Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias

Biológicas
Departamento de Bioquímica
Laboratorio de Métodos de Análisis

Practica 5. Análisis Espectrofotométrico De Un Sistema

Múltiple

Alumno: Rosales Ocampo Iván

Grupo: 5QM2
Objetivos
• Comprobar la ley de aditividad en un sistema múltiple

• Conocer las propiedades que presenta un sistema múltiple

Fundamento

La ley de aditividad de absorbancias establece que la absorbancia total de varias sustancias

en mezcla es la suma de las absorbancias individuales, siempre y cuando no haya
interacciones químicas entre las moléculas y si los coeficientes de extinción molar en la
mezcla coinciden con los coeficientes determinados en solución individual.
Por lo tanto, en un sistema de dos sustancias, que las podemos llamar X y Y, a una longitud
de onda 1, podemos enunciar la ley de Lambert – Beer para cada sustancia

Se puede hacer lo mismo para una longitud de onda 2

Para cada longitud de onda, podemos sumar las dos expresiones, que quedan de la
siguiente forma

Si se reemplazan los valores de absorción, coeficiente de extinción molar para cada

longitud de onda y cada sustancia y el valor del paso de celda (generalmente es 1 cm),
se obtiene un sistema de dos ecuaciones con dos incógnitas (las concentraciones de cada
sustancia). Este sistema se puede resolver por el método algebraico de preferencia.
Resultados

Determinación de la concentración de K2Cr2O7 y KMnO4

Problema 5: 𝐴𝑇λ1 = 𝐴𝑇(λ1) = 𝑎𝑚𝐴(λ1) 𝑏𝐶𝑚𝐴 + 𝑎𝑚𝐵(λ1) 𝑏𝐶𝑚𝐵
ATλ1= 1.054 ATλ2= 0.286
𝐴𝑇λ2 = 𝐴𝑇(λ2) = 𝑎𝑚𝐴(λ2) 𝑏𝐶𝑚𝐴 + 𝑎𝑚𝐵(λ2) 𝑏𝐶𝑚𝐵

Donde:
A= K2Cr2O7 𝑎𝑚𝐴(λ1) = 1657.7 𝑎𝑚𝐴(λ2) = 105.04

B= KMnO4 𝑎𝑚𝐵(λ1) = 672.04 𝑎𝑚𝐵(λ2) = 1111.2

𝐴𝑇λ1 = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐾2 𝐶𝑟2 𝑂7 = 1.054 𝐶𝑚𝐴 = 𝑥 𝐶𝑚𝐵 = 𝑦

𝐴𝑇λ2 = 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑑𝑒 𝐾𝑀𝑛𝑂4 = 0.286
b= 1

Sustituyendo:
1.054 = 1657.7𝑥 + 672.04𝑦 … . . 1
0.286 = 105.04𝑥 + 1111.2𝑦 … . . 2

Realizando el sistema de ecuaciones

0.286 = 105.04𝑥 + 1111.2𝑦
105.04 (1.054 = 1657.7𝑥 + 672.04𝑦) ---1
0.286 = 105.04𝑥 + 1111.2(0.000205)
−1657.7 (0.286 = 105.04𝑥 + 1111.2𝑦) ---2
0.286 = 105.04𝑥 + 0.2277
110.7121 = 174124.808𝑥 + 70591.0816𝑦) ---1
−474.1022 = −174124.808𝑥 − 1842036.24𝑦) ---2 0.286 − 0.2277
𝑥= = 0.00055
105.04
−363.3901 = 0 − 1771445.158𝑦
−363.3901 = −1771445.158𝑦

−363.3901
𝑦= = 0.000205
−1771445.158
Discusión
Las dos longitudes de onda de trabajo seleccionadas corresponden a las longitudes de onda
que presentan mayor absorción del analito en cada uno de los espectros de absorción, por
lo tanto, con K2Cr2O7 fue de 370nm y con KMnO4 fue de 490 nm.
Otro criterio que se toma en cuenta es que, en el espectro de absorción, K2Cr2O7 tiene su
mayor absorbancia en 370 nm, mientras que el espectro de absorción de KMnO4 tiene su
mínimo nivel de absorbancia en la misma longitud de onda (370 nm). De igual manera,
ambos espectros del K2Cr2O7 y KMnO4 se cruzan, obteniéndose así el punto isobestico con
el cual se puede elegir la longitud de onda de trabajo, la cual fue de 490 nm.
Se comprobó la Ley de la Aditividad en el sistema múltiple mediante la comparación de las
absorbencias leídas en el espectrofotómetro y las calculadas con la Ley General de la
Fotometría.
En las gráficas correspondientes se obtuvieron los valores de r y r2 los cuales son muy
cercanos a 1, por lo que se cumple la Ley de la Aditividad en el sistema múltiple a las
longitudes de onda de trabajo.
De acuerdo con la Ley de Beer-Lambert, la absortividad es proporcional a la concentración
del soluto absorbente.
Para la determinación de las concentraciones molares de ambos compuestos en la muestra
problema 5, se obtuvieron las absorbancias con las longitudes de onda de trabajo. Con un
sistema de ecuaciones se calcularon las concentraciones molares de cada compuesto de la
muestra siendo el dicromato de potasio el compuesto de mayor concentración.
Conclusiones

• La ley de aditivad se cumple con el sistema múltiple de K2Cr2O7 y KMnO4

• Las longitudes do onda optimas de trabajo serán aquellas donde los compuestos no
presenten interferencia y tengan mayor absorción.
Bibliografía
Torres Cartas Sagrario, Gómez Benito Carmen. “Técnicas instrumentales. Manual de
Laboratorio”. Editorial Universidad Politécnica de Valencia.
D.A. Skoog, J.J. Leary, 1994, “Análisis Instrumental”, McGraw-Hill, 4ta. Edición