CODIGO: 201-300-PRO05-FOR03

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR

VERSIÓN: 1
GUIA DE LABORATORIO
ASIGNATURA: QUÍMICA ANALITICA

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS NATURALES Y MEDIO AMBIENTE

GUÍA DE LABORATORIO No. 6

1. TEMA: CROMATOGRAFIA DE PAPEL

2. OBJETIVOS
2.1. Estudiar el concepto de separación física de compuestos orgánicos usando
cromatografía de papel
2.3. Reconocer los factores que afectan a la cromatografía, tales como, fase móvil
y fase estacionaria

3. INTRODUCCIÓN
Todas las reacciones químicas son formadas por precursores que reaccionan
entre sí para formar uno más productos, siendo la cantidad y la identidad de estos
productos influenciada por la relación estequiométrica de cada reacción.
Independiente del nivel de complejidad, sea en el laboratorio de síntesis orgánica,
industria farmacéutica, o industria petroquímica, por nombrar algunos, la separación
de cualquier analito de una reacción es importante para aprovechar cualquier
proceso químico. En química analítica, la separación purifica el analito del resto de
los componentes de la mezcla cruda de la reacción utilizando procedimientos
físicos, reduciendo la cantidad de interferencias, y permitiendo un análisis completo
del compuesto de interés.
La cromatografía es un método muy utilizado para la separación de los
productos de una reacción química, así como para identificación y determinación de
nuevos compuestos. Es una técnica en la cual las moléculas de una mezcla son
separadas, con el auxilio de una fase móvil, dependiendo de la velocidad de elución
con que atraviesan una fase estacionaria. La fase estacionaria es una fase fija ya
sea en un columna, papel, aluminio, u otra superficie plana. Por otro lado, la fase
móvil es la fase que se mueve a través de la fase estacionaria, llevando consigo la
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mezcla cruda de los productos de la reacción. La fase móvil puede ser liquida o
gaseosa.

Figura 1. Representación de una cromatografía de papel

4. PROCEDIMIENTO
4.1. Materiales
- Recipiente transparente de boca ancha con tapa
- Palillos grandes o madera de chuzo
- Recipientes pequeños
- Jeringa de 5 cm3
- Regla
- Tijeras
- Cinta adhesiva
- Dulces tipo sparkies, m&m, o cualquier dulce con color
- Palillos de madera
- Papel de filtro de café grande
- Solución salina (0,1 % p/v): Para preparar esta solución disuelva una cuchara
de té de sal en 1 litro de agua, agite bien hasta completa disolución
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4.2. Preparación del papel de cromatografía

Use un papel de filtro de café grande y corte una tira cuyo de entre 25-50
mm. Corte los extremos de esta tira para maximizar la longitud del papel y formar
un rectángulo de unos 7 centímetros de largo, o del tamaño adecuado para que
toque el fondo del recipiente con tapa. En uno de los extremos de la tira de papel,
pegue una tira estrecha de cinta adhesiva para fortalecer el borde superior del papel.
Presione la tira de papel sobre una superficie limpia y seca, trace una línea de lápiz
en el papel de modo que esté a 10 mm de la base, en el extremo opuesto de donde
se encuentra la cita adhesiva. Esta es la línea sobre la que se colocan los colores.

Figura 2. Representación del papel cortado

4.3. Preparación de las soluciones

Clasifique los dulces según el mismo color. Coloque los dulces del mismo
color en un recipiente y agregue una pequeña cantidad de agua (1 cm3, aprox.).
Agite recipiente y los dulces durante 2 minutos hasta que el agua tome el color del
dulce. Separe la solución coloreada en un recipiente limpio y seco. Etiquete el tubo
y su contenido con el nombre del color.
Repita el proceso de extracción para cada color del dulce
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4.4. Plantando los colores

Con un palillo de madera limpio coloque una pequeña gota del extracto en la
línea de lápiz a 10 mm del borde del papel. Si el color no es intenso, deje secar la
mancha y repita la aplicación hasta que el color sea visible. Repita el procedimiento
y coloque en la línea de lápiz todos los colores extraídos de los dulces. Continúe
manchando hasta que no quede espacio a lo largo de la línea del lápiz, cuidado
para no mezclar los colores. Seque bien las manchas.

Figura 3. Ejemplo de semillas en el papel de filtro

4.5. Realizando la cromatografía

Una vez que las manchas estén secas, fije un palito de madera en la parte
superior de la tira de papel, junto a los pedazos de cinta, para que el papel quede
suspendido en la boca del recipiente (Figura 1). Intente dar un pequeño ajuste para
que se sujete bien (esto servirá de soporte para el papel durante la cromatografía).
La longitud del papel debe ser tal que la parte inferior esté aproximadamente entre
2-5 mm de la superficie inferior del frasco de vidrio.
Retire el papel y sus accesorios del frasco y vierta un pequeño volumen de
la solución acuosa de cloruro de sodio (fase móvil) en el frasco de vidrio hasta una
profundidad de 5 mm. Baje la tira de papel en la solución, con atención para que
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toque la solución de forma uniforme, y cúbralo con la tapa. No mueva el frasco y su

contenido durante la cromatografía.
Cuando la fase móvil se haya movido una distancia apreciable por encima de la
línea del lápiz (esto dependerá de varios factores, incluida la temperatura y el tipo
de papel utilizado), retire el papel del frasco y seque rápidamente el papel, puedes
usar un secador de pelo. No deje que la solución llegue hasta la parte donde está
la cinta. Los colores y estándares separados deben verse claramente en el papel.

Figura 4. Representación hipotética del resultado de la cromatografía

4.6. Medidas y comparación

Con el resultado debe ser fácil ver, a simple vista, el movimiento hacia arriba
en el papel de los diferentes colores. Sin embargo, puede ocurrir que la fase móvil
no se desplace uniformemente por el papel, por lo tanto, será necesario realizar
mediciones para realizar la corrección.
Mida la distancia promedio (mm), que la fase móvil se elevó por encima de la
línea del lápiz en la parte inferior del papel (llame de "A"). Para cada componente
del color, mida la distancia (mm) que el componente se mueve por encima de la
línea de base del lápiz (sean "C1", "C2", "C3", etc., los diferentes colores)
Coloque los resultados en la siguiente tabla, realizando el cociente Cn/A
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Tabla 1. Resultados de la medición de la cromatografía de papel

Color Cn (mm) Cn/A (mm)

5. Preguntas de profundización
5.1. ¿Cuál es la función de la solución salina?
5.2. ¿Cuál es la función del papel de filtro de café?
5.3. Organice los colores según el índice Cn/A, ¿Existe alguna correlación
entre los colores y la distancia en el papel?
5.4. ¿Cuál es la naturaleza fisicoquímica de los colores de los dulces?

6. BIBLIOGRAFÍA.
 Douglas A. Skoog, Donald M. West, F. James Holler, Stanley R. Crouch,
(2013), Ninth Edition, Fundamentals of Analytical Chemistry, Cengage
Learning. USA.
 Chang, R (2007), química orgánica. 9na Edición. Editorial McGraw –Hill.
México.