La típsina es la serina prolessa más estudiada debido a sus mútiles aplicaciones

biotecnológicas, enel aso detpsina de sarcina Monterey (Sardinops sagax csenues),

muestra
características cinátias y termocinámicas que la definen como una enzima adaptada
río, estas
csracterísicas están inimamente relacionadas con su estructura. Actualmente se
conoos la
estructura terciaia de típsina in sico, generada a parir dela estuctura
crstlográfca de
salmón POB (1H48), el cual presenta una identidad del 28% en su secuencia de
aminoácidos con
trípsina de sardina la cual brinda una ides general dela posioe distribución de la
proteína pero
este modelo no muestra la posición exacta de los aminoácidos en el espacio. las
zonas dela
proteína con mayor hexbiidad ola distancia entre los residuos en elo activo
responsables de

catálisis. Sin embargo, conocer estas ceractríticas es clave enla comprensión del
proceso
de adaptación alto; de ahí surge la necesidad de obtener la estructura
oristalográñce. Por lo
que este trabajo ene como objetivo determinar las condiciones necesarias para la
obtención de
cristales de rípsina | part del ciego plórico de sardina Monterey (Sarcinops sagas
caerulea)
con el fin de establecer el primer paso en la caracterización de su estructura por
diracción de
os X. Para alcanzar este objetivo se puricó tripsina 1 partr del ciego plírico de
sardina
Monterey (Sarcinope sagax cuerule), haciendo uso de los métodos de cromatografía de
exclusión por tamaño, cromatografía de afnidad y cromatografía de intercambio
iónico: la
presencia de la proteína con un 00% de pureza se evidenció en un gel de
electroforesis SOS»
PAGE al 15%, donde se observó la banda de 25 kDa caracteristica que corresponde a
tripsina
Durante el establecimiento de las condiciones de cristalización se utlizaron los
Kits comerciales
e Jena Bloscience WIZARD y Il ambos con un ttal de 08 condiciones de cristalización
que
contienen condiciones de pH, fuerza nica, altos y soluciónes amoriguadoras las
cuales
ueron evaluadas por dos técnicas de crstalzación distintas microbateh y fusión de
vapor por
ota colgante, Por la técnica de micrbath fue posible observar el crecimiento de
sólidos
ristalmos en cuntro de las condiciones y uno 1 por ditsión de vapor. La composición
de los
cristales se identicó por mecio de la inción diferencial ZIT la cual demostró el
origen salino de
los citas