TEMA 2.

Leyes de la Absorción de la
Radiación.
 Ley de Lambert-Beer

Ley fundamental que rige la absorción de todos los

tipos de radiación electromagnética aplicable a
disoluciones y también a gases y sólidos.

“La absorbancia de la radiación electromagnética

producida por una especie absorbente es
directamente proporcional a la trayectoria de la
radiación a través la disolución y a la concentración
en ésta de la sustancia que produce la absorción”.

A =  bC
 A =  bC
 = coeficiente de absortividad molar
b= paso óptico (tamaño de la celda)
C = concentración
LEY DE BEER
LEY DE BEER
 Diagrama de bloques de un espectrofotómetro de VU-vis

Selector de longitud Po P
Fuente de luz de onda Muestra Detector
(Monocromador) de luz

Diagrama esquemático de un experimento espectrofómetro de haz simple. P0,

irradancia del haz que entra en la muestra; P, irradancia del haz que sale de la
muestra; b, longitud el camino óptico a través de la muestra.
Espectrofotómetro de UV-vis
La transmitancia, T de define como la fracción de luz incidente
que pasa a través de la muestra.

P
T ra n s m ita n c ia : T =
Po

Como la muestra puede haber absorbido algo de luz, P Po

Por lo tanto, T puede valer de 0 a 1. El porcentaje de transmitancia es

simplemente 100T y puede valer desde 0 a 100 %.
La absorbancia se define como

Absorbancia: Po
A = lo g = lo g T
P

Ley de Beer: A = bc

La absorbancia es directamente
proporcional a la concentración, c, de la
especie que absorbe luz en la muestra.
 b

Disolución
adsorbente
Luz
incidente P P - dP Luz
absorbente

X=0 X=b


dx
 La Ley de Beer asume lo siguiente:

1. La radiación incidente es monocromática

2. Las especies absorbentes actúan independientemente una de otra
3. La absorción ocurre en un volumen de sección transversal uniforme
4. La degradación de la energía es rápida: si las especies absorbentes
son fluorescentes o fosforescentes, la energía emitida durante el
proceso luminiscente es percibida por el detector, la cual se suma a
la señal de radiación transmitida por la celda que contiene el analito.
Esto, obviamente causa una distorsión en la relación
absorbancia/concentración.
5. El índice de refracción de la solución es independiente de la
concentración (si la diferencia en concentraciones entre dos
soluciones es demasiada grande, su índice de refracción varía en la
misma proporción y en estas condiciones la ley de Beer ya no es
válida.
Espectro del KMnO4
 Mezclas

Espectros no superpuestos
Espectros superpuestos
parcialmente

Espectros completamente superpuestos

 Sistemas multicomponentes
Si se tienen dos componentes como especies absorbedoras y
considerando la aditividad de las absorbancias individuales de cada
especie se tiene:

A l 1 tenemos:

AIl1 = aIlIbCI AIIl1 = aIIl1bCII

Al1 = AIl1 + AIIl1 = aIlIbCI + aIIl1 bCII

A l 2 tenemos:

AIl2 = aIl2bCI AIIl2 = aIIl2bCII

Al2 = AIl2 + AIIl2 = aIl2bCI + aIIl2 bCII
 Donde:

Al1 = Absorbancia de las especies I y II a longitud de onda l 1

Al2 = Absorbancia de las especies I y II a longitud de onda l 2

Haciendo simultáneas las ecuaciones 1 y 2 obtenidas

anteriormente se puede conocer el valor de la
oncentración de cada especie absorbente.

La absorbancia a una determinada longitud de onda es

igual a la suma de las absorbancias individuales de cada
uno de los componentes individuales que absorben a dicha
longitud de onda.

Al = SAIl = bSail Ci
Errores cometidos al aplicar la ley de Beer

• Químicos
• Instrumentales
• Personales
 Errores químicos

Efectos debidos a sistemas en equilibrio

Asociación
Espectro de
Analito Disociación
absorción diferente
del analitio
Reacciones con el disolvente

2- 2 H C rO -
C r2O 7 + H 2O 4 2 C rO 4
- + 2H +
 Efectos debidos al disolvente

• Interacciones soluto-disolvente: corrimientos espectral

ensanchamientos de bandas.

Efectos de interferencias :

Impurezas dal agua destilada

Impurezas de reactivos
Interferentes en las muestras
problema
 Errores Instrumentales

Desviaciones debidas a la luz policromática

Desviaciones debidas a la presencia de luz parásita

Radiación parásita Radiación extraña que llega al detector no proveniente

de la muestra

Polvo Defectos en el sistema óptico

Reflexiones (rayaduras, roturas)
 Errores personales

Utilización y cuidado de las celdas

Limpieza
Evitar rayaduras

Cubetas para trabajar en zona visible : Plástico, Vidrio

Cubetas para trabajar en UV: Cuarzo

Ausencia de burbujas o partículas

Control de temperatura
 Determinación del contenido de hierro en suero

Espectro de absorción visible del complejo

(ferrocina)3Fe(II) en análisis colorimétrico del
hierro
Curva de calibración del complejo
(ferrocina)Fe(II) que se utiliza en la
determinación de hierro en suero
Cubetas utilizadas habitualmente en espectroscopia
visible y UV
Celdas Uv- Vis
 Rango de
transmisión Tolerancia en
Material Zona del espectro
(longitudes de transmisión
onda)
Cristal óptico o
vidrio De 380 a 780 nm3​ Visible 0,5% a 365 nm
borosilicatado
Plástico De 380 a 780 nm3​ Visible
Menos de
Cuarzo fundido Ultravioleta
380 nm3​
Cuarzo UV 185 nm,4​ Ultravioleta 1% a 220 nm
Cuarzo ES
(cuarzo silicatado De 190 a 2000 nm Ultravioleta 1% a 220 nm
fundido)

Cuarzo IR De 220 a 3500 nm Infrarrojo 1% a 2730 nm

Cálculo de la concentración por interpolación en la recta
de calibrado