UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS Y

BIOTECNOLOGÍA
PRODUCCIÓN DE METABOLITOS
NOMBRE: Jhoana Elizabeth Falcón
CURSO: Noveno “A”
AYUDANTE: Guadalupe Vaca

PRODUCCIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS DE PLANTAS

MEDIANTE EL CULTIVO IN VITRO

Aproximadamente 100 000 metabolitos son producidos por las plantas, siendo fuentes de
numerosas sustancias de interés comercial dando como resultado, la implementación en
grandes industrias como la farmacéutica, alimenticia, cosméticos.

A causa del descubrimiento de nuevas estructuras químicas con actividad biológica, gran
cantidad de especies vegetales en peligro de extinción, el incremento en la demanda de
productos naturales, se propone nuevas alternativas para la producción de metabolitos
secundarios.

IMPORTANCIA Y CLASIFICACIÓN DE LOS METABOLITOS

SECUNDARIOS

Los metabolitos secundarios son compuestos derivados del metabolismo primario, que
tienen múltiples funciones en las plantas como la defensa contra herbívoros, virus,
hongos, bacterias como sustancias alelopáticas, fitoalexinas o disuasorios nutritivos,
funciones fisiológicas, protectores de rayos UV, fuentes de principios activos de
medicamentos y productos químicos.

Los aromas, saborizantes y estimulantes de las especias, condimentos, infusiones y

bebidas como el café, el té y el chocolate, también se les atribuyen a metabolitos
secundario farmacológicamente activos, como la cafeína, teofilina y teobromina.

Los medicamentos se obtienen por síntesis químicas, sin embargo, la mayoría de las
estructuras están basadas en productos naturales, es decir que para la síntesis utilizan
precursores de origen natural y el resto son copias sintéticas de productos naturales.
Los compuestos secundarios de plantas de interés comercial según:

biosintéticas
Monoterpenos, sesquiterpenos,
Terpenos diterpenos, triterpenos, tetraterpenos y
Rutas esteroles

Ácidos fenólicos, cumarinas, flavonoides y

Compuestos fenólicos
taninos

Compuestos
Alcaloides y glucósidos cianogénicos.
nitrogenados

Los productos naturales según su aplicación

Por su aplicación

Alcaloides. cardenólidos,
Productos farmacéuticos
diterpenos y flavonoides

Productos utlizados como Antocianinos, betalinos,

pigmentos y en perfumería aceites de rosa y de jazmín

Productos con fines químicos Proteasas, vitaminas, lípidos,

y agroquímicos aceites, látex

CULTIVO IN VITRO PARA LA PRODUCCIÓN DE METABOLITOS

SECUNDARIOS.

El incremento en la demanda de productos naturales del mercado internacional le ha

concedido gran importancia la cultivo in vitro como fuente de metabolitos secundarios y
para el desarrollo de nuevas investigaciones bioquímicas relacionado con las rutas
metabólicas bajo un ambiente controlado.

Esta técnica se basa en cultivar plantas dentro de un frasco de vidrio en un ambiente

artificial, con dos características fundamentales, la primera la ausencia de gérmenes
(asepsia) y la segunda el control de factores que afectan el crecimiento (López, 2018).
 Imagen 1 Cultivo in vitro

Ventajas del cultivo in vitro

• Sustancias de utilidad como metabolitos secundarios en condiciones controladas

• Incremento en el rendimiento de metabolitos específicos
• Incrementa la productividad y reduce los costos al automatizar el proceso y
regular los procesos metabólicos
• Se puede establecer sistemas del control de la calidad del producto
• El proceso de extracción es más simple, rápido y eficiente
• Puede sintetizar proteínas foráneas como proteínas terapéuticas y antigénicas

Para la producción de metabolitos secundarios de plantas mediante cultivo in vitro se

utiliza tejidos diferenciados en las que están las suspensiones celulares y los callos.

Cultivo de células

Se utiliza para el estudio y la producción de metabolitos secundarios a fin de incrementar

la acumulación de un compuesto de interés, ha tenido un gran impacto en la producción
de sustancias bioactivas principalmente en suspensiones celulares a diferencia de del
cultivo de callos que a pesar de ser considerado un material vegetal para estudios
biosintéticos no lo es para la producción de metabolitos, debido a lento crecimiento y a
que no se puede escalar en biorreactores.

El desarrollo de sistemas de cultivo de células de plantas tiene como objetivo obtener alta
producción, productividad y rendimiento del producto mediante técnicas de biosíntesis.

Ventajas

• Permite la rápida multiplicación celular

 • Se puede realizar un escalado en biorreactores
• Se han detectado nuevas sustancias que no son sintetizadas por las plantas en su
hábitat natural

Desventajas

• Inestabilidad genética y fisiológica

• Pérdida del producto en el tiempo

Cultivos de órganos

Es una alternativa para la producción de metabolitos secundarios de plantas, los órganos

de mayor importancia son los brotes y las raíces, que pueden ser cultivados a gran escala.

Pueden producir sustancias de interés que no han sido obtenidos a partir de cultivos no
diferenciados, sin embargo, no puede producir todos los compuestos que se obtienen en
las hojas de las plantas en condiciones naturales

Ventaja

• Estable genéticamente en comparación de los cultivos de suspensiones celulares

y callos.

Desventaja

• No se obtiene todos los compuestos que se obtienen de las hojas de las plantas

En el cultivo de brotes se ha investigado como fuente de aceites esenciales, alcaloides,

flavonoides.

El cultivo de raíces se utiliza un método basado en la infección del tejido Agrobaterium

rhizogens, que da como resultado el desarrollo de raíces aéreas en el sitio de infección,
estas raíces aéreas tienen la ventaja de multiplicarse rápidamente y no necesitan
aplicación exógena de reguladores de crecimiento, además de ser posible escalar en
biorreactores

Se ha comparado el cultivo de raíces transformadas y no transformadas, mostrando que

las raíces transformadas crecen más rápido y tienen mayor ritmo de producción del
compuesto deseado, muestran buen crecimiento in vitro y producen igual o mayor
cantidad de metabolitos secundarios incluso de las plantas cultivadas en condiciones
naturales.
APLICACIONES DEL CULTIVO IN VITRO

• En el campo de la fitoquímica para estudios biogenéticos y enzimáticos como

fuente para el aislamiento de metabolitos secundarios
• Propagación de plantas de interés comercial en forma rápida, eficiente y en
grandes cantidades.
• Mejoramiento genético de plantas para la obtención de clones libres de
microorganismos patógenos
• Conservación de germoplasma.

Imagen 2. Ejemplos del uso del cultivo in vitro para la producción de metabolitos secundarios
de plantas
ESTRATEGIAS DESARROLLADAS PARA INCREMENTAR LA
PRODUCCIÓN DE METABOLITOS SECUNDARIOS DE INTERÉS

Selección de líneas celulares

Después de que se ha establecido el cultivo de células se selecciona los clones con un alto
ritmo de crecimiento y la producción de metabolitos de interés, ya que al principio la
población es heterogénea debido a un proceso continuo de cambios epigenéticos o
genéticos.

Exámenes microscópicos, macroscópicos y químicos son estrategias para la selección

líneas celulares.

Optimización de la composición del medio y las condiciones de cultivo

La optimización del medio y las condiciones de cultivo puede incrementar la

productividad del compuesto deseado, a pesar de que las condiciones de cultivo y
nutrientes no coinciden con las necesidades para la producción del compuesto de interés,
por lo que el desarrollo de un sistema de cultivo se realiza en dos etapas

La primera etapa para estimular el crecimiento de la biomasa, modificando los

componentes básicos del medio de cultivo como la concentración o naturaleza de
compuestos como el N, P, K, Ca, Mg u otras sustancias que intervienen en la ruta
metabólica del compuesto de interés y la segunda etapa para favorecer la biosíntesis del
metabolito deseado.

Existen otros fatores que afectan la concentración de metabolitos como el pH, la luz, la
temperatura, además de fatores externos como el número de subcultivos, el tipo y la edad
del explante.

