PRACTICA N 2 MITOSIS I.

INTRODUCCIN

El ciclo celular es el perodo comprendido entre la formacin de una clula, por divisin de otra precedente, y el momento en que ella misma se divide para originar dos clulas hijas. El ciclo celular se puede dividir en dos grandes perodos: interface y mitosis, cada uno de los cuales se subdivide en varias fases o etapas. La interface se encuentra subdividida en 3 etapas: a) Perodo G1. Comienza la sntesis de RNA y protenas, la cual perdura durante toda la interface. b) Perodo S donde ocurre la duplicacin del ADN. c) Perodo G2, fase postsinttica que va desde el final de S hasta el comienzo de la mitosis. Por otro lado, en la mitosis ocurren 2 procesos altamente sincronizados: la cariocinesis (divisin del ncleo) y la citocinesis (divisin del citoplasma). En la cariocinesis se reconocen distintas fases: profase, metafase, anafase y telofase. Algunos autores reconocen a la prometafase como un estadio entre profase y metafase. La mitosis finaliza con la citocinesis, la cual es diferente en animales y vegetales. Para estudiar los parmetros del Ciclo Celular se utilizan tejidos en constante renovacin (tejidos en proliferacin), en los que la duracin total del ciclo con determinadas condiciones es constante. En este prctico se utilizar un tejido meristemtico vegetal, races de Allium cepa (cebolla), por su simplicidad de manejo y el gran tamao de sus clulas. Cuando las clulas de un meristemo de Allium cepa se encuentran en equilibrio proliferativo, la duracin de cada uno de los perodos del ciclo celular permanece constante. De esta forma, el nmero de clulas que estn en una fase determinada es tambin constante y proporcional a la duracin (en tiempo) de la misma. Teniendo en cuenta esto se puede calcular la duracin relativa de las diferentes fases del ciclo, es decir de la interface y de la mitosis, as como de cada una de las etapas de sta.

II.

OBJETIVOS Diferenciar las distintas fases de la mitosis. Explicar las caractersticas ms significativas de cada una de las faces mitticas Explicar con correccin un mnimo de tres fases sucesivas de la mitosis.

Realizar la operacin para el estudio de la mitosis en otras especies biolgicas. III. MATERIALES Y METODOS

Materiales vaso fresco de vidrio; de boca ancha palillos de dientes bistur pinza de punta fina papel absorbente goteros tijera de punta fina vidrio de reloj porta y cubre objetos colorante: carmn actico (1 g de carmn, 50 ml de ac. actico y 50 ml de agua destilada) fijador carnoy microscopio compuesto Muestra Bulbo de cebolla Procedimiento Una semana antes de realizarse el experimento escoja algunos bulbos de cebolla fresca e inserte tres palillos de dientes en sus partes laterales. Colquelas sobre un vaso de agua de manera que la posicin inferior del bulbo, se mantenga en contacto permanente con la superficie del agua. evite que se seque, manteniendo el nivel de agua. Cuando las races han alcanzado un tamao adecuado (2 o 3 cm), extraiga la cebolla del vaso, seleccione una raz y corte con una navaja de afeitar los ltimos 3 mm del extremo (zona meristematica). Coloque el fragmento de la raz en un vial conteniendo fijador carno por 30 minutos. Retire el fragmento de la raz del vial y colquela sobre una luna de reloj que contenga 2 o 3 gotas de carmn actico y lleve el calor del mechero hasta que entre en ebullicin por espacio de 15 segundos.

 Retire el fragmento de raz con una pinza de punta fina y colquela sobre un porta objetos y agrguele una gota de carmn actico. Tape la preparacin con una laminilla cubre objetos y sobre este ponga un papel absorbente. presione el cubre objetos con la yema del dedo pulgar y luego con la extremidad plana de un lpiz y presionar un poco mas fuerte hasta convertir el material del porta objetos en una capa delgada (squash). Al realizar esta operacin tenga cuidado para no romper el cumbre objetos. Limpie el exceso del colorante del porta objetos con papel higinico y lleve el preparado al microscopio para su observacin a menor y mayor aumento. Identifique las diferentes fases de la divisin celular, analice, explique y esquematice.

