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Para los
microorganismos, un factor crítico es la disponibilidad de agua liquida mas que la
cantidad total de agua presente en el ambiente. El total del agua realmente
disponible para uso microbiano se expresa como la actividad de agua (aW)
➢ Psicrófilos: ˂0ºC-20ºC
➢ Mesófilos: 20-40ºC
➢ Termófilos: 40-80ºC
➢ Hipertermófilos: 80-110ºC
FUNDAMENTO TEÓRICO
El crecimiento y la viabilidad de los microorganismos está determinada por factores
nutricionales y ambientales, y en condiciones de laboratorio óptimas, es posible
predecir una curva de crecimiento característica de cada especie microbiana.
Cuando una bacteria es inoculada a un
medio de cultivo líquido fresco,
experimentará un periodo de
adaptación al medio y condiciones de
cultivo y posteriormente se dividirá en
forma exponencial, dando lugar a una
curva de tipo sigmoidal que se
acostumbra a dividir en cuatro partes:
FUNDAMENTO TEÓRICO
El producir alimentos inocuos es sin lugar a dudas un reto quizás el más importante
que todo establecimiento debe asumir, especialmente cuando todos y cada uno
de los procesos o etapas implicados(as) tienen que lidiar con el control de los
peligros de orden biológico. Las Buenas Prácticas de Manufactura (BPM o GMP del
Ingles) asociadas con el establecimiento también de Procedimientos Operativos
Estandarizados de Saneamiento (POES) o Buenas Prácticas de Higiene (BPH) son
las que garantizan la producción Inocua del alimento.
FUNDAMENTO TEÓRICO
El propósito de un examen microbiológico de las aguas es de determinar su calidad
sanitaria. Las técnicas utilizadas están encaminadas a establecer el grado de
contaminación con residuos. El grupo de bacterias coliformes, es el principal
indicador de la adecuación del agua para usos domésticos, industriales o de otro
tipo. La experiencia ha demostrado que la densidad del grupo de los coliformes es
un indicador del grado de contaminación y, por tanto, de la calidad sanitaria.
La técnica del filtro membrana, que implica una siembra directa para la detección
y cálculo de la densidad de coliformes, es tan eficaz como la fermentación en
tubos múltiples para la detección de bacterias del mismo grupo. La primera permite
el recuento directo de las colonias de coliformes. En ambos casos, la densidad de
coliformes se expresa en NMP o recuento en filtro membrana por 100 ml.
Las bacterias del grupo de los coliformes se encuentran en el intestino y en las heces
de los animales de sangre caliente: entre ellas suele haber gérmenes capaces de
producir gas a partir de la lactosa en un medio de cultivo adecuado a 44,5 ±0,2ºC.
Dado que los bacilos coliformes procedentes de otras fuentes no suelen producir
gas en estas condiciones, tal criterio se utiliza para diferenciar el componente fecal
del grupo coliforme. Tanto el procedimiento de filtro membrana como la técnica
de dilución en tubos múltiples han sido modificados para incubación a 44,5ºC en
pruebas confirmatorias y para que sea posible proporcionar estimaciones sobre la
densidad de los microorganismos fecales.
El grupo coliforme está formado por todas las bacterias aerobias y anaerobias
facultativas, gram negativas, no formadoras de esporas y con forma de bastón que
fermentan la lactosa, produciendo gas y ácido en 48 horas a 35ºC. En el caso de
la técnica de fermentación de tubos múltiples, los resultados del estudio de los
tubos y diluciones replicados se comunican en términos de Número Mas Probable
(NMP) de microorganismos existentes. Este número basado, basado en
determinadas fórmulas de probabilidad, es un cálculo de la densidad media de
coliformes en la muestra.
