Eur Food Res Technol (2017) 243: 1385-1395 DOI
10.1007 / PAPEL ORIGINAL s00217-017-2849-7
Composición química de semillas de leguminosas: parte I-contenido de nutrientes
básicos, aminoácidos, compuestos fitoquímicos, y la actividad antioxidante
Eugeniusz R. Grela 1  · Bożena Kiczorowska 1  · Wioleta Samolińska 1  · Ene Matras 1  · Piotr Kiczorowski 2  ·
Wojciech Rybiński 3  · Ewa Hanczakowska 4  
Recibido: 9 Agosto 2016 / Revisado: 16 Noviembre 2016 / Aceptado: 19 Enero 2017 / Publicado en línea: March 1 2017 © El Autor (s) de 2017. En este
artículo se publica con acceso abierto al Springerlink.com
Abstracto El objetivo del estudio fue determinar y lisan ana- el contenido de
nutrientes esenciales, archivo el aminoácido pro-, compuestos fitoquímicos, y
actividad antioxidante en las semillas de las especies y variedades de plantas
Fabaceae seleccionados. Se detectó el contenido de proteína total más alta en
las semillas de los altramuces amarillo y andinos. Las semillas de altramuz se
caracterizan por un alto ( P < 0,05) el nivel de fibra cruda, NDF, y CEL. La mayor
proporción de EAAI (77%) se observó en la proteína de garbanzo, haba,
chícharo, y guisante. Entre las plantas Fabaceae analizados, semillas de
garbanzo exhibieron el más alto ( P < 0,05) los niveles de fenoles totales y
polifenoles. La mayor ( P < 0,05) la actividad antioxidante (DPPH) se observó
para la lenteja y las semillas de altramuz amarillo. Comparado con los otros
representantes de leguminosas, la importancia de altramuz está aumentando,
como la composición química de sus semillas hace que la planta un importante
componente nutracéutico.
Palabras clave semillas de leguminosas · · nutrientes básicos Los aminoácidos ·
factores anti-nutricionales · La actividad antioxidante
* Bożena Kiczorowska
bozena.kiczorowska@up.lublin.pl
1 Departamento de Bromatología y la Alimentación Fisiología, Instituto
de la alimentación animal y Bromatología, Akademicka calle
13, Universidad de Ciencias de la Vida, 20-950 Lublin, Polonia
2 Departamento de Bases biológicas de los Alimentos y Piensos
Tecnologías de la Universidad de Ciencias de la Vida en Lublin, Głęboka
28, 20-612 Lublin, Polonia
3
Instituto de Genética de Plantas, Academia de Ciencias de Polonia, Poznan,
Polonia
4 Instituto Nacional de Investigación de Producción Animal, Cracovia,
Polonia
Introducción
En la actualidad, la proporción de semillas de leguminosas en la dieta diaria ha
disminuido en favor de la carne y pro- ductos altamente procesados. Un desequilibrio
en estas proporciones en la dieta tiene un impacto negativo en la salud humana. Por
lo tanto, los nutricionistas recomiendan un regreso al consumo de semillas de
leguminosas. El año 2016 ha sido declarado como el Año Internacional de Pulsos
(AIP) por la ONU para promover el uso de las legumbres en la alimentación humana [ 1
]. Debido a sus altos valores nutricionales, estas plantas son ampliamente utilizados
como la principal fuente de proteínas, en particular en la dieta vegetariana. Además
de la proteína, estas semillas proporcionar muchos otros componentes importantes,
es decir, minerales y vitaminas del complejo B, y tienen otros compuestos de salud
fundamental pro- protectora (fenólicos, fosfatos de inositol, y gosaccharides oli-). Su
atributo es el índice glucémico bajo, por lo tanto, pueden ser recomendados para las
personas que sufren de diabetes. Las plantas leguminosas comprenden muchas
especies, cuyas semillas difieren considerablemente en su composi- ción química y
el valor nutritivo [ 2 ]. Además de nutrientes, semillas de leguminosas contienen
sustancias biológicamente activas indeseables, incluidos los factores
anti-nutricionales (ANF) -tannins, alcaloides, glucósidos, inhibidores de proteasa,
lectinas, y otros. Ellos pueden poner en peligro la digestión de alimentos y empeorar
la comida vour flagrante; Además, aquellos con propiedades tóxicas pueden aggra-
Vate el estado de salud mineral. Además de los ANF, semillas de leguminosas
contienen fitoestrógenos, que poseen propiedades antioxidantes y disminuye el
riesgo de cáncer [ 3 ].
El objetivo del estudio fue determinar y analizar el contenido de nutrientes
esenciales, el perfil de aminoácidos, compuestos químicos fito- y actividad
antioxidante en las semillas de especies y variedades de plantas leguminosas
seleccionados.
13
Vol.:(0123456789)
1386
Materiales y métodos
composición básica
Las semillas-utilidad general y consumo estudiados de UMES pierna- se
obtuvieron en cantidades de ~ 5 kg de las zonas ción cul- de Sur y Este Polonia
en 2014. Una muestra aleatoria fue tomada después de la cosecha para el
análisis químico. El contenido de materia seca y nutrientes básicos en
muestras de semillas de tierra (250 g de cada adhesión) se determinó según la
norma AOAC [ 4 ] procedimientos. Fibra ciones fracciones, es decir, neutro
detergente (NDF) y fibra ácido detergente (ADF), se sometieron a ensayo de
acuerdo con el método por Goering y Van Soest [ 5 ]. Las mediciones se
formaron per- usando un analizador de fibra Ankom220 (ANKOM Technology
Corp., Fairport, Nueva York, EE.UU.). El contenido de materias de extractos
libres de nitrógeno (NFE) se calculó como la ceniza-grasa cruda
proteína-crudo materia-crudo seco de fibra en bruto.
de aminoácidos (AA) determinación
El contenido de aminoácidos se determinaron en un SYKAM Amino Acid
Analyzer (Laserchrom HPLC Laboratories Ltd. Inc., Rochester, UK). Antes
del análisis, las mues- tras se hidrolizaron con HCl 6 N a 110 ° C durante 24
h. La metionina y la Cys se analizaron como metionina sulfona y ácido
cisteico después de noche a la mañana oxidación con ácido perfórmico en
frío antes de la hidrólisis. El triptófano se determinó después de NaOH
hidrólisis a 110 ° C durante 22 h. La EAAI se calculó como la media
geométrica de acuerdo con la fórmula si- guiente [ 6 ]:
√(
) ( )
un 1 un norte
EAAI = norte × 100 × ⋯ × × 100 = 10 logEAAI,
un 1 s un ns
dónde un norte es el contenido de AA en la proteína de prueba y un ns el contenido de AA en
la proteína de referencia.
Los valores de CS se calcularon para todos los aminoácidos de acuerdo
con la siguiente fórmula [ 7 ]:
un norte
CS = .
un ns
Para enfatizar el valor de la proteína de la semilla en términos del
contenido de aminoácidos limitantes, sólo el CS Lys y CS Met + Cys Los valores se
presentan en el documento. Los niveles ciones reparados de aminoácidos
exógenos fueron los siguientes: Lys-7,0 g · 16 g - 1 · N, Met + Cys-5,7 g · 16 g - 1 N,
Thr-
4,7 g · 16 · g - 1 N, Ile-5,4 g · 16 g - 1 N, Trp-1,7 g · 16 g - 1
N, Val-6,6 g · 16 g - 1 N, Leu- 8,6 g · 16 g - 1 N, Su-2,2 g · 16 g - 1 N, Phe + Tyr-
9,3 g · 16 g - 1 N, para el estándar de toda la proteína del huevo [ 8 ].
13
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Análisis de los factores anti-nutricionales
El contenido de taninos en las legumbres semillas se determinó con el
reactivo de Folin-Ciocalteu y pirogalol como ard stand- [ 9 ]. Los análisis
se llevaron a cabo a 760 nm en un espectrofotómetro UV-VIS (Nicolet
Evolution 300 LC, Thermo Fisher Scientific, Waltham, EE.UU.).
La actividad de inhibidor de tripsina (TIA) se analizó de acuerdo con PN EN
ISO 14902: 2005 [ 10 ], Expresada como unidades de inhibidor de tripsina (TIU)
por miligramo de proteína, y calculado a partir leyó la absorbancia a 410 nm
(espectrofotómetro UV-VIS, Nicolet Evolution 300 LC, Thermo Fisher Scientific,
Waltham, EE.UU.) frente a un blanco de reactivo. Una TIU se definió como un
valor que produce un aumento en la absorbancia de 0,01 en relación con
reacciones de control de tripsina utilizando un volumen de ensayo de 10 mL.
contenido de fenoles totales
El contenido fenólico total se determinó usando el método
espectrofotométrico [ 11 ]. Una solución metanólica del extracto a
una concentración de 1 mg / ml se utilizó en el análisis. La mezcla
