las modificaciones de histonas en loci específicos
también cambian después del estrés nutricional. La expresión de ARN pequeño (ARNs) como fragmentos de ARNt (tRF), microARN (miARN) y ARN que interactúa con PIWI (piARN) se ve afectada por el estilo de
vida o el estrés ambiental.

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[7]. Se encontró un enriquecimiento similar para los genes del desarrollo del sistema
nervioso en el esperma de hombres obesos antes y después de la pérdida de peso
inducida por el bypass gástrico[8]. En un estudio anterior que investigaba la variación
de la metilación del ADN en células somáticas obtenidas de ratones endogámicos, se
identificaron genes similares a los que se hace referencia en ontologías relacionadas
con el desarrollo embrionario y la neurogénesis.[41]. En conjunto, estos estudios
indican que los genes implicados en el desarrollo del sistema nervioso central son
susceptibles a la variación epigenética estocástica. Por lo tanto, es legítimo plantear
la hipótesis de que diferentes estilos de vida o factores ambientales inducen cambios
en la metilación del ADN en los loci de genes neurológicos. De manera consistente,
los resultados de nuestro grupo respaldan los efectos específicos del estilo de vida
sobre los cambios epigenéticos en los genes que controlan el desarrollo del sistema
nervioso central.[9]. Los espermatozoides recolectados antes y después de una
intervención de ejercicios de resistencia de seis semanas, así como después de tres
meses sin entrenamiento físico, mostraron que los cambios en la metilación del ADN
ocurren cerca de los genes relacionados con la neurogénesis y, notablemente, con
un mayor enriquecimiento en el entrenado, en comparación con el estado no
entrenado[9]. Esto revela que el tiempo no es el factor principal que impulsa la
remodelación epigenética y sugiere que los cambios epigenéticos son inducidos por
influencias externas. Esto es consistente con la teoría formulada previamente de que
las células responden a los factores estresantes ambientales a través de una mayor
variación epigenética.[41]. Sin embargo, es legítimo cuestionar si un sesgo técnico no
está en el origen de estos resultados, ya que los estudios que informaron cambios
epigenéticos en genes relacionados con el desarrollo del sistema nervioso central
utilizaron exclusivamente matrices de metilación de ADN o secuenciación de bisulfito
de representación reducida.[7,8,41,42], dos técnicas que sobrestiman las regiones
ricas en CpG. Los resultados podrían explicarse entonces por el hecho de que los
genes a los que se hace referencia en términos de ontología génica relacionados con
el desarrollo del sistema nervioso central tienen regiones de alta densidad CpG
(denominadas islas CpG) en comparación con el resto del genoma. Sin embargo, el
análisis de ontología de genes corregido por la sobreestimación de genes con alta
densidad de CpG no eliminó el enriquecimiento del término de ontología.desarrollo
del sistema nerviosoen hombres obesos[8], lo que descarta sesgos técnicos. Se
deben explorar otras causas de mala interpretación, como la precisión de los genes a
los que se hace referencia en términos de ontología, y el uso sistemático de la
secuenciación de bisulfito del genoma completo, que no enriquece las regiones ricas
en CG, debe permitir una conclusión sobre la existencia real de epigenética inducida
por el medio ambiente. variación en los genes relacionados con el desarrollo del
cerebro en los espermatozoides. Sin embargo, se discute en el campo si la variación
epigenética causa variación genética oviceversa.En un estudio pionero que examinó
el vínculo entre la variación genética y la metilación del ADN, se encontró evidencia
de la expresión de genes específicos de alelos fuera de las regiones impresas.[43].
Otros han sugerido que los genotipos influyen en la mayoría de las regiones
hereditarias de metilación diferencial. Las investigaciones de una familia de tres
generaciones, así como de individuos no relacionados, descubrieron que los
polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) heterocigóticos se asocian con diferentes
patrones de metilación, lo que se correlaciona con la expresión génica.[44].
Sorprendentemente, al examinar los efectos del genotipo en la metilación del ADN,
las variantes genéticas parecieron tener un mayor impacto que la impronta.[44].
Además, un modelo matemático apoya la hipótesis de que la variación epigenética
puede ser genéticamente seleccionada[41]. Por supuesto, el papel de las mutaciones
genéticas en los modificadores epigenéticos no debe descartarse para ninguno de
los dos, ya que tiene el potencial de causar cambios profundos en la maquinaria
epigenética general de las células (revisado en[45]). En conjunto, es bastante difícil
en esta etapa desentrañar la causalidad en la relación entre la genética y la
epigenética. Indudablemente, la genética y la epigenética interfieren entre sí, pero se
justifican más investigaciones en esta área. Los cambios de metilación inducidos por
el medio ambiente también pueden ser bastante específicos de genes. Por ejemplo,
en un modelo de diabetes tipo 2, los espermatozoides
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albergaba cambios en la metilación del ADN en genes relacionados con el
metabolismo de la glucosa y la diabetes tipo 2[46]. En otro ejemplo, el
condicionamiento del miedo al olor con acetofenona indujo la hipometilación del gen
del receptor de acetofenona.Olfr151[10]. Estos estudios sugieren que los factores
ambientales (o al menos ciertos tipos) pueden desencadenar una respuesta
epigenética muy específica al servicio de una adaptación fisiológica específica.
Además, estos hallazgos desafían la teoría de que la respuesta epigenética a un
insulto ambiental es exclusivamente inespecífica, para permitir, a nivel de organismo
o célula individual, una respuesta fisiológica distinta en comparación con el resto de
la población. Por el contrario, otros estudios han informado que las agresiones
ambientales están asociadas con cambios en la metilación del ADN con cambios
específicos de función poco claros. En particular, la exposición de compuestos
derivados del plástico bisfenol-A (BPA), bis (2-etilhexil) ftalato (DEHP) y dibutil ftalato
(DBP) a varias generaciones de machos se asoció con metilación diferencial en 197
promotores, pero sin enriquecimiento de específicos. vías genéticas[11]. De manera
similar, los ratones con una dieta baja en proteínas exhibieron cambios en la
metilación del ADN en los espermatozoides que no estaban asociados con ninguna
vía genética específica.[3]. Semen de animales desnutridosen el úteromostró un
marcado perfil de hipometilación del ADN, con enriquecimiento en regiones
intergénicas e islas CpG y subrepresentación de los cambios de metilación del ADN
en elementos nucleares intercalados largos (LINE) y elementos nucleares
intercalados cortos (SINE)[5]. La hipometilación estuvo presente a nivel de la línea
germinal, lo que respalda queen el úterola desnutrición interrumpió la remetilación
del ADN durante la reprogramación de la línea germinal, pero no se identificaron
cambios coordinados claros en ninguna vía genética específica[5]. La provocación
con una dieta alta en grasas en ratas también induce la remodelación del metiloma
del ADN espermático en 92 regiones genómicas ubicadas en la proximidad de genes
enriquecidos para una función genética no específica, como la localización celular, el
transporte y los procesos metabólicos[6]. Dieciocho regiones fueron metiladas
diferencialmente tanto en el esperma de los fundadores en HFD como en su
descendencia, notablemente en la proximidad de Slc3a2 (familia de transportadores
de soluto 3 (cadena pesada del transportador de aminoácidos), miembro 2), Tbrg4
(regulador beta del factor de crecimiento transformante 4) y Mfsd7 (dominio de
superfamilia de facilitador principal que contiene 7), pero, en este caso, la escasez de
genes en común entre las dos generaciones no permitió el análisis de
enriquecimiento de genes[6].
La diversidad de respuestas epigenéticas bajo influencias ambientales podría
deberse a muchos factores, incluidos el momento y el tipo de estímulo ambiental, la
metodología utilizada para detectar cambios en la metilación del ADN, los
parámetros bioinformáticos utilizados, la especie, el sitio de recolección de esperma
(epididimo).contraeyaculados), purificación o no de espermatozoides móviles, etc.
Alternativamente, la diversidad en respuesta a influencias dietéticas podría indicar
que la señal detectada corresponde a niveles de ruido como se sugiere en una
investigación de todo el genoma sobre el efecto de una dieta rica en grasas en el
ADN del esperma. metilación en el ratón a una profundidad de secuenciación
extrema[47]. Esta conclusión se basa en la suposición de que las diferencias de
metilación por debajo del 10 % no pueden explicar la penetrancia del fenotipo, es
decir, la consistencia fenotípica en la descendencia de la siguiente generación.[47].
Sin embargo, sigue siendo posible otro modelo mediante el cual los cambios
epigenéticos modestos que ocurren en distintos loci se integran en una respuesta
fenotípica unificada, particularmente cuando se enfoca en procesos celulares
fundamentales como los procesos metabólicos. De hecho, la interconexión de los
metabolitos energéticos combinada con el hecho de que todos los procesos celulares
están dictados por el metabolismo energético implica que es probable que una
perturbación de solo unos pocos genes tenga implicaciones metabólicas. De interés,
la observación de que el estrés psicológico en los padres perturba el metabolismo en
la descendencia respalda que varios estímulos ambientales se integran en una
respuesta metabólica no específica, pero consistente, en la descendencia.[18]. Por el
contrario, el desafío nutricional induce una variación epigenética en los genes
modificadores de la cromatina.
