Regulación de la expresión génica

en Procariotas

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Regulación de la expresión génica

Procariotas Eucariotas
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Diferencias entre la transcripción
procariota y eucariota

- ARNm monocistrónico
- ARNm policistrónico - transcripción y procesamiento
- transcripción y traducción acopladas acoplados
- ARN Polimerasa única - 3 ARN Polimerasas diferentes

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Regulación de la expresión génica

Ejemplo: Metabolismo de azúcares

Bacterias Células eucariotas
Glucosa Galactosa Glucosa
Lactosa Rafinosa
Maltosa Melibiosa
Ramnosa Xilosa

Las bacterias tienen vías catabólicas para varios azúcares, si

se expresaran todas a la vez implicaría un enorme gasto de
energía.
El cambio en la expresión ocurre en pocos minutos.

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Sistemas de regulación

• Prender y apagar ciertos genes o grupos de genes.

• Mecanismo sensor que reconozca que enzimas se

necesitan en cada momento (que genes deben ser
expresados).

• Activación e inactivación del sistema en el tiempo.

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Operón
Unidad transcripcional que contiene:
• genes estructurales que codifican para proteínas que
cumplen funciones relacionadas
• regiones regulatorias

Transcripción y traducción ocurren

después de la inducción

Enzima 1 Enzima 2 Enzima 3

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Regulación Transcripcional en
Procariotas

OPERON Genes para enzimas de una vía

metabólica agrupados en una localización
cromosómica.
Permite expresión coordinada.
OPERADOR Una secuencia regulatoria
adyacente determina si se transcribe o no.
Proteínas reguladoras se asocian al operador
para controlar la transcripción del operón.
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Clasificación de los operones de
acuerdo a su regulación

Ejemplo Vía Metabólica

Utilización de nutrientes
Inducibles Operón Lactosa
(Catabolismo)

Represibles Operón Triptófano Biosíntesis

Esenciales
Constitutivos Metabolismo Glucosa
(housekeeping)

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Cuatro modelos de regulación
INDUCIBLE REPRESIBLE

CONTROL POSITIVO
Co-represor
(activador)

Co-represor
CONTROL NEGATIVO
(represor)

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Inducción-control negativo

• INDUCCIÓN: síntesis aumentada en respuesta a un metabolito

• Inductores gratuitos: metabolitos que inducen el sistema pero no pueden ser
metabolizados (IPTG).
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Represión-control negativo

REPRESION: síntesis reducida en respuesta a un metabolito.

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Metabolismo de la lactosa

Los genes del metabolismo de

la glucosa se expresan en
forma continua en E. coli.
El metabolismo de los otros
azúcares como fuentes
energéticas está regulado, es
inducible.
Lactosa = disacárido
(glucosa + galactosa)
La lactosa estimula el
aumento de 1000 X de la
expresión de 3 proteínas.
Transacetilasa
Operón lactosa: INDUCIBLE

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Organización del operón lac de E. coli
wild type

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El operador

Modelo del tetrámero represor

lac (4 polipéptidos)

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Operón lac de E. coli wt en medio SIN lactosa

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Operón lac de E. coli wt en medio CON lactosa

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Operón Lactosa

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18
Función de los distintos elementos del
operón
Genes Normales (wt)

No hay actividad -galactosidasa.

Mutación del gen lacZ, gen
Disminuye la producción de permeasa y
estructural transacetilasa.

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Efecto de las mutaciones
1. Mutaciones en el promotor (lacP): Afecta la expresión de las 3

2. Mutaciones en el operador (lacO) Bacterias diploides (plásmido F)

F’ lacO+ lacZ- lacY+  permeasa (sólo con lactosa)

C lacOc lacZ+ lacY-  -galactosidasa (sin lactosa, expresión
constitutiva)

3. Mutaciones en el represor (lacI) Bacterias diploides (plásmido F)

F’ lac I+ lacO+ lacZ- lacY+

C lacI- lacO+ lacZ+ lacY-

lacO actúa en cis

El represor codificado
por lacI actúa en trans

Cis Trans

Promotor Represor
Operador Inductor
Sec. codificantes
Terminador
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 Genotipo c/ lact s/ lact
El modelo del I + O+ Z+ + -
operón
I + O+ Z- - -
I - Oc Z+ + +
Los signos + y – se refieren a I + Oc Z+ + +
la presencia o ausencia de
actividad de ß- I - O+ Z+/ F’ I + + -
galactosidasa
I + Oc Z+/ F’ O+ + +
c/lact: lactosa presente
s/lact: sin lactosa
I + O+ Z+/ F’ I - + -
I + O+ Z+/ F’ Oc + -
I s O+ Z+ - -
I s O+ Z+/ F’ I + - -
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Control positivo:
Activación por catabolitos

Proteínas accesorias que activan la

transcripción.
La unión de CAP-AMPc al ADN
asiste a la formación del complejo
de iniciación sobre el promotor.

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Control positivo del operón lac:
Activación por catabolitos

Si hay baja concentración de glucosa, se

activa la Adenilato ciclasa.
Se consume ATP y se genera AMPc (en
alta concentración).
La proteína CAP (Catabolite activator
protein) se une al AMP cíclico.
CAP se une a un sitio blanco del
promotor, cambia la conformación del
ADN y aumenta la afinidad de la ARN Pol.
• Si hay glucosa y lactosa, se usa
preferencialmente la glucosa porque los
niveles de AMPc son bajos.
• Si se agrega AMPc al medio, se
transcribe el operón lac aún en
presencia de glucosa.

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Estado funcional del operón lac de E. coli wt
en medio con baja concentración de glucosa

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Secuencia del operón lac de E. coli

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CAP-AMPc-DNA

CAP-AMPc
RNA Pol

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Operón lac: control positivo, con represión

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 Regulación general del operón lac

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Operón trp: control negativo,
con represión por producto

Trp ausente: Represor inactivo. Las enzimas sí se transcriben.

Trp presente: Represor activo. El Trp actúa como co-represor.
Las enzimas no se transcriben.
El represor Trp se asocia al promotor en presencia de producto .

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Operón trp

Organización de la región líder/atenuador del operón trp

Acoplamiento transcripción-traducción en bacterias

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Modelo de Atenuación: Ausencia de Trp

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Modelo de Atenuación: Presencia de Trp

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Operón trp: atenuación

ATENUACIÓN ANTITERMINACION
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35
La atenuación es un mecanismo
común

Secuencia de aminoácidos de los atenuadores (péptidos líder)

de los operones de E. coli
phe, his, leu, thr, e ilv

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