de reacción se preparó mezclando 0,5 ml de la solución metanólica
del extracto,
2,5 ml del reactivo de 10% de Folin-Ciocalteu disuelto en agua, y 2,5 ml de
7,5% de NaHCO 3. Un espacio en blanco se concom- itantly preparó y
contenía 0,5 ml de metanol, 2,5 ml del reactivo 10% Folin-Ciocalteu disuelto
en agua, y 2,5 ml de 7,5% de NaHCO 3. Las muestras se incubaron después
allí- en un termostato a 45 ° C durante 45 min. Los resultados se
expresaron como GAE (equivalentes de ácido gálico).
Determinación de polifenoles individuales
muestras de leguminosas liofilizados homogeneizadas (0,5 g) se
extrajeron con 5 × 5 ml de metanol, en un homogeneizador UltraTurrax
T25 (IKA.Werke, Janke y Kunkel). Quots Ali- de los extractos de
leguminosas metanólico (0,1 ml) se transfirieron a viales de GC y se
añadieron 50 l de un estándar interno (3- solución -1-propanol
[4-hidroxifenil],
19,2 g / ml); A continuación, la muestra se evaporó a sequedad bajo nitrógeno
y se derivatiza mediante la adición de 250 l N,
O- bis (trimetilsilil) trifluoroacetamida (BSTFA) a 70 ° C durante 20 min.
Análisis de las muestras fue realizado por un Agilent (Wallborn,
Alemania) HP serie GC 6890N acoplada con un detector HP 5973 MS
(EI, 70 eV), un inyector split-splitless, y un muestreador automático HP
7683 en un HP-5 MS capilar columna (5% fenil-95% de siloxano de
metilo, 30 m x 0,25 mm x 250 m). Como estándar se utilizó el 3-
(4-hidroxifenil) -1-propanol.
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método de eliminación de radicales DPPH para medir la actividad
antioxidante
El método consistió en la medi- ción espectrofotométrica de la
intensidad del cambio de color en la solución en función de la cantidad
del DPPH ⋅ ( 2,2-difenil-1- radical picrilhidrazil). La reacción se inició por
mix- ing 1 ml del extracto metanólico con 3 ml de nol metadona y
añadiendo después 1 ml de la DPPH ⋅ ( 0,012 g / 100 ml). La absorbancia
a lambda max de 517 nm (UV mini-1240 Shimadzu espectrofotómetro,
Fischer Bioblock, Francia) se han consultado a 0, 0,5, y en cada 0,5 min
hasta que la reacción alcanza un estado estable. Esta meseta se
alcanzó en 60 min. La actividad del extracto en DPPH ⋅ de barrido se
calculó como sigue:
[ Control absorbanceof - muestra absorbanceof ]
% DPPH de eliminación =
Control absorbanceof
× 100
La capacidad antioxidante total también se expresó como un equivalente de
Trolox sobre la base de la curva estándar ( R 2 = 0.9974).
análisis estadístico
Los análisis se realizaron por triplicado y todos los datos se expresaron como
medias. Todos los datos de la composi- ción química de las semillas de
leguminosas se analizaron con la versión de software tistica Sta- 10,0 [ 12 ]. La
normalidad de los datos y la homogeneidad de las varianzas se ensayaron
usando los ensayos SHA piro-Wilk y Brown-Forsythe, respectivamente. Los datos
obtenidos se analizaron estadísticamente utilizando especies como una variable
independiente en el modelo lineal general (GLM) de una sola vía análisis ANOVA
de varianza o una prueba de Kruskal-Wallis no paramétrico (un equivalente no
paramétrico de análisis unidireccional de la varianza ). comparaciones detalladas
entre las medias de la leguminosa especies se realizaron utilizando el Duncan o
Dunn prueba post hoc. se llevaron a cabo de pruebas de correlación de
Spearman Pearson o para determinar las correlaciones lineales entre algunas
variables. Todas las declaraciones de significación se basaban en los niveles de
probabilidad de 0,05 y 0,01.
Resultados y discusión
Las semillas analizadas se caracterizan por una alta ter mat- seca (MS) de contenido,
es decir, más de 900 g en 1 kg (Tabla  1 ). Las semillas analizadas mostraron una
significativa ( P < 0,05) variaciones ción del contenido de cenizas en bruto que van
desde ca. 44,3 g kg - 1
DM en el lupino blanco y amarillo y chícharo incluso
25,3 g kg - 1 DM en el guisante (Pomorski cv.). Las semillas de las plantas
leguminosas se caracterizan por su alta proteína contenido de materias, en
particular, las semillas de altramuz amarillo y andinos (427,4 g kg - 1 DM). El alto
contenido de este valioso
1387
nutrientes, especialmente en el altramuz amarillo, se informó por Sujak et al. [ 13 ].
Los autores informan que algunos cultivares de la especie puede contener tanto
como 482 g kg - 1 DM (cv tonelada Kro-.) O 471 g kg - 1 DM (Markiz cv.) De proteína.
El más bajo ( P < se encontró 0,05) contenido total de proteína en las semillas
analizadas para el frijol, guisante, garbanzo, y las semillas de haba (219 g kg - 1 DM
en promedio). los niveles de proteínas totales similares en estas especies
leguminosas fueron reportados por otros investigadores [ 2 , 14 ]. El papel nutricional
de estas plantas en el organismo humano está determinada no sólo por el
contenido de proteínas, sino también su estructura y funciones. fracciones de
proteína de dos, albúminas y globulinas, son distinguía. Albúminas representan ca.
10-25% de la proteína total y servir una función estructural y enzimática en el
organismo humano. los niveles de albúmina superiores contribuyen a un mayor
valor nutricional de las semillas. A su vez, las globulinas son considerados
principalmente como proteínas inmunes [ 15 ]. Las globulinas pueden dar cuenta de
incluso 60-75% de las proteínas en guisantes, soja y semillas de altramuz y
80-90% en las semillas de frijol y amplias [ dieciséis ].
El contenido de grasa osciló ( P < 0,05) a partir de 7.91 a
23.81 g kg - 1 DM en las semillas de la mayoría de las especies analizadas; los
niveles más altos de grasa, es decir, 53 g kg - 1 DM en promedio, se detectaron en las
semillas de la azul y altramuces amarillo y garbanzo. A su vez, el lupino blanco
(100,3 g kg - 1 DM) y el altramuz andino (155 g kg - 1 DM) demostró ser especies de
cojinete de petróleo. rangos similares del contenido de este ent nutrición en semillas
de plantas Fabaceae fueron reportados en la literatura [ 2 ,
13 , 14 , 17 ].
Nutricionistas subrayan la necesidad de que el consumo de semillas de plantas
leguminosas, debido a su contenido de diversas fracciones de fibra dietética que
son esenciales para el proceso de una descomposición mediante activamente y
contrarrestan las enfermedades de estilo de vida y el cáncer. Las investigaciones
realizadas por Farvid et al. [ 18 ] Apoyar la hipótesis de que una mayor ingesta de
fibra reduce el riesgo de cáncer de mama y sugieren que el consumo de grandes
cantidades de fibra dietética insoluble durante la ado- lescence y períodos edad
adulta temprana puede tener un carácter preventivo. Especialmente alta
importancia nutricional terapéutico en este aspecto se atribuye a las semillas de
altramuz, que se caracterizan por un alto ( P < 0.05) proporción de fibra cruda (una
media de 117 g kg - 1 DM), en contraste con las semillas de garbanzo y lentejas, que
contenían por ca. los niveles de 78% más bajos de este nutriente (Tabla  1 ). Los
altramuces y frijoles analizadas exhibieron un gran nivel de la fracción ción NDF
(una media de 228 g kg - 1 DM) y CEL (una media de 153 g kg - 1 DM). datos de la
literatura muestran que el contenido de materias de fibra en las semillas puede
diferir significativamente en diferentes especies y sus variedades [ 19 ]. Un papel
especial que mejora la salud es interpretado por fracciones de fibra en la dieta
difícilmente solubles, ya que,
por ejemplo, mejorar los parámetros de intestino grueso physiologi- cal de estado.
Ellos exhiben una capacidad de retener agua, lo que aumenta directamente el
volumen de las heces, eliminando de este modo los ácidos biliares secundarios y
otras sustancias tóxicas de la
13
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tabla 1 Contenido de nutrientes básicos, fibra detergente, y factores anti-nutricionales en algunas especies de leguminosas (g kg - 1 DM)

DM g kg - Ceniza bruta Proteína bruta extracto de éter Fibra bruta NDF ADF ADL HCEL CEL
1

cv altramuz azul.

Regente 933,2 35.47 319,2 67.31 116,4 209.3 172,1 12.21 37.20 159.89

 CV. Zeus 918,5 29.15 398,4 46.78 94.45 245.4 209.1 15.13 36.30 193,97

 valor medio 925,8 32.31 segundo 358,8 segundo 57.04 do 105,4 segundo 227.3 un 190,6 un 13.67 do 36.70 gramo 176.93 un

cv lupino

blanco. butan 939,7 39.06 355.2 101.9 117,1 214,4 138,2 19.14 76.20 119,06

 CV. Bardo 915,4 46.52 336.7 98.74 135,4 237,8 164,4 16.42 73.40 147.98

 valor medio 927.5 42.79 un 345,9 segundo 100.3 segundo 126,2 un 226,1 un 151,3 segundo 17.78 segundo 74.80 do 133.52 segundo

cv altramuz

amarillo. parys 938,9 45.80 428,4 55.28 118,4 232.2 179.1 13.43 53.10 165.67

 CV. Iryd 908.1 42.38 454,2 40.18 121,5 256,7 213,3 15.31 43.40 197.99

 valor medio 923,5 44.09 un 441.3 un 47.73 do 119,9 un 244,4 un 196.2 un 14.37 do 48.20 F 181.83 un

Valor medio de

lupino andino 922,6 37.45 ab 413,5 un 155,1 un 73.84 do 178,8 segundo 127,1 do 10.52 re 51.70 mi 116.58 do

