Obtención de metabolitos (Lab) C5302-3

EXTRACCION DECOLORANTE DEL ACHIOTE

1. OBJETIVOS
1.1. OBJETIVOS GENERALES
El principal objetivo de la extracción es separar selectivamente el producto de una reacción, o
eliminar las impurezas que lo acompañan en la mezcla de reacción, gracias a sus diferencias de
solubilidad en el disolvente de extracción elegido.

1.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS

 Manejar adecuadamente las diferentes técnicas de extracción.
 Aislar una sustancia de una muestra que puede ser solida o
liquida.
 Comprobar experimentalmente la eficiencia en el rendimiento de
los diferentes métodos de extracción.
 Mediante cálculos del experimento hallar el coeficiente de
distribución.
2. FUNDAMENTO TEORICO
El achiote es un árbol originario de la América Tropical donde crece en forma espontánea, es de
rápido desarrollo y alcanza de 3a 4 metros de altura y tiene 20 a 30 cm. De diámetro en la base del
tallo. Su raíz es pi-votante y bien desarrollada, las hojas son cordiformes y las flores hermafroditas
de un color rosado a blanco, dispuestas en panojas terminales. El fruto es una cápsula que
contiene de 30 a 60 semillas, las mismas que están cubiertas de una pulpa rojiza y cerosa que
constituye el tinte llamado achiote. Este árbol se lo cultiva bien entre los 300 a 1.000 metros de
altura, aunque se adapta bien desde el nivel del mar. El achiote crece en óptimas condiciones en
un amplio margen de suelos, desde los francos arenosos hasta los arcillosos; pero, los mejores
resultados se han conseguido en suelos francos con un marcado índice de fertilidad y si bien es
cierto que crece en todo tipo de suelo, también es cierto que es muy exigente en cuanto al
drenaje, ya que su desarrollo en suelos mal drenados es deficiente y aún improbable. En lo que se
refiere al agua, el achiote es muy resistente a la sequía, y se ha observado que a pesar que durante
el periodo seco sufre ciertos trastornos fisiológicos como es la fuerte defoliación, se repone
rápidamente después de caer las primeras lluvias. Las plantaciones establecidas en buenas
condiciones de humedad durante todo el año, producen excelentes rendimientos. La temperatura
varía de los 24 a los 30 grados centígrados.

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Características fisicoquímicas de la semilla del achote.

El principal constituyente colorante de la semilla del achiote es la bixina, que se encuentra en la

cubierta exterior de la semilla del fruto, representa más del 80% de los pigmentos presentes, lo
cual facilita su extracción; los componentes principales de la semilla del achiote son:

♦Resina

♦Orellina (materia colorante amarilla)

♦Bixina (materia colorante roja, 80%)

♦Aceite volátil y aceite graso

Colorantes del achiote.-

El colorante obtenido de las semillas de achiote es un colorante natural, compuesto en su mayoría

por el carotenoide bixina, que se utiliza en la industria láctica, cárnica, condimentaría, cosmética,
farmacéutica, etc.

a) Bixina.-

Llamado también bija o annato, cuya fórmula es C25H30O4, peso molecular 394.49. Se presenta
como isómero geométrico del tipo cis, pero que puede convertirse a su forma trans, más estable.
Se usa en forma de pasta para la elaboración de mantequilla y en forma de una solución alcalina
diluida como aditivo para la leche destinada a la elaboración de queso. Sus dos pigmentos
principales, la bixina (soluble en aceite) y norbixina (soluble en agua) producen una solución
naranja. El color de la bixina depende mucho del pH; entre pH 6 y 7 es predominantemente
amarillo, mientras que en pH inferior a 5.5 es predominantemente rojo. Se utiliza para margarinas,
quesos, embutidos, yogurt y otros.

Bixin 1

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General

Otros nombres Bixina

Fórmula molecular C25H30O4

Identificadores

Número CAS 6983-79-52

ChEBI 3136

ChemSpider 4444638

Propiedades físicas

Apariencia polvo anaranjado

Masa molar 394.5 g/mol

Propiedades químicas

Solubilidad en agua insoluble

b) Norbixina.-

Fórmula C24H28O4, peso molecular 380.50. Es un carotenoide producido por la eliminación del
grupo éster metílico de la bixina, es estable al oxígeno, sensible a la luz y al calor, es soluble en
agua, se utiliza como colorante y en algunos casos como sustituto del beta caroteno.

