ENCUESTA INTERNACIONAL DE LOS REPORTES DE DD

INFORMARON 28
COMBINACIONES
POSIBLES EN LA MANERA
DE INFORMAR LOS
RESULTADOS DE DD

UN LLAMADO A LA ESTANDARIZACIÓN DEL

REPORTE DEL DD

Lippi y col Semin Thromb Hemost 2015; 41: 287-293

 EXPRESIÓN DE LOS RESULTADOS DE DD

2 FEU ~ 1 DDU
La recomendación internacional es informar en las unidades en
que viene el método y no convertir una en la otra
 ¿Cómo se calcula la U de una material para
veracidad?

• El fabricante no proporciona datos de

incertidumbre
U = 2√ CVi 2

El fabricante informa la I del calibrador y el laboratorio

•participa de un Programa externo de calidad y no tiene
evidencias de ES

U = 2√ CVi 2 + ucal 2

•El fabricante informa la I del calibrador y por comparación de

métodos el laboratorio introduce un factor de corrección de
1.11 . La I que corresponde a ese factor puede calcularse
dividiendo por 4 (4SD) el IC de la pendiente

uc =2 √ CVi 2 + ucal 2 + ufc 2

 ¿Con qué materiales se realiza
la prueba de veracidad?
1. Materiales de referencia certificados
(Instituto Nacional de estándares y Tecnología de EEUU)
X± U El fabricante directamente
informa cual es el error
estándar asociado (Sa) o la
U con el K

2- Materiales de Referencia derivados de

pruebas de aptitud Se toma el SD del grupo y
se divide por el Nro de
participantes. Sa =SDg/N

3-Materiales proporcionados por el fabricante

para evaluación de desempeño (CCI): TP= 90
(72-103)% Si el fabricante reporta el 95 % del
intervalo de confianza, entonces
Sa= CI/2
 ¿Con qué materiales se realiza
la prueba de veracidad?
4-Materiales de control de programas inter
laboratoriales
Se toma el SD del grupo y
se divide por el Nro de
participantes. Sa =SDg/N

5- Materiales de una tercera marca

Se toma el SD del grupo y

se divide por el Nro de
particpantes. Sa =SDg/N
www.migliarinoconsultores.com
www.migliarinoconsultores.com
www.migliarinoconsultores.com
www.migliarinoconsultores.com
ET < ETa
 EP15-A3

 Fue aprobado en Setiembre de 2014

 Determina cada material por quintuplicado durante 5 días donde se corre el

CCI. Produce 25 valores para cada material.

 Permite verificar las especificaciones declaradas por el fabricante

 Al igual que el EP15 A2 permite calcular la imprecisión y el bias , pero lo hace

en un solo experimento.
 La imprecisión la mide en términos de repetibilidad y la imprecisión
interlaboratorio las evalua realizando un análisis de Varianza ( ANOVA)

 Los materiales deben tener concentraciones próximas a niveles de decisión

médica y tener incertidumbre establecida. Verifica la veracidad estadística y
clínica

 Si los materiales utilizados tienen un valor target de concentración

establecido , el usuario puede estimar el bias entre la media obtenida del
ensayo de precisión y el intervalo de verificación del valor target.

 El comité de EP15 A3 considera que si se quiere realizar un experimento de

comparación de pacientes debe realizarse con el CLSI EP9-A3
 EP 10 verificación, precisión y
veracidad Preliminar
 Es un protocolo preliminar del desempeño
analítico . No reemplaza al EP15 A2/A3

 Se pueden obtener estimaciones confiables

del grado de error aleatorio, sistemático y
total

 Se realiza en 3 días consecutivos por

triplicado puede extenderse a 5. (se debe
procesar el CCI) .

 Los materiales de referencia pueden ser los

mismos que para el EP15 A2
 CLSI EP-6 A
Linealidad: Habilidad (dentro de un rango dado), de
proveer resultados que son directamente
proporcionales a la concentración (cantidad) del
analito presente en la muestra.

• Intervalo de medición Analítica ( AMR): es el

intervalo de valores de analito que un método puede
medir directamente en una muestra sin ninguna
dilución, concentración u otro pre tratamiento que
no es parte del ensayo habitualmente

• Rango de Reporte Clínico (RRC): Rango de resultados

que con un método se pueden reportar admitiendo
diluciones, concentraciones u otro tipo de pre
tratamientos de la muestra. Se basa en el empleo del
criterio médico y se vincula en parte a la tecnología
empleada.
 Herramientas: EP 6 A
 Establecer Intervalo Analítico de Medición
De 9 a 11 niveles de concentración.
Entre 2 y 4 replicados.

 Validar especificaciones para un método

casero o modificado
De 7 a 9 niveles.
Entre 2 y 3 replicados.

 Verificación de especificaciones del fabricante

De 5 a 7 niveles.
Duplicado.
 Material: Comercial para Linealidad o plasma
de pacientes
 Diluyente solución fisiológica, plasma
deficitarios , plasma normal
 Linealidad y EP 6 CLSI
 Se ensayan una serie de muestras de concentración conocida
o una serie de muestras diluidas (dilución equidistante)

0% 25 % 50 % 75 % 100%

 5 muestras de concentración diferente por triplicado Las

muestras o diluciones deben cubrir la mayor parte del
rango de medición analítico (AMR) del procedimiento de
medida seleccionado.