Guisante

 CV. Medalla 926,4 29.58 237.1 12,52 48.25 176,1 85.01 7.53 91.09 77.48

 CV. Mentor 901,2 25.34 201,5 9.78 43.18 101.4 73.44 4.84 27.96 68.60

 valor medio 913,8 27.46 do 219,3  discos compactos 11.15 mi 45.71 re 138,7 antes de Cristo 79.23 re 6.18 mi 59.48 re 73.04 re

valor medio de

garbanzo 929,8 31.30 segundo 226,2 do 54.85 do 22.16 F 168.3 segundo 75.72 re 11.43 re 92.58 segundo 64.29 mi

Lenteja

 valor medio 924.3 28.13 do 268,9 do 7.91 mi 31.05 mi 89.52 do 53.65 mi 4.81 F 35.87 gramo 48.84 F

cv chícharo.
Derek 925,5 31.66 276,9 9.72 45.49 148,5 68.21 9.64 80.29 58.57

 CV. Crujiente 903,2 55.69 312.4 8.24 44.19 163,7 71.63 6.62 92.07 65.01

 valor medio 914,35 43.67 un 294,65 antes de Cristo 8.98 mi 44.84 re 156,1 segundo 69.92 re 8.13 mi 86.18 segundo 61.79 mi

frijol cv. mela

901,2 41.82 194,5 23.81 44.34 216,8 163,4 0.13 53.40 163.3

 valor medio 901,2 41.82 un 194,5 re 23.81 re 44.34 re 216,8 ab 163,4 segundo 0.13 gramo 53.40 re 163.3 un

cv amplio.
Prima 900.1 31.81 236.4 9.39 62.81 236,9 112.3 96.31 124.60 15.99

 valor medio 900.1 31.81 segundo 236.4 do 9.39 mi 62.81 re 236,9 un 112.3 do 96.31 un 124.60 un 15.99 F

 piscina SEM 8.79 0.39 2.84 0.67 0.93 1.46 2.67 0.12 0.45 2.03

  PAG valor 0,152 0.0.37 0,024 0,016 0,037 0,019 0,048 0,025 0,033 0,026

CEL celulosa (calculado valores: ADF-ADL), ADF fibra ácido detergente, NDF fibra neutra-detergente, ADL lignina, HCEL hemicelulosa (calcu- valores lated: NDF-ADF)

aBCDeF Las diferencias estadísticas entre los valores medios ( P < 0,05) Especies

organismo. fracciones de fibra en las semillas de altramuz no sólo pueden
regular los niveles de pH y humedad intestinales, sino que también tienen un
efecto beneficioso sobre los pará- metros morfométricos del colon, por ejemplo,
la longitud de las mucosas plica y el espesor de la capa muscular. La fibra
soluble fracciones ciones y a-galactósidos presentan considerable actividad
proliferativa debido a los procesos de fermentación rápidos [ 20 ]. Estos procesos
que ocurren dentro de límites razonables son beneficiosos para la salud, ya que
contribuyen a aflojar las heces y la defecación regular. El alto contenido de fibra
en las leguminosas
semillas asegura sus propiedades basificating, que equilibrar los efectos
acidificantes de productos de carne, huevos, y cereales. La combinación de las
semillas de leguminosas con carne, huevos, queso o aumenta la digestibilidad de
las proteínas contenida en la misma [ 21 ].
Los perfiles de aminoácidos de la proteína bruta y los valores de sus
índices se compilan en la Tabla  2 . Digno de mención, hay diferencias en el
contenido de ambas endo- y exog- aminoácidos enous entre las especies,
así como dentro de las variedades. La mayor cantidad de aminoácidos
esenciales

13
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Tabla 2 perfil endógeno de aminoácidos de

Ala Arg Áspid Glu Gly Ser Pro ΣNEΑΑ
especies de leguminosas (g · 16 g - 1  NORTE)

cv altramuz azul.

Regente 3.59 8,73 14.74 16.85 3.79 4.97 4.40 57.07

 CV. Zeus 3.08 9.28 9.15 18.34 3.51 3.58 3.86 50.80

 valor medio 3.34 9.01 11.95 17.60 segundo 3.65 4.28 4.13 53.94

cv lupino

blanco. butan 3.71 8.96 12.20 18.54 3.83 5.60 3.74 56.60

 CV. Bardo 3.25 9.54 9.67 19.96 3.66 4.93 3.37 54.38

 valor medio 3.48 9.25 10,94 19.25 ab 3.75 5.27 3.56 55.49

cv altramuz

amarillo. parys 3.83 9.87 11.26 21.78 4.03 5.40 4.18 60,34

 CV. Iryd 4.83 9.21 8.83 20.68 5.31 4.63 1.59 55.08

 valor medio 4.33 9.54 10.05 21.23 un 4.67 5.02 2.89 57.71

Valor medio de

lupino andino 3.98 9.47 10.88 21.68 un 3.95 5.36 3.93 59.24

cv guisante.

Medalla 4.46 8.29 12.66 17.30 4.17 5.05 4.18 56.12

 CV. Mentor 3.56 7.89 8.79 16.54 3.86 4.53 3.45 48.62

 valor medio 4.01 8.09 10,73 16.92 segundo 4.02 4.79 3.82 52.37

valor medio de

garbanzo 4.90 8.30 12.60 16.50 segundo 4.11 5.56 4.50 56.48

valor medio de

lentejas 3.77 9.60 12.91 18.30 segundo 3.80 5.19 4.10 57.67

cv chícharo.
Derek 4.99 9.33 11.55 17.32 4.37 4.92 4.30 56.78

 CV. Crujiente 5.78 6.75 10,27 17.89 6.07 5.10 2.15 54.01

 valor medio 5.39 8.04 10,91 17.61 segundo 5.22 5.01 3.23 55.40

frijol cv. mela

3.45 7.59 9.25 16.15 4.59 4.13 3.39 48.55

 valor medio 3.45 7.59 9.25 16.15 segundo 4.59 4.13 3.39 48.55

cv amplio.
Prima 3.84 8.57 10,73 16.69 4.56 4.96 3.86 53.21

 valor medio 3.84 8.57 10,73 16.69 segundo 4.56 4.96 3.86 53.21

 agrupada SEM 0,196 0,224 0,454 0,487 0,175 0,139 0,211 0,904

  PAG valor 0,160 0,568 0,968 0,016 0,549 0,622 0,950 0,610

AANE aminoácidos no esenciales

aBCDeF Las diferencias estadísticas entre los valores medios ( P < 0,05) Especies

Los ácidos se observó en el cultivar hierba guisante. Crujiente, en garbanzo,
haba, guisante y (más de 40 g · 16 g - 1   N) (Tabla  3 ). Sin embargo, las
diferencias en los niveles medios de aminoácidos esenciales entre las especies
de leguminosas no se confirmaron estadísticamente camente ( P = 0,198),
excepto para el contenido de glutamina con la proporción más alta en la proteína
de la CAN y las semillas de altramuz amarillo, en comparación con la lenteja,
chícharo, altramuz azul, guisante, haba, el garbanzo, y las semillas de frijol ( P < 0,05).haba y común), el contenido de tamine Glu- y asparagina fue el más alto de
El más alto de CS conocido + cys índice se observó para la proteína bruta del lupino
amarillo (54%) y de chícharo (52%) y el más bajo para las semillas de frijol
común (30%), altramuz azul (37%), y altramuz blanco (39%). Se detectó la EAAI
más alto (77%) en la proteína de garbanzo, así como la
proteína de la haba (76%), de chícharo (75%), y el guisante (74%), mientras
que se observaron los valores más bajos de este índice para el frijol común y
proteína de altramuz (62-70%). larmente simi-, en el caso de los indicadores
del valor biológico de la proteína, el análisis estadístico no confirmó las
diferencias entre las especies Fabaceae. En las semillas analizadas de las
plantas leguminosas (altramuces, garbanzos, guisantes, lentejas, chícharo,
todos los ácidos que no son esen- cial amino (NEAA). Se obtuvieron
resultados similares por Iqbal et al. [ 22 ] En sus investigaciones de la
composición química y el valor nutritivo de garbanzo, caupí, lenteja,

13
1390
y semillas de guisantes verdes, así como Khattab et al. [ 23 ] En sus análisis de
semillas de judía de vaca, guisantes, y frijol.
La proteína de las semillas Fabaceae se caracteriza por un valor menor que
la de proteína animal y un valor mayor que la de la proteína de cereales [ 23 ].
Esto se confirmó en el presente estudio por el alto contenido de aminoácidos
exógenos y el alto valor biológico de las proteínas de leguminosas. En este
estudio, el contenido de aminoácidos esenciales (EAA) varió de 41 g 16 g - 1  N
en garbanzo a 34 g · 16 g - 1  N en semillas de frijol mon com-, en comparación
con el valor de 51 g · 16 g - 1 N en la clara de huevo de gallina utilizada en la
evaluación como un estándar de ácido amino [ 8 ]. El análisis de correlación de
Pearson reveló un alto positivo ( P < 0,05) correlación entre EAAI y el contenido
de proteína en las semillas Fabaceae analizadas (Tabla  5 ). Se obtuvieron
resultados similares en las investigaciones CON- canalizado por Khattab et al. [ 23
], Donde el contenido de aminoácidos esenciales en total de diferentes semillas
varió de 31,29 g · 16 g - 1 N en el guisante egipcio a 36,12 g · 16 g - 1 N en el frijol
canadiense. En el presente estudio, el valor EAAI varió de 77% para el
garbanzo a 62% para el grano, que se refleja en el CS Met + Cys valor. El valor de
baja est de este parámetro, es decir, 30%, se estimó para el grano, mientras
que el altramuz amarillo exhibe el valor más alto (54%). El contenido de cistina y
metionina en las semillas de altramuz y de chícharo estaba fuertemente
correlacionado positivamente con el contenido de proteína ( P < 0,05) (Tabla  5 ).
El eratura lit- disponible muestra una alta proporción de lisina y un nivel
relativamente bajo de aminoácidos de azufre y triptófano en semillas de plantas
ume pierna- [ 22 , 23 ]. Esto fue confirmado en gran medida por los presentes
resultados, como el CS Lys valor para todas las semillas Fabaceae analizados fue
alta (en ca. promedio 87%), y aminoácidos que contienen azufre fueron los
primeros aminoácidos limitantes, con la excepción de la altramuz Andino,
lenteja, y proteína de altramuz amarillo, donde triptófano fue el primero que
limita ácido amino (20, 29, y 38% de CS trp, respectivamente).
sustancias anti-nutricionales comprenden compuestos que disminuyen
significativamente el valor nutricional de las leguminosas, por ejemplo quimotripsina
e inhibidores de tripsina (tabla  4 ). Su impacto negativo no sólo se refleja en el
deterioro de la digestibilidad de la proteína a través de la formación de complejos de
los mismos, sino también en el bloqueo de la actividad de enzimas proteolíticas.
Esto puede resultar en hipertrofia páncreas y, debido a la secreción intensificado
enzima, un aumento de la demanda del organismo para los aminoácidos, en
particular para la metionina y la cisteína [ 24 ]. Las relaciones fuertes entre
inhibidores de la proteína y la tripsina son confirmadas por los altos valores de los
coeficientes de correlación observado para casi todas las semillas de leguminosas
(Tabla  5 ). Sin embargo, su efecto en el organismo puede ser positivo en algunas
circunstancias. Los inhibidores de tripsina se aplican en el tratamiento de la
obesidad, diabetes tipo 2, y la enfermedad de cáncer, así como de prevención de
infarto y enfermedades cardiovasculares [ 25 ]. El mayor contenido de estos
compuestos se determinó en las semillas de chícharo y de guisante (en promedio
129,3 y
13
Eur Food Res Technol (2017) 243: 1385-1395
47.06 UIS - 1  mg), y los niveles más bajos se observaron para las semillas de
altramuz y de frijol amarillo (en promedio 1,64 y 2,62 TUI - 1  mg) (Tabla  4 ). Una
variabilidad similar en el contenido de estas sustancias se informó por otros
investiga- dores [ 26 ]. Sin embargo, a pesar del contenido relativamente pequeño
de los inhibidores de la proteasa en las semillas de altramuz, estudios recientes
han sugerido sus propiedades inusuales [ 27 ]. Contienen cáncer anti- MMP-9
inhibidores, que son los más eficaces de los presentes en las leguminosas,
inhibiendo tanto los NAS gelatinosa y la migración HT29 y el crecimiento. Algunos
autores sugieren la posible aplicación de MMPI proteínas de leguminosas como
inhibidores de metaloproteinasas novedosos contra el cáncer en farmacológica
estrategias lógicas y nutricionales.
Los taninos presentes en semillas de leguminosas se clasifican como anti-
compuestos nutricionales. Entre los cultivares analizados, se detectó el mayor
contenido de tanino en la variedad de edad de altramuz andino (16.34 g kg - 1 DM),
mientras que las nuevas variedades de altramuz azul y amarillo tenían por ca.
70% más bajo contenido de estos compuestos (Tabla  4 ). Los niveles más bajos
de taninos lysable hidro, es decir, 2,58 g kg - 1 DM, fueron detectados en las
semillas de altramuz blanco. Entre las otras especies analizadas, sólo las
semillas de lentejas exhibieron un nivel relativamente alto de estos compuestos,
es decir, 8,72 g kg - 1 DM. Una fuerte correlación ( P < 0,05) se observó en este
estudio entre el contenido de taninos y el nivel de proteína en la altramuz azul,
altramuz amarillo, altramuz Andino, lenteja, chícharo, y haba (+) y en el lupino
blanco y el guisante (-) (Tabla  5 ). Cantidades similares de estos compuestos
anti-nutricionales en semillas de leguminosas fueron reportados por Ksiezak y
Bojarszczuk [ 28 ] En sus investiga- ciones que cubre un área muy grande de
Polonia. No observaron un efecto significativo del sitio de cultivo en el nivel de
taninos, pero correlacionadas con las especies y cultivares. El presente estudio
muestra una alta correlación entre taninos y proteínas. Los taninos son
compuestos polifenólicos capaces de formación de complejos estables con
proteínas, minerales, y vitaminas A y B 12, lo que resulta en el deterioro de la
digestibilidad y disponibilidad de nutrientes. Este efecto nocivo de taninos es
aliviado por el tratamiento térmico de las semillas [ 29 ].
semillas de plantas Fabaceae se refieren cada vez más como una fuente de
antioxidantes. Además de taninos, que contienen compuestos Phe- nolic con
actividad antioxidante importante, por ejemplo, glucósidos de quercetina,
kaempferol, y myricetins así como cafeico, ferúlico, y pag- ácidos cumárico. Son
principalmente presente en cubiertas de las semillas, y las semillas de variedades
con flores ful Color- contienen mayores cantidades de estos compuestos. Estas
sustancias se cree que proteger contra el cáncer y las enfermedades
cardiovasculares [ 30 ]. El efecto beneficioso de los polifenoles implica la eliminación
de especies reactivas del oxígeno de la sangre, así como la prevención de la ción
ROS mación existente. Los polifenoles también pueden inhibir la oxidación de
antioxidantes enous endog- en el proceso de oxidación, por ejemplo querce-
estaño puede evitar la oxidación de la vitamina C [ 31 ]. Entre el
 Tabla 3 perfil esencial amino ácido de especies de leguminosas y sus valores nutricionales (g · 16 g - 1  NORTE)