Solubilidad

La bixina es insoluble en agua; ligeramente soluble en cloroformo, aceites vegetales, acetato de

etilo y propilenglicol.

La norbixina es menos soluble en grasas y aceites y muy solubles en agua mayormente en agua
alcalinizada.

EXTRACCIÓN DEL COLORANTE DEL ACHIOTE:

Desde la antigüedad se conocen diferentes métodos de extracción del colorante del Achiote que
varían desde la extracción rudimentaria o artesanal hasta los procesos industriales.

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Extracción rudimentaria o artesanal del colorante del Achiote:

Las semillas que se separan de las cápsulas maduras, se colocan en suficiente agua hirviendo con
el fin de que el colorante se des-prenda de éstas; luego se separa el residuo de las semillas de la
suspensión acuosa, que se deja fermentar por cerca de una semana. Finalmente se elimina el agua
para dejar una pasta sólida que se modela para obtener el producto con la forma más conveniente
y aceptada por el consumidor. Otro de los métodos antiguos y prácticamente en desuso, consiste
en machacar las semillas entre cilindros para obtener una masa, a la cual se le agrega una cantidad
suficiente de agua con agitación. Cuando la suspensión acuosa se sedimenta, se le retira la mayor
parte del agua clara y se deja hervir por dos o tres horas. Al retirarla del fuego, se exprime bien
para sacar el resto de agua y obtener la pasta que queda lista para empacar y comercializar
directamente.

Extracción industrial:

La extracción del pigmento a escala industrial se puede hacer con diferentes solventes, tales como
agua caliente, álcali diluido, aceites vegetales, propilenglicol, acetato de etilo y otros solventes de
menor importancia. Para cada uno de estos solventes se emplean varios métodos de extracción,
de acuerdo con la disponibilidad de equipos y recursos.

Álcali acuoso:

La bixina, uno de los componentes colorantes del Achiote, es un ácido carboxílico que, al agregarle
un álcali acuoso, forma sales alcalinas solubles en agua, lo que permite extraer el colorante de una
forma más fácil. Las semillas se lavan con esta solución, el extracto y el lavado se acumulan y la
solución roja oscura se neutraliza con un exceso de ácido mineral, el cual precipita el pigmento.
Luego se filtra, se lava y el líquido sobrante se separa hasta obtener la masa colorante para secar.

Aceites vegetales:

La extracción con aceites vegetales consiste en diluir el colorante delas semillas en aceite vegetal
caliente, para venderlo en forma de una solución concentra-da destinada a la pigmentación de
algunos productos lácteos y para fines culinarios.

Propilenglicol:

El proceso de extracción se lleva a cabo en frío debido a la alta solubilidad que tiene el pigmento
en estas condiciones. El colorante obtenido se emplea para colorear derivados lácteos
principalmente.

Extracción con solución alcalina (KOH).

Entre los diferentes métodos y solventes existentes para extraer el colorante del achiote, se
selecciona la solución de hidróxido de potasio para desarrollar los ensayos, a escala de laboratorio,
en este proyecto. Esta selección se fundamenta en las siguientes razones: Según estudios
realizados con diferentes solventes, con una solución de hidróxido de potasio se obtiene el

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colorante con mejor rendimiento y calidad. Según Proexport, el solvente que extrae un mayor

porcentaje del compuesto activo por encima del 30%, además del acetato de etilo, es el hidróxido
de potasio; lo cual es determinante en el momento de exportar el colorante. La extracción con una
solución de hidróxido de potasio, es muy común entre algunas empresas extranjeras, tales como
KALSEC, localizada en Estados Unidos y dedicada a la extracción del colorante de achiote, Annatto,
no solo por el método dela solución alcalina, sino también con aceites vegetales, óleo resinas,
entre otros, encontrando que el hidróxido de potasio es el indicado para realizar esta extracción.

INDUSTRIALIZACIÓN DEL ACHIOTE

De las semillas del achiote se obtiene un compuesto químico llamado bixina, materia prima de
colorantes ampliamente utilizados en la industria alimenticia. En las zonas rurales del Perú, se
produce pasta de achiote por métodos empíricos. Esta pasta es a su vez vendida a otras industrias
para la elaboración de lo conocido en el mercado nacional como "achiote", utilizado para dar color
a los alimentos preparados a nivel casero, principalmente. El procedimiento de extracción
normalmente utilizado por los productores rurales consta de las siguientes etapas:

1. Extracción: las semillas se cocinan en agua caliente por un período hasta de 24horas.

2. Filtración: los residuos vegetales se separan de la solución acuosa coloreada mediante filtración
mecánica. Los residuos se lavan con abundante agua, para separar la mayor cantidad posible de
colorante de las semillas.