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en el esperma que, a su vez, afecta globalmente el transcriptoma del tejido adiposo
de la descendencia y conduce a un fenotipo de peso corporal homogéneo
[48]. Cabe señalar que muchos estudios intergeneracionales se han centrado
en las lecturas metabólicas de la descendencia, como la tolerancia a la glucosa
y los cambios en la expresión génica en los órganos metabólicos.[3mi6,18,46].
Si bien el objetivo principal de estos estudios fue probar la hipótesis de que las
influencias paternas afectan el fenotipo de la descendencia a través de la
herencia epigenética, creemos que la naturaleza de la lectura fenotípica
(metabólica) no podría permitir una determinación exacta de la especificidad
de la respuesta. Es posible que otras respuestas fenotípicas, por ejemplo,
características de comportamiento, se vean afectadas de manera diferente por
las diversas exposiciones ambientales utilizadas. Ampliar el panel de
caracterización fenotípica de la descendencia en estudios intergeneracionales,
con un perfil paralelo del modelo epigenético en los espermatozoides,
permitirá determinar la relación entre cambios epigenéticos específicos en los
espermatozoides y la implicación en la descendencia.
3. CROMATINA ESPERMÁTICA
En comparación con las células somáticas, los espermatozoides albergan una estructura y
organización de cromatina muy distintas. El ADN en los espermatozoides está unido a protaminas,
que reemplazan a la gran mayoría de las histonas y permiten una estructura de empaquetamiento de
ADN seis veces más densa, protegiendo el ADN de los espermatozoides de los factores estresantes
extracelulares.Figura 2)[49]. La protaminación durante la espermatogénesis da como resultado la
eliminación de la mayor parte de la información epigenética transportada por las histonas. Sin
embargo, las proteínas histonas restantes son esenciales y pueden equilibrar los genes para el
desarrollo embrionario temprano.
3.1. Retención y modificación de histonas
El reemplazo de histonas por protaminas resulta de un proceso gradual durante la
espermatogénesis, que conduce gradualmente a la eliminación de 85mi95% de las
histonas, dependiendo de la especie[50]. Las proteínas de transición y H2A.L.2
facilitan el reemplazo de histonas por protaminas, lo que permite la carga de
protaminas en los nucleosomas. Las protaminas, a su vez, son responsables del
desalojo de histonas.[50]. La hiperacetilación de histonas participa en la eliminación
de histonas y se ha propuesto que la biodisponibilidad de acil-CoA impacta en la
compactación del genoma espermático[51]. La butirilación, otra modificación
postraduccional de las histonas, puede ocurrir de manera concomitante con la
hiperacetilación de las histonas durante la espermatogénesis, evitando la eliminación
de las histonas dependiente de la acetilación y, en última instancia, retrasando el
reemplazo por protaminas, lo que conduce a la modulación de la compactación de la
cromatina.[50,52,53]. Por lo tanto, los factores ambientales podrían controlar la
estructura genómica en espermatozoides maduros a través de la regulación de la
disponibilidad, acetilación y butirilación de acil-CoA.
El análisis de las regiones resistentes a la endonucleasa del genoma del esperma ha
revelado información sobre el nivel de empaquetamiento de la cromatina. Cuando se usa en
asociación con la detección de la marca H4K12ac, este análisis ha proporcionado evidencia
de que los nucleosomas no se retienen al azar, sino que se ubican en ubicaciones genómicas
específicas en el genoma del esperma.[54]. Estudios seminales han informado que las
histonas se retienen en las regiones génicas, preferiblemente en los genes que controlan el
desarrollo embrionario.[55,56]. Sin embargo, la comparación de la accesibilidad de la
nucleasa entre las células madre embrionarias de ratón y los espermatozoides mostró que la
mayoría de las histonas retenidas en los espermatozoides se encuentran principalmente en
regiones pobres en genes.
[57]. Esto fue confirmado por un grupo independiente que demostró que la retención de
histonas ocurre principalmente en regiones intergénicas distales, repeticiones y
retrotransposones.[58]. Razones técnicas, potencialmente relacionadas con la concentración
de endonucleasas o la duración de la digestión, podrían estar en el origen de las
discrepancias en la estimación de la distribución genómica específica de la retención de
histonas en los espermatozoides, como se sugiere[59]. Independientemente de estas
consideraciones técnicas, una proporción de histonas
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permanecen en secuencias promotoras, en particular secuencias reconocidas por el
factor de unión a CCCTC (CTCF) y cerca de genes implicados en el desarrollo
embrionario[54,57]. Usando la tinción de anticuerpos para las variantes de
replicación de la histona 3, se encontró que las protaminas son reemplazadas por
nucleosomas maternos después de la fusión de los gametos, mientras que las
histonas paternas retenidas permanecieron asociadas al genoma paterno.[60].
Curiosamente, la retención de histonas ocurre predominantemente en regiones de
alta densidad de CpG y baja metilación del ADN, por ejemplo, en los promotores de
los genes reguladores del desarrollo y el mantenimiento.[8,55]. De interés, las
histonas también se retienen en los genes involucrados en la percepción sensorial.
[54], que puede proporcionar un mecanismo molecular por el cual los insultos
ambientales en el padre alteran la percepción sensorial en la próxima generación
[10]. Consistentemente, las regiones genómicas con histonas retenidas se
enriquecieron para regiones metiladas diferencialmente en espermatozoides obesos
en comparación con hombres delgados[8]. Juntos, estos hallazgos respaldan un
papel específico de la retención de histonas en el desarrollo embrionario y también
un efecto potencial del estilo de vida y los factores ambientales, que podrían afectar
la programación del desarrollo a través de la modulación del posicionamiento de las
histonas en el esperma.
También se ha informado la variación inducida por la dieta de marcas específicas de
histonas en espermatozoides maduros.[3]. La intensidad del H3K27me3 en el gen
mitocondrial Monoamino oxidasa a (Maoa) y el factor de elongación Tu GTP que
contiene 1 dominio de unión (Eftud1a) es mayor en el esperma de ratones que
fueron alimentados con una dieta baja en proteínas durante tres meses[3]. Se
describe que las regiones repetitivas en el genoma del esperma están enriquecidas
en la marca H3K27me3, lo que sugiere que el silenciamiento de elementos
repetitivos está, al menos en parte, bajo el control de la retención y modificación de
histonas.[57]. Esta noción se demostró más tarde en el contexto de la expresión
génica temprana en el embrión.[61]. El hallazgo de que las histonas se retienen al
azar en pacientes infértiles, y que las marcas H3K4me y H3K27me están disminuidas,
respalda aún más que el posicionamiento y la modificación de las histonas son
importantes para la función normal de los espermatozoides y definitivamente
descalifica la idea de que las histonas restantes son remanentes no funcionales de la
espermatogénesis.[56].
La protaminación gradual del ADN espermático durante la espermatogénesis borra
de forma pasiva las señales epigenéticas que portaban las histonas eliminadas. Por
lo tanto, la protaminación participa en la reprogramación epigenética de la misma
manera que la desmetilación del ADN durante la espermatogénesis. Las influencias
ambientales que modifican la protaminación y el posicionamiento de la protamina,
por lo tanto, pueden constituir una señal epigenética en sí misma que es igualmente
importante para la modificación de histonas y los cambios de metilación del ADN
para influir en la actividad transcripcional después de la fertilización. Además del
ADN unido a protaminas e histonas, regiones específicas de ADN espermático se
unen a la matriz nuclear, en las denominadas regiones de unión a la matriz (MAR),
que constituyen una capa adicional de información sobre la estructura de la
cromatina en los espermatozoides.[62,63]. A niveles funcionales, las MAR son
esenciales para el desarrollo embrionario normal y están implicadas en la replicación
del ADN y la formación del pronúcleo masculino después de la fertilización.[62]. Por
lo tanto, la distribución de protaminas a lo largo del ADN espermático impulsa no
solo las señales epigenéticas relacionadas con las histonas, sino que, en paralelo,
define las regiones específicas del ADN involucradas en las MAR y, posteriormente,
puede sintonizar varios eventos tempranos de desarrollo posteriores a la
fertilización. Sin embargo, la influencia del estilo de vida y los factores ambientales
en el posicionamiento de la protamina sigue siendo muy desconocida. La
concentración de factores contenidos en el líquido seminal, como el zinc, puede
modular la formación de protamina y, posteriormente, la estructura de la cromatina
de una manera muy dinámica.[64]. Además de sus grupos cargados positivamente,
que neutralizan la carga negativa del esqueleto del ADN, las protaminas contienen
grupos tiol que forman puentes estabilizados con zinc, lo que permite un alto grado
de compactación.[sesenta y cinco].in vitrola evidencia sugiere que las variaciones en
la concentración de zinc extracelular pueden afectar el zinc
5
Revisar
contenido en la cabeza del espermatozoide e influir en la compactación del ADN
[sesenta y cinco].En vivo, la estructura de la protamina puede modularse cuando
ingresa al ooplasma, lo que permite la descompactación del ADN paterno. Además,
los cambios inducidos por el medio ambiente en la concentración de zinc en el
líquido seminal, el tiempo de exposición al líquido seminal durante las técnicas de
reproducción asistida o el tiempo en el tracto femenino pueden influir en la
concentración de zinc en la cabeza del espermatozoide y la estructura de la
cromatina. Sin embargo, se justifican estudios adicionales para determinar la
influencia del líquido seminal y el tracto femenino en la estructura y organización de
la protamina en el esperma.