AA esenciales Valores nutricionales

Su Val ile Leu Lys Reunió Cys Met + Cys Phe Tyr Thr Trp Σ EΑΑ CS Lys CS Met + Cys EAAI

cv altramuz azul.

Regente 2.74 4.40 3.42 7.05 6.81 1.37 1.10 2.48 4.03 2.79 4.03 0.74 38.49 97 43 72

 CV. Zeus 2.92 3.81 3.75 6.53 5.09 0.74 1.02 1.76 3.56 3.54 3.22 0.68 34.86 73 31 64

 valor medio 2.83 ab 4.11 segundo 3.59 ab 6.79 segundo 5.95 ab 1.06 segundo 1.06 re 2.12 3.80 3.17 ab 3.63 segundo 0,71 antes de Cristo 36.68 85 37 68

cv lupino

blanco. butan 2.71 3.57 3.06 7.20 5.80 0.68 1.12 1.80 3.33 2.79 3.83 0.65 34.72 83 32 64
Eur Food Res Technol (2017) 243: 1385-1395

 CV. Bardo 2.26 4.09 2.83 7.38 5.09 0.87 1.69 2.56 3.98 3.68 3.69 0,78 36.34 73 45 67

 valor medio 2.49 segundo 3.83 segundo 2.95 segundo 7.29 ab 5.45 segundo 0,78 do 1.41 antes de Cristo 2.18 do 3.66 segundo 3.24 un 3.76 ab 0,72 antes de Cristo 35.53 78 38.5 65.5

cv altramuz

amarillo. parys 2.93 3.70 3.36 7.51 5.57 0.92 1.75 2.67 3.78 2.56 4.00 0,71 36.79 80 47 69

 CV. Iryd 2.91 4.38 3.84 8.15 4.76 1.34 2.16 3.50 3.84 2.71 3.19 0.59 37.87 68 61 70

 valor medio 2.92 un 4.04 segundo 3.60 ab 7.83 segundo 5.17 segundo 1.13 segundo 1.96 un 3.09 un 3.81 ab 2.64 antes de Cristo 3.60 segundo 0.65 do 37.33 74 54 69.5

Valor medio de

lupino andino 3.03 un 3.67 segundo 3.90 un 6.77 antes de Cristo 6.1 ab 0.85 do 1.64 segundo 2.50 segundo 3.57 segundo 3.57 un 4.10 un 0.38 re 37.61 88 44 66

Guisante

 CV. Medalla 2.65 4.41 3.65 6.97 7.10 1.40 1.31 2.71 4.52 2.69 4.37 1.06 40.13 101 48 77

 CV. Pomorski 2.23 4.23 4.31 6.29 6.23 0.95 1.09 2.04 4.36 2.39 3.98 0.98 37.04 89 36 70

 valor medio 2.44 segundo 4.32 ab 3.98 un 6.63 antes de Cristo 6.67 un 1.18 ab 1.20 do 2.38 segundo 4.44 un 2.54 do 4.18 un 1.02 un 38.59 95 42 73.5

Garbanzo

 valor medio 2.91 un 4.61 un 3.90 un 7,47 ab 6.60 un 1.10 segundo 1.55 segundo 2.65 segundo 4.60 un 2.49 do 4.48 un 0.84 segundo 40.55 94 46 77

Lenteja

 valor medio 2.88 ab 4.63 un 3.49 ab 7.08 ab 6.92 un 1.08 segundo 1.50 segundo 2.58 segundo 4.71 un 2.40 do 4.42 un 0.49 re 39.59 99 45 71

cHÍCHARO

 CV. Derek 3.07 4.84 3.74 6.98 6.20 1.07 1.40 2.47 4.10 2.82 4.06 0.98 39.27 89 43 76

 CV. Crujiente 3.06 3.89 4.39 7.69 6.09 1.56 1.94 3.50 4.02 4.21 4.19 0.45 41.49 87 61 74

 valor medio 3.07 un 4.37 un 4.07 un 7,34 segundo 6.15 ab 1.32 un 1.67 segundo 2.99 un 4.06 ab 3.52 un 4.13 un 0,72 antes de Cristo 40.38 88 52 75

frijol cv. mela

2.42 4.21 3.72 6.44 5.46 0.69 1.03 1.72 2.61 2.56 3.89 0.61 33.64 78 30 62

 valor medio 2.42 4.21 ab 3.72 un 6.44 do 5.46 segundo 0.69 do 1.03 re 1.72 re 2.61 do 2.56 antes de Cristo 3.89 ab 0.61 do 33.64 78 30 62

cv amplio.
albus 3.05 4.79 3.54 8.53 6.33 0.74 1.98 2.72 3.94 2.79 3.89 0.84 40.42 90 48 76

 valor medio 3.05 un 4.79 un 3.54 ab 8.53 un 6.33 ab 0.74 do 1.98 un 2.72 ab 3.94 ab 2.79 segundo 3.89 ab 0.84 segundo 40.42 90 48 76

 agrupada SEM 0,134 0,175 0,121 0,297 0,173 0,132 0,119 0,084 0,164 0,127 0,203 0,347 0,611 0,978 0,734 0,695

  PAG valor 0,027 0,038 0,017 0,016 0,049 0,022 0,036 0,025 0,048 0,027 0,016 0,034 0,198 0,341 0,127 0,279

13
CS Lys cómputo químico lisina, CS Met + Cys metionina + puntuación química cisteína, EAA aminoácidos esenciales, EAAI esencial índice de aminoácidos
aBCDeF Las diferencias estadísticas entre los valores medios ( P < 0,05) Especies
1391
1392 Eur Food Res Technol (2017) 243: 1385-1395

Tabla 4 Contenido de factores anti-nutricionales y actividad antioxidante en algunas especies de leguminosas (g kg - 1  DM)

gálico g Inhibidores
de proteínasde la tripsina TIU mg - 1 Los taninos DPPH 2
g kg - 1 DM fenoles
mgtotales
/ 100 g1 Los polifenoles DM g / 100 g DM (Mmol equivalentes
ácido cafeico quercetina ácido ferúlico pag- ácido cumárico
de Trolox / g DM)

cv altramuz azul.

Regente 3.28 4.93 313,7 47.62 78.64 88.52 41.84 7.91

 CV. Zeus 3.45 5.12 294,2 45.69 63.43 84.75 32.56 7.42

 valor medio 3.36 F 5.02 re 304.0 do 46.65 segundo 71.03 segundo 86.63 segundo 37.2 re 7.66 segundo

cv lupino

blanco. butan 4.17 2.54 289,3 43.53 63.54 86.34 18.73 3.73

 CV. Bardo 4.28 2.62 278.4 39.41 45.83 87.16 15.38 6.34

 valor medio 4.23 F 2.58 gramo 283,9 do 41.47 segundo 54,69 do 86.75 segundo 17.06 5.04 do

cv altramuz

amarillo. parys 1.52 4.63 328,9 45.63 123,4 83.43 53.84 8.75

 CV. Iryd 1.75 4.96 273,5 41.27 116,8 81.64 47.96 7.64

 valor medio 1.64 h 4.80 mi 301.2 do 43.45 segundo 120,1 un 82.54 segundo 50.90 do 8.20 un

Valor medio de

lupino andino 3.94 F 16.34 segundo 297,8 do 48.64 segundo 59.81 do 76.41 do 44.91  discos compactos 5.31 do

Guisante

 CV. Medalla 42.35 4.16 225,6 32.64

Dakota del Norte 56.83 45.67 2.89

 CV. Mentor 51.76 5.21 189,7 30.86

Dakota del Norte 52.74 46.93 2.56

 valor medio 47.06 segundo 4.69 mi 207,6 re 31.75 re

Dakota del Norte 54,79 re 46.30 do 2.73 mi

valor medio de

garbanzo 11.23 re 3.78 F 459,7 un 101.5 un 126,4 un 134,7 un 90.72 un 2.97 mi

Lenteja

 valor medio 31.47 do 8.72 do 398.3 segundo 24.53 do 36.86 re 29.75 F 72.93 segundo 8.13 un

cv chícharo.
Derek 123,5 3.54 249,7 27.61
Dakota del Norte - 67.94 4.69

 CV. Crujiente 135,2 3.86 294.1 26.43

Dakota del Norte - 66.38 3.09

 valor medio 129,3 un 3.70 F 271,9 do 27.02 mi

Dakota del Norte - 67.16 segundo 3.89 re

frijol cv. mela

2.62 1.53 418,4 1.52 19.83 26.28 21.97 mi 5.77

 valor medio 2.62 gramo 1.53 h 418,4 un 1.52 re 19.83 F 26.28 F 21.97 5.77 do

cv amplio.
Prima 5.67 2.16 366,7 27.34
Dakota del Norte 41.96 32.34 7,33

 valor medio 5.67 mi 2.16 gramo 366,7 segundo 27.34 mi

Dakota del Norte 41.96 mi 32.34 re 7,33 segundo

 piscina SEM 0.16 0.38 4.56 0.27 0.97 0.54 0,19 0.06

PAG valor 0,037 0,028 0,025 0,019 0,043 0,037 0,014 0,018

DPPH la capacidad de captación de radicales libres

aBCDeF Las diferencias estadísticas entre los valores medios ( P < 0.05)

1 mg de equivalentes de ácido / Especies

semillas Fabaceae analizados, las semillas de garbanzo y frijol común
demostrado tener los niveles más altos de fenoles totales (en promedio 439 mg
100 g - 1 DM), y ligeramente menor con- tiendas de estos compuestos se
determinaron en las semillas de soja y lentejas amplios (en promedio 400 mg 100
g - 1 DM) (Tabla  4 ). Las cantidades más bajas, es decir, menor de 50%, se
observaron en las semillas de guisante. Las semillas de garbanzo se carac-
racteriza por los más altos niveles de polifenoles ( P < 0,05). Aproximadamente
dos veces menores niveles de polifenoles eran
determinado en las semillas de las variedades de altramuz, con el altramuz
amarillo caracterizado por el mayor contenido de ácido cafeico y pag- ácido
cumárico. Se obtuvieron resultados similares por Siger et al. [ 32 ], Que
informó el nivel est alta de estos compuestos en las semillas de altramuz
amarillo (en particular en el cv Paris.). Por otra parte, los autores
destacaron que
el antioxidante apigenina-6,8-di-Cp
glucopiranósido y apigenina 7- O- β-Apium furanosyl-
6,8-di-Cp-glucopiranósido descubierto por primera vez en