3. Concentración: se lleva a cabo con la finalidad de reducir el contenido de humedad y concentrar

el del colorante.

4. Mezclado: la pasta obtenida en la concentración se mezcla con grasas vegeta leso animales y
otros aditivos que permitan obtener un producto con una concentración de bixina adecuada a las
necesidades de los consumidores.

5. Empaque: la pasta se envasa en papel celofán o en pequeñas cajas de plástico para ser
distribuidas a los consumidores domésticos, o en envases de mayor tamaño destinados a los
servicios de alimentación. Esta técnica presenta varios problemas:

a. Los rendimientos de extracción son bajos, ya que se utiliza el agua como disolvente, en el cual la
bixina es poco soluble.

b. La bixina se degrada por efecto de las altas temperaturas aplicadas durante la extracción.

c. Se favorecen las condiciones para la proliferación de los microorganismos, dado el elevado

contenido de humedad de la pasta verde y deficientes condiciones higiénicas.

d. La calidad del colorante se encuentra estandarizada, y la obtenida por este método no coincide
con ese estándar.

Extracción con hidróxido de sodio1. Extracción:

Esta se realiza solubilizando la bixina o colorante del achiote, en solución alcalina (hidróxido de
sodio), a una temperatura de 41ºC, por un período de 20minutos.

2. Filtración:
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En esta etapa se separan los residuos vegetales, de la solución coloreada.

3. Precipitación:

La bixina en solución se insolubiliza precipitándola mediante la adición de solución ácida de

concentración20% V/V.

4. Filtración y lavado:

La bixina sólida se separa por filtración y se lava para eliminar todos los residuos de ácido que
pudieran estar presentes.

5. Secado:

Finalmente la bixina se seca a una temperatura de 60ºC hasta alcanzar un contenido de humedad
del 5%. Este método presenta las siguientes ventajas con respecto al tradicionalmente aplicado:

a. El tiempo de extracción es relativamente corto.

b. La extracción se realiza a temperaturas controladas e inferiores a las requeridas para la

degradación de la bixina (60-70ºC).

c. Debido a los cambios bruscos de pH la proliferación de los microorganismos es baja.

d. La humedad del producto terminado es reducida.

Esta técnica alternativa de procesamiento, además de ser más eficiente, permitiría obtener un
producto de calidad estándar; no obstante los pequeños achioteros tendrían que unirse para
poder montar la infraestructura necesaria y en la escala que se requiera. Es-tas mejoras podrían
brindar mayores posibilidades de comercialización, ya que no sólo se lograría ofrecer mejores
productos a los consumidores, sino que además se podría satisfacer la demanda de algunas
industrias nacionales que actualmente importan bixina para la elaboración de colorantes.

Variables a tener en cuenta durante la extracción de colorante del achiote.-

Entre las principales variables del proceso que inciden de modos diferentes en su rendimiento son:
relación semilla/solvente, concentración del solvente, tiempo de agitación, velocidad de agitación,
pH y temperatura de secado.

a.- Relación semilla-solvente.

Es una variable importante para llevar a cabo el proceso, por-que indica cual es el volumen
adecuado de solvente, según el peso de semillas.

b.- Concentración del solvente.

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Considerando que se deben emplear bajas concentraciones de álcali (para el caso de extracción
con álcali) para no degradar el colorante, este pará-metro se maneja como variable del proceso,
porque de ésta depende, en parte, el des-prendimiento del colorante de las semillas, teniendo en
cuenta que es recomendable según estudios realizados trabajar con concentraciones entre
0.5% p/v y 2% p/v.

c.- Tiempo de agitación

.El tiempo de agitación es otra de las variables que se debe considerar en el proceso, para
determinar el tiempo que deben permanecer las semillas en agitación para retirar la máxima
cantidad de colorante, sin que éstas comiencen a des-prender impurezas o quede buena parte
decolorante sin separar.

d.- Velocidad de agitación.

La velocidad se debe considerar porque a bajas velocidades se obtiene un mayor rendimiento.

e.- pH.