Más evidencia respalda que los factores nutricionales cambian las marcas de histonas en los
espermatozoides en varios organismos modelo. Masculinodrosófilaalimentados con una
dieta alta en azúcar mostraron desrepresión transcripcional en los espermatozoides de una
manera específica del estado de cromatina[48]. La respuesta a la dieta paterna dependía de
la plasticidad de la cromatina espermática, en particular a través del silenciamiento
dependiente de H3K9me3 y H3K27me3[48]. Otro estudio que utilizó ratones como modelo
demostró el papel de las marcas de cromatina en los espermatozoides en la herencia
epigenética[66]. La remodelación de las marcas de esperma H3K4me2 utilizando un modelo
transgénico de sobreexpresión de la histona lisina 4 desmetilasa KDM1A durante la
espermatogénesis del ratón mostró una supervivencia reducida y anomalías del desarrollo
en tres generaciones posteriores
[66]. El aumento de la actividad de KDM1A durante el desarrollo del esperma se
asoció con la alteración de la metilación de las histonas y la expresión del ARN del
esperma, lo que sugiere que la modificación de las histonas podría participar, al
menos en parte, en los efectos transgeneracionales observados.[66]. Curiosamente,
el hecho de que la remodelación de las marcas H3K4me2 del esperma se asociara
con la expresión de ARN pequeño no codificante sugiere una cooperación entre las
diferentes marcas epigenéticas en la herencia epigenética.[66]. La noción de
cooperación epigenética está respaldada por un estudio previo que muestra que el
estrés traumático temprano induce una alteración transgeneracional del fenotipo
conductual y metabólico.[18]. En esta investigación, el estrés traumático temprano
indujo la remodelación de la expresión de miARN en los espermatozoides en los
espermatozoides F0 pero no en los F1, a pesar de la propagación del fenotipo
conductual y metabólico a la segunda generación (F2).[18]. Dado que los
experimentos de microinyección demostraron el papel del ARN espermático en la
respuesta transgeneracional al estrés traumático temprano
[18], este estudio sugiere que otras señales epigenéticas además de los ARN
cooperan para propagar los efectos transgeneracionales.
No se ha establecido el papel del posicionamiento y la modificación de las histonas en la
herencia epigenética. Evidencia de que algunas marcas de histonas en los espermatozoides
se borran después de la fertilización[67]indica que, si las señales de histonas transportadas
por el ADN paterno están involucradas en la herencia epigenética, estas señales no se
propagan a los tejidos adultos. Aún así, las marcas de histonas en los espermatozoides
pueden participar en los efectos intergeneracionales, pero más probablemente a través de la
alteración de la etapa muy temprana de la reprogramación del desarrollo.
4. RNAS PEQUEÑOS TRANSMITIDOS POR ESPERMA
Los ARN pequeños (ARNs) funcionan como reguladores epigenéticos de la expresión
génica ya sea por interacción con la maquinaria de traducción y/o por inducción de la
degradación de sus objetivos de ARNm complementarios. Durante la
espermatogénesis, el citoplasma, junto con la mayoría de sus transcritos, se agota
como un cuerpo residual, lo que deja a los espermatozoides inertes en el nivel de
traducción, como lo confirma la ausencia de ARNr intacto.[68]. Sin embargo, algunas
transcripciones se dejan como un grupo, que consta de ARN codificantes y no
codificantes en una cantidad de aproximadamente 200 veces menor que en las
células somáticas.[69]. En el pasado, se pensaba que los ARN restantes eran
moléculas remanentes no funcionales de pasos anteriores de la espermatogénesis, o
simplemente contaminación de células somáticas. Con el desarrollo de nuevos
métodos y herramientas de análisis, ahora está claro que las transcripciones
restantes, de hecho, se retienen selectivamente, lo que sugiere que
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Los ARN transmitidos por los espermatozoides son funcionales. Entre estos se encuentran
los ARNm fragmentados y no degradados, los ARN pi (que interactúan con piwi), los
fragmentos de ARN t (de transferencia) (tRF), los ARN si (pequeños de interferencia), los ARN
mi (micro) y los ARN lnc (no codificantes largos). . Krawetz y sus colegas sugirieron un papel
para las transcripciones de esperma en el desarrollo embrionario, quienes demostraron que
el ARN mensajero paterno se entrega a los ovocitos en la fertilización.
[70]. Otro estudio mostró que, al inyectar ARN que codifica la fosfolipasa C-
zeta en ovocitos de ratón, una parte de estas transcripciones se traducía en
proteínas funcionales.[71]. Posteriormente, un estudio seminal implicó a los
ARN de esperma en la transmisión de fenotipos no mendelianos.[72]. Juntos,
estos estudios han demostrado un papel para las transcripciones transmitidas
por espermatozoides en el desarrollo temprano del embrión y sugirieron un
papel en la herencia epigenética.
ARN que interactúan con piwi (26mi31 nucleótidos) se expresan específicamente en
las gónadas y se cree que silencian los elementos transponibles, especialmente en la
línea germinal, protegiendo la integridad del genoma. Los piRNA median su efecto a
través de las proteínas PIWI, una subfamilia de la familia de proteínas argonautas.
Además de su papel en la fertilidad masculina
[73]Los piRNA están involucrados en la herencia epigenética endrosófilay
C. elegante[74,75]. Los espermatozoides de humanos obesos y ratas con una dieta
rica en grasas tienen una firma piRNA alterada en comparación con sus contrapartes
magras, lo que podría indicar un papel de los piRNA en la herencia epigenética de la
disfunción metabólica[6,8,9]. En humanos obesos sanos en edad fértil, la expresión
de 37 piRNA se alteró en los espermatozoides, en comparación con los
espermatozoides de hombres delgados[8]. La predicción del objetivo computacional
de estas secuencias de siembra complementarias basadas en piRNA al mRNA, arrojó
que el gen Transcrito regulado de cocaína y anfetamina (CART), un regulador
negativo de la ingesta de alimentos involucrado en la obesidad, era un objetivo
putativo (revisado en
[76]). Existen datos que muestran que los factores del estilo de vida pueden modular
el piRNA en el esperma. Seis semanas de entrenamiento físico alteran la expresión
de 6 piRNA diferentes en los espermatozoides de individuos jóvenes sanos y
delgados[9]. Es importante destacar que, como se discutió anteriormente, la
expresión alterada de piRNA no se debió a un simple efecto del tiempo de
recolección entre el estado no entrenado y el entrenado, ya que los cambios en la
expresión de piRNA se revirtieron después de un período de desentrenamiento de 3
meses. Estos datos indican que los efectos del estilo de vida son, de hecho,
específicos y que la expresión de piRNA en los espermatozoides es dinámica. La
predicción objetivo de piR-hsa-28160, uno de los piRNA expresados
diferencialmente en respuesta al ejercicio, devolvió el ARN que interactúa con ILF3/
NF90, el ARN asociado con ILF3/NF90 pequeño (SNAR), un regulador del miembro de
la familia let7 let7a, que es una familia de miARN conocida por estar involucrada en
la inflamación, el metabolismo de la glucosa[77mi79] y, más recientemente, la
herencia epigenética como se menciona en esta revisión[6,20].
Otras moléculas importantes que pertenecen a los ARN pequeños y que se cree que
contribuyen a la herencia epigenética son los fragmentos de ARNt o tRF. Los tRF
varían en longitud (10mi45 nucleótidos) y se derivan principalmente de los 50
final del tRNA maduro o del pre-tRNA. La observación de que los tRF participan en la síntesis
de piRNA en gametos y cigotos de ratón sugirió un papel de los tRF transmitidos por los
espermatozoides en la herencia epigenética.[80]. Más recientemente, varios grupos han
proporcionado pruebas convincentes de que los tRF desempeñan un papel en la herencia
epigenética[17,20]. Una dieta baja en proteínas remodela la expresión de varios fragmentos
de tRF en espermatozoides de fundadores en el origen de los efectos parentales[20]. Se
sugirió el papel potencial de los tRF de espermaa través dela inyección intracitoplasmática de
espermatozoides (ICSI) de espermatozoides de fundadores con una dieta baja en proteínas.
