Práctica 1: Factores que influyen en las separaciones cromatograficas

1/03/2021
6FV1 Eq.6
Hernández Hernández Alexa Fernanda
Hernández Hernández Elena Angélica.
Labastida Espinosa Karen Belen

Objetivos:
General:
● Analizar la influencia de algunos factores que afectan las separaciones cromatográficas.
Específicos:
● Demostrar el efecto de la polaridad del disolvente.
● Demostrar el efecto del volumen de muestra aplicada.
● Demostrar el efecto de concentración de la muestra.
● Demostrar el efecto de la naturaleza del disolvente de la muestra.
● Analizar la presencia de otros analitos

Resultados:

Experimento 1: Efecto de la polaridad del disolvente

Experimento 2: Efecto del volumen de muestra aplicada

Experimento 3: Efecto de concentración de muestra

Experimento 4: Efecto Matriz

a) Efecto de la naturaleza del disolvente b) Presencia de otros analitos

Discusión de resultados:

Las separaciones cromatográficas están basadas en el reparto diferencial de los solutos entre la
fase móvil y la fase estacionaria, cuando la muestra y la fase móvil entran en contacto con la fase
estacionaria, entran en juego los distintos tipos de interacciones moleculares de cada uno de los
componentes.
Tanto para el colorante rojo de metilo como para sudan I, el Rf disminuyó conforme a la proporción
de hexano en el disolvente aumentaba y el de acetato de etilo disminuye, esto ya que , al ser
moléculas polares, al aumentar el carácter no polar de la fase móvil, las interacciones de la silica gel
crecieron, ocasionando un retardo en la elución.

Para evidenciar el efecto de matriz en la cromatografia en capa fina, utilizamos rojo de metilo en
diferentes disolventes (matrices) ambos tienen diferentes polaridades por lo que el colorante tiene
mayor solubilidad en metanol que en el agua, pero ambos, menor que en el acetato de etilo, por lo
cual se observan manchas con el mismo Rf, pero diferente intensidad

Se observo la presencia de otros analitos en el seno de la muestra, cuando el rojo de metilo con
NaCl, observamos que la sal tiene interaccion con fase eluyente, ya que ambos compuestos son
polares, lo que provoca una mancha asimetrica, mientras que la sacarