Papa transgnica

TEMA: PAPA TRANSGENICA PROFESOR: CURSO: ANALISIS POR INSTRUMENTACION INTEGRANTES: CONISLLA HINOSTROZA Julio Cesar MILLA GOMEZ Enrique Humberto SILVA GUILLEN Deyci Mara

2011

Papa transgnica

Pgina 1

tr

Indice
I) RESUMEN II) INTRODUCCION III) MARCO TEORICO III.1) ORIGEN DE LA PAPA III.2) PAPA TRANSGENICA III.2.a) LA PAPA TRANSGNICA NO ES SOLUCI... III.2.b) Papa Bt en Sudfrica III.2.c) Papa de BASF . . .. (3) . (3) ... (4) . ... (4) . ... (5) . .. (5) . (6) . (6) . (6) . . (7) ...(7)

III.3) LOS TRANSGNICOS EN AMRICA LATINA III.3.a) PROPONEN DEFINIR MODELO

III.3.b) Importancia Econmica Y Cultural En La Regin Andina

III.4) Implicaciones Ecolgicas .. (9) III.5) IMPACTOS ESPECFICOS EN LA PAPA III.5.a) EFECTOS EN LA SALUD IV) INGENERIA DEL PROCESO IV.1) Resumen ... ... ... .. .. . . .. ... .. .. .. (9) .. (10) .. (11) .. (11) .. (12) .. (20) . (23)

IV.2) Materiales y Mtodos V)

Discusin

.. ..

VI) BIBLIOGRAFIA

Papa trans n a

P i

tr

LA PAPA UN ALIMENTO BSICO

Posibles impactos frente a la introduccin de papa transgnica

I) RESUMEN La papa es uno de los alimentos ms importantes en la nutricin humana y una posible insercin de semillas modificadas genticamente podra acarrear enormes riesgos para los agricultores y los consumidores en general.

II) INTRODUCCION La papa (Solanum tuberosum) constituye el cuarto alimento de mayor consumo en el mundo y su produccin, a nivel mundial, es de unos 320 millones de toneladas po r ao. Esta cantidad tiende a aumentar mientras que la de los otros tres alimentos ms consumidos, maz, trigo y arroz, va decreciendo. Su cultivo se encuentra presente en ms de cien pases. Entre ellos, los de Amrica del Norte y Europa vienen siendo de los mayores productores, aunque en las ltimas dcadas hubo un crecimiento extraordinario de estas plantaciones en Asia, frica y Amrica Latina. La planta de papa es una herbcea de un metro de altura de la que se consume el tubrculo, que es el lugar de reserva de nutrientes. La papa tiene alto contenido de carbohidratos lo que la posiciona como un alimento de alto valor energtico. Adems, aunque en menor medida, aporta protenas en cantidad similar a los cereales y en mayor proporcin que otros tubrculos. Su valor nutritivo incluye tambin aporte de vitamina C (ver recuadro). Existen ms de 4.000 variedades de papa, lo que muestra la gran diversidad gentica que presenta este cultivo. Esta riqueza en diversidad ha sido preservada, en gran medida, gracias a las prcticas tradicionales de los agricultores en los centros de origen de la papa (Regin Andina). Los hbitos de trabajo de los pequeos productores ubicados en la regin andina respecto al cuidado de las semillas son los que han permitido el mantenimiento de la gran cantidad de variedades de este cultivo, adaptadas a distintas altitudes, temperaturas y suelos. Las variaciones son en tamao, color, forma o textura. De estas caractersticas depende el destino y el tipo de consumo que tendr el alimento. Se cocina de diversas formas de acuerdo a las costumbres de cada regin. Puede comerse al horno, hervida, frita o deshidratada. Es ingrediente en ensaladas, sopas, tortillas, como relleno para pastas, tortas, galletas, y hasta se destila para hacer vodka.

Papa trans n a

P i

tr

Cuadro 1

III) MARCO TEORICO III.1) ORIGEN DE LA PAPA La papa se cultiva desde hace ocho mil aos y su lugar de origen ha sido muy discutido. En este momento hay certeza que proviene de la regin andina, probablemente de Per, y, tambin, de la isla Chilo, ubicada al sur de Chile. En el siglo XVI, los colonizadores espaoles introducen la papa en Europa. A partir de ese momento el cultivo de papa se expande por el hemisferio norte hasta llegar, durante la Revolucin Industrial, a convertirse en un alimento fundamental para los mineros y obreros, cuyas largas jornadas laborales requeran gran aporte de energa. En la actualidad la papa es un alimento que se consume en todo el mundo. Los europeos son quienes ms lo hacen pero su uso est en aumento en regiones de frica, Asia y Amrica Latina, razn por la cual son estos los lugares que han sido elegidos para hacer experimentos con cultivos de papa transgnica.

Este cultivo constituye un recurso alimenticio y econmico importante para los campesinos, pero tambin tiene un fuerte valor social y cultural.

Papa trans n a

 

P i

tr

III.2) PAPA TRANSGENICA Las papas transgnicas son papas que son modificados genticamente para volverlos ms resistentes a plagas o a temperaturas extremas

III.2.a) LA PAPA TRANSGNICA NO ES SOLUCIN La introduccin de semillas transgnicas como forma de reducir el uso de agro txicos y de aumentar la resistencia a las plagas no es tan beneficiosa si se consideran los impactos ambientales, econmicos y sociales que stas conllevan. Todo esto se vera agravado si la introduccin se realiza en los sitios de origen (Per, Chile, Bolivia y Ecuador), lugares donde an es posible conservar las variedades nativas de papa. Al pensar a mediano plazo es fcil notar que el uso de semill as transgnicas trae desventajas enormes, tanto ambientales como sociales y nutricionales. Las plagas y los patgenos evolucionan segn la especie husped, por lo que al conferir resistencia a ellos, es posible que en corto plazo estos patgenos tambin en cuentren la forma de resistir y poder atacar a la planta nuevamente. Esto es ms serio de lo que se enfrenta hasta el momento, porque empezara una cadena interminable donde se debera modificar genticamente la semilla cada vez que estas plagas se especialicen. Es comn que se utilice el argumento de que las semillas de la papa transgnica son estriles (en general el macho es estril y la hembra es frtil) para justificar su introduccin. Sin embargo, la posible contaminacin gentica de cultivos transgn icos hacia los locales siempre est latente, ya sea por medio de la polinizacin o por contaminacin de suelos por algn tubrculo genticamente modificado. La tecnologa requerida para la produccin de transgnicos es muy costosa y entonces el precio de la semilla para los agricultores ser tambin alto. Esto tiene un impacto socioeconmico importante, puesto que los pequeos y medianos productores debern invertir en la semilla transgnica y para esto quizs tengan que pedir prstamos, o sea que generan deudas y en caso de una mala produccin perdern su dinero y posiblemente sus tierras si no logran cubrir el endeudamiento. Esto sin mencionar que la mayora de estos pequeos productores se autoabastecen de estos alimentos. Los productores se volvern absolutamente dependientes de las empresas, ya que debern pagar por el uso que hagan de las semillas. Estos mecanismos de produccin solo favorecen a las grandes transnacionales que producen las semillas y a los grandes productores que pueden acceder a ellas sin mayores problemas. A lo anterior se suma la posibilidad de que sus cultivos se contaminen con la papa transgnica, como ya ha ocurrido en el caso del maz en Mxico y otros pases de Centro Amrica y que se les exija el pago de patentes a las empresas vendedoras de la semilla transgnica. Cualquiera de estos factores puede tener efectos no deseados y poner en riesgo la seguridad y soberana alimentaria de la poblacin, ya que la papa es uno de los alimentos ms consumidos en la dieta.

Papa trans n a

   

P i

P
III.2.b) Papa Bt en Sudfrica

tr

La papa Bt (Solanum tuberosum L. Variedad Spunta G2 y G3 ) fue modificada genticamente para que tenga resistencia a la polilla de la papa. Este insecto se come las hojas de los cultivos pero no suele afectar al tubrculo. Adems de que es posible su control mediante un buen manejo del cultivo. En Sudfrica se cultiv esta clase de papas modificadas genticamente, que fue desarrollada por el Instituto Internacional de la Papa, en Per, segn indica un artculo publicado en la revista Biodive rsidad del mes de julio. En los ensayos de la papa modificada no fueron tenidos en cuenta los impactos sociales y econmicos para una regin en que la urgencia alimenticia es importante y se experimenta con uno de los alimentos bsicos en la dieta sudafricana. La papa en esta zona es una solucin, ya que es un alimento que puede obtenerse casi todo el ao y tambin es un medio de trabajo y auto sustento de los campesinos ms pobres. Es justamente con estos pequeos productores con quienes se ensayan las pap as genticamente modificadas, se les facilitan sistemas de crditos para que puedan acceder a las semillas que son muy caras porque involucran un trabajo de alta tecnologa y lo que obtienen como resultado es una gran deuda que en muchos casos no pueden pa gar.

III.2.c) Papa de BASF Este es otro ejemplo de papa transgnica que est prxima a salir al mercado. La empresa BASF desarroll esta papa con resistencia al hongo del tizn tardo modificndola genticamente con una variedad silvestre de Mxico y el marcador utilizado es un gen con resistencia a herbicidas.

III.3) LOS TRANSGNICOS EN AMRICA LATINA En Per el CIP (Centro Internacional de la papa) ha efectuado pruebas de campo con transgnesis en papa para conseguir resistencia al hongo del tizn tardo, a virus e insectos; un ejemplo de esto es la papa Bt. En Bolivia se realizan ensayos para insertar genes de pez lenguado a la papa, que le otorguen resistencia al fro. Estos no dieron buenos resultados, y las papas que se obtuvieron perdan su cal idad para ser cocidas y estaban deformadas. Chile cuenta con mucha variedad de papa de la regin andina al norte y de la isla de Chilo al sur. Hay investigacin de papa transgnica en laboratorio desde 1991 y se efectuaron experimentos de campo en el sur del pas entre 1997 y 2001.

Papa trans n a

   

P i

tr

III.3.a) PROPONEN DEFINIR MODELO

Nosotros pedimos que se d un debate nacional consensuado, para definir qu modelo de produccin agrcola queremos. Por el momento, ante las dudas que hay, queremos una moratoria para la entrada de semillas modificadas , afirm Montoro. Sin embargo, para el jefe del Instituto Nacional de Innovacin Agraria (INIA), Juan Risi, organismo encargado de crear el controvertido reglamento, las crticas a los transgnicos surgen por desconocimiento y denunci que quienes los combaten emplean argumentos falaces ante la opinin pblica. En una entrevista, Risi explic que el reglamento en cuestin no busca slo que entren transgnicos, sino emplear la tecnologa moderna para desarrollar productos p ropios y aprovechar as la biodiversidad del pas. El funcionario seal adems que estos nuevos cultivos ayudarn a los pequeos agricultores a aumentar su productividad y evitar las plagas, y neg que vayan a daar a los cultivos autctonos. Los principales productos en nuestra agricultura no son de aqu, como el caf, el esprrago, el mango, la paprika (pimentn dulce), la alcachofa, los ctricos, por lo que el desarrollo de transgnicos en estos cultivos cmo podran daar la biodiversidad? , se pregunt. Risi consider que los retrasos en la aplicacin de los transgnicos son una prdida preciosa de tiempo , y seal que si no se emplean en Per el impacto lo va a pagar el pequeo agricultor . III.3.b) IMPORTANCIA ECONMICA Y CULTURAL EN LA REGIN ANDINA La Regin de los Andes acoge, a nivel mundial, la mayor diversidad gentica vegetal debido a la gran diversidad de ecosistemas. Las comunidades nativas y locales se han adaptado a esta diversidad gentica y de ecosistemas, y han desarrollado estrategias alimenticias y de agricultura tradicional para asegurar la provisin de sus alimentos. La papa en la Regin Andina es un ejemplo de sinergia entre la riqueza biolgica y dinmica socio-cultural. La papa y sus diferentes variedades cumplen importantes funciones socio- econmico y cultural en la vida cotidiana de las familias campesinas andinas. A nivel socio-econmico, la papa es uno de los cultivos que ms dinamiza el empleo rural (produccin y comercializacin). Adems de ello, es la base de la alimentacin de las comunidades andinas. La importancia que la papa tiene en la alimentacin, ha
Papa trans n a
# ! "

P i

tr

permitido la conservacin de variedades nativas como estrategia de provisin de estabilidad a la produccin y equilibrio a la dieta familiar. La mayora de papas nativas producidas en la Regin Andina son destinadas para el autoconsumo. Por ejemplo, en un estudio realizado en una comunidad de Bolivia, se encontr que de un total de 19 variedades de papa sembradas, todas son destinadas al autoconsumo, 5 son para el mercado y 1 para labores culturales (descanso) (Iriarte et al., 1999). Otro ejemplo es del Ayllu Majasaya Mujlli, tambin de Bolivia, donde se cultivan 82 variedades de papas amargas, semi-amargas y dulces; de las cuales 10% son variedades comerciales y el restante 90% para consumo familiar (Saravia et al., 2002). Es por eso que la papa en la regin andina no slo sirve para la alimentacin, sino tambin que es utilizada para el trueque y la venta, complementando la provisin de otros alimentos. El intercambio entre diferentes pisos ecolgicos de variedades de papa tambin ha influido en la conservacin, renovacin del material gentico y movimiento de la semilla (Iriarte et al., 1999; Saravia et al., 2002). Hay una dinmica en el flujo de la semilla de papa especialmente nativa, entre las familias, comunidades y regiones. Los flujos intercomunales tienen como vehculo los matrimonios de cnyuges de diferentes orgenes, con el fin de intercambiar productos y principalmente variedades nativas (Garca, 1994). Por otro lado, la migracin temporal de las familias campesinas constituye una estrategia de seguridad alimentaria, para diversificacin la alimenticia y econmica. Estas migraciones son tambin el vehculo de diferentes variedades de papa (Iriarte et al., 1999). La conservacin de la papa nativa en las comunidades andinas se hace a travs de la herencia, intercambio y comercializacin en ferias campesinas, intercambios entre familias, obsequios, co secha comunitaria de papa (minka o minga), siembra en compaa . Sin embargo, el flujo gentico tambin se da a travs de la mezcla involuntaria de una variedad de papa con otras, durante la compra o intercambio; y tambin a travs de los remanentes de cosecha que quedan en las parcelas (Saravia et al., 2002). La conservacin de la papa est tambin relacionada con su adaptacin al espacio y al tiempo; a su comportamiento en los almacenes y a su respuesta a indicadores tradicionales. Por ejemplo, se realizan distintas combinaciones de papa nativa para alcanzar una mejor digestibilidad, absorcin de nutrientes, caloras y energa. Es as que las papas runas (alargadas) son catalogadas como frescas y las papas imillas (redondeadas) como clidas (Iriarte et al., 1999; Garca, 1994).

Papa trans n a

' % & $

P i

tr

El manejo de las papas nativas es hecho bajo una lgica espacial, pues se siembran distintas variedades en los diversos piso ecolgicos. El manejo de la papa nativa obedece tambin a necesidades especficas de las comunidades. Por ejemplo, se siembra en terrenos sin riego para el autoconsumo, debido a que en estos suelos la cscara se engrosa y la papa no se deshidrata fcilmente, lo que permite que el tiempo de almacenaje sea mayor.

III.4) IMPLICACIONES ECOLGICAS Los cultivos transgnicos son esencialmente inestables, y tienen la capacidad de interferir en los procesos ecolgicos, evolutivos y biolgicos de las variedades no transgnicas, especialmente cuando se trata de un cultivo de tan alta difusin para la produccin y consumo, como es la papa en la Regin Andina. Los cultivos transgnicos, una vez liberado en el ambiente, no pueden ser controlados, generando impactos en toda cadena alimenticia de los ecosistemas naturales y en los agro ecosistemas, con impactos a corto y largo plazo (Vlez, 2000). Lovei & Arpaia (2005) hicieron una revisin de los impactos de los organismos transgnicos en los enemigos naturales de plagas que afectan a cultivos agrcolas, (por ejemplo de predadores y parasitoides). Estos son organismos que revisten mucha importante en sistemas agroecolgicos, porque han sido utilizados tradicionalmente por los agricultores para combatir la presencia de plagas en los cultivos de manera natural y encontraron los cultivos transgnicos constituyen un importante elemento de riesgo para los enemigos naturales de las plagas y por lo mismo para la agricultura. Por otro lado, el ingreso de cultivos transgnicos han producido cambios en las poblaciones que son plagas de cultivos, como el algodn en Estados Unidos, introduciendo plagas que ya estaban erradicadas de algunas regiones (Nancy, 2005). III.5) IMPACTOS ESPECFICOS EN LA PAPA La mayora de las variedades nativas de papa pueden entrecruzarse entre s. A esto deben aadirse los siguientes factores que favorecen al flujo de genes en papa : -Coincidencia de floracin - Presencia de polinizadores - Sobrevivencia de semilla sexual en los campos de cultivos - Habilidad de propagacin mediante cruces naturales entre especies silvestres y cultivadas dando lugar a semilla frtil

Papa trans n a

1 ) 0 (

P i

tr

- La germinacin y sobrevivencia espontnea que da lugar a variaciones en especies silvestres y cultivadas e introgresin (Scurrah et al., 2005). A pesar que algunas pruebas de campo bajo condiciones controladas pretenden demostrar la ausencia del riesgo de contaminacin gentica de las variedades nativas de papa (cultivadas o silvestres) con material transgnico, el riesgo de contaminacin es muy amplio por los factores de flujo de genes mencionados, los cuales se exacerban en la complejidad ecolgica y social existentes en la Regin Andina (Huamn, 2005). La liberacin de variedades mejoradas o genticamente modificadas estriles para evitar el flujo y contaminacin gentico sugerido por algunos cientficos (Celis et al., 2004) no representan una solucin; al contra rio, implican una mayor probabilidad de erosin gentica por la liberacin de polen y vulos estriles que pueden ocasionar la inviabilidad de variedades nativas de papa. Se debe considerar adems, el efecto negativo del material reproductivo estril en la dinmica de las especies de fauna silvestre que dependen del nctar, polen y semillas. Por ello, la introduccin y expansin de la papa transgnica en el centro de origen representa una amenaza de contaminacin y erosin gentica para la biodiversidad local y especficamente para las diversas variedades nativas de papa y sus parientes silvestre. El potencial de contaminacin gentica en pases mega diversos como Bolivia, Per, Chile, Colombia y Ecuador es particularmente preocupante por ser centros de ori gen y distribucin de la papa, debido a la capacidad incontrolada de reproduccin, mutacin, evolucin y colonizacin de los transgnicos.