Estos experimentos identificaron a tRF-Gly-GCC como un represor de genes vinculados a un
retroelemento endógeno activo en el embrión previo a la implantación.[20]. Se utilizó un
enfoque similar que descubrió fragmentos de ARNt alterados en el esperma de ratones
alimentados con una dieta rica en grasas. Este estudio demostró además que la inyección de
fragmentos de ARNt aislados de esperma HFD en el control
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los cigotos dieron como resultado trastornos metabólicos de la descendencia junto con la
expresión génica alterada de las vías metabólicas en los embriones tempranos
[17]. Juntos, estos resultados indican de manera convincente que los tsRNA de
esperma podrían desempeñar un papel en la transmisión de señales epigenéticas
inducidas por la dieta del padre a la descendencia, a través de la modulación del
desarrollo embrionario.
Los micro ARN (miARN) son el subtipo mejor caracterizado de ARNs. Los
miARN están constituidos por un ARN estructurado en horquilla de 22
nucleótidos de largo y están bien descritos en la regulación de la expresión
génica. En una vía canónica, los miARN regulan a la baja la expresión génica al
dirigirse a los ARNm en sus 30UTR, que da como resultado la represión de la
traducción o la degradación del ARNm[81]. Un miARN puede dirigirse a varios
ARNm; un mRNA puede ser el objetivo de varios miRNA. Esto significa que las
redes de miARN-ARNm pueden ser complejas de resolver y la función de los
miARN individuales difícil de identificar. Varios estudios han identificado la
función de los miARN transmitidos por los espermatozoides. Por ejemplo,
miR-34c es el miARN más abundante en el esperma humano y se demostró
que es necesario para las primeras divisiones celulares en embriones de ratón.
[82]. Además, varios grupos han proporcionado evidencia de que los miARN juegan
un papel importante en la provisión de señales para el desarrollo embrionario
temprano.[18,19,72,83mi85]. Los ratones que recibieron una inyección cigótica de
una combinación de nueve miARN que se alteraron en el esperma paterno después
de la exposición al estrés crónico tuvieron descendencia que desarrolló respuestas
alteradas al estrés muy parecidas al fenotipo del padre[86]. Más recientemente, el
miARN let-7c se identificó como un potencial portador de la herencia epigenética
transgeneracional inducida por la dieta paterna rica en grasas.[6]. Se sabe que la
familia de miARN let-7 controla el metabolismo de los lípidos y la glucosa, y se
encontró que se expresaba diferencialmente en los espermatozoides de ratas
alimentadas con HFD, así como en los espermatozoides de sus crías.[6]. Como
respuesta a la obesidad paterna, la descendencia desarrolló alteraciones en el
metabolismo de la glucosa y los lípidos, junto con una expresión alterada observada
de let-7c en el hígado, tejido adiposo blanco y tejido muscular de la descendencia
adulta.[6,87]. Curiosamente, la familia de miARN let-7 parece estar implicada
también en otros modelos de herencia transgeneracional inducida por la dieta.
Cuando se exponen ratones a una dieta baja en proteínas en el período previo a la
concepción, varias especies let-7 se regulan a la baja en los espermatozoides
asociados con un fenotipo alterado de la descendencia.[20]. Estos descubrimientos,
realizados por distinguidos laboratorios, indican que los miembros de la familia let-7
son sRNA de esperma sensibles a la dieta que median la herencia intergeneracional.
Si bien algunas moléculas de sRNA parecen responder a una variedad de estímulos, por
ejemplo, el estrés nutricional, cabe señalar que la composición de los diferentes subgrupos
de sRNA varía entre las especies animales. En humanos, los piRNA, seguidos de los tRNA y
los miRNA, constituyen los subgrupos de sncRNA más abundantes.[8,88], mientras que en
roedores, los ARNt son, con mucho, el grupo más abundante cuando se considera el
contenido de espermatozoides completamente maduros[20,85]. Sin embargo, esta
composición cambia a lo largo de la maduración del espermatozoide, siendo los piRNA la
forma más abundante en los primeros procesos de espermatogénesis y luego disminuyendo
lentamente en cantidad, mientras que los tRNA aumentan en abundancia a medida que
avanza la maduración.[17]. Si bien la escisión dependiente de la etapa de ARNt específicos
puede estar en el origen de los tRF de los espermatozoides, existe evidencia que respalda
que las células epiteliales del epidídimo proporcionan ARNt de los epididimosomas, durante
el viaje de los espermatozoides en el epidídimo.[20]. Por supuesto, la diferencia en la
composición de sRNA entre especies puede establecerse evolutivamente, pero es posible
que estén involucradas diferencias en los métodos para la recolección de espermatozoides
maduros. En estudios con humanos, las células de semen se recolectan y aíslan de los
eyaculados de esperma, mientras que la mayoría de los estudios con roedores recolectan
espermatozoides directamente del epidídimo. Como se mencionó, las células epiteliales
pueden entregar sRNA a los espermatozoides maduros.[20]; por lo tanto, es posible que las
diferencias metodológicas
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al recolectar espermatozoides puede explicar las disparidades en la composición. De
hecho, los espermatozoides en los eyaculados han atravesado todo el tracto genital
masculino, mientras que la recolección de espermatozoides en varios lugares del
epidídimo (cauda, corpus y caput) puede resultar en espermatozoides inmaduros,
en términos de contenido de ARN. Sin embargo, varios grupos han tenido éxito en
replicar parcialmente las alteraciones fenotípicas obtenidas por apareamiento
natural a través de generaciones utilizando técnicas de FIV/ICSI, o microinyección de
ARN aislado de esperma, donde el esperma se recolectó en el epidídimo.
[17,18,20,84]. Sin embargo, entre otros factores de confusión más obvios, las
diferencias en los métodos dificultan la deducción de hallazgos de una especie a
otra. Una forma de explicar esto podría ser la recolección de semen mediante
estimulación eléctrica rectal en roedores, pero este método es un desafío ético y
metodológico de establecer, debido a su naturaleza estresante y dolorosa.
A pesar de la evidencia mencionada anteriormente de que los sRNA transmitidos por
los espermatozoides contribuyen a la herencia epigenética, los mecanismos reales
de acción, es decir, en el embrión en desarrollo, aún no están suficientemente
definidos. Sin embargo, el desarrollo continuo de nuevas tecnologías, como el perfil
transcriptómico a nivel de una o pocas células, ha facilitado enormemente las
investigaciones sobre el papel transcriptómico de los sRNA. Además, la evidencia
acumulada sugiere que los sRNA de los espermatozoides influyen en otras marcas
epigenéticas. Por ejemplo, en la inactivación de genes, donde los sRNA contribuyen
al reclutamiento de histonas metilasas, como durante el establecimiento de la
inactivación del cromosoma X y en las regiones impresas. [89,90]. Además, los sRNA
pueden afectar los niveles de metilación del ADN en loci específicos a través de la
interacción con las ADN metiltransferasas.[91,92].
Las proteínas Argonaute y diferentes modificaciones de histonas co-
inmunoprecipitado, lo que lleva a la especulación de que los sRNA alteran la
estructura de la cromatina en sitios objetivo específicos (revisado en[93]). Una
diafonía entre las marcas epigenéticas implicaría que las investigaciones
centradas en la transmisión de señales epigenéticas desde el gameto a las
células somáticas de la descendencia deberían ser exhaustivas para todas las
principales marcas epigenéticas, metilación del ADN, modificación de histonas
y expresión de ARNs, lo que representa un tiempo muy -estrategia
consumidora y financieramente exigente en la fecha actual.
5. CONSIDERACIONES EVOLUTIVAS
La alta densidad de genes CpG denominada "control de procesos
neurológicos" en las bases de datos de ontología plantea la cuestión adicional
de un posible papel de la variación epigenética en la variación genética. Como
se sugirió anteriormente[94], se cree que las citosinas metiladas constituyen
puntos calientes para la desaminación (donde las citosinas metiladas se
convierten en timinas) y la mutación. La noción de que las citosinas metiladas
son mutagénicas ha sido el origen de la teoría de que la hipometilación es un
mecanismo que protege la integridad de la secuencia de ADN.[94]. Esta teoría
está respaldada por la observación computacional de que los SNP en el
genoma humano ocurren con mayor frecuencia en los sitios CpG.[95]. Hasta
donde sabemos, sólo un estudio, realizado enE. coli,ha abordado
experimentalmente la mutagenicidad de las citosinas metiladas, por lo que las
tasas de desaminación de 5-metilcitosina dentro del ADN de doble cadena
fueron más altas que las de la citosina[96]. La mutagenicidad de las citosinas
está respaldada además por unen silicoestudio, en el que la comparación de
secuencias ortólogas ricas en CpG entre primates sugiere que existe un
proceso activo de conservación de CpG en regiones genómicas específicas
[95]. En particular, las regiones impresas H19 y GTL2/DLK1 en la línea germinal masculina
muestran tasas de pérdida de CpG más bajas de lo esperado.[95]. Además, las islas CpG
ubicadas en regiones exónicas también muestran bajas tasas de divergencia de citosina.[95].
