TEMA 1.

- EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
* Sección de toma de muestras. Causas de contagio en un laboratorio de Microbiología Clínica
* Sección de recepción y registro de muestras.
• Ingestión y exposición de mucosas a líquidos
* Sección de procesamiento de muestras.
* Sección de preparación de medios/material contaminados.
laboratorio. • Aspiración de aerosoles formados en la manipulación.
* Sección de análisis:
• Inoculación accidental con jeringuillas.
- Bacteriológico - Virológico
- Micológico -Parasitológico • Cortes y laceraciones con material de vidrio y objetos
•* Sección de serología. punzantes.
•* Sección de biología molecular.
•*Área de almacén. • Manipulación de sueros.
•* Área de eliminación de residuos • Accidentes de centrífuga.

• Rotura de frascos de hemocultivo.

Grupo de riesgo I (bajo riesgo individual y • Manipulación de animales de laboratorio (mordeduras,
comunitario).
arañazos…).
Grupo de riesgo II (riesgo individual moderado y
riesgo comunitario limitado).
Grupo de riesgo III (riesgo individual alto y riesgo
comunitario bajo).
Grupo de riesgo IV (elevado riesgo individual y
comunitario).

Análisis Microbiológico y Parasitológico. Grupos A y B

PREVENCIÓN DE INFECCIONES ADQUIRIDAS EN EL LABORATORIO
• BARRERAS PRIMARIAS: para evitar la dispersión de
los microorganismos.
- Prohibición de pipetear con la boca.
- No llevarse a la boca ningún objeto.
- Restricción del uso de agujas hipodérmicas.
- Sustitución de pipetas y material de vidrio por
plástico.
- Reemplazo del material astillado o agrietado.
- Tubos de centrífuga cerrados con tapón de
rosca y llenados hasta 2 cm m del borde.
- Inspección de aparataje para evitar la formación
e aerosoles.
- Desinfectantes en cada punto de trabajo y
desinfección periódica.
- Bocales de desecho para objetos pequeños en
cada puesto de trabajo.
- Recipientes desechables o bolsas en cada
puesto de trabajo.
• BARRERAS SECUNDARIAS: protegen al personal si
fallan las primarias.
- Las batas deben estar siempre abrochadas y
guardarse separadas de la ropa de calle.
- La bata ha de retirarse cuando el personal acuda
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a otras áreas, como lavabos o cafetería.
- Las manos deben lavarse después de manipular
material infeccioso.
- Deben cubrirse con apósitos impermeables los
cortes, raspaduras y abrasiones visibles sobre las
partes expuestas del cuerpo del personal.
- Cualquier enfermedad del personal ha de ser
comunicada al supervisor.
- Cualquier miembro del personal sometido a
tratamiento esteroideo o inmunosupresor debe
comunicarlo al supervisor médico.
- El personal ha de estar vacunado siempre que
sea posible.
BARRERAS TERCIARIAS: pensadas para ofrecer una
protección adicional al personal y para prevenir la
difusión a la comunidad de los microorganismos en
estudio Relacionado con el diseño arquitectónico de los
laboratorios, estableciéndose:
* Laboratorio básico: Grupos de riesgo I y II.
* Laboratorio de seguridad: Grupo de riesgo III.
* Laboratorio de máxima seguridad: Grupo de riesgo IV.
 PREVENCIÓN DE INFECCIONES ADQUIRIDAS EN EL LABORATORIO
• Niveles de contención o seguridad biológica:Atendiendo al
riesgo relativo que entrañan los microorganismos que en
ellos se manipulan, los laboratorios se clasifícan en cuatro
niveles de seguridad biológica, niveles de contención
biológica 1, 2, 3 e 4, para trabajar, respectivamente, con
agentes biológicos de los grupos de riesgo 1, 2, 3 e 4.
NORMAS EN NIVEL 1:
a) las puertas del laboratorio permanecerán cerradas
mientras se trabaja.
b) Hay que realizar una desinfección diaria de las mesas al
finalizar el trabajo y si se produce un derrame de muestras.
c) El material contaminado debe ser esterilizado antes de su
eliminación.
d) Trabajar con bata que se quitará al saír del laboratorio.
e) No se debe pipetear con la boca
f) No comer, fumar, aplicarse cosméticos, morder los lápices
o bolígrafos o tener alimentos en el laboratorio.
g) Lavar las manos después de trabajar con microorganis-
mos y al rematar la jornada.
h) Realizar las técnicas correctamente evitando la
producción de aerosoles.
i) Los materiales que no se puedan esterilizarse en el
laboratorio se trasladarán en colectores cerados hasta el
lugar donde se encuentre el autoclave que debe ser en el
mesmo edificio.
l) Deben llevarse a cabo programas de desinfección e
desratización.
• m) El diseño del laboratorio debe permitir una limpeza
adecuada entre os muebles que deben ser resistentes a
ácidos, álcalis e impermeables.
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Normas en nivel 2: laboratorios de hospitales o centros de
salud primaria. Ademais das de nivel 1, comprende as
seguintes normas:
f) Se debe tomar una muestra de suero la todo el personal
cuando empiece a trabajar que se archivará como suero
base.
g) Existirá un manual en el laboratorio de normas de
seguridad que todo el mundo debe conocer y donde esté
expuesto que hacer en caso de accidente.
h) Se trabajará con cabinas de seguridad de nivel I, II o III
cuando se utilicen técnicas que puedan producir aerosoles
(centrifugación, homogeneización de muestras, agitación
vigorosa...)
Nivel 3: Microorganismos con riesgo individual elevado y
riesgo comunitario bajo, que suele provocar enfermedades
graves en humanos o en animales pero que generalmente
no se propaga de un individuo infectado la otro. Se
disponen de medidas eficaces y de prevención.
Comprende las normas de los niveles 1 y 2 y además:
a) Todas las actividades con microorganismos o productos
potencialmente patóxenos se realizarán en cabinas de
seguridad..
b) Se utilizarán batas abiertas por las costas que no deben
usarse fuera del laboratorio. Se utilizarán guantes cuando
se trabaje con material contaminado o animales que se
esterilizarán antes de descartarlos.
Nos cuartos donde se tienen los animales se utilizarán
máscaras rígidas.
c) En el laboratorio no debe de haber plantas ni animales
que nose utilicen en el trabajo.
 CONTROL DE CALIDAD

