UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

Facultad de Ciencias Químicas

Laboratorio de Microbiología II

INTEGRANTES Palma Diego Pico Katherine

Ruiz Rodney Valdiviezo Melina Grupo 4

PRÁCTICA 1

Diluciones
1.-OBJETIVO
Aprender a preparar diluciones seriadas para obtener concentraciones específicas para la sensibilidad de
los aparatos.
2.- INTRODUCCIÓN
2.1.-DILUCIONES SERIADAS
Hay muchas situaciones en que las cantidades de sustancia necesarias para ver un efecto son
extremadamente pequeñas (por ejemplo un fármaco para tratar una enfermedad, una hormona para
estudiar su efecto en un animal de experimentación, etc.) y difícilmente se pueden pesar o medir en esas
proporciones tan pequeñas. En esas situaciones es necesario recurrir a la preparación de una solución de
alta concentración (o solución de stock o solución madre) y hacer diluciones seriadas a partir de ésta.

En general se parte de una solución concentrada y se preparan series de diluciones al décimo (1:10) o al
medio (1:2). De esta manera se obtiene una serie de soluciones relacionadas por ejemplo por un factor
de dilución 10 es decir 1/10; 1/100; 1/1000 y así sucesivamente. O la otra serie es 1/2; 1/4; 1/8; 1/16;
1/32 etc.
Por ejemplo: si partimos de una solución de 50mg/ml de una sustancia (Solución A)
a. Dilución 1/10: 1ml de la solución A + 9 ml de agua= una solución de 5 mg/ml (dilución 1:10)
b. Dilución 1/2: 5 ml de la solución A + 5 ml de agua= una solución de 25 mg /ml (dilución 1:2)

2.2.- APLICACIÓN

EN HOMEOPATIA
La homeopatía forma parte de los métodos biológicos, puesto que trabaja en el sentido del curso de la
enfermedad y la aviva por medio de una enfermedad medicamentosa que se desarrolla en una dirección
similar. Por lo tanto, la homeopatía conoce también el empeoramiento inicial, es decir, una intensificación
de los síntomas patológicos y de las molestias después de comenzar el tratamiento que luego se convierte
en una fase curativa.
La dilución se elabora con una proporción siempre ascendente, con las llamadas "potencias". Por lo
general se diluye con potencias decimales, o sea:
1:10 = D 1
1:100 = D 2
1:1.000 = D 3
1:10.000 = D 4
EN LABORATORIO
Dilución en Siembra de las muestras:
 Cuando se tienen las muestras al laboratorio, se colocan en un vortex durante 15 segundos con la finalidad
de homogeneizarlas e inmediatamente se procede a realizar las diluciones de las mismas en forma
seriada, previo a la siembra y a la observación microscópica. Las diluciones se hacen de la siguiente forma:
Se toma 0,9 ml de Caldo Tripticasa de Soya estéril y se mezcla con 0,1 ml del inóculo contenido en el medio
de transporte, obteniéndose una dilución de 10-1.
De la dilución obtenida10-1, se toma 0,1 ml y se mezcla con 0,9 ml de Caldo Tripticasa de Soya estéril,
obteniéndose la de 10-2.
Luego de realizadas las diluciones, se toma 0,1 ml de ambas diluciones y se inocularon en placas de Petri
(BLOGSPOT, 2006).

3.- MATERIALES
Pipetas de 10 mL Botes de dilución con 90 Tubos de ensayo Pipetas volumétricas
estériles. mL de agua de peptona
al 0.1% estériles.
Mechero Alcohol Lápiz graso Fósforos
Algodón Espátula Cajas Petri
4.-PROCEDIMIENTO
1. Mezclar bien el total de la muestra.
2. Tomar 10 mL de la muestra con pipeta estéril.
3. Poner en frasco de dilución con 90 mL de diluyente estéril. La dilución obtenida es al1/10. Se
desecha la pipeta.
4. Tomar 10 mL de la dilución anterior con nueva pipeta estéril.
5. Poner en bote de dilución con 90 mL de diluyente estéril. La dilución obtenida es al 1/100.
Desechar la pipeta.
6. Por el mismo procedimiento hacer las diluciones al 1/1000. 1/10000. etc. Según se estime el
grado de contaminación.
7. La inoculación en los medios de cultivo debe hacerse antes de 30 minutos después de hacer las
diluciones (OCM, 2008),

4.1 Diagrama gráfico del proceso

1 2 3 4

5.- RESULTADOS

DILUCIÓN 1 1:10

DILUCIÓN 2 1:100

DILUCIÓN 3 1:1000
6.- CONCLUSIONES

Aprendimos el proceso de preparación de diluciones seriadas en una muestra de mortadela; debido a que
en muchos casos se necesita preparar disoluciones con concentraciones extremadamente bajas de un
soluto, Se modifica el factor de dilución se calcula o aproxima sabiendo las concentraciones máxima y
mínima que se quieren estudiar y el número de concentraciones distintas que se quieren hacer.

BIBLIOGRAFÍA

BLOGSPOT. (2006). DILUCIONES. Obtenido de http://diluciones.blogspot.com/

OCM. (2008). DILUCIONES DE ALIMENTOS PARA SU EXAMEN MICROBIOLOGICO. Obtenido de

http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/higiene-inspeccion-y-control-alimentario/practicas-
1/practica-1-diluciones-de-alimentos-para-su-examen