Influye en el tono de coloración del colorante a extraer cuando se extrae con álcali y se desea que
la presentación final del colorante sea en polvo, se requiere precipitar el colorante antes de filtrar;
para lo cual se puede usar ácido sulfúrico o ácido clorhídrico. Se ha encontrado que el colorante a
pH neutro es estable, pero que en un intervalo entre 2– 2,5 se obtiene un mayor rendimiento; por
lo tanto, aunque este es un parámetro importante para controlar.

f.- Temperatura de secado

.Por estudios realizados anteriormente se determinó experimentalmente que a temperaturas por

encima de 60°C la bixina se degrada, disminuyéndose la calidad del colorante y el rendimiento del
proceso.

5.6 Utilización de los colorantes:

En general todos los colorantes naturales son usados para colorear en forma natural bebidas
lácteas, yogurt, quesos, aceites y margarinas, snack, galletas, postres, sopas y cremas
instantáneas, caldos de gallina, pastas alimenticias, salsas y jugos naturales.

3. MATERIALES

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A) Achiote

B) 2 Embudo de separación o decantación

C) 9 Matraces enlermeyer de 250 ml

D) 2 Probeta graduada de 100 ml

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E) Pipetas de 10 ml

G) Soporte universal

H) Espátula

J) Guantes de protección

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K) Pizzeta

L) 15 tubos de ensayo y 2 gradillas

M) Pinzas

4. PROCEDIMIENTO
Primer paso.- Extraer el colorante de las semillas de achiote que se encontraban en un frasco con
etanol.

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Segundo paso.- se extrae el resto del colorante añadiendo etanol al frasco, realizando la
maceración agitada.

Tercer paso.- Se debe filtrar, para retirar las semillas y partículas grandes.

Cuarto paso.-

Quinto paso.- Con la ayuda de 6 estudiantes se añade al mismo tiempo la porción de semillas en
cada matraz; 3 estudiantes realizaran la maceración agitada con los 3 diferentes solventes y los
otros 3 la maceración estacionaria.

Sexto paso.- La maceración agitada consistía en agitar los matraces durante 5 minutos.

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Séptimo paso.- L a maceración estacionaria en agitar solo una vez y dejar reposar durante 5
minutos.

Octavo paso.- Nuestro objetivo es elegir el colorante con la mayor limpieza, con mayor pureza y
pigmento.

NOTA.- No debe haber el efecto de Tyndall, es por eso que se eligió la muestra con el disolvente
alcohol con la maceración agitada.

5. DATOS CALCULADOS
# de muestra Disolvente Tipo de Efecto Tyndall Color
maceración
1 Agua destilada Estacionaria Positivo Anaranjado rojizo

2 Etanol al 96% Estacionaria Negativo Amarillo

3 Gasolina Estacionaria Negativo Amarillo

4 Agua destilada Agitada Positivo Anaranjado rojizo

5 Etanol al 96% Agitada Negativo Anaranjado rojizo

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6 Gasolina Agitada Positivo Anaranjado rojizo

6. CONCLUSIONES
 En conclusión podemos observar que lo que necesitamos para
obtener un buen colorante el efecto Tyndall debe ser negativo,
debe una pureza alta y por su puesto lo ideal sería obtener un
pigmento concentrado.
 Se seleccionó el disolvente que nos permite extraer el colorante
del achiote., gracias a sus diferencias de solubilidad en el
disolvente de extracción elegido.
 Se manejó adecuadamente las diferentes técnicas de extracción.
 Se comprobó experimentalmente la eficiencia en el rendimiento de
los diferentes métodos de extracción.

7. RECOMENDACIONES
Es recomendable usar guantes de protección al momento de utilizar los diferentes disolventes.

Ejecutar los métodos correctamente para no tener ningún margen de error.

Seleccionar el mejor método teniendo en cuenta los diferentes factores que se requieren para una
buena extracción de colorante de achiote.

8. BIBLIOGRAFIA
Guía de prácticas de laboratorio de química orgánica.

https://es.scribd.com/doc/136716466/Extraccion-Del-Colorante-Del-Achiote

http://publicaciones.eafit.edu.co/index.php/revista-universidad-eafit/article/viewFile/899/805

http://www.bristhar.com.ve/bixina.html

https://es.wikipedia.org/wiki/Bixina

9. ANEXOS

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Mac. Estacionaria realizando Mac. Agitada Mac. estacionaria

Achiote con agua con alcohol

Mac. Estacionaria Requerimiento de gasolina vainas de achiote

Con gasolina materiales

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