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Manual de Prácticas de Inmunología William Cornejo y Pilar Alva

PREPARACION DE SOLUCIONES

OBJETIVO
• Reconocer la importancia de preparar correctamente las soluciones y calcular
las cantidades de reactivos que se necesitan para su preparación.

OBJETIVOS ESPECIFICOS
• Realizar la preparación de soluciones que se utilizarán en las prácticas del
curso.

• Efectuar correctamente los cálculos numéricos involucrados en la preparación


de soluciones.

L as soluciones son mezclas homogéneas de dos o más componentes, uno


que se conoce como soluto y otro que se conoce como solvente o disolvente,
y que generalmente está en mayor proporción que el primero. Las soluciones más
comunes son las acuosas y tienen como solvente al agua, el solvente universal.

La cantidad de soluto que se encuentra disuelto en un volumen determinado de


solución constituye su concentración. Existen básicamente dos tipos de
expresiones que prevalecen: aquellas que expresan la concentración de forma
porcentual y aquellas que la expresan como molaridad.

Cuando se prepara una solución generalmente se usan reactivos con un alto


grado de pureza (generalmente de grado químicamente puro q.p., de grado
analítico g.a., o de grado estándar primario) y agua purificada (destilada o
desionizada).

Para guardar las soluciones preparadas se prefieren recipientes de vidrio pyrex


debido a su gran resistencia a la acción química. El frasco debe quedar bien
tapado, ser del tamaño adecuado, ser transparente o de color oscuro (cuando la
solución es sensible a la luz) y contar con una etiqueta donde se especifica el
nombre de la sustancia, su concentración y la fecha de su preparación. El uso de

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envases de plástico hechos de polietileno tiene sus limitaciones debido a que son
permeables a los gases (CO2, O2) presentes en el aire.

Rangos de pH de buffers biológicos seleccionados (25 ºC, 0.1 M)

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MATERIALES
1. Cloruro de sodio 7. Fiola 100 mL
2. Azida de sodio 8. Pipetas 5 mL
3. Tampón salino fosfato (PBS) 9. Baguetas
4. Agarosa 10. Frascos de vidrio con tapa
5. Beakers 250 mL 11. Etiquetas o cinta adhesiva
6. Probetas 100 mL 12. Cocina eléctrica

PROCEDIMIENTO
1. Pesar 0,85 g de cloruro de sodio y luego depositar esta cantidad en un beaker
de 250 mL. Medir 60-80 mL de agua destilada en una probeta y adicionarla al
beaker. Con la ayuda de una bagueta disolver la sal en el agua. Trasvasar el
contenido del beaker a una fiola de 100 mL y enrasar hasta la marca de aforo
con la ayuda de una piseta. Verter la solución preparada en un frasco de vidrio
limpio, rotular y guardar a 4 ºC hasta su uso.
2. Pesar 0,01 g de azida de sodio y disolver la sal en agua destilada empleando
un beaker y una bagueta. Trasvasar el contenido del beaker a una fiola de 50
mL y enrasar hasta la marca de aforo con la ayuda de una piseta. Verter la
solución preparada en un frasco de vidrio limpio, rotular y guardar a 4 ºC hasta
su uso.
3. Pesar 8 g de cloruro de sodio, 0,2 g de cloruro de potasio, fosfato de sodio
primario 0,24 g y 1,44 g de fosfato de sodio secundario. Colocar 50 mL de
agua destilada en un beaker y añadir una a una las cuatro sales, cuidando que
se disuelva totalmente una sal para continuar agregando las otras sales. De
ser necesario, puede acelerar el proceso de disolución con la ayuda del calor.
Medir pH y ajustarlo a 7,4 con NaOH o HCl. Trasvasar el contenido del beaker
a una fiola de 100 mL y enrasar hasta la marca de aforo con la ayuda de una
piseta. Verter la solución preparada en un frasco de vidrio limpio, rotular PBS
10X y guardar a 4 ºC hasta su uso.
4. Pesar 1,2 g de agarosa y luego depositar esta cantidad en un beaker de 250
mL. Medir 100 mL de PBS en una probeta y adicionarla al beaker. Colocar el
beaker en la hornilla eléctrica y con la ayuda de una bagueta disolver la
agarosa en el PBS. Trasvasar el contenido del beaker en tubos de 16 x 150
mm con tapa de rosca, cuidando no exceder la mitad del volumen del tubo,

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rotular y guardar a 4 ºC hasta su uso.

PREGUNTAS
1. ¿Cómo prepararía 50 mL de una solución de PBS 1X, pH 7,4, a partir de una
solución de PBS 10X?
2. Calcular a qué concentración en M están cada uno de los componentes de la
solución de PBS 1X.
3. Realice los cálculos para preparar 200 mL de una solución 2 N de NaHPO 4
Peso molecular de NaHPO4 = 84.
4. ¿Cómo influye el agua de hidratación de los sólidos en los cálculos que se
llevan a cabo para la preparación de las soluciones?
5. ¿Cuántos gramos de MgCl2 hay en 1 g de MgCl2.3H2O? Peso molecular del
MgCl2.3H2O = 149 g/mol; peso molecular del MgCl2 = 95 g/mol.
6. ¿Qué cantidad de Ba(OH)2.8H2O hay que pesar para preparar 450 mL de
Ba(OH)2.0,2 M?
7. ¿Qué consideraciones se deben tener para preparar las soluciones que tienen
solutos líquidos como los ácidos clorhídrico, nítrico y sulfúrico?
8. Realice los cálculos para preparar 100 mL de una solución 0,1 M de ácido
clorhídrico (HCl) a partir de un ácido clorhídrico comercial. Peso molecular del
HCl =36,5 g/mol; d = 1,18 g/mL; 35% de contenido.
9. ¿Por qué un buffer se opone a los cambios de pH?
10. ¿Qué habría que hacer para preparar 500 mL de H2SO4 0,2N a partir de H2SO4
6 M?
(A) Añadir 8,3 mL del ácido concentrado a la cantidad suficiente de agua para
obtener 0,5 litros de solución.
(B) Tomar 8,3 mL de ácido concentrado y añadirlos a 0,5 litros de agua
destilada
(C) Añadir 16,6 mL del ácido concentrado a la cantidad suficiente de agua para
obtener 0,5 L de solución
(D) La solución no se puede preparar con este ácido tan concentrado

BIBLIOGRAFÍA
1. Sansón M.C. y col. Manual de prácticas. Química analítica I. México D.F. 2007.
Disponible en:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/manualdelaboratorio_20827.pdf.
Fecha de acceso: 17 de febrero de 2014.

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