norma UNE-EN

N ISO 4833-2

españolla
Febrero 2014

TÍTULO Microobiología de la cadena alimentaria

Métod
do horizontal para el recuento de microoorganismos

Parte 2: Recuento de colonias a 30 ºC mediaante la técnica de

siemb
bra en superficie

(ISO 4833-2:2013)
4

Microbiollogy of the food chain. Horizontal method for the enumeration of miicroorganisms. Part 2: Colony
count at 30
3 degrees C by the surface plating technique. (ISO 4833-2:2013).

Microbiollogie de la chaîne alimentaire. Méthode horizontale pour le dénombrrement des micro-organismes.

Partie 2:: Comptage des colonies à 30 degrés C par la technique d'ensemencement
d en surface.
(ISO 48333-2:2013).

CORRESPONDENCIA Esta norrma es la versión oficial, en español, de la Norma Europeea EN ISO 4833-2:2013,
que a suu vez adopta la Norma Internacional ISO 4833-2:2013.

OBSERVACIONES Esta norma, junto con la Norma UNE-EN ISO 4833-1:20144, anula y sustituye a la
Norma UNE-EN
U ISO 4833:2003.

ANTECEDENTES Esta noorma ha sido elaborada por el comité técnico AE

EN/CTN 34 Productos
alimentaarios cuya Secretaría desempeña FIAB.

EXTRACTO DEL DO
OCUMENTO UNE-EN ISO 4833-2
4
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 Índice

Prólogo ..................................................................................................................................................... 6

1 Objeto y campo de aplicación................................................................................................ 7

2 Normas para consulta ............................................................................................................ 7

3 Términos y definiciones ......................................................................................................... 8

4 Principio .................................................................................................................................. 8

5 Medios de cultivo y diluyentes ............................................................................................... 8

5.1 Generalidades ......................................................................................................................... 8
5.2 Diluyentes ................................................................................................................................ 8
5.3 Medio de agar: Agar de recuento en placa (PCA; plate count agar) ................................. 8

6 Aparatos .................................................................................................................................. 9

7 Toma de muestras ................................................................................................................ 10

8 Preparación de la muestra para análisis ............................................................................ 10

9 Procedimiento ....................................................................................................................... 10
9.1 Porción para análisis, suspensión inicial y diluciones ....................................................... 10
9.2 Inoculación e incubación...................................................................................................... 11
9.3 Recuento de colonias ............................................................................................................ 11

10 Expresión de los resultados ................................................................................................. 11

11 Informe del análisis .............................................................................................................. 12

Anexo A (Normativo) Recuento de colonias de superficie utilizando un sembrador de

placas en espiral........................................................................................ 13

Bibliografía ............................................................................................................................................ 19

1 Objeto y campo de aplicación

Esta parte de la Norma ISO 4833 describe un método horizontal para la determinación del número de microorganismos
capaces de crecer y formar colonias en la superficie de un medio sólido tras incubación aerobia a 30 ºC. El método
resulta aplicable para:

a) productos destinados al consumo humano o la alimentación animal;

b) muestras ambientales del área de producción y manipulación de alimentos para consumo humano y alimentación
animal.

Esta parte de la Norma ISO 4833 resulta aplicable para:

1) productos que contengan organismos sensibles al calor que constituyan con probabilidad una proporción
significativa de la flora total (por ejemplo organismos psicotrópicos en alimentos refrigerados y congelados,
alimentos desecados u otros alimentos que puedan contener organismos sensibles al calor);

EXTRACTO DEL DOCUMENTO UNE-EN ISO 4833-2

2) productos que contengan bacterias aerobias estrictas que constituyan con probabilidad una proporción significativa
de la flora total (por ejemplo Pseudomonas spp.);

3) productos que contengan partículas pequeñas que puedan resultar difíciles de distinguir de las colonias en una placa
vertida;

4) productos cuyo color intenso impida el reconocimiento de las colonias en una placa en profundidad;

5) productos en los que se requiera una distinción entre distintos tipos de colonias como parte de la garantía de la
calidad alimentaria.

Además de la técnica de siembra manual por extensión en placa, esta parte de la Norma ISO 4833 también describe el
uso de un sembrador de placas en espiral, un método rápido para realizar el recuento de colonias en superficie
(anexo A).

La aplicabilidad de esta parte de la Norma ISO 4833 para el examen de algunos alimentos fermentados para consumo
humano y alimentación animal es limitada y pueden resultar más adecuados otros medios o condiciones de incubación
diferentes. No obstante, puede aplicarse este método con dichos productos aunque es posible que no se detecten con
eficacia los microorganismos predominantes de dichos productos.

En algunas matrices el método descrito en esta parte de la Norma ISO 4833 puede proporcionar resultados diferentes de
los obtenidos con el método descrito en la Norma ISO 4833-1.

2 Normas para consulta

Los documentos indicados a continuación, en su totalidad o en parte, son normas para consulta indispensables para la
aplicación de este documento. Para las referencias con fecha, sólo se aplica la edición citada. Para las referencias sin
fecha se aplica la última edición (incluyendo cualquier modificación de ésta).

ISO 6887, (todas sus partes) Microbiología de los alimentos para consumo humano y animal. Preparación de las
muestras de ensayo, suspensión inicial y diluciones decimales para examen microbiológico.

ISO 7218, Microbiología de los alimentos para consumo humano y alimentación animal. Requisitos generales y guía
para el examen microbiológico.

ISO 11133, Microbiología del agua y de los alimentos para consumo humano y alimentación animal. Preparación,
producción, almacenamiento y análisis del rendimiento de los medios de cultivo.

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