Inmovilización celular

En la inmovilización celular la biomasa producida puede ser utilizada continuamente,

consiguiendo altos niveles de producción de biomasa, además de que las células pueden
ser separadas fácilmente del medio de cultivo.

Adición de precursores

La adición de precursores incrementa el potencial biosintético de las enzimas presentes

en el cultivo de células. Ejemplos de precursores fenilalanina, ácido benzoico, serina, etc.
Por lo tanto, los metabolitos secundarios pueden ser modulados por la adición de
precursores a sus rutas biosintéticas.

Elicitores

Es un término que se utiliza para denominar los factores físicos y químicos responsables
de las respuestas fisiológicas o morfológicas de las plantas, que según su origen y
estructura molecular se clasifican en físicos (déficit hídrico, temperaturas extremas,
anaerobiosis) o químicos (estrés iónico, presencia de contaminantes inorgánicos u
orgánicos), abióticos (dióxido de silicio, ácido jasmónico) o bióticos (extractos de
bacterias).

Los elicitores más usados en el cultivo in vitro para incrementar la producción de

metabolitos secundarios son, el metil jasmonato, los oligosacáridos, extractos de hongos
u organismos.

La elicitación es uno de los métodos más efectivos para inducir la expresión de genes
asociados a enzimas que sintetizan metabolitos secundarios como defensa para el ataque
de patógenos o daños en las plantas.

Recuperación del producto in situ

El uso de solventes y la adición de adsorbentes al cultivo de células, se utiliza para

incrementar la producción de metabolitos secundarios y para facilitar la separación de los
productos.

Biotransformación

La inmovilización de plantas y las preparaciones enzimáticas pueden ser usadas para la

producción de biofármacos a través de la biotransformación debido a que las enzimas de
las plantas pueden catalizar reacciones específicas o estereoespecíficas.

La biotransformación solo se utiliza en el cultivo de células de plantas y para productos

que tienen alto valor económico de interés comercial.

Escalado de la producción

En el escalado en biorreactores generalmente la productividad disminuye debido a los

cambios en el ambiente in vitro por lo que se ha desarrollado estrategias en biorreactores
modificados y sistemas de inmersión temporal. Se han aplicado diferentes diseños, sin
embargo, cumpliendo los mismos principios y los objetivos de incrementar la calidad y
manipular las condiciones de crecimiento de la biomasa, y la acumulación de metabolitos
secundarios.

Puede ser empleados para la producción de compuestos de interés farmacéutico.

Transformación genética

Se utiliza para el mejoramiento genético de los cultivos, transferencia estable y la

expresión de genes foráneos en plantas de interés medicinal.

Un sistema eficiente de transformación es mediante Agrobacterium rhizogenes para la

cual se debe tener una metodología de transferencia de ADN y un sistema de selección
de células o tejidos transformados para cada una de las fases del proceso de regeneración.

Ingeniería metabólica

En la ingeniería metabólica se han desarrollado métodos como la sobreexpresión de

enzimas, la canalización del flujo metabólico, creación de nuevas rutas en las redes
metabólicas existentes, para favorecer la acumulación de compuestos que no son
normalmente producidos en ciertas especies de plantas.

PERPECTIVAS DE LA PRODUCCIÓN DE METABOLITOS

La optimización de la producción a través del empleo de diferentes estrategias y el

desarrollo de nuevas estrategias permitirá obtener metabolitos secundarios en plantas con
aplicación comercial, bajos costos y en menor tiempo, lo cual será necesario para cubrir
el incremento en la demanda de metabolitos secundarios mediante el cultivo in vitro.

El conocimiento de las rutas metabólicas, la identificación de genes y enzimas que

participan en la síntesis de un compuesto de interés permitirá obtener plantas altamente
productoras, proporcionando la posibilidad de conseguir compuestos novedosos.

BIBLIOGRAFÍA

Lopez, A. (2018). Técnicas de cultivo in vitro. Recuperado de:

https://issuu.com/fredylopfer/docs/in_vitro

Pérez, A &Jiménez, E. (2011). Producción de metabolitos secundarios de plantas

mediante el cultivo in vitro. Biotecnología Vegetal (11)(4), 195 - 211