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EDUCACIÓN Y CIENCIAS
COLEGIO NACIONAL E.M.D. ASUNCIÓN ESCALADA
MICROBIOLOGIA
FICHA DE TRABAJO N° 13
Alumno/a: ……………………………………………………………………
Curso: 3er año 7MA/ 8va BTQI T.M./TT
Prof. : Prof. Jorge Martínez
Indicadores:
✔ Reconoce importancia del uso del microscopio compuesto.1p
✔ Reconoce usos de las diversas clases de microscopio compuesto.1p
✔ Reconoce las partes del microscopio compuesto.1p
Tema: USO DEL MICROSCOPIO.
INTRODUCCION
El microscopio compuesto
M Sistema óptico
Es el encargado de producir la imagen ampliada de la muestra mediante los dos sistemas de lentes que se
sitúan en sus extremos. Estos sistemas son el ocular y el objetivo. El objetivo proyecta una primera
imagen de la muestra que el ocular luego amplía; esta producción de la imagen en dos fases es la que
justifica la expresión microscopio compuesto, distinguiéndolo del microscopio simple (o lupa).
Objetivo
La mayoría de los microscopios modernos vienen dotados de varios objetivos, que pueden usarse
alternativamente, montados en una pieza giratoria, denominada revólver portaobjetivos. Éste está
construido de manera que el objetivo que se está usando tiene su eje óptico alineado con el del ocular y
también con el del condensador. En los microscopios modernos, tanto los de trabajo o investigación como
los empleados en la educación, los objetivos se insertan en el revólver por medio de una rosca estándar,
lo que permite sustituirlos. El número de objetivos varía con el tipo de microscopio y el uso a que se
destina. Los aumentos de los objetivos secos más frecuentemente utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y
60X.
Cada objetivo es un objeto cilíndrico que contiene una serie de lentes coaxiales —tienen sus ejes
alineados— con un diseño apropiado para producir una cierta ampliación evitando a la vez los dos
problemas mayores de todos los sistemas semejantes, también los objetivos fotográficos, por un lado la
aberración esférica y por otro la aberración cromática. Un objetivo se califica como acromático si corrige la
segunda, evitando cercos de color, y planacromático si corrige adecuadamnte las dos. En la mayoría de
los casos la corrección de aberraciones se logra por el trabajo combinado de objetivo y ocular.
Los objetivos se distinguen principalmente por la ampliación que está previsto obtener con ellos y por su
poder de separación, es decir, su resolución. El poder separador depende de un parámetro llamado
abertura numérica. Los objetivos destinados a ampliaciones más pequeñas (típicamente 4X) tienen A.N.
de 0,10; los de mayor ampliación (100X) tienen A.N. de 1,25.
Cuanto mayor es la ampliación de un objetivo más debe acercarse éste a la muestra. Incluso en objetivos
de mediana ampliación, como 40X, la distancia es inferior a un milímetro. En un microscopio la operación
de enfocar consiste en ajustar esta distancia.
Los objetivos de 100 aumentos (100X), y más raramente otros de menor ampliación, suelen ser objetivos
de inmersión (y llamamos a los que no lo son objetivos secos). Para el uso de éstos hay que crear entre la
muestra y la lente frontal del objetivo, la más cercana a ella, un medio con un índice de refracción continuo
(el índice de refracción de un medio transparente mide el grado de desviación que provoca en los rayos
luminosos). Para ello se pone sobre la muestra una gota de aceite (clásicamente «aceite de cedro») y se
acerca el objetivo a la muestra hasta que su lente frontal queda sumergida en la gota. En la mayoría de los
casos entre el objeto observado (por ejemplo una bacteria) y la lente frontal estarán, en este orden, el
medio de montaje (una gelatina o una resina), el vidrio cubreobjetos y, por último, el aceite de inmersión.
Las características de un objetivo suelen estar grabadas en un lateral. Las que no faltan son el poder de
ampliación (por ejemplo 40X), la abertura numérica (por ejemplo, 0,65), y la distancia a la que proyecta la
imagen (por ejemplo 160, porque se da en milímetros). La longitud del tubo óptico y los oculares deben
estar ajustados a la misma distancia de proyección.
La lente frontal del objetivo es siempre muy pequeña, menor cuanto mayor su poder de ampliación, y su
diámetro es inferior a un milímetro en los objetivos más potentes. Su cuidado, evitando mancharla y
limpiándola con medios adaptados, es una parte crítica del mantenimiento de los microscopios,
especialmente de los escolares.