Estas observaciones podrían indicar en conjunto que algunas regiones genómicas son
propensas a la variación epigenética y las mutaciones genéticas posteriores, mientras que
otras regiones están protegidas para
7
Revisar

mutagenicidad inducida por metilación. Nuestros datos muestran que las regiones
epigenéticamente variables en hombres obesos se superponen con variantes
previamente identificadas en estudios de asociación de obesidad en todo el genoma.
Esto favorecería que la variación epigenética inducida por el estilo de vida también
ocurra en los puntos críticos de variación genética.[8]. Este proceso ha sido descrito
por el biólogo del desarrollo Conrad Waddington como “asimilación genética”.[97].
La implicación evolutiva de la variación epigenética como fuente de variación
genética es atractiva, ya que reconciliaría dos modelos teóricos de evolución de las
especies que a menudo son opuestos; la evolución a través de la herencia
lamarckiana, donde el genoma se modifica directamente por factores estresantes
ambientales y luego se transmite transgeneracionalmente, y la evolución a través de
la selección darwiniana, donde existe una variación genética continua dentro de una
población y conduce a la selección en los extremos del fenotipo. Sin embargo, el
modelado matemático indica que la variación epigenética puede seleccionarse
genéticamente[41], lo que está en contradicción con el modelo opuesto en el que la
variación epigenética es una causa de la variación genética. Si bien ambos modelos
pueden cooperar, más evidencia experimental, aparte de
computacionalmente, debe proporcionarse para abordar la
mutagenicidad de las regiones sujetas a la variación epigenética
inducida por el medio ambiente y las implicaciones evolutivas.
6. OBSERVACIONES FINALES
Si bien la investigación actual apunta a la regulación epigenética como un
mecanismo de control factible para la herencia paterna, es un desafío descartar
factores de confusión (no gaméticos) que podrían estar en juego en los efectos de los
padres. Por ejemplo, el intercambio de microbiota en el momento del apareamiento
puede participar en un entorno de desarrollo alterado para el embrión. Además, los
factores del líquido seminal paterno teóricamente pueden afectar el entorno fetal
antes o durante la fusión de los gametos, ya que se sabe que contiene factores de
señalización potenciales, como las hormonas. Curiosamente, se han detectado
niveles seminales elevados de insulina y leptina en hombres obesos[98], y los análisis
de espectrometría de masas han revelado más de 20 proteínas expresadas
diferencialmente en el plasma seminal de fumadores
[99]. Los espermatozoides no están en contacto con la fracción completa del semen.

tabla 1miSelección de estudios que aportan evidencia de herencia epigenética transgeneracional en modelos murinos.

autor, año Intervención especies, generaciones Marcas epigenéticas estudiadas Técnica(s) utilizada(s)
investigado

Carone et al., 2010 Dieta paterna baja en proteínas antes de la Ratón, F0þF1 Espermatozoide, F0: metilación del ADN y Esperma, F0: MeDIP-seq, bisulfito
concepción ncRNA pequeño seq, micromatriz de ARN
Hígado, F1: metilación del ADN, ncRNA Hígado, F1: micromatriz de ADN,
pequeño RRBS, bisulfito seq, HT-seq de miARN
Radford et al., 2014 Restricción calórica materna durante Ratón, (F0)þF1þF2 Esperma, F1: ADN Esperma, F1: MeDIP-seq, bisulfito
la gestación (F0) Metilación pirovateseq
Hígado/cerebro, F2: metilación del ADN F2, hígado/cerebro: Bisulfito pirovateseq
de castro barbosa Dieta paterna rica en grasas antes de la Rata, F0þF1þF2 Esperma, F0þF1þF2: metilación del ADN, Espermatozoide, F0þF1þF2: MBD-seq, ARN-
et al., 2016 concepción ncRNA pequeño Tejidos metabólicos, F1þ seq
F2: ARNnc pequeño Tejido metabólico, F1þF2: secuencia de ARN

Dias y Ressler, Condicionamiento del miedo al olor paterno Ratón, F0þF1þF2 esperma, F0þF1: metilación del ADN, esperma, F0þF1: bisulfito seq
2014 Crianza cruzada, FIV cromatina esperma, F0: Native-ChIP
Epitelio olfatorio principal, F1þF2: secuencia

de bisulfito
Manikkam Exposición materna a disruptores Rata, F0þF1þF3 Esperma, F3: metilación del ADN Esperma, F3: MeDIP-Chip
et al., 2013 endocrinos durante la gestación (F0)
McPherson Exposición paterna a dieta rica en grasas y/ Ratón, F0þF1 Esperma, F0: microARN Esperma, F0: matriz de microARN
et al., 2015 o ejercicio antes de la concepción Dieta
Wei et al., 2014 paterna rica en grasasþestreptozodocina Ratón, F0þF1þF2 Esperma, F0: metilación del ADN Esperma, F0: MeDIP-Seq, bisulfito
en dosis bajas antes de la concepción Páncreas, F1: metilación del ADN seq Páncreas, F1: MeDIP-Seq,
Páncreas, F2: metilación del ADN bisulfito seq
Páncreas, F2: MeDIP-qPCR
Gapp et al., 2014 Estrés traumático paterno en la vida temprana Ratón, F0þF1þF2 Microinyección de ARN esperma, F0þF1þF2: Cerebro ncRNA RNA-seq (todos los tejidos)
de esperma en cigotos ctrl pequeñoþsuero, F0þF1þF2: ARNnc
pequeño
Sharma et al., 2016 Dieta paterna baja en proteínas antes Ratón, F0þF1 Esperma, epidídimo, testículo, F0: Esperma, epidídimo, testículo F0:
de la concepción FIV, ICSI/microinyección de ARN ncRNA RNAseq
específico en cigoto ctrl Embrión único, F1: ncRNA Embrión único, F1: RNA-seq
Chen et al., 2016 Dieta paterna rica en grasas antes de la Ratón, F0þF1 Espermatozoide, F0: ncRNA Espermatozoide, F0: RNA-seq
concepción Microinyección de cabeza de Páncreas, embrión/blastocisto, F1: Páncreas, F1: RNA-seq, RRBS
espermatozoide/ARN total/ARN específico ncRNA, metilación del ADN Embrión único/blastocisto: RNA-seq
Grandjean et al., 2009 Microinyección de microARN específico en cigotos ctrl Ratón, Microinyección de Embriónþtejido adulto, F1: microARN Embriónþtejido adulto, F1: RTqPCR,
en cigotos ctrl microARN específico en cigotos ctrl específico, cromatina ChIP
(F1)þF2þF3
Wagner et al., 2008 Microinyección de microARN específico Ratón, microinyección de F1, corazón: microARN específico Corazón, F1: RT-qPCR
en cigotos ctrl microARN específico en cigotos
Cropley et al., 2016 Modelo de ratón con obesidad ctrl (F1) Ratón, F0þF1þF2þF3 Esperma, F1: ncRNA Esperma, F1: RNA-seq
congénica paterna/prediabetes
Grandjean et al., 2015 Dieta paterna alta en grasas/alta en azúcar Microinyección de ARN total/microARN Testículos, espermatozoides, F0: ncRNA Testículo, F0: RNA-seq
antes de la concepción específico de testículos y espermatozoides en Testículos, espermatozoides, F0: RT-qPCR

cigotos ctrl (F1)

secuencia¼secuenciación; MeDIP¼Inmunoprecipitación de ADN metilado; RRBS¼Secuenciación de bisulfito representativa reducida; (RT-)qPCR: (transcripción inversa) polimerasa cuantitativa
reacción en cadena; MBD¼dominio de unión a metilo; ChIP: inmunoprecipitación de cromatina.

8 METABOLISMO MOLECULAR 14 (2018) 1mi11 -2018 Los Autores. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
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líquido antes de la eyaculación, pero como suele pasar unas pocas horas antes de que los
espermatozoides alcancen el ovocito, los espermatozoides son susceptibles de estar
expuestos a estos factores muchas horas antes de la fertilización. La suposición común es
que los cambios de metilación del ADN en los espermatozoides ocurren exclusivamente
antes de la eyaculación. La presencia de enzimas modificadoras de la metilación del ADN en
espermatozoides maduros[100,101]y el hecho de que la metilación dinámica del ADN puede
ocurrir en células que no se dividen[102], sin embargo, apoyaría la provocativa hipótesis de
que la metilación del ADN espermático puede alterarse en los espermatozoides maduros.
Además, las células somáticas pueden entregar contenido de sRNA directamente al
espermatozoide maduro como se sugiere.[20]. Así, los espermatozoides maduros, incluso
después de la eyaculación, pueden ser remodelados epigenéticamente por el líquido seminal
o por factores o células del tracto genital femenino.
6.1. ¿Las marcas epigenéticas inducidas por la dieta se transmiten a la
descendencia?
Comprender los mecanismos por los cuales los cambios del epigenoma del
esperma impulsados por el medio ambiente afectan el metabolismo de la
descendencia representa un vacío muy importante que llenar. Dada la
importancia del epigenoma del espermatozoide en el desarrollo embrionario,
es muy plausible que cualquier modulación de la señal epigenética gamética
altere la programación del desarrollo del embrión. Tal alteración se
amplificaría a través del llamado modelo de Waddington, según el cual
pequeños cambios epigenéticos que ocurren temprano durante la
diferenciación celular impulsan la expresión génica específica del tejido.[97].
La caracterización de los cambios impulsados por el medio ambiente que se
transmiten a las células madre de la descendencia sería muy informativa.
Es tentador postular que las marcas de metilación de la cromatina y el ADN que
varían bajo el estrés ambiental tienen una función posterior a la fertilización y no son
simplemente decorativas. Sin embargo, esta suposición puede ser difícil de probar,
ya que examinar el efecto de los patrones de metilación del ADN específicos en el
esperma en la programación del desarrollo del embrión sigue siendo un desafío
técnico. Herramientas de edición que utilizan el sistema CRISPR-Cas9 sin nucleasas,
por ejemplo, CRISPR-Cas9 fusionado con ADN metiltransferasa 3A[103]o la enzima
participante en la desmetilación TET1[104]puede ser usado. Sin embargo, si las
señales de metilación del ADN localizadas en una plétora de loci se metilan de forma
diferencial, es posible que estas herramientas no puedan dirigirse a todos los sitios
genómicos en el mismo espermatozoide.
Por otro lado, los experimentos de microinyección que utilizan sRNA han
proporcionado pruebas convincentes de que el sRNA puede llevar efectos parentales
a la próxima generación.[10,17mi20]. Sin embargo, el hecho de que muchos de estos
experimentos condujeran a un metabolismo alterado en la descendencia no indica
una alta especificidad.[17,19,20]. Como se discutió anteriormente en esta revisión,
las características metabólicas como la tolerancia a la glucosa y la insulina
constituyen lecturas que probablemente se vean afectadas por cada ligera alteración
en la programación del embrión y, por lo tanto, es probable que la microinyección de
cualquier especie de sRNA afecte el metabolismo de una forma u otra. El uso de un
tipo de sRNA que no varíe bajo el insulto ambiental específico como control negativo
para el experimento de microinyección, en lugar de moléculas codificadas, por
ejemplo, ayudaría a determinar la especificidad del sRNA en la herencia epigenética.
En la actualidad, en el campo de la herencia epigenética, aún quedan muchas
preguntas sin respuesta. El mecanismo de cómo se establecen y alteran los factores
epigenéticos en la línea germinal, así como en las células somáticas, no se
comprende bien. La causalidad aún no se ha explicado, y todavía se debate mucho
en qué medida los factores genéticos y epigenéticos interactúan en la manipulación
de la expresión génica y el fenotipo influenciada por el medio ambiente. Una visión
general de la diversidad de las respuestas epigenéticas al estilo de vida o a los
insultos ambientales (tabla 1) está impulsando a los investigadores en el campo a
comprender mejor la contribución del momento y la duración de la exposición, el
sexo, las especies y la tecnología utilizada en
METABOLISMO MOLECULAR 14 (2018) 1mi11 -2018 Los Autores. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
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Cambios epigenéticos en los espermatozoides (Figura 1). Los esfuerzos de
investigación futuros pueden identificar una respuesta de remodelación epigenética
unificada al estrés del estilo de vida en todas las especies. Comprender el papel de
los cambios epigenéticos ambientales en los gametos sobre el fenotipo de la
descendencia constituye no solo una pregunta biológica fascinante en sí misma, sino
que también representa una obligación moral para la salud de las generaciones
futuras.
AGRADECIMIENTOS
Este trabajo ha sido financiado por la subvención nórdica de endocrinología de la Fundación Novo
Nordisk 21448. El Centro de investigación metabólica básica de la Fundación Novo Nordisk es un
centro de investigación independiente de la Universidad de Copenhague financiado parcialmente por
una donación ilimitada de la Fundación Novo Nordisk.
CONFLICTO DE INTERESES
Ninguno que declarar.
REFERENCIAS
[1]Noble, D., et al., 2014. La evolución evoluciona: la fisiología vuelve al centro del
escenario. El diario de fisiología 592 (11): 2237mi2244.
[2]Pembrey, ME, et al., 2006. Respuestas transgeneracionales de línea masculina específicas del
sexo en humanos. Revista Europea de Genética Humana 14(2):159mi166.
[3]Carone, BR, et al., 2010. Reprogramación ambiental transgeneracional inducida
paternalmente de la expresión de genes metabólicos en mamíferos. Celda
143(7):1084mi1096.
[4]Ng, SF, et al., 2014. El consumo paterno de una dieta rica en grasas induce cambios
comunes en los transcriptomas del tejido adiposo retroperitoneal y de los islotes
pancreáticos en crías de ratas hembra. Revista FASEB 28(4):1830mi1841.
[5]Radford, EJ, et al., 2014. Efectos en el útero. La desnutrición en el útero perturba el
metiloma del esperma adulto y el metabolismo intergeneracional. Ciencia 345 (6198):
1255903.
[6]de Castro Barbosa, T., et al., 2016. La dieta alta en grasas reprograma el epigenoma de
los espermatozoides de rata y afecta transgeneracionalmente el metabolismo de la
descendencia. Metabolismo Molecular 5(3):184mi197.
[7]Denham, J., et al., 2015. Cambios en la metilación del ADN espermático en todo el genoma
después de 3 meses de entrenamiento físico en humanos. Epigenómica 7(5):717mi731.
[8]Donkin, I., et al., 2016. La obesidad y la cirugía bariátrica impulsan la variación epigenética de los
espermatozoides en humanos. Metabolismo celular 23(2):369mi378.
[9]Ingerslev, LR, et al., 2018. El entrenamiento de resistencia remodela la expresión y la metilación del ARN
pequeño transmitido por los espermatozoides en puntos críticos de genes neurológicos. Epigenética
Clínica.
[10]Dias, BG, et al., 2014. La experiencia olfativa de los padres influye en el comportamiento y la
estructura neuronal en las generaciones posteriores. Naturaleza Neurociencia 17(1): 89mi96.
[11]Manikkam, M., et al., 2013. Los disruptores endocrinos derivados de plásticos (BPA, DEHP y DBP)
inducen la herencia transgeneracional epigenética de la obesidad, las enfermedades
reproductivas y las epimutaciones espermáticas. PLoS Uno 8(1):e55387.
[12]McPherson, NO, et al., 2015. La dieta previa a la concepción o la intervención de ejercicio en
padres obesos normaliza el perfil de microARN de esperma y el síndrome metabólico en la
descendencia femenina. Revista estadounidense de fisiología, endocrinología y metabolismo
308 (9): E805miE821.
[13]Ge, ZJ, et al., 2013. La diabetes materna provoca alteraciones en los estados de
metilación del ADN de algunos genes impresos en ovocitos murinos. Biología de la
Reproducción 88(5):117.
[14]Ge, ZJ, et al., 2014. Metilación del ADN en ovocitos e hígado de ratones hembra y sus
crías: efectos de la obesidad inducida por una dieta rica en grasas. Perspectivas de
Salud Ambiental 122(2):159mi164.
9
Revisar
[15]Stilling, RM, et al., 2014. Genes microbianos, cerebro y comportamiento: regulación epigenética
del eje intestino-cerebro. Genes, cerebro y comportamiento 13(1):69mi86.
[dieciséis]Curley, JP, et al., 2011. Epigenética y los orígenes de los efectos paternos.
Hormonas y Comportamiento 59(3):306mi314.
[17]Chen, Q., et al., 2016. Los tsRNA de esperma contribuyen a la herencia intergeneracional de un
trastorno metabólico adquirido. Ciencia 351 (6271): 397mi400.
[18]Gapp, K., et al., 2014. Implicación de los ARN de esperma en la herencia
transgeneracional de los efectos del trauma temprano en ratones. Naturaleza
Neurociencia 17(5): 667mi669.
[19]Grandjean, V., et al., 2015. Herencia paterna mediada por ARN de la obesidad y los trastornos
metabólicos inducidos por la dieta. Informes científicos 5:18193.
