REPARACIÓN-RECOMBINACIÓN

• Importancia del tema.

• Fidelidad de la
replicación. Daños en
el ADN y sistemas de
reparación del ADN.
• Recombinación:
concepto,
clasificación,
modelos, enzimología.
• Consecuencias
genéticas de la
Recombinación.
 Daño del ADN
• Como toda molécula el ADN participa de diversas reacciones
químicas, y como tal puede eventualmente sufrir modificaciones.

•Dichas modificaciones pueden ser :

•espontáneas

•inducidas por diversos agentes

•físicos
•químicos
•biológicos.
 Tipos de daño que ocurren en el ADN
ESPONTÁNEOS:
•depurinaciones
•desaminaciones
5000 depurinaciones/día/ célula
100 desaminaciones/día / célula

•Cambios tautoméricos de base

Son formas alternativas isoméricas de las bases
nitrogenadas que cambian el patrón de
apareamiento normal.
Las variantes son de ceto a enol para timina y
guanina y de amino a imino para citosina y
adenina.
Cambios tautoméricos durante la replicación
 Tipos de daño que ocurren en el ADN

INDUCIDOS:

Químicos
Figura a: sitios proclives a modificaciones
- oxidación
los agentes alquilantes - hidrólisis
adicionan grupos metilo o etilo - metilación
en diversas bases del ADN

Físicos
Exposición a UV: Dímeros de
pirimidina
 Sistemas de reparación

1) Fidelidad de la polimerasa

2) Sistemas de reparación directa

3) Reparación por escisión.

4) Sistemas de reparación post-replicación.

 Sistemas de reparación
Fidelidad intrínseca de la maquinaria
de replicación (10-9pb)
• Esta dada por la actividad exonucleasa 3´-´5´.
• Requerimiento de cebadores.
• Imposibilidad de la polimerasa de agregar nucleótidos si
no hay apareamiento exacto en los nucleótidos previos.
• Implica la imposibilidad de replicación en dirección 3´-5´.
 Sistemas de reparación

1) Sistemas de reparación directa.

a. Fotorreactivación: eliminación
de dímeros de pirimidina.
(procariotas y plantas)
b. Remoción del metilo en O6 de
guanina (la metilación se produce por
agentes alquilantes)
Sistemas de reparación 2) Reparación por escisión.
2a: Reparación por 2b: Reparación por
escisión de base escisión de nucleótido
 Sistemas de reparación

2c: Sistema de
reparación por
apareamiento erróneo.
¿Cómo se diferencia la hebra
parental de la nueva?
_E. Coli: la hebra parental está
metilada.
_Eucariotas: la hebra nueva
presenta roturas de simple hebra.

2d: Sistema de reparación

acoplada a la transcripción.
_Se reparan preferentemente las
hebras transcriptas. (factores de la
trasncripción que actúan en la
maquinaria de reparación, ej. TFIIH)
 Sistemas de reparación
3) Sistemas de 3a: Reparación recombinatoria. La
reparación post- hebra parental no dañada rellena el espacio
replicación. opuesto al sitio dañado en la otra molécula
hija, mediante recombinación entre secuencias
homólogas.
Reparación recombinacional
Sistemas de reparación
Mantenimiento de la información hereditaria

La replicación del material genético es esencial a

mitosis la vida

meiosis Errores en la replicación son el origen de las

enfermedades hereditarias.

Errores en la replicación son causa primaria

DNA de cánceres.
RECOMBINATION

Existen patologías por incapacidad de

mitosis reparar errores cometidos en la replicación

La recombinación aumenta la variabilidad y

genera diversidad.
 Recombinación
Importancia de la variabilidad génica:

-La estabilidad génica es crucial para la supervivencia a

corto plazo.

-A largo plazo, la supervivencia de los organismos puede

depender de la variación génica, mediante la cual
células y organismos pueden adaptarse a las variaciones
del ambiente.

-La propiedad del ADN de experimentar reordenamientos

determina que se formen nuevas combinaciones génicas,
sustrato molecular de la variabilidad génica.
Consecuencias
genéticas de la
recombinación...
 Dónde y cuándo sucede la
recombinación homóloga....?
-Durante la formación de gametos: MEIOSIS
Donde y cuando sucede la
recombinación homóloga....?
Consecuencias genéticas de la recombinación

Aumento de la variabilidad genética:

-Varios niveles:
1) Dado por la combinación aleatoria de los
cromosomas paternos y maternos.

223 gametos diferentes

Consecuencias genéticas de la recombinación

1) La recombinación aumenta el número de combinaciones entre

alelos paternos y maternos.

2) Permite ir eliminando alelos deletéreos tras diversas generaciones.

3) Ofrece mecanismos de reparación del ADN.

“Por estos motivos y muchos más, es que la reproducción

sexual ha sido tan efectiva a lo largo de la evolución”.
 Recombinación
Concepto: Implica la ruptura física y posterior unión de
hebras de ADN de forma tal que intercambian el
contenido de ADN resultando en dos “nuevas” hebras.
Clasificación:

1) HOMÓLOGA: requiere grandes regiones de

homología. (ej. recombinación meiótica)

2) SITIO ESPECÍFICA: se da entre regiones específicas

de moléculas de ADN. Requiere regiones pequeñas
de homología.(ej. reorganizaciones del ADN –genes de Igs,
inserción viral)

3) TRANSPOSICIÓN: implica el movimiento de

secuencias a través del genoma y no requiere
secuencias homólogas. (transposones, retrotransposones, etc)
 Recombinación homóloga

Primeros indicios:

Morgan (1910)

Análisis de
ligamiento.
 Recombinación homóloga
Primeros indicios:
- Habría un
intercambio físico
de información
hereditaria.
- Relación directa
entre la frecuencia
de recombinación
y distancia de
mapa.
- Sienta las bases
del mapeo
genético.
Recombinación homóloga

Modelo de Robin Holliday (1964):

Recombinación homóloga

Intermediario Holliday
Forma Chi
Recombinación homóloga
Resolución del
intermediario Holliday:

No se forman moléculas
recombinantes. Persiste un
sector heterodúplex.

Se forman moléculas
recombinantes, con un sector
heterodúplex.
 Recombinación homóloga

Inicio Intermediario Resolución

de Holliday
 Recombinación homóloga

Modelo de
rotura de
doble
hebra en
una sola
molécula
de ADN.
(la más
aceptada
actualmente)

A pesar de los múltiples modelos del comienzo de la recombinación, la

unión Holliday de hebra cruzada continúa siendo el intermediario central
del proceso.