13
Eur Food Res Technol (2017) 243: 1385-1395 1393

semillas de altramuz mejorar aún más el valor nutricional de esta planta no sólo
como una materia prima rica en proteínas, sino también como una fuente rica de

0,623 *

0,678 *

0,808 *

0,576 *
0,416

0,415

0,378

0,421

0,247
-0.509
Haba
antioxidantes. Un considerable variación en el contenido de compuestos
antioxidantes en las semillas Fabaceae ha sido reportada por muchos autores [ 21 , 30
, 33 , 34 ].
Las propiedades antioxidantes de las semillas de leguminosas se
determinaron mediante la capacidad para eliminar el radical DPPH. El más
alto ( P < Se determinó 0,05) la actividad antioxidante (DPPH) para las
0,653 *

0,548 *

0,649 *
0,369

0,387

0,212

0,267

0,245

0,348
-0.143
frijol

semillas de lentejas y altramuz amarillo (en promedio 8,16 mmol Trolox

equivalentes g DM - 1). En el haba, altramuces azules, blancas, y andina, así
como frijol, DPPH exhibieron un nivel de ca. 7-5 mmol Trolox equivalentes g
DM-1. El valor más bajo DPPH se determinó en los de chícharo, garbanzo, y
cHÍCHARO

-0,437 *
0,503 *

0,689 *

0,423 *

0,597 *

0,389

0,374

0,278
semillas de guisante (respectivamente, 3,89, 2,97, 2,73 mmol Trolox
-

- equivalentes de g DM - 1) ( Mesa  4 ). En el presente estudio, no hubo

correlaciones entre DPPH y cada polifenol (Tabla  5 ). En el caso de
0,628 *

0,495 *

0,567 *

0.589 *

0,648 *

quercetina, una correlación alta ( P < 0,05) se observó para el lupino blanco (-),
0,435

0,247

0,154

0,378
-0.374
Lenteja

altramuz amarillo, altramuz Andino, guisante, garbanzo, y haba común. A su

vez, una alta correlación ( P < 0,05) se encontró entre fenoles totales y DPPH
para las semillas de la blanco altramuz, guisante, garbanzo y. Hay informes
Garbanzo

de la literatura de una correlación moderada o incluso bajo entre fenoles y

-0.412
0,571 *

0,593 *

0,577 *

0,614 *

0,695 *
0,378

0,462

0,451

0,271

DPPH ured medi- con los métodos DPPH y ORAC en las semillas de lentejas
[ 34 ]. Sin embargo, algunos autores informan que la actividad medida con el
ensayo FRAP exhibió una fuerte correlación (más de 0,8) con compuestos
fenólicos y taninos condensada. Li et al. [ 35 ] Explicar que este fenómeno
-0,597 *
-0,535 *

-0,407 *
Guisante

-0.203
0,667 *

0,674 *

0,646 *
0,283

0,385

también se observa en otros productos alimenticios, que se relaciona con el

-

hecho de que los compuestos fenólicos pueden tener no sólo propiedades

antioxidantes. Potente activi- dad antioxidante, particularmente en relación
con el ácido linoleico, se exhibió por extractos acuosos y etanólicos de
lupino andino

cáscaras de lenteja, guisante, altramuz, o de frijol. Simultáneamente, estas

0,536 *

0,534 *

0,584 *

0,578 *

0,678 *

0,645 *
-0,578 *

0,378

0,234

0,457

preparaciones se han observado que tienen actividad anti-inflamatoria y una

bilidad capa- de la inhibición de 15-LOX selectiva, moderada COX-1 y COX 2
inhibición, así como forma camino- ciclooxigenasa inhibición [ 36 ]. Teniendo
en cuenta estas propiedades, semillas Fabaceae pueden ser considerados
como una fuente de nutrientes de alto valor, especialmente de proteínas, y
Tabla 5 Coeficientes de correlación entre las características medidas en semillas de leguminosas

tremosilla

pueden ser útiles en la mejora de la salud humana y la reducción del riesgo

0,618 *

0,524 *

0,616 *

0,598 *

0,578 *

0,637 *
-0,525 *

0,467

0,156

0,345

de incidencia de las enfermedades de estilo de vida, es decir, cáncer,

enfermedades degenerativas, obe- sidad, y la diabetes.
lupino blanco

0,598 *

0,674 *

0,556 *

0,578 *
-0,545 *
-0,451 *

-0,576 *
-0.364

-0.489

-0.278

* Las diferencias estadísticas ( P < 0,05) Variables

altramuz azul

0,567 *

0,697 *

0,736 *

0,587 *

0,587 *
-0,574 *
0,485

0,433

0,145

0,193

conclusiones
 Los inhibidores de tripsina

Dada su composición química única y muy rico composi- ción y alto valor
 pag-  ácido cumárico

nutricional, semillas de plantas leguminosas pueden ser un componente

 fenoles totales
 El ácido cafeico

 Ácido ferúlico
 La quercetina

importante de la dieta diaria. Sin embargo, el contenido de sustancias

 Met + Cys

 Los taninos

 Los taninos

biológicamente activas que hasta ahora han sido considerados como no

Proteína

 EAAI

DPPH

esenciales o incluso anti-nutricional

13
1394
puede promover la adecuación de las semillas para ser utilizados como alimentos
funcionales, que mejoran la salud, en particular para la prevención de la diabetes y la
obesidad, que determinan la calidad de vida de millones de personas en todo el
mundo. En este aspecto, las semillas de altramuz, que hasta ahora se han utilizado
principalmente como alimento para animales y en la actualidad están ganando
importancia como componente nutracéutico, se debe dar una atención especial.
Cumplimiento de las normas éticas
Conflicto de intereses Ninguna.
El cumplimiento de los requisitos de ética Este artículo no contiene ningún estudio con
sujetos humanos o animales.
Acceso abierto En este artículo se distribuye bajo los términos de la licencia Creative
Commons Atribución 4.0 Licencia Internacional ( http: //
creativecommons.org/licenses/by/4.0/ ), Que permite el uso ilimitado, distribución y
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se han realizado cambios.
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