Control de calidad de las muestras:

• Manual de normas de obtención y transporte de

muestras.
• Horarios fijos de recepción de muestras.
• Evaluar la calidad de la muestra al recibirla.
• Informar con rapidez los resultados clinicamente más
útiles antes de emitir el informe definitivo.

Control de calidad: Evaluación sistemática del Control de calidad de los medios de cultivo:
trabajo para asegurar que el producto final
conforma, en un nivel aceptable, los límites
1. Control de esterilidad: ausencia de cualquier tipo de
tolerables de precisión y exactitud previamente
crecimiento.
establecidos
2.Control de calidad: comprobar que el medio contiene
aquellos componentes que le caracterizan. Se utilizan
Política de calidad: Directrices y objetivos de gérmenes que crecen sobre el medio, o dan positiva una
una empresa relativos a la calidad y reacción, y gérmenes que no crecen, o dan negativa la
expresados formalmente por la Dirección
reacción.
General.
3.Control de caducidad: Se utilizan gérmenes que
crecen sobre el medio, o dan positiva una reacción, y
Aseguramiento de la calidad: Conjunto de gérmenes que no crecen, o dan negativa la reacción.
acciones planificadas y sistemáticas que son - Gérmenes o cepas control de las colecciones de
necesarias para proporcionar la confianza
cultivos tipo (CECT, NCIMB, ATCC…)
adecuada de que un producto o servicio
satisfará los requisitos dados sobre la calidad.