III.5.a) EFECTOS EN LA SALUD Entre los genes usados en la ingeniera gentica, estn los llamados marcadores genticos, o genes de resistencia a antibiticos, los que pueden entrar en contacto con bacterias patgenas, mediante un proceso conocido como "transferencia horizontal de genes", aumentando el creciente problema de salud pblica de resistencia a antibiticos(ISIS,2001). Otro peligro constituye el uso del promotor CaMV, que est presente en la mayora de los cultivos transgnicos comerciales. El CaMV puede generar impactos inesperados en la salud humana y el ambiente, pues tiene la capacidad de activar genes en cualquier lugar del genoma de una gran cantidad de seres vivos (Ho, 1998). Por otro lado, la inclusin de protenas que nunca fueron parte de la dieta humana, produce propensin a desrdenes fisiolgicos e inmunolgicos, especialmen te alergias
Papa trans n a
5 3 4 2

P i

10

tr

(Freese, 2006). Para mostrar slo un ejemplo, en un estudio reciente con ratas de laboratorio alimentadas con el maz transgnico MON863 se encontr varios resultados significativos como una mayor cantidad de basfilos, lo que indica una reaccin alrgica; aumento en el nmero de linfocitos y clulas blancas, los cuales usualmente aumentan ante la presencia de infecciones, cncer, varias toxinas y enfermedades; menor nmero de meticulositos, lo que es un indicio de anemia; disminucin en el peso de los riones, relacionado con problemas de presin arterial; y una elevacin de los niveles de azcar en la sangre, lo que no puede ser catalogado como biolgicamente insignificante, dada la epidemia de diabetes. Tambin se encontr niveles elevados de inflamacin de riones, necrosis de hgado (Puztai, 2003). IV) INGENERIA DEL PROCESO IV.1) Resumen La capacidad de sintetizar inulina de alto peso molecular, fue trasladado a las plantas de papa a travs de la expresin constitutiva de la 1-SST (sacarosa: sacarosa 1fructosyltransferase) y el 1-FFT (fructanos: fructanos 1-fructosyltransferase) los genes de alcaucil (Cynara scolymus) . El patrn de fructanos de los tubrculos de las plantas de papa transgnicas representa el espectro completo de las molculas de la inulina presente en las races de la alcachofa como se muestra por cromatografa de alto rendimiento del intercambio de aniones, as como la cromatografa de exclusin por tamao. Estos resultados demuestran que las plantaciones en las enzimas sacarosa: sacarosa 1 fructosyltransferase y fructanos: 1-fructosyltransferase fructanos son suficientes para sintetizar molculas de inulina de todas las longitudes de cadena de forma natural en una especie vegetal. La inulina compuesto por el 5% del peso seco de tubrculos transgnicos, y un bajo nivel de la produccin de fructanos tambin se observ en hojas completamente expandidas. A pesar de la acumulacin de inulina no influy en la concentracin de sacarosa en las hojas o los tubrculos, una reduccin en el contenido de almidn producido en los tubrculos transgnicos, lo que indica que la sntesis de inulina no aument la capacidad de almacenamiento de los tubrculos. La inulina es un hidrato de carbono altamente soluble en agua formado por lineal (2 1)-vinculados cadenas de fructosa unida a una molcula de sacarosa. Pertenece al grupo de los fru ctanos de los polisacridos, que sirve como alternativa de almacenamiento de carbohidratos en la vacuola de aproximadamente 15% de todas las especies de plantas con flores ( 1 - 7 ). aumento reciente de inters proviene de las observaciones que la inulina influye positivamente en la composicin de la microflora intestinal (revisado en ref. ), y h ay indicios de efectos beneficiosos en la absorcin de minerales, la composicin de lpidos en la sangre, y la prevencin de cncer de colon ( 9 ). Adems, la inulina es una fibra de baja en caloras que pueden utilizarse en la produccin de alimentos, reducir la grasa ( 10 ). En la actualidad, la principal fuente para la produccin de inulina d e achicoria (Cichorium intybus) y la alcachofa de Jerusaln (Helianthus tuberosus), los cuales producen un fructanos con un relativamente bajo peso molecular promedio ( 11 ).
Papa trans n a
9 7 8 6

P i

11

tr

En 1968, Edelman y Jefford ( 12 ) propusieron un modelo para la sntesis de inulina en el H. tuberosus que participan dos enzimas: sacarosa: sacarosa 1-fructosyltransferase (1-SST) y fructanos: fructanos 1-fructosyltransferase (1-FFT). El modelo postula que el 1-SST cataliza la sntesis de la trisacrido 1-kestosa a partir de dos molculas de sacarosa, por lo tanto la liberacin de glucosa. En los pasos siguientes, 1 -FFT reversible transferencias de residuos fructosilo de un fructanos a otro, produciendo una mezcla de fructanos con longitudes de cadena diferentes. En los ltimos aos, la evidencia en apoyo del modelo se obtuvo a partir de experimentos de sntesis in vitro d e inulina purificada con un TSM-y-FFT enzimas 1 ( 13 - 15 ). Sin embargo, los polmeros s lo de longitudes de cadena de hasta 25 unidades de fructosa fueron sintetizados, mientras que la gama de tamaos de molcula en la produccin de plantas -de inulina como H. tuberosus o C. intybus cuenta con un grado de polimerizacin (GP) de ms de 60 (11). petunia Las plantas transgnicas que expresan el 1-SST y los genes de una FFT de Helianthus tuberosus tambin producen slo las molculas de inulina de hasta DP 25 (16). Por lo tanto, la prueba inequvoca de que la 1 -SST y una FFT-son suficientes para catalizar la sntesis de fructanos con un GP mayor que an le falta. alcaucil (Cynara scolymus) sintetiza molculas de inulina con una longitud de cadena de hasta 200 ( 11 ), que es la ms alta de las molculas de DP inulina conocido por las plantas. En el presente trabajo mostramos que la expresin de una-SST y los genes 1FFT de alcachofa en las plantas de papa transgnicas lleva a una acumulacin importante de inulina en los tubrculos con una longitud mxima de cadena que es indistinguible de la inulina aislados de las races de la alcachofa. IV.2) Materiales y Mtodos

Transformacin de las plantas.

El 1-SST ( 17 ) y FFT ADNc 1 ( 18 ) se subclonaron por separado en el vector binario pBinAR, un derivado del vector pBin19 ( 19 ). El ADNc contienen secuencias endgenas de la seal para una localizacin predicha vacuolar de las enzimas codificadas. El ADNc se inserta entre la coliflor 35S ARN constitutiva mosaico promotor del virus ( 20 ) y la secuencia de terminacin de octopina sintasa ( 21 ). La transformacin de la patata se realiz segn lo descrito por Rocha -Sosa et al. ( 22 ). tipo de plantas de papa-Wild (Solanum tuberosum var. Dsire) se transformaron primero con la construccin quimrica que contiene el gen 1-SST. transformantes positivos que muestra la actividad 1-SST fueron seleccionados y supertransformed con el gen APC-1.