FUNDAMENTO TEÓRICO
La leche, cuando se extrae de la ubre de una vaca, contiene algunas bacterias,
después puede ser contaminada por el cuerpo del animal, la atmosférica de
granja, el cubo de la leche o la ordeñadora, los recipientes donde se deposita, las
manos del
lechero o de otros trabajadores de la lechería, etc, pero puede ser también
contaminada por varios agentes patógenos por un animal infectado, entre ellos
Streptococcus, Brucella, Staphylococcus, Bacilos de la Tuberculosis o levaduras.
CONTAMINACION DE LA LECHE
1. Mamaria:
Los microorganismos pueden alcanzar la leche por vía mamaria ascendente o
descendente. Por vía ascendente lo hacen bacterias que se adhieren a la piel de
la ubre y posterior al ordeño entran a través del esfínter del pezón (Staphylococcus
aureus, Streptococcus, coliformes). La vía descendente o hematógena la utilizan
los microorganismos que pueden causar enfermedad sistémica o tienen la
propiedad de movilizarse por la sangre y a través de los capilares mamarios llegar
a infectar la ubre (Salmonellas, Brucellas, Mycobacterium tuberculosos).
2. Medio Externo:
Los utensilios, tanques de almacenamientos, transportes e incluso el personal que
manipula la leche, son fuentes de contaminación de microorganismos que utilizan
esta vía, que en algunos casos son los más abundantes, causantes de grandes
pérdidas en la calidad del producto
El animal:
Teóricamente la leche al salir del pezón debería ser estéril, pero siempre contiene
de 100 a 10000 bacterias/ml, una baja carga microbiana que puede no llegar a
multiplicarse si la leche es manipulada adecuadamente los microorganismos. La
ubre está en contacto con el suelo, heno y cualquier superficie donde las vacas se
echen, de allí que los pezones sean considerados como una fuente importante de
esporas bacterianas. En animales enfermos (vacas, con mastitis) aumenta el
número de microorganismos en leche
Una vaca padeciendo de mastitis clínica puede producir una leche con 107
bacterias/ ml. Y si es subclínica de 105-106 bacterias / ml. Str. agalactiae, Str.
Dysgalactiae y Str. uberus son bacterias comúnmente asociadas a cuadros de
mastitis Escherichia coli, Pseudomona aeruginosa, Clostridium, Bacillus, Pasteurella,
Proteus, Serrati. Unos de los microorganismos más frecuentes causante de mastitis
es el Staphylococcus aureus, el cual además es resistente al tratamiento antibiótico
común y es capaz de producir una enterotoxina, que por su termo-resistencia no
es destruida en la pasteurización pudiendo a llegar a causar enfermedad en el
consumidor
Aire: El aire representa unos de los medios más hostiles para la supervivencia de los
microorganismos debido a la constante exposición al oxígeno, cambios de
temperatura y humedad relativa, radiación solar, etc. Los microorganismos Gram
negativos mueren rápidamente mientras que los Gram positivos y aquellos
esporulados pueden resistir por largo tiempo. Micrococcus, Streptomyces y esporas
de mohos como Penicillium y Aspergillus se puede encontrar en el aire, pero
raramente hay levaduras.
La microflora que contienen los granos de los cereales procede del aire, del suelo
y de los animales. El número y los tipos de organismos dependen de varios factores,
como el clima, el suelo, el medio biológico (aves, insectos y roedores), los
procedimientos y el material utilizados para su recolección, transporte y
almacenamiento. Otras fuentes de contaminación son los aparatos de descarga
de los molinos, el material de elaboración, etc.
Los mohos, levaduras y casi todas las bacterias aeróbicas mesófilas que se
encuentran en los granos crudos son endógenos, y se desarrollan en el tejido
vegetal de la propia planta; la presencia de Escherichia coli y de las bacterias
coliformes es debida a la contaminación causada por el hombre, las aves y los
roedores. La supervivencia en el grano de los microorganismos depende de la
humedad y de la temperatura: una fuerte humedad es favorable al desarrollo de
los mohos, aunque se ha observado que el desarrollo microbianio es más fácil en
la harina que ene le grano entero, siempre que la humedad sea la misma en
ambos.