Ocular
En el extremo superior del tubo óptico, el de observación, donde se aproxima el ojo o se monta una
cámara, se sitúa el ocular. Un ocular tiene forma cilíndrica y contiene generalmente, como el objetivo,
varias lentes coaxiales. A diferencia del objetivo, no se atornilla, sino que se encaja en el tubo óptico como
un émbolo, sostenido por su peso, y contenido por un reborde de mayor diámetro en su extremo superior.
Cada ocular lleva grabadas sus características. Nunca falta una de ellas: su poder de ampliación. Se
expresa como en el caso de los objetivos con un número seguido de aspas. Los oculares más usados son
los de 10X, pero frecuentemente se encuentran los 5X y los 15X. Valores mayores, como 20X, producen
ampliaciones más grandes, pero que suelen ser excesivas para la capacidad que tienen los objetivos para
resolver el detalle de la muestra, y tienen por ello un uso limitado.
La ampliación total de una observación se obtiene multiplicando la del objetivo por la del ocular. Por
ejemplo, con un objetivo de 100X y un ocular 15X, obtenemos una ampliación de 1 500 aumentos (1
500X), que es por cierto la máxima ampliación útil de un microscopio compuesto clásico, dadas las
limitaciones de resolución de los objetivos.
La mayoría de los microscopios escolares y muchos de aficionado son monoculares, pero los de rutina
(por ejemplo, los usados para examinar muestras médicas) y los de investigación, son binoculares. En
estos los rayos luminosos producidos por el objetivo se desdoblan por medio de prismas para dar servicio
a dos oculares, de manera que se observa con los dos ojos a la vez. A diferencia de lo que ocurre con
unos prismáticos o gemelos de visión lejana (o con el tipo de microscopio compuesto que llamamos lupa
binocular) los dos ojos ven exactamente la misma imagen, sin ningún efecto de relieve. Lo que se busca
es una observación más descansada, como es exigible por quien pasa horas cada día trabajando con el
microscopio.
Algunos microscopios son triloculares, con espacio para tres oculares. En este caso dos se destinan a la
observación directa y el tercero al registro fotográfico o videográfico de la imagen producida por el objetivo.
En este caso se usan generalmente tres oculares, dos iguales, para los dos ojos, y otro, generalmente de
poca ampliación, optimizado para proyectar la imagen sobre el sensor o la película fotográfica.
lentes para corregir las distintas aberraciones producidas por las lentes simples.
Además, es habitual que el haz de luz proveniente del objetivo sea dividido mediante
un prisma óptico para poder observar la muestra con dos oculares. El hecho de
observar la muestra con los dos ojos simultáneamente resulta en una mayor
comodidad. Este tipo de microscopio se conoce como binocular. En los microscopios
en que no se incluye un prisma para dividir la luz, la muestra debe ser observada a
través de un único ocular.
Sistema de iluminación
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparación u
objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes
elementos:
Poder separador. También llamado a veces poder de resolución, es una cualidad del microscopio,
y se define como la distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden verse separados. El ojo
normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una décima de milímetro.
En el microscopio viene limitado por la longitud de onda de la radiación empleada; en el microscopio
óptico, el poder separador máximo conseguido es de 0,2 décimas de micrómetro (la mitad de la
longitud de onda de la luz azul), y en el microscopio electrónico, el poder separador llega hasta 10 Å.
Poder de definición. Se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre todo respecto a sus
contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la corrección de las aberraciones de las lentes
utilizadas.
Ampliación del microscopio. En términos generales se define como la relación entre el diámetro
aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio
aumenta 100 diámetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces mayor linealmente que
el tamaño real del objeto (la superficie de la imagen será 100 2, es decir 10.000 veces mayor). Para
calcular el aumento que está proporcionando un microscopio, basta multiplicar los aumentos
respectivos debidos al objetivo y el ocular empleados. Por ejemplo, si estamos utilizando un objetivo
de 45X y un ocular de 10X, la ampliación con que estamos viendo la muestra será: 45X x 10X = 450X,
lo cual quiere decir que la imagen del objeto está ampliada 450 veces, también expresado como 450
diámetros.
La parte mecánica del microscopio comprende el pie o la base, el tubo, el revólver, el asa, la platina, el
carro y el tornillo micrométrico. Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación; además,
permiten los desplazamientos necesarios para el enfoque del objeto.
El pie y soporte: contiene la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general
forma de Y o bien es rectangular.
La columna o brazo: llamada también asa, es una pieza en forma de C, unida a la base por su
parte inferior mediante una bisagra, permitiendo la inclinación del tubo para mejorar la captación
de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior
se adapta al pie.