El material vegetal.
Las plantas que crecen en cultivo de tejidos fueron trasladados en macetas (30 cm de dimetro) con el suelo y cultivadas en el invernadero con luz natural y el rgimen de temperatura. Las muestras de hojas se tomaron a partir de 6 - a las plantas de 7 semanas de edad. Los tubrculos fueron cosechadas despus de 12 semanas de crecimiento. En el caso de las plantas transformadas con el gen 1-SST, los discos del tubrculo se prepararon (1 cm de dimetro, aproximadamente 2 mm de espesor), inmediatamente congeladas en nitrgeno lquido, y se homogeneiza. De cinco plantas
Papa trans n a
C A B @

P i

12

tr

diferentes para cada uno-SST /-FFT la lnea 1, un tubrculo entero fue tomada y se homogeneiza en nitrgeno lquido. Alcuotas del tejido homogeneizado se analizaron para determinar su contenido de azcares solubles, fr uctanos, y el almidn, y la AD de las molculas de inulina se determin como se describe a continuacin.

Anlisis de hidratos de carbono.

Los carbohidratos solubles en el agua de las plantas transformadas con el gen 1 -SST se determinaron por el alto rend imiento de aniones cromatografa de intercambio lquido (HPAEC) con un CarboPac PA -100 en la columna Dionex DX -500 sistema de cromatografa de gradiente ( 17 ). discos de hoja y tubrculos se homogeneizaron en nitrgeno lquido y luego extrajo dos veces con etanol a 80 C durante 30 min. Los sobrenadantes se combinaron y se seca, y los azcares se resuspendieron en agua. Antes de cargar en la columna de los extractos se desionizada (AG resina 501 -X8, BioRad) y se filtr (microcontrolador, Millipore). Tuber homogeneizados de las plantas Los 1-SST y la actividad 1-FFT, as como homogeneizados raz de alcachofa se extrajeron dos veces en etanol al 80% a 80 C y dos veces en agua a 60 C. Los extractos de etanol se secaron, y los residuos se disolvieron en agua los extractos combinados. contenido de g lucosa y la fructosa se mide fotomtricamente ( 23 ). Debido a invertasas tambin degradan oligofructanos, contenido de sacarosa se determin despus de la escisin por la fosforilasa sacarosa ( 24 ). Para cuantificar la inulina, las molculas de fructanos se hidroliza con 0,5% de cido oxlico a 65 C y la fructosa liberado se determin f otomtricamente. Para el anlisis del patrn de inulina por HPAEC los extractos combinados fueron desionizada y filtrada tal como se describe anteriormente. El precipitado del etanol y el procedimiento de extraccin de agua se utiliz para la determinacin del contenido de almidn ( 25 ). Como consecuencia del procedimiento de extraccin, una pequea parte de almidn se pierde durante la extraccin de inulina. Esta prdida no efectu la comparacin del contenido de almidn de las plantas de tipo salvaje y transgnicos, y la reduccin absoluta no fue significativa.

Tamao de la cromatografa de exclusin (SEC) de los extractos de inulina.

El sistema consisti en la SEC de los siguientes componentes: distribucin del disolvente de la bomba LC-10 AD VP (Shimadzu) conectada a un inyector de Rheodyne 7725i (Cotati, CA) (volumen del lazo 200 / l), una columna de seguridad (Waters), y dos columnas de PL aquagel-OH 30 8 micras (2 300 7,5 mm; Laboratorios polmero, Waltrop, Alemania). Un detector de ndice de refraccin RID -10A (Shimadzu) fue utilizado como un detector sensible a la concentracin. Las mediciones se realizaron en el agua desgasificada y bi-destilada que contiene 0,02% de azida de sodio como eluyente a un flujo de 1,0 ml / min. Antes de la SEC, un molar de inulina de masas de alta sintetizados in vitro por Aspergillus sydowi conidias (r M = 30 10 6 g / mol) se aadi a la inulina extractos
Papa trans n a
G E F D

P i

13

tr

como estndar interno. La A. inulina sydowi ha sido producido utilizando conidios de la cepa IAM 2544 siguiendo un procedimiento descrito por Kawai et al. ( 26 ). Antes de la inyeccin de los extractos de inulina se centrifuga, se filtra a travs de un espartano 0,45 micras 30 / B del filtro (Schleicher & Schuell), y se diluye dos veces en el eluyente. El eluido de la columna se fraccion en alcuotas de 110 l con un colector de fracciones RediFrac (Amersham Pharmacia). Las fracciones entre 10 y 18 ml de volumen de elucin fueron sometidos a la hidrlisis con cido oxlico, y puesto en libertad la fructosa se mide fotomtricamente ( 23 ). IV.3)

Resultados

Sntesis de inulina en las papas transgnicas.

Para definir las actividades enzimticas de los genes fructosyltransferase de Cynara scolymus en planta que transforma una especie nonfructan (Solanum tuberosum var. Dsire) y se analiz el patrn de inulina de hojas y tubrculos . En una etapa de transformacin en primer lugar, una construccin quimrica que contiene el gen 1 -SST ( 17 ) bajo el control de la coliflor promotor constitutivo 35S se introdujo el virus del mosaico en el tipo de patata plantas salvajes. En 19 de 41 plantas resistentes a los antibiticos SST ARNm de la acumulacin-1 y la sntesis oligofructan se pudo observar. De los que eligieron a tres lneas transgnicas y transformado con el gen APC -1 ( 18 ), nuevamente bajo el control del promotor 35S. Se obtuvieron 10 lneas transgnicas acumulacin de inulina de alto peso molecular. Las plantas transgnicas que expresan o 1-SST solo o en combinacin con 1-FFT no muestran ninguna alteracin visible del crecimiento, la forma de la hoja, y color de las hojas, en comparacin con las plantas de tipo silvestre. Por otra parte, el nmero de tubrculos, as como el peso fresco y seco de los tubrculos no se vieron afectados por sntesis oligofructan o inulina (datos no presentados).

Patrn Oligofructan de plantas que expresan C. scolymus 1-SST.

Las plantas que expresan el gen 1-SST oligofructanos acumulado en las hojas, as como en los tubrculos. HPAEC anlisis de extractos de hojas revel la sntesis, no slo de la trisacrido 1-kestosa (GF 2), pero de oligmeros de inulina hasta GF 6 en lneas con alto nivel de expresin (Fig. 1 ). Todos los tipos de molculas de fructanos estaban ausentes en las plantas testigo.