IV.

RESULTADOS Durante la prctica, donde estudiamos clulas en proceso de mitosis en la raz de la cebolla encontramos todas las fases de replicacin anafase, telofase, metafase, profase y diacinesis logrando ver las diferentes formas en la que el ncleo y sus cromosomas se ven en este tipo de proceso celular.

INTERFASE: Ncleos en interface. La cromatina aparece bastante homognea, a excepcin de zonas ms claras que corresponden a los nuceolos.

PROFASE: La cromatina comienza a condensarse. A medida que avanza este estadio desaparece el nucleolo. Los cromosomas aparecen como filamentos delgados.
Profase tarda Profase temprana

 METAFASE: Cada cromosoma, integrado por dos cromtidas hermanas, se dispone con su centrmero en el plano ecuatorial.

ANAFASE: Las cromtidas hermanas se separan y comienzan a migrar hacia los polos opuestos de la clula. Ahora los cromosomas se observan formados por una sola cromtida, con los centrmeros dispuestos hacia los polos y los telmeros hacia el centro de la clula.
Anafase tarda Anafase temprana

TELOFASE: No es posible individualizar los cromosomas. La cromatina comienza a descondensarse en ambos ncleos hijos.
Telofase tarda Telofase temprana

DISCUSIN DE RESULTADOS: En la mitosis, se llegaban a distinguir un poco los cromosomas tras el proceso de tincin

que llevaron a cabo, posteriormente fijando con carmn actico el portaobjetos debido a que se observaban claramente todas las fases de la mitosis. Como se describi en los resultados y ya que se pusieron las observaciones e imgenes en

orden del ciclo celular se puede observar como estas clulas se encontraban en continua divisin para su replicacin o divisin celular, cuya finalidad como se observ en las imgenes es el dar origen a dos clulas hijas con igual dotacin de cromosomas.

CONCLUSIN Durante esta prctica, se estudi e identificaron los principales cambios morfolgicos que se presentan durante la profase, metafase, anafase, telofase y citocinesis en clulas meristmaticas de races de cebolla Allium cepa (cebolla), por su simplicidad de manejo y el gran tamao de sus clulas. La preparacin present el aspecto de una dispersin de clulas por todo el campo que abarca el microscopio. Se observaron clulas en distintas fases o estados de divisin celular. Con esta tcnica de tincin se ven los cromosomas impregnados por el carmn actico en color rosado. SUGERENCIAS Se recomienda realizar bien el procedimiento de tincin ya que es muy importante para lograr observar claramente las diversas fases de la mitosis. Tambin se sugiere tener cuidado en el momento de presionar el cubre objetos, ya que este se puede romper; o en todo caso podemos estropear nuestra muestra de raz de cebolla Usar mascarilla en el momento de realizar la coloracin, ya que el acido actico emite olores fuertes.

BIBLIOGRAFIA PIERCE, BENJAMN A. 2006. Gentica un enfoque conceptual.2 edicin. Editorial Panamericana. Madrid Espaa. STRICKBERGER.1982. Genetica.2 Edicin. Ediciones OMEGA. S.A. Espaa WEBGRAFIA http://www.iespando.com/web/departamentos/biogeo/2BCH/PDFs/18Mitosis.pdf http://www.jdenuno.com/PDFfiles/Mitosis.pdf http://www.agro.unlpam.edu.ar/catedraspdf/biologia2010/19%20LABORATORIO%20Mitosis%202010.pdf http://biodeluna.wordpress.com/2010/01/16/practica-mitosis-lab-4eso/ http://www.unicartagena.edu.co/librose/LABORATORIO%20N209.%20MITOSIS.pdf http://www.amemi.org/Docs/simposia_biologia/carteles/36_OBSERVACION_DE_LA_ MITOSIS_EN_C%C3%89LULAS_MERISTEM%C3%81TICAS.pdf