En general los mohos y las levaduras utilizan diversos tipos de nutrientes y sustratos
tanto sencillos como complejos, poseen gran cantidad de enzimas hidrolíticas y
algunos se cultivan para obtener amilasa, pectinasas, proteinasas y lipasa. Pueden
causar olores y aromas extraños y decolorar la superficie de los alimentos. Se
observan frecuentemente en los alimentos de bajos pH, húmedos, con elevado
contenido de azúcar, etc. Pueden utilizar sustratos como las pectinas y además
carbohidratos los ácidos orgánicos, las proteínas y los lípidos, son resistentes al
calor, a la congelación y a los antibióticos. Las micotoxinas son metabolitos
secundarios, de bajo peso molecular, producidas por hongos que causan efectos
patológicos en los seres humanos y en los animales.
Debido que las micotoxinas no son antigénicas, los primeros estudios que se
desarrollaron fueron en el sentido de lograr la conjugación con proteínas o
polipeptidos que pudieran servir como transportadores en las condiciones óptimas
de producción de anticuerpos. Existen diferentes tipos de inmunoensayos entre los
que destacan los sistemas ELISA (ensayos inmunologicos de enzimas ligadas), RIA
(radioinmunoensayos) y las columnas de inmunoafinidad. La mayoría de estos
métodos son muy sensibles, específicos y faciles de operar. Debido a que en la
mayoría de los inmunoensayos se basan en la competición por los sitios de enlace
de las moléculas de los anticuerpos entre las toxinas presentes en la muestra y las
toxinas marcadas características del sistema, micotoxinas conjugadas. Por lo tanto
es necesario contar con una micotoxina perfectamente marcada además del
anticuerpo específico en el sistema de ensayo. Es necesario contar con un buen
método de extracción de las micotoxinas y con un procedimiento adecuado de
separación de toxinas enlazadas y libres. Debe conocerce el grado de
especificidad de los anticuerpos, entrecruzamiento, contra compuestos análogos.
De modo tal que el extracto de la matríz sólida puede ser usado directamente en
el ensayo, previa dilución con una solución amortiguadora característica del
propio sistema. Sin embargo la sensibilidad de las determinaciones se incrementa
cuando se utilizan un procedimiento adecuado de limpieza de los extractos. Dos
sistemas de ELISA se han usado para el análisis de micotoxinas y ambos son ensayos
competitivos heterogeneos. Un sistema es ELISA directo, se utiliza un conjugado
enzima-micotoxina y el otro sistema es ELISA indirecto, dado que se utiliza un
conjugado proteína-micotoxina y un anticuerpo secundario con el cual una
enzima ha sido conjugada. Después de los lavados apropiados, la cantidad de
enzima conjugada que reacciona con el anticuerpo se determina por incubación
con un sustrato en solución que contiene peróxido de hidrógeno que actua como
un oxidante cromogeno. El color resultante se mide ya sea visualmente o por medio
de un espectrofotómetro. Debido a que las concentraciones de conjugado
enzimático y de anticuerpo son constantes, la intensidad del color es un función
inversamente proporcional a la concentración de toxina.
FUNDAMENTO TEÓRICO
FUNDAMENTO TEÓRICO
Preparación de la cerveza
FUNDAMENTO TEÓRICO
La fermentación alcohólica es un proceso anaerobio en el que las levaduras y
algunas bacterias, descarboxilan el piruvato obtenido de la ruta Embden-
Meyerhof-Parnas (glicolisis) dando acetaldehído, y éste se reduce a etanol por la
acción del NADH2 [1 – 2]. Siendo la reacción global (1), conocida como la ecuación
de Gay-Lussac [3]:
FUNDAMENTO TEÓRICO
Las suspensiones de levadura se mezclan cada vez con un azúcar distinto. Se pasan
las soluciones a estudiar a los tubos de fermentación.
La fermentabilidad del azúcar correspondiente se pone de manifiesto por la
formación de CO2 y éste se determina cuantitativamente.