El cañón : tiene forma cilíndrica. El cañón se encuentra en la parte superior de la columna, enfoca
el objeto mediante un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los
tornillos.
El tornillo macrométrico o macroscópico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del
microscopio, deslizándose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos
movimientos largos permiten el enfoque rápido de la preparación.
El tornillo micrométrico o microscópico: mediante el ajuste fino con movimiento casi
imperceptible que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la
preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para
precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
La platina: es una pieza metálica plana en la que se coloca el objeto que se va a observar.
Presenta un orificio, en el eje óptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a la
preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmóvil; en otros casos puede ser
giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
Las pinzas: son dos piezas metálicas que sirven para sujetar el objeto. Se encuentran en la
platina.
Ajuste óptico:este gira la lente para aumentar o disminuir la visión a través del microscopio
El revólver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos. Al
girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, lo que se
nota por el ruido de un piñón que lo fija.
Paramecium aurelia. Microscopio óptico. El mejor conocido de los ciliados. Las burbujas que se ven son vacuolas.
Todo el cuerpo está cubierto de cilios, que se ven borrosos debido a sus rápidos movimientos.
Se denomina campo del microscopio al círculo visible que se observa a través del microscopio. También
podemos definirlo como la porción del plano visible observado a través del microscopio.
Si el aumento es mayor, el campo disminuye, lo cual quiere decir que el campo es inversamente
proporcional al aumento del microscopio. Para medir el diámetro del campo del microscopio con
cualquiera de los objetivos se utiliza el micrómetro, al que se hará referencia en el siguiente punto.
Tipos de microscopios
Existen diversas clases de microscopios, según la naturaleza de los sistemas de luz, y otros accesorios
utilizados para obtener las imágenes.
El microscopio compuesto u óptico utiliza lentes para ampliar las imágenes de los objetos observados.
El aumento obtenido con estos microscopios es reducido, debido a la longitud de onda de la luz visible que
impone limitaciones. El microscopio óptico puede ser monocular, y consta de un solo tubo. La observación
en estos casos se hace con un solo ojo. Es binocular cuando posee dos tubos. La observación se hace
con los dos ojos. Esto presenta ventajas tales como mejor percepción de la imagen, más cómoda la
observación y se perciben con mayor nitidez los detalles.
El Microscopio invertido el sistema óptico de este tipo de microscopio está en posición al revés
comparado con un microscopio óptico convencional. La fuente de luz y el condensador están dispuestos
sobre la plataforma apuntando hacia abajo; y los objetivos y la torrecilla están debajo de la plataforma
apuntando hacia arriba. Las únicas partes que están en una disposición normal son el tubo binocular o
trinocular, así mismo la muestra que es colocada sobre la plataforma o platina mecánica. Presenta la
ventaja de poder observar cultivos enteros o grandes muestras bajo estados más naturales y con menores
condiciones de estrés.
El Microscopio estereoscópico: es un tipo de microscopio hace posible la visión tridimensional de los
objetos. Consta de dos tubos oculares y dos objetivos pares para cada aumento. Este microscopio ofrece
ventajas para observaciones que requieren pequeños aumentos. El óptimo de visión estereoscópica se
encuentra entre 2 y 40X o aumento total del microscopio.
Microscopio de campo oscuro. Este microscopio está provisto de un condensador paraboloide, que
hace que los rayos luminosos no penetren directamente en el objetivo, sino que iluminan oblicuamente la
preparación. Los objetos aparecen como puntos luminosos sobre un fondo oscuro.
Microscopio de contraste de fases. Se basa en las modificaciones de la trayectoria de los rayos de luz,
los cuales producen contrastes notables en la preparación.
Microscopio de fluorescencia. La fluorescencia es la propiedad que tienen algunas sustancias de emitir
luz propia cuando inciden sobre ellas radiaciones energéticas. El tratamiento del material biológico con
flurocromos facilita la observación al microscopio.
Microscopio quirúrgico
El empleo de microscopios quirúrgicos ha permitido que los cirujanos lleven a cabo intervenciones que
parecían imposibles, como la reimplantación de un miembro y la cirugía de los ojos y oídos. Estos
microscopios son en especial útiles cuando es necesario realinear para unir o reparar fibras nerviosas y
vasos sanguíneos individuales. Se usa para operaciones de dificultad.
FUENTE
https://www.mundomicroscopio.com/
EJERCICIOS
A. MICROSCOPIO COMPUESTO
B. MICROSCOPIO SIMPLE
C. AUMENTO INVERTIDO
COMPUESTO
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MICROSCOPIO COMPUESTO