UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO – FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
ANÁLISIS DE SUPERFICIES VIVAS E INERTES

PROFESOR: Mg. Sonia Herrera Sánchez

INTEGRANTES:

 AMADO QUISPE MIGUEL ANGEL

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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1.- CONTROL HIGIENICO DE SUPERFICIES VIVAS

1.1Materiales

 Placa Petri
 Pipeta
 Probeta
 Guantes descartables
 Solución salina 0.8%
 Agar Endo

1.2 Procedimiento

1. Preparamos la solución salina (8gr/litro), que pasara a ser repartido 100 ml por
grupo, el cual se colocara en una bolsa ziploc.

2. Un integrante del grupo enjuagara su mano en la solución salina contenida en

la bolsa ziploc.
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3. Procederemos a colocar el Agar ENDO en un vaso precipitado de 250ml a baño

maría, para someterlo a calor y así fusionar al agar.
4. Luego colocaremos un mililitro de la solución salina que contiene a las
superficies vivas en la placa y vertemos 15ml del AGAR ENDO alrededor de la
placa Petri y lo dejamos enfriar con suaves movimientos hasta que cuaje.

5. Colocamos a la incubadora por un tiempo de 48 horas.

6. Después de 48 horas sacamos nuestra muestra de la incubadora. Finalmente
hacemos la lectura en el contador de colonias y contrastamos con los límites
permisivos de la norma R.M 461-2007 MINSA (método del enjuague).

Análisis: Superficies Vivas

Lugar: Laboratorio de Microbiología

Fecha de muestreo: 09-07-2021

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1.3 Resultados microbiológicos de superficies vivas

TIPOS DE ENSAYO RESULTADO LIMITES

PERMISIBLES
COLIFORMES AUSENCIA / MANO < 10 UFC / MANO

En conclusión, en el análisis microbiológico para identificar la presencia de COLIFORMES, el

resultado obtenido SE ENCUENTRA EN EL RANGO PERMISIBLE que indica la norma R.M 461 -
2007 MINSA en las disposiciones específicas de Análisis Microbiológicos de Superficies vivas
(método del enjuague)”. Lo que nos indica que las manos de nuestro compañero de grupo de
laboratorio están correctamente lavadas y aptas para realizar los trabajos en el laboratorio.

ANTES DEL ENJUAGUE CON EL ENJUAGUE

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2. ANALISIS DE SUPERFICIES INERTES

2.1   Materiales
 Hisopos de algodón u otro material equivalente, de largo aproximado de 12
cm.
 Tubo de ensayo con tapa hermética conteniendo 10 mL de solución
diluyente estéril.
 Plantilla estéril, con un área en el centro de 100 cm2 (10cm x 10cm) o
alternativamente, plantilla estéril, con un área en el centro de 25 cm2 (5 x 5
cm). Gradillas      
 Guantes descartables de primer uso.
 Protector de cabello.
 Mascarillas descartables.
 Plumón marcador para vidrio.
 Caja térmica.
 Refrigerante.

2.2   Procedimiento

1. Colocar la plantilla (10cm x 10cm) sobre la superficie a muestrear.

2. Humedecer el hisopo en la solución diluyente y presionar ligeramente en la
pared del tubo con un movimiento de rotación para quitar el exceso de
solución.
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3. Con el hisopo inclinado en un ángulo de 30º, frotar 4 veces la superficie

delimitada por la plantilla, cada una en dirección opuesta a la anterior.

4. En el caso de utilizar la plantilla de 5cm x 5cm, repetir esta operación en 3

lugares diferentes de la misma superficie, para obtener 100 cm2.
5. Introducir de nuevo el hisopo en el tubo de solución salina quebrando la parte del
hisopo que estuvo en contacto con los dedos del muestreador, la cual debe ser
eliminada y dejar en reposo el hisopo dentro del tubo entre 15-30 minutos de manera
que los microorganismos se liberen del algodón al líquido.

6. Sembrar 0.1 ml del liquido en una placa con agar estándar.

7. Incubar la placa a 37 ºC durante 24-48 h y realizar el recuento, expresándolo como
UFC por unidad de superficie.
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2.3 Cálculos

Para superficies regulares:

El número de colonias obtenidas (ufc) se multiplicará por el factor de dilución y por el

volumen de solución diluyente utilizada en el muestreo (10 ml) y se dividirá entre el
área de la superficie hisopada o muestreada (100 cm2).

Para superficies irregulares:

El número de colonias obtenido (ufc) se multiplicará por el factor de dilución.

Limite permisible para superficies inertes irregulares

2.3Resultados microbiológicos de superficies inertes

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 En el punto de obtención de la muestra en la mesa hubo crecimiento de bacterias

y hongos.

Las bacterias patógenas identificadas fueron Salmonella paratyphi A y Salmonella sp;

también se aislaron bacterias patógenas oportunistas que no afectan habitualmente a
individuos sanos, pero si a los inmunocomprometidos o debilitados. También se
aislaron bacterias consideradas de flora normal.

En conclusión, La mayor frecuencia de desarrollo bacteriano en mesas, se atribuye al

uso frecuente de estas por parte de los alumnos y a la ausencia de protocolos de
limpieza y desinfección, factores determinantes para evitar la contaminación
bacteriana (OMS, 2005). El desarrollo de hongos filamentosos en la totalidad de las
muestras puede relacionarse con las condiciones ambientales de la ciudad del callao
que tiene un promedio anual de humedad y de temperatura de 85 % y 18,2 %,
respectivamente.

si bien las superficies inertes tienen un riesgo mínimo de transmitir directamente una
infección, estas contribuyen de manera importante en la contaminación cruzada
secundaria al entrar en contacto con superficies vivas como piel, boca, nariz o garganta
o con otras superficies inertes. Así pues, la contaminación bacteriana y micológica de
mesas constituye un riesgo para la salud de los alumnos que realizan prácticas en los
laboratorios de enseñanza.
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