Papa trans n a

Q I P H

P i

14

tr

Figura 1
Oligofructan contenido de las hojas y tubrculos de la 35S -SST-transformado plantas de papa en comparacin con plantas no transformadas de tipo salvaje. Los oligosacridos a partir de extractos de la lnea de papa transgnica 35S -SST 36 (a) las plantas de papa y de tipo salvaje (b) se separaron por HPAEC. Los nmeros indican la AD de los azcares: sacarosa = 2, 3 = 1-kestosa, 4 = nistosa, 5-7 = oligofructanos. Sobre la base de la normalizacin con las sustancias puras del contenido de azcares solubles de las hojas y tubrculos de diferentes 1 -SST lneas transgnicas se determin (Tablas 1 y 2 ). En las hojas, contenido de glucosa, fructosa y sacarosa de las plantas transgnicas correspondi a la de las plantas de tipo salvaje. la acumulacin de fructanos en plantas TSM 1 alcanz slo una dcima parte de la concentracin de sacarosa (0.45 a 0.65 mmol / g de peso fresco en comparacin con los 3,28 -4,94 mmol / g de peso fresco) con GF3 dominante sobre GF 2 en todas las lneas analizadas.

Tabla 1 contenido de azcar expresado en equivalente de hexosa mmol / g de peso fresco de hojas de plantas silvestres de papa-tipo o plantas transformadas con la construccin 35S-SST

Planta La glucosa Fructosa Sacarosa 1-kestosa DP4 DP5 De tipo salvaje 1,64 0,92 1,59 1,12 3,28 1,02 35S-TSM 6 1,11 0,39 1,26 0,58 4,53 1,95 0,21 0,07 0,24 0,12 35S-SST 9 0.64 0.18 0,69 0,35 3,47 1,28 0,17 0,06 0,32 0,09 0,16 0,07 35S-SST 18 1,24 0,83 1,51 1,24 3,51 1,42 0,17 0,08 0,27 0,12 0,13 0,06 35S-SST 36 2,00 1,66 2,08 1,41 4,94 1,27 0,11 0,02 0,27 0,07 0,16 0,07

Papa trans n a

U S T R

P i

15

tr

discos foliares fueron homogeneizados en nitrgeno lquido, los azcares se extrajeron en etanol al 80%, y las cantidades fueron cuantificados por HPAEC. Siete a diez repeticiones fueron analizados por lnea. nd, no detectables. contenido de azcar expres ado en equivalente de hexosa mmol / g de peso fresco de hojas de plantas silvestres de papa-tipo o plantas transformadas con la construccin 35S-SST Tabla 2 Contenido de azcar expresado en equivalente de hexosa mmol / g de peso fresco de los tubrculos de tubrculos de plantas de papa que expresan -SST actividad 1

Planta La glucosa Sacarosa 1-kestosa 1,1-nistosa Almidn De tipo salvaje 3,16 1,54 11,20 2,47 651 111 * 35S-SST 18 8,64 2,22 12,25 2,30 29,87 5,83 0,47 0,22 665 110 35S-SST 22 13.21 2.46 * 15,04 4,17 25,01 5,85 1,83 0,76 608 133 35S-SST 36 12.91 1.90 * 10.15 1.82 10,79 3,70 2,71 1,14 596 134
y

discos del tubrculo se homogeneizaron en nitrgeno lquido, los azcares se extrajeron en etanol al 80%, y las cantidades fueron cuantificados por HPAEC. Cinco rplicas se analizaron por lnea. Los datos se analizaron las diferencias significativas utilizando la prueba t de Student, si p <0,05 para la comparacin de una lnea transgnica con el tipo salvaje, se caracteriza por *.

Un panorama diferente se obtuvo para los tubrculos de las plantas transgnicas. En este tejido de 1 kestosa fue la ms abundante de oligosacridos, mientras que la concentracin de sacarosa fue de nuevo no alterado de manera significativa (Fig. 1 , Tabla 2 ). Adems de 1 kestosa, nistosa acumulada a cantidades considerables, mientras que slo cantidades muy bajas de molculas de mayor inulina DP poda ser detectado. En tubrculos transgnicos, un aumento significativo de la concentracin de glucosa puede ser detectado, mientras que la acumulacin de oligofructan no tuvo ningn impacto sobre el contenid o de almidn.

La acumulacin de inulina de alto peso molecular en plantas que expresan 1-SST y una FFT.
La sntesis de la inulina se demostr por anlisis HPAEC de extractos de hojas y tubrculos. Una vez ms la acumulacin de inulina fue mucho menor en las hojas que en los tubrculos. Un perfil tpico de los fructanos de tubrculos de patata transgnica se muestra en la figura. 2 . El patrn no difiere si gnificativamente de la de inulina nativa raz de alcachofa. Usando HPAEC podramos separar las molculas de inulina slo hasta un GP de cerca de 50. Sin embargo, se ha demostrado que la alcachofa sintetiza inulina de alto peso molecular de un GP de hasta 2 00 ( 11 ). Para comprobar que una-SST y 1-FFT de la alcachofa son suficientes para catalizar la sntesis de inulina
Papa trans n a
Y W X V

P i

16

tr

de alto peso molecular, se determin la longitud de la cadena mximo de la papa fructanos por SEC.

Figura 2
La inulina contenido de las hojas y tubrculos de plantas de patata que a lberga el 1-SST y el gen APC-1 de C. scolymus. El perfil HPAEC del patrn de fructanos de las hojas de una planta de patata transgnica (a) se compar con la de un tipo de patata de plantas silvestres (b). Adems, la inulina de tubrculos de patata transg nica (d) se compar con inulina nativa de alcachofa (Cynara C.), races (c). Los nmeros indican la AD de los azcares como se describe en la leyenda de la figura. 1 . Debido a la contaminacin de la inulina por el almidn, la deteccin de ndice de refraccin no era apto para registrar los perfiles de elucin. Por lo tanto, fraccionado que el efluente de la columna y la fructosa concentracin determinada en las fracciones l-110 (ver Materiales y Mtodos). El perfil de distribucin del tamao de la fructosa que contienen polmeros en los extractos de tubrculos de plantas de patata que alberga el 1-SST y el gen APC-1 de C. scolymus, as como las races de alcachofa se muestra en la figura. 3 . Para garantizar la comparabilidad de los diferentes separaciones, una masa molecular de inulina (r M> 30 10 6 g / mol, ver Materiales y Mtodos) fue agregado a todos los extractos como estndar interno antes de la separacin de la SEC. El pico de esta norma se detect en las fracciones 70-10, en todos los extractos analizados.