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 CONTROL DE CALIDAD

Control de calidad de los reactivos:

Producto Microorganismos Reacción esperada

Bacitracina discos* Streptococcus ß-hemolíticos Sensible=halo de inhibición
Grupo A Resistente= no hay halo de inhbición
Enterococcus faecalis

Catalasa (H2O2)*$ Staphylococcus aureus Positiva (burbujas)

Streptococcus viridans Negativa (no burbujas)

Coagulasa*$ Staphylococcus aureus Positiva (forma coágulo en 4h)

S. epidrmidis Negativa
*Control de cada lote; $Control semanal

Control de aparatos:

Aparatos Controles necesarios Periodicidad

Neveras Limpieza Anual
Temperatura 2-8ºC Diaria
Descongelación Anual

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 Diseño, validación y control de los sistemas de diagnóstico
1.Selección del método de ensayo:
2.Optimización del método de ensayo:
Experimentos y análisis de los datos para
asegurar que el ensayo se realiza en las
mejores condiciones.
3 .Validación del método de ensayo: Evalua
la fiabilidad del método de ensayo para un uso
determinado. La validación pueden incluir:
* Estudios epidemiológicos o de campo.
* Comparación con otros métodos ,
preferiblemente métodos de referencia o
aprobados por organismos internacionales.
* Estudios de colaboración con otros
laboratorios que utilizen el mismo método,
incluyendo el intercambio de muestras.
Análisis Microbiológico y Parasitológico. Grupos A y B
Control de calidad interno:
El laboratorio debe disponer de un programa de
control de calidad interno para evaluar con
carácter contínuo sus actividades. Dicho
programa puede incluir: recuentos cruzados entre
analistas, análisis duplicados de una misma
muestra por distintos analistas, uso de materiales
de referencia, etc
Control de calidad externo:
Es recomendable que los laboratorios participen en
ensayos de aptitud organizados externamente
como parte de sus procedimientos de
aseguramiento de la calidad.
-La participación en estos programas permite al
laboratorio la evaluación objetiva de sus actividades
y demostrar la fiabilidad y precisión de los
resultados obtenidos con sus métodos analíticos.
 MANIPULACIÓN Y ALMACENAMIENTO DE MATERIAL INFECCIOSO

-Todos los especímenes han de recogerse en recipientes resistentes y con sistema

de cierre para evitar su pérdida o derrame.

- Las heridas en las manos deben protegerse con vendajes.

- Usar guantes desechables si se va a manipular sangre, suero o plasma u otros

especímenes.

-Las muestras contaminadas con sangre deben ser rechazadas o, si se trata de

-una emergencia, procesarla con guantes.

-Lavarse las manos con agua y jabón frecuentemente y después de manipular/

procesar muestras clínicas y siempre antes de salir del laboratorio.

-Meter en bolsas todo el material contaminado y etiquetarlo como infeccioso.

-Desinfectar el área de trabajo que halla estado en contacto con la muestra

contaminada.
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 ELIMINACIÓN DE RESIDUOS BIOLÓGICOS

-El laboratorio debe de disponer de vertederos o sumideros para la eliminación

de las muestras biológicas una vez esterilizadas.

-Todo el material contaminado o potencialmnte contaminado (tubos, recipientes

de las muestras, pipetas de plástico,...) deben depositarse en bolsas etiquetadas
como material peligroso.

-Depositar el material de vidrio u objetos punzantes (agujas, lancetas,…) en

recipiente adecuados y una vez llenos, sellarlos y etiquetarlos para su adecuada
eliminación.

-Trasladar las bolsas llenas con material contaminado a la zona de esterilización

y eliminación de residuos con la frecuencia adecuada para evitar su acumulación.

-Sumergir el material de vidrio reutilizable en solución desinfectante. Lavar el

material abundantemente con agua y autoclavarlo antes de su reutilización.

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