 Graficar valores obtenidos vs valores teóricos

 Trazar la mejor recta a través de los puntos

 Utilizan un cálculo complejo que realiza una regresión

lineal para ecuaciones de 2 a 4 coeficientes
Ecuación obtenida a
¿Un polinomio ajusta mejor
partir de los datos
Resultados analíticos que la ecuación lineal?
vs resultados
asignados SI

orden 2, 3 , 4
NO
El procedimiento de medida
no es estadísticamente
lineal en el rango evaluado
Orden 1
Y = m.x + b
El polimonio ajusta mejor
que un recta
Procedimiento de Evaluar linealidad Clínica
medida
estadísticamente y
clínicamente lineal en Error de no Linealidad
el rango evaluado
Hasta el 50 % del Requisito de la Calidad
 Ensayo de linealidad
para PC
Valores Valores 140
teoricos calculados Diferencia 120 R2=0.996

valores asignados
126 124,5 1,19 100

63 59,5 2,78 80

60
31,5 34,5 -2,38
40
15,5 11 3,57
20

7,75 5,7 1,63 0

0 50 100 150
valores obtenidos

ETa= 18.5 % Error de linealidad =9.25%

Instrumento : ACL TOP 500

Método: cromogénico
Linearity vWFRCo automatizado
 Valores de referencia
ISO 15189

 El laboratorio debe definir los intervalos

biológicos de referencia o los valores de decisión
clínica y comunicar la información a los usuarios

 Cuando el laboratorio cambia un procedimiento,

el laboratorio debe revisar los intervalos de
referencia y los valores de decisión clínica e
INFORMAR EL CAMBIO .
 Intervalos de referencia C28A2
¿Cuándo deben establecerse?

 No son informados por el fabricante

 No existen estudios previos

 Cálculo para una subpoblación

 Se trata de un método adaptado o

casero
 Intervalos de referencia C28A2
 Para establecer:
 Seleccionar los individuos de referencia N= 120 datos
utilizables
 Establecer los criterios de partición o exclusión,
 Ejecutar un consentimiento informado para participar en
un estudio de intervalos de referencia y realizar un
cuestionario
 Excluir individuos por cuestionario
 Preparar a los individuos con las mismas recomendaciones
que a los pacientes
 Tomar y analizar las muestras (estricto cuidado de
variables preanalíticas y analíticas)
 Hacer un histograma para ver la distribución
 Eliminar outliers
 Utilizar un método estadístico no parametrico para
 Estimar los límites de referencia
 LS Y LI engloba al 95 % de los individuos
 ( percentilos 2.5th y 97.5 th)
 Analizar particiones
 CLSI C28A2

Transferencia y Validación de Int. de Ref.

• Comparabilidad entre ambos sistemas de medición en el
mismo laboratorio:
 Si el laboratorio tiene establecido los Valores de
referencia para un analito hay que hacer EP9. Si ambos
métodos son comparables (CV, ES, calibradores,
Unidades) entonces los Valores de Referencia también.

 Si un método nuevo se compara con el otro y el Bias

excede el error permitido, deben reverse los intervalos de
referencia
 Valores de referencia CLSI C28A2

Comparabilidad entre las poblaciones

(Transferir desde el inserto)

1-Estudiar 20 muestras eliminados los outliers : Puedo tomar el

valor del inserto si no mas de 2/20 (10%) sujetos caen afuera. Si
mas de 2 caen afuera tengo que evaluar mas individuos.

2- Establecer los VREf para n=60 y comparar el rango hallado

con el del inserto del fabricante . Si no hay diferencias entonces
puede transferirse.
 Evaluación de límites bajos
 Límite de blanco: muestra que no contienen analito

 Límite de detección (LOD): es la menor cantidad de

analito en una muestra que puede ser detectada quizás no
cuantificada como un valor exacto. SE define como 3SD
del valor promedio del blanco (n=20) ,asi los falsos
positivos son menores al 1 %.

 Límite de cuantificación: Es la menor cantidad de analito

que puede ser cuantitativamente determinada con una
exactitud aceptable. Habitualmente se define como el 5 a
10 SD del valor promedio del valor cero.

 No siempre es necesario detectar cantidades

extremadamente pequeñas del analito

 NO se determina LOD y LOQ en los ensayos expresados en

tiempo

 El protocolo que se utiliza EP17-A2 son mínimo 20

replicados .
 Robustez del método

 Es una medida de la capacidad que tiene el ensayo para

permanecer sin modificaciones por pequeños cambios en
los parámetros del método y las variables pre analíticas

 Los parámetros del método son diferencias de

instrumentos, operadores, lotes de reactivos y variable pre
analíticos

 Para la mayoría de los parámetros analíticos la robustez

es determinada por el fabricante y generalmente aprobado
por el organismo regulatorio.

 Hay que incluir las interferencias nivel de TG, de Bi, y de

Hb que cada método permite

 Si el laboratorio desarrolla un método tiene que asumir la

responsabilidad de ESTABLECER la robustez del método.
 A modo de resumen
Cuando un laboratorio quiere introducir un nuevo método
tiene que al menos VERIFICAR si el mismo se comparta
como el fabricante lo indica-

 Verificar precisión CLSI EP15 A2/3

 Verificar exactitud CLSI EP 15 A2/3

 Determinar el intervalo analítico de la medición CLSI EP 6

 Verificar valores de referencia CLSI C28A2

 Determinar LOD y LOQ si aplica

 Tomar conciencia de las interferencias

 Preguntas por el aula virtual

GRACIAS !!!
Somos lo que hacemos día a día de modo que la
excelencia no es un acto sino un hábito
Aristóteles