[20]Sharma, U., et al., 2016. Biogénesis y función de fragmentos de ARNt durante la
maduración y fertilización del esperma en mamíferos. Ciencias 351 (6271): 391
mi396.
[21]Ventura-Junca, P., et al., 2015. Fecundación in vitro (FIV) en mamíferos:
alteraciones epigenéticas y del desarrollo. Implicaciones científicas y bioéticas
de la FIV en humanos. Investigación biológica 48:68.
[22]Jaenisch, R., 1997. Metilación e impresión del ADN: ¿por qué molestarse? Tendencias en
Genética 13(8):323mi329.
[23]Bird, AP, et al., 1999. Represión inducida por metilaciónmicinturones, tirantes y
cromatina. Celda 99(5):451mi454.
[24]Ito, S., et al., 2010. Papel de las proteínas Tet en la conversión de 5 mC a 5 hmC, la autorrenovación de
células ES y la especificación de la masa celular interna. Naturaleza 466(7310):1129mi1133.
[25]Tahiliani, M., et al., 2009. Conversión de 5-metilcitosina a 5-
hidroximetilcitosina en ADN de mamíferos por el socio TET1 de MLL.
Ciencia 324 (5929): 930mi935.
[26]Woodcock, DM, et al., 1987. La mayoría de las desoxicitidinas metiladas en el
ADN humano no están en el dinucleótido CpG. Comunicaciones de
investigación bioquímica y biofísica 145 (2): 888mi894.
[27]Lister, R., et al., 2009. Los metilomas del ADN humano en resolución básica muestran
diferencias epigenómicas generalizadas. Naturaleza 462(7271):315mi322.
[28]Yan, J., et al., 2011. Evidencia de metilación no CpG en mamíferos. Investigación
celular experimental 317 (18): 2555mi2561.
[29]Barres, R., et al., 2009. La metilación no CpG del promotor PGC-1alfa a través de
DNMT3B controla la densidad mitocondrial. Metabolismo celular 10(3): 189mi
198.
[30]Ichiyanagi, T., et al., 2013. Acumulación y pérdida de metilación asimétrica no CpG
durante el desarrollo de células germinales masculinas. Investigación de ácidos
nucleicos 41(2):738mi745.
[31]Messerschmidt, DM, et al., 2014. Dinámica de metilación del ADN durante la
reprogramación epigenética en la línea germinal y embriones de
preimplantación. Genes y Desarrollo 28(8):812mi828.
[32]Seisenberger, S., et al., 2012. La dinámica de la reprogramación de la metilación del ADN en todo
el genoma en células germinales primordiales de ratón. Célula molecular 48(6): 849mi862.
[33]Tang, WW, et al., 2016. Especificación y programación epigenética de la línea
germinal humana. Nature Reviews Genética 17(10):585mi600.
[34]Kobayashi, H., et al., 2013. El análisis de metiloma de ADN de alta resolución de células
germinales primordiales identifica la reprogramación específica de género en ratones.
Investigación del genoma 23 (4): 616mi627.
[35]Gkountela, S., et al., 2015. Dinámica de desmetilación del ADN en la línea germinal
prenatal humana. Celda 161(6):1425mi1436.
[36]Wang, X., et al., 2011. Cromatografía líquida de ultra rendimiento/espectrometría de
masas en tándem para la cuantificación precisa de la metilación global del ADN en
espermatozoides humanos. Revista de cromatografía. B 879(19):1647mi1652.
Tecnologías analíticas en las ciencias biomédicas y de la vida.
[37]Molaro, A., et al., 2011. Los perfiles de metilación del esperma revelan características de
herencia epigenética y evolución en primates. Celda 146(6):1029mi1041.
[38]Ehrlich, M., et al., 1982. Cantidad y distribución de 5-metilcitosina en ADN
humano de diferentes tipos de tejidos de células. Investigación de ácidos
nucleicos 10(8):2709mi2721.
10 METABOLISMO MOLECULAR 14 (2018) 1mi11 -2018 Los Autores. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
[39]Simar, D., et al., 2014. La metilación del ADN está alterada en los linfocitos B y NK en
humanos obesos y diabéticos tipo 2. Metabolismo 63(9):1188mi1197.
[40]Tang, WW, et al., 2015. Una red reguladora de genes única restablece el epigenoma de la línea
germinal humana para el desarrollo. Celda 161(6):1453mi1467.
[41]Feinberg, AP, et al., 2010. Evolución en salud y medicina Coloquio de Sackler: la
variación epigenética estocástica como fuerza impulsora del desarrollo, la
adaptación evolutiva y la enfermedad. Actas de la Academia Nacional de
Ciencias de los Estados Unidos 107 (Suplemento 1): 1757mi1764.
[42]Feinberg, JI, et al., 2015. Metilación del ADN del esperma paterno asociada con signos tempranos
de riesgo de autismo en una cohorte enriquecida con autismo. Revista Internacional de
Epidemiología 44(4):1199mi1210.
[43]Kerkel, K., et al., 2008. Las encuestas genómicas mediante análisis de SNP sensibles a la
metilación identifican la metilación del ADN específica del alelo dependiente de la secuencia.
Genética natural 40(7):904mi908.
[44]Gertz, J., et al., 2011. El análisis de la metilación del ADN en una familia de tres
generaciones revela una influencia genética generalizada en la regulación
epigenética. PLoS Genética 7(8):e1002228.
[45]You, JS, et al., 2012. Genética y epigenética del cáncer: ¿dos caras de la misma moneda?
Célula cancerosa 22(1):9mi20.
[46]Wei, Y., et al., 2014. Herencia transgeneracional inducida paternalmente de la
susceptibilidad a la diabetes en mamíferos. Actas de la Academia Nacional de
Ciencias de los Estados Unidos 111 (5): 1873mi1878.
[47]Shea, JM, et al., 2015. La variación genética y epigenética, pero no la dieta, dan forma al
metiloma del esperma. Célula de desarrollo 35(6):750mi758.
[48]Ost, A., et al., 2014. La dieta paterna define el estado de cromatina de la descendencia y la
obesidad intergeneracional. Celda 159(6):1352mi1364.
[49]Ward, WS, et al., 1991. Empaquetado y organización del ADN en espermatozoides de
mamíferos: comparación con células somáticas. Biología de la Reproducción 44(4):
569mi574.
[50]Barral, S., et al., 2017. La variante de histona H2A.L.2 guía el ensamblaje de protamina
dependiente de proteínas de transición en células germinales masculinas. Moléculas y Células
66(1):89mi101 e108.
[51]Rousseaux, S., et al., 2015. Acilación de histonas más allá de la acetilación: terra
incognita en la biología de la cromatina. Diario celular 17 (1): 1mi6.
[52]Goudarzi, A., et al., 2016. La acetilación y butirilación dinámica de histonas H4 K5K8
competidoras son características de los promotores de genes altamente activos.
Moléculas y Células 62(2):169mi180.
[53]Gaucher, J., et al., 2010. De la meiosis a los eventos posmeióticos: los secretos de la
desaparición de las histonas. Revista FEBS 277(3):599mi604.
[54]Arpanahi, A., et al., 2009. Las regiones sensibles a la endonucleasa de la cromatina del
espermatozoide humano están altamente enriquecidas en secuencias de unión de promotor y
CTCF. Investigación del genoma 19 (8): 1338mi1349.
[55]Erkek, S., et al., 2013. Determinantes moleculares de la retención de nucleosomas en secuencias
ricas en CpG en espermatozoides de ratón. Biología Estructural y Molecular de la Naturaleza
20(7):868mi875.
[56]Hammoud, SS, et al., 2011. El análisis de todo el genoma identifica cambios en la
retención de histonas y modificaciones epigenéticas en loci de genes impresos y de
desarrollo en el esperma de hombres infértiles. Reproducción Humana 26(9): 2558mi
2569.
[57]Carone, BR, et al., 2014. Mapeo de alta resolución del empaquetamiento de cromatina en células
madre embrionarias de ratón y esperma. Célula de desarrollo 30(1):11mi22.
[58]Samans, B., et al., 2014. Uniformidad del patrón de conservación de nucleosomas en el
esperma de mamíferos y su conexión con elementos de ADN repetitivos. Célula de
desarrollo 30(1):23mi35.
[59]Kurimoto, K., et al., 2015. Mecanismo y reconstitución in vitro del desarrollo de células
germinales en mamíferos. Simposio de Cold Spring Harbor sobre biología
cuantitativa 80:147mi154.
[60]van der Heijden, GW, et al., 2008. Las histonas derivadas de espermatozoides contribuyen a la
cromatina cigótica en humanos. BMC Biología del desarrollo 8:34.
