RECOMENDACIONES

 Trabajar en un ambiente aséptico en todo momento.

 Desechar adecuadamente los residuos al acabar los muestreos
 Esterilizar adecuadamente la luna de reloj
 Trabajar siempre considerando las medidas de higiene y
seguridad en el laboratorio

PREGUNTA 3

Anotar la composición y utilidad de los medios de cultivo: Saboraud, agar

de papa y dextrosa y agar rosa de bengala
*AGAR SABORAUD

El agar Sabouraud se usa para el aislamiento y cultivo de hongos.

Se recomienda este agar para:
• El aislamiento de hongos de muestras biológicas que no
contienen flora bacteriana asociada. Las muestras que presentan
una flora mixta (fúngica y bacteriana) deben cultivarse
preferiblemente en: - Sabouraud + cloranfenicol - Sabouraud +
gentamicina .
• El cultivo de hongos para permitir su identificación posterior.
• Pruebas de esterilidad en productos farmacéuticos (medio
recomendado por el Codex de la Farmacopea Francesa) o
productos alimenticios, en cuyo caso, deben incubarse los tubos
en el incubador o a la temperatura de laboratorio durante una
noche. Este medio puede usarse también como base para la
elaboración de medios enriquecidos: medios con sangre, medios
con vitaminas.
COMPOSICIÓN TEÓRICA (g/l de agua destilada)
Este agar se elabora según la fórmula teórica del Medio C de la
Farmacopea Europea.
Peptonas …… 10g
Glucosa …… 40g
Agar …… 15 g
Preparación del medio:
Homogeneice el polvo contenido en el frasco. Añada 42 gramos
de medio deshidratado a un litro de agua destilada estéril. Espere
5 minutos, luego mezcle hasta que se obtenga una suspensión
homogénea. Caliente suavemente, agitando con frecuencia y
luego caliente hasta hervir y que se consiga la disolución
completa. Si es necesario, ajuste el pH a 5,8. Esterilice en el
autoclave a 121° durante 20 minutos y dispense en tubos o en
placas de Petri.
* Agar Papa Dextrosa
El agar papa dextrosa es un medio de cul8vo microbiológico que
se preparan a par8r de infusión de patata y dextrosa. La base del
medio es altamente nutri8va, favorece el crecimiento de hongos y
levaduras y permite la esporulación y la producción de pigmentos
en algunos dermatofitos. Algunos procedimientos señalan bajar el
pH del medio a 3.5 ± 0.1 con ácido tartárico al 10 %, para inhibir
el crecimiento bacteriano. El agar es adicionado como agente
solidificante. El Agar Dextrosa y Papa puede ser suplementado
con an8bió8cos o ácidos para inhibir el crecimiento bacteriano.
Este medio es recomendado también para realizar recuentos y
para el cul8vo de hongos y levaduras de importancia clínica.
Composición (en gramos por litro)
Extracto de papa ….. 4 g
Dextrosa …. 20 g
Agar …. 15 g

Preparación comercial del agar papa dextrosa

Pesar 39 gr del medio deshidratado disponible comercialmente y
disolver en un litro de agua destilada. Dejar en reposo por 5
minutos.
La mezcla se calienta agitando frecuentemente hasta su disolución
total. Posteriormente se esteriliza en autoclave a 121 °C durante
15 minutos.

Se pueden preparar placas o cuñas. Proceder como fue descrito

anteriormente.

El pH queda en 5,6 ± 0,2. Si se desea el pH de 3,1 se deben

agregar 14 ml de ácido tartárico estéril al 20% antes de servir en
las placas.

El color del medio sin preparar es beige y preparado es ámbar

claro con un aspecto ligeramente turbio u opalescente.

* Agar Rosa Bengala Cloramfenicol

AGAR ROSA DE BENGALA se utiliza para el aislamiento

selectivo y la enumeración de levaduras y mohos de materiales y
alimentos ambientales. El medio contiene peptona micológica que
actúa como fuente de carbono, nitrógeno, minerales, vitaminas y
otros nutrientes esenciales para el crecimiento. La dextrosa es la
fuente de carbohidratos fermentables. El fosfato monopotásico
proporciona capacidad de amortiguación y el sulfato de magnesio
es un oligoelemento necesario. El medio se sustituye por
cloranfenicol debido a una selectividad superior.
Este medio tiene un pH bajo en combinación con cloranfenicol,
que suprime el crecimiento de la mayoría de las bacterias. El tinte
rosa de bengala suprime el desarrollo de bacterias y restringe el
tamaño y la propagación de colonias de moho como las especies
de Rhizopus. La rosa de bengala es ocupada por las colonias en
crecimiento, lo que las hace más fáciles de ver e inhibe su
propagación. El agar es un agente solidificante.
Composición
Ingredientes Gms / Ltr.

 Agar 15.00
 Dextrosa 10.0
  Peptona micológica 5.00
 Fosfato monopotásico 1.00
 Sulfato de magnesio 0.50
 Rosa de bengala 0.05

Preparación del medio

Disolver 32 g del medio en 1 litro de agua destilada. Calentar
agitando hasta ebullición para su disolución. Autoclavar a 121 ºC
durante 15 minutos.
PREGUNTA 4

Porqué es necesario realizar la técnica de microcultivo para identificar mohos

El microcultivo permite la observación de las estructuras

microscópicas de los hongos filamentosos en particular las
esporas asexuales, sin alteración de las mismas(figura a). Cuando
se siembra al hongo en un microcultivo se induce y favorece la
producción de conidias, estructuras morfológicas claves para
poder dar nombre y apellido al hongo patógeno, porque en cada
microorganismo es diferente esta esporulación (figura b) aunque
posean características similares entre géneros y especies.

Figura a Figura b
Frey, F (7/11/2018) MICOLOGÍA|Utilidad Clínica de la Técnica de Microcultivo-
Método de Ridell o del Cuadrito. Steemit. https://steemit.com/stem-
espanol/@fran.frey/micologia-or-utilidad-clinica-de-la-tecnica-de-microcultivo-
metodo-de-ridell-o-del-cuadrito-incluye-video

Insumolab agar papa dextrosa

https://www.insumolab.cl/descargas/industria/placas_90mm/ficha_tecnica/02.pd
f

Novachem del Ecuador. (2019, 12 agosto). Agar Rosa de Bengala.

https://www.novachem.com.ec/producto/agar-rosa-de-bengala/