Papa trans n a

c a b `

P i

17

tr

Figura 3
Papa trans n a
g e f d

P i

18

tr

SEC perfiles de los extractos crudos de un tipo de papa, los tubrculos si lvestres, races de alcachofa, y tubrculos de papa transgnicas que expresan la 1-SST y la FFT-genes de una alcachofa. El efluente de la columna de la SEC se fraccion en alcuotas de 110 microlitros. Las fracciones entre 10 y 18 ml de volumen de elucin fueron sometidos a la fructosa determinacin despus de la hidrlisis de inulina por el cido oxlico. Un alto peso molecular de inulina de A. sydowi (M r 10 6 g / mol) se ha aadido como un estndar a todos los extractos y se eluy con un pico en la fraccin 7-10. En extractos de tubrculos de tipo salvaje slo se detect sacarosa como la fructosa que contienen especies liberadoras en las fracciones 74 a 88. Comparacin del cromatograma de la raz de los extractos de alcachofa con los de los tubrculos transgnicos revel que el patrn de inulina de la alcachofa y las patatas transgnicas no difieren con respecto a la longitud mxima de cadena. En todos los extractos de la elucin de detectar ms alta fructosa, polmeros de peso molecular se inici con la fraccin 42. Sin embargo, la proporcin relativa de molculas de diferentes DP diferan significativamente. Aunque el perfil de fructanos raz de alcachofa revel un pico en la fraccin 62, la concentracin de fructanos aument de forma continuada con la disminucin de DP en los extractos de la 22/19 lnea transgnica de papa. El pico de la fraccin de 73, probablemente refleja grandes cantidades de la oligofructanos 1 kestosa y nistosa. En extractos de la 22/30 lnea transgnica de papa este pico de oligosacridos (fraccin de 69 a 87) tambin puede ser detectado. En los tubrculos de todas las lneas analizadas, la fraccin de inulina de alto peso molecular fue significativamente menor que en las races de la alcachofa, mientras que la mxima DP fue comparable.

El contenido de hidratos de carbono de la Papa sntesis de inulina.

Para cuantificar la acumulacin de fructanos y analizar su efecto sobre el metabolismo de los carbohidratos de la papa, el rendimiento total y la composicin de hidratos de carbono se determinaron para el tipo salvaje y las lneas de transgnicos en cinco repeticiones cultivadas en un invernadero. Un tubrculo de cada planta se cosecha y el contenido total de azcar se determin. Las lneas transgnicas de inulina acumulado hasta 37 equivalentes fructosa mmol / g de peso fresco (Cuadro 3 ). Como ya se ha demostrado por 1-SST-expresin de las lneas, las actividades fructosyltransferase no tienen grandes repercusiones en la composicin de carbohidratos solubles de los tubrculos. En la lnea de 22/34, la concentracin de glucosa se increment significativamente, mientras que el contenido de sacarosa se mantuvo sin cambios en todas las lneas. El contenido de almidn que pareca ser disminuido, a pesar de una reduccin significativa se observ en todas las lneas excepto 22/34 debido a la alta variacin en el contenido de almidn del tipo silvestre, as como las lneas transgnicas. El contenido total de carbohidratos de los tubrculos, expresada en equivalente de hexosa mmol por gramo de peso fresco, mostr un ligero descenso en las plantas transgnicas.

Tabla 3

Papa trans n a

q i p h

P i

19

tr

y el almidn contenido en azcar, expresado en equivalente de hexosa mmol / g de peso fresco de tubrculos de plantas de tipo salvaje y las plantas portadoras de la 1 SST y el gen APC-1

Planta La glucosa Fructosa Sacarosa Fructanos Almidn Desiree 2,12 1,62 9,11 1,77 770 113 22/19 3,87 3,31 14,67 6,41 34,13 4,71 631 144 22/30 5,63 4,24 10,60 5,21 33,00 4,08 645 132 * 22/34 7,21 4,14 9,71 2,17 37,43 5,82 620 75 *
tubrculo entero de cinco plantas por lnea se homogeneizaron y alcuotas fueron analizados. Los datos se analizaron las diferencias significativas utilizando la prueba t de Student, si p <0,05 para la comparacin de una lnea transgnica con el tipo salva je, se caracteriza por *. nd, no detectables. V)

Discusin

1-SST y una FFT-son suficientes para la sntesis molecular de inulina de alto peso en alcachofa.
Un cuerpo slido de evidencia de estudios in vitro con enzimas purificadas ( 13 - 15 ), as como el anlisis de plantas transgnicas ( 16 ) ha apoyado el concepto de la sntesis de inulina por las dos enzimas 1 -SST y una FFT, originalmente propuesto por Edelman y Jefford en 1968 ( 12 ). Pero mientras que las plantas que naturalmente se acumulan inulina producir polmeros de fructosa con una longitud de cadena mxima de entre 60 y 200 unidades ( 11 ), la sntesis de molculas de inulina con un GP de ms de 25 nunca se ha informado tanto de los experimento s in vitro o de plantas transgnicas. Expresin de fructosiltransferasas bacteriana en las plantas conduce a la sntesis de fructanos peso molecular muy alto de un GP de varios miles ( 27 , 28 ), pero la sntesis de fructanos bacteriana difiere mucho de fructanos metabolismo de la planta. Las bacterias utilizan slo una enzima para sintetizar polmeros de alto peso molecular con fructanos sacarosa es el sustrato para cada paso de elongacin de la cadena ( 29 ), mientras que en las plantas de sntesis de la cadena de alargamiento de inulina se lleva a cabo como fructosilo transferencia reversible entre las molculas de fructanos, que es catalizada por una enzima ( 1-FFT) que carece de actividad sucrolytic. Adems, casi todas las transferasas fructosilo bacterias producen fructanos tipo levano, que se caracteriza por -2 6 enlaces de las molculas de fructosa en lugar de la -2 1 enlaces de las cadenas de inulina. Van der Meer et al. ( 28 ) reportaron la expresin del gen de la FTF de Streptococcus mutans, que produce inulina de alto peso molecular, en la papa, pero el bajo nivel mismo de la acumulacin de fructanos impedido la determinacin del tamao exacto. Sobre la base de un anlisis detallado por HPAEC y SEC de las plantas de papa transgnicas, que demuestran que la inulina con un GP de hasta 200 se pueden producir en un sistema heterlogo utilizando el 1 -SST-FFT y los genes de una alcachofa. Comparacin de los cromatogramas de la SEC de los tubrculos de papa con los
Papa trans n a
u s t r