[61]Teperek, M., et al., 2016. El esperma está epigenéticamente programado para regular la
transcripción de genes en embriones. Investigación del genoma 26 (8): 1034mi1046.
www.metabolismomolecular.com
 [62]Yamauchi, Y., et al., 2007. La degradación del ADN pronuclear paterno está ligada
funcionalmente a la replicación del ADN en ovocitos de ratón. Biología de la
Reproducción 77(3):407mi415.
[63]Ward, WS, 2010. Función de los elementos estructurales de la cromatina espermática
en la fertilización y el desarrollo. Reproducción Humana Molecular 16(1):30mi36.
[64]Bjorndahl, L., et al., 2003. La secuencia de la eyaculación afecta al
espermatozoide como portador y su mensaje. Biomedicina reproductiva en
línea 7(4): 440mi448.
[sesenta y cinco]Bjorndahl, L., et al., 2010. Estabilización de la cromatina del esperma humano: un modelo
propuesto que incluye puentes de zinc. Reproducción Humana Molecular 16(1):23mi29.
[66]Siklenka, K., et al., 2015. La interrupción de la metilación de histonas en el desarrollo de los
espermatozoides perjudica la salud de la descendencia de forma transgeneracional. Ciencia 350 (6261):
aab2006.
[67]Zheng, H., et al., 2016. Restablecimiento de la memoria epigenética mediante la reprogramación
de modificaciones de histonas en mamíferos. Moléculas y Células 63(6):1066mi1079.
[68]Johnson, GD, et al., 2011. La escisión del ARNr asegura el cese de la traducción en el
esperma en la fertilización. Reproducción Humana Molecular 17(12):721mi726.
[69]Goodrich, RJ, et al., 2013. Aislamiento de ARNm y ARN pequeños no codificantes de
esperma humano. Métodos en Biología Molecular 927:385mi396.
[70]Ostermeier, GC, et al., 2004. Biología reproductiva: entrega de ARN de espermatozoides
al ovocito. Naturaleza 429(6988):154.
[71]Sone, Y., et al., 2005. Translocación nuclear de fosfolipasa C-zeta, un factor activador de
huevos, durante el desarrollo embrionario temprano. Comunicaciones de
investigación bioquímica y biofísica 330(3):690mi694.
[72]Rassoulzadegan, M., et al., 2006. Herencia no mendeliana mediada por ARN de
un cambio epigenético en el ratón. Naturaleza 441(7092):469mi474.
[73]Deng, W., et al., 2002. miwi, un homólogo murino de piwi, codifica una proteína
citoplasmática esencial para la espermatogénesis. Célula de desarrollo 2 (6):
819mi830.
[74]Ashe, A., et al., 2012. Los piRNA pueden desencadenar una memoria epigenética
multigeneracional en la línea germinal de C. elegans. Celda 150(1):88mi99.
[75]Brennecke, J., et al., 2008. Un papel epigenético para los piRNA heredados de la madre en el
silenciamiento de transposones. Ciencia 322 (5906): 1387mi1392.
[76]Lau, J., et al., 2014. CART en la regulación del apetito y la homeostasis
energética. Fronteras en Neurociencia 8:313.
[77]Castella, S., et al., 2015. Funciones de Ilf3 y NF90 en la biología del ARN. Revisiones
interdisciplinarias de Wiley: ARN 6 (2): 243mi256.
[78]Jiang, LQ, et al., 2013. El papel autocrino de la interleucina-13 en el metabolismo de la
glucosa del músculo esquelético en pacientes con diabetes tipo 2 involucra el
microARN let-7. Revista estadounidense de fisiología, endocrinología y metabolismo
305 (11): E1359miE1366.
[79]Zhu, H., et al., 2011. El eje Lin28/let-7 regula el metabolismo de la glucosa. Celda
147(1):81mi94.
[80]Garcia-Lopez, J., et al., 2014. Caracterización global e identificación de objetivos
de piRNA y endo-siRNA en gametos y cigotos de ratón. Biochimica et
Biophysica Acta 1839(6):463mi475.
[81]Bartel, DP, 2004. MicroARN: genómica, biogénesis, mecanismo y función.
Celda 116(2):281mi297.
[82]Liu, WM, et al., 2012. Se requiere microARN-34c transmitido por esperma para la
primera división de escisión en ratón. Actas de la Academia Nacional de Ciencias de
los Estados Unidos 109(2):490mi494.
[83]Grandjean, V., et al., 2009. La paramutación miR-124-Sox9: control epigenético
mediado por ARN del crecimiento embrionario y adulto. Desarrollo 136(21):
3647mi3655.
METABOLISMO MOLECULAR 14 (2018) 1mi11 -2018 Los Autores. Publicado por Elsevier GmbH. Este es un artículo de acceso abierto bajo la licencia CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).
www.metabolismomolecular.com
[84]Wagner, KD, et al., 2008. Inducción de ARN y herencia de la hipertrofia cardíaca
epigenética en el ratón. Célula de desarrollo 14(6):962mi969.
[85]Cropley, JE, et al., 2016. Transmisión de linaje masculino de un fenotipo metabólico
adquirido inducido por la obesidad del abuelo paterno. Metabolismo Molecular
5(8):699mi708.
[86]Rodgers, AB, et al., 2015. La programación epigenética transgeneracional a través de
microARN de esperma recapitula los efectos del estrés paterno. Actas de la Academia
Nacional de Ciencias de los Estados Unidos 112(44):13699mi13704.
[87]Alm, PS, et al., 2017. Reprogramación dietética transgeneracional inducida por
el abuelo de la respuesta proteica desplegada en el músculo esquelético.
Metabolismo Molecular 6(7):621mi630.
[88]Krawetz, SA, et al., 2011. Una encuesta de pequeños ARN en el esperma humano. Reproducción
Humana 26(12):3401mi3412.
[89]Nagano, T., et al., 2008. El ARN no codificante de Air silencia epigenéticamente
la transcripción al dirigir G9a a la cromatina. Ciencia 322 (5908): 1717mi1720.
[90]Pandey, RR, et al., 2008. El ARN no codificante antisentido de Kcnq1ot1 media el silenciamiento
transcripcional específico del linaje a través de la regulación del nivel de cromatina. Célula
molecular 32(2):232mi246.
[91]Benetti, R., et al., 2008. Un grupo de microARN de mamíferos controla la metilación del ADN y la
recombinación de los telómeros a través de la regulación de las metiltransferasas de ADN
dependiente de Rbl2. Naturaleza Estructural y Biología Molecular 15(9):998.
[92]Lai, F., et al., 2014. Donde los ARN largos no codificantes se encuentran con la metilación del ADN.
Investigación celular 24 (3): 263mi264.
[93]Li, LC, 2014. Remodelación de cromatina por la maquinaria de ARN pequeño en células
de mamífero. Epigenética 9(1):45mi52.
[94]Bird, A., et al., 1985. Una fracción del genoma del ratón que se deriva de islas de
ADN rico en CpG no metilado. Celda 40(1):91mi99.
[95]Cohen, NM, et al., 2011. Las islas CpG de primates se mantienen mediante regímenes
evolutivos heterogéneos que implican una selección mínima. Celda 145(5): 773mi786.
[96]Shen, JC, et al., 1994. La tasa de desaminación hidrolítica de 5-metilcitosina en
ADN de doble cadena. Investigación de ácidos nucleicos 22(6):972mi976.
[97]Waddington, CH, 2012. El epigenotipo. 1942. Revista Internacional de
Epidemiología 41 (1): 10mi13.
[98]Leisegang, K., et al., 2014. La obesidad se asocia con un aumento de la insulina seminal
y la leptina junto con parámetros de fertilidad reducidos en una cohorte masculina
controlada. Biología Reproductiva y Endocrinología 12:34.
[99]Fariello, RM, et al., 2012. Efecto del tabaquismo en los aspectos funcionales de los
perfiles de proteínas del plasma seminal y del esperma en pacientes con varicocele.
Reproducción Humana 27(11):3140mi3149.
[100]Marques, CJ, et al., 2011. Marcas de impresión de metilación de ADN y expresión de
metiltransferasa de ADN en etapas de células espermatogénicas humanas.
Epigenética 6(11):1354mi1361.
[101]Ni, K., et al., 2016. Las enzimas TET se expresan sucesivamente durante la espermatogénesis
humana y su nivel de expresión es fundamental para la fertilidad masculina. Reproducción
Humana 31(7):1411mi1424.
[102]Pattamaprapanont, P., et al., 2016. La contracción muscular induce la
hidroximetilación aguda del gen sensible al ejercicio Nr4a3. Fronteras en
Endocrinología 7:165.
[103]Vojta, A., et al., 2016. Reutilización del sistema CRISPR-Cas9 para la metilación dirigida
del ADN. Investigación de ácidos nucleicos 44(12):5615mi5628.
[104]Liu, XS, et al., 2016. Edición de la metilación del ADN en el genoma de los mamíferos.
Celda 167(1):233mi247 e217.
11