P i

20

tr

extractos de raz de alcachofa revel que el mismo inulina de alto peso molecular como en la alcachofa se encuentran en la papa. Por lo tanto, puede extender el modelo de Edelman y Jefford, que originalmente se elabor para la sntesis de inulina bajo peso molecular en la alcachofa de Jerusaln (tuberosus H.), con el peso de inulina de alto peso molecular tpico de alcaucil (Cynara C.). A medida que la longitud de la cadena es un determinante importante de la calidad en la produccin de inulina industriales ( 30 ), este resultado es tambin de inters econmico considerable. Aunque los dos fructosiltransferasas 1-SST y una FFT-son suficientes para crear el conjunto completo de molculas de inulina presente en alcachofa, hemos observado importantes cambios en la longitud del patrn de distribucin de la cadena (Fig. 3 ). Determinacin de la relacin glucosa / fructosa de cido hidroliza molculas de inulina de la alcachofa revel una longitud de cadena media de 43, mientras que en los tubrculos de patata, la longitud de cadena media fue de slo el 18 (datos no presentados). Factores como la disponibilidad de sacarosa o de las enzimas invertasas competir, por ejemplo, pueden ser responsables de esta diferencia. Se ha propuesto ( 13 ) que la sntesis de fructanos en un producto -como forma de cascada, donde la concentracin de una molcula de una determinada cadena debe ser la longitud de un umbral alcanzado antes de la ms alta homlogo siguiente se sintetiza. Si este mecanismo opera en las plantas de papa transgnicas, la sntesis de almidn concurrentes pueden impedir la distribucin del tamao de estado estacionario que se encuentran en alcachofa de ser alcanzado en tub rculos de patata. Adems, exohydrolase (s) pueden estar involucrados en la generacin del patrn de inulina que se encuentran en las races de la alcachofa en el momento de la cosecha. Si por ejemplo una enzima hidroliza preferentemente oligofructanos, la duracin media de la cadena se trasladara a un DP ms alto. En petunias transgnicas que expresan la 1-SST y la FFT-genes de una sntesis de inulina de la alcachofa de Jerusaln slo se observ en las hojas senescentes ( 16 ). Por el contrario, se obtuvo la acumulacin de fructanos en hojas complet amente expandidas y, en cantidades an mayores, en los rganos de almacenamiento de la papa transgnica. Baja concentracin de sacarosa o mayor actividad de la invertasa vacuolar en petunia podran contribuir a esta diferencia. Por otra parte, distintas propiedades enzimticas se debe tomar en cuenta. Nos han informado de que 1 -FFT de alcaucil muestra una mayor preferencia por sustratos DP como aceptor de transferir los residuos fructosilo que tiene la enzima de la alcachofa de Jerusaln ( 18 ). En condiciones donde la actividad invertasa alta previene la acumulacin de molculas de bajo peso molecular de inulina, que son los principales productos formados por la H. tubero SUS 1-FFT, el C. scolymus enzima sera ms eficiente en la sntesis de molculas de inulina de orden superior, que son menos accesibles a invertasas ( 31 ).

Impacto de la acumulacin de fructanos en el metabolismo de carbohidratos de la papa transgnica.

En contraste con los resultados obtenidos para la expresin de fructosiltransferasas bacteriana en las plantas ( 27 , 32 ), se observ ni fenotpica efectos adversos ni una reduccin de la produccin de tu brculos de inulina de acumulacin de las plantas de
Papa trans n a
y w x v

P i

21

tr

papa. Adems, el impacto sobre el metabolismo de los hidratos de carbono de los rganos de las plantas verdes slo inulina menores y de la hoja fue baja. Los bajos niveles de acumulacin de fructanos en las hojas tambin se ha informado de la remolacha azucarera y de petunia ( 16 , 33 ) y, al menos en el caso de la papa ( 34 ), puede atribuirse a la disponibilidad de sacarosa baja en las vacuolas de las hojas. Curiosamente, en hojas de plantas que expresan slo una -SST fructo-oligosacridos hasta un GP de 7 podra ser detectado. La capacidad de 1 -SST para producir oligmeros con ms de 5 DP tiene hasta el momento no se ha informado y contradice la distincin clara de las actividades transferasa fructosilo como se propone en el modelo de Edelman y Jefford. En contraste, 1-SST parece tener un espectro ms amplio de actividades. Observaciones similares se han hecho en otras fructofuranosidases. El 6-SFT de cebada, que era el fructosyltransferase primera vez que se ha caracterizado a nivel molecular ( 35 ), es capaz de la sntesis de novo de fructanos a partir de sacarosa, as como la introduccin de branchpoints en las cadenas existentes, y el 1-FFT de la achicoria es capaz de transferir los residuos a la fructosa fructosilo monmeros ( 36 ). Los tubrculos de patata que contiene inulina -mostrar una ligera reduccin en el contenido de almidn, lo que indica que la sntesis de inulina se lleva a cabo a expensas de la produccin de almidn con inulina como una alternativa, pero no un receptor adicional para los hidratos de carbono. Que fotoasimilados importados en el tubrculo se reparten entre la sntesis de almidn y fructanos es una prueba ms de una limitacin de fuente de produccin de biomasa del tubrculo, ya que fue reportado por Engels y Marschner ( 37 ). Actualmente estamos investigando la posible contribucin de la produccin de inulina para hundir la fuerza de la papa mediante la transferencia de los genes fructosyltransferase a una lnea de papa que es incapaz de sntesis de almidn, debido a la inhibicin antisentido de ADP -glucosa pirofosforilasa ( 38 ). Si el suministro de hidratos de carbono era limitar la acumulacin de inulina en las plantas de tipo salvaje transformado por el 1-SST /-FFT genes 1, se esperara un aumento en la produccin de inulina en la transformacin de esta lnea.

Abreviaturas
1-SST, sacarosa: sacarosa 1-fructosyltransferase; 1-FFT, fructanos: fructanos 1-fructosyltransferase; HPAEC, de alto rendimiento de cromatografa de intercambio aninico; SEC, tamao de la cromatografa de exclusin; DP, grado de polimerizacin
y

Recibido 01 de febrero 2000.

Papa trans n a

P i

22

P
y

tr

Copyright La Academia Nacional de Ciencias

VI) BIBLIOGRAFIA

- Bigio, Isaac; Minka News, ao 4, nmero 2; Londres, UK - Catacora, Giorgina; Tierra Viva, Bolivia; RALLT; Agosto 2006 - Galvn, Guillermo, captulo VI Recursos genticos - Galvn, G.; Gonzlez, H.; Sollier, S. 1996. Los recursos genticos en el Uruguay, una visin desde la horticultura. Ponencia en el Curso "Agricultura Ecolgica" del programa de Educacin Permanente. Facultad de Agronoma, Uruguay - Informe de la Jornada realizada el 12 de marzo de 2003 en el Saln de Actos del Mercado Modelo.Montevideo - http://www.elpais.com/articulo/sociedad/primera/patata /transgenica/fractura/Union/Europea/elpepisoc/20080219elpepisoc_3/Tes - http://www.cipotato.org/potato/

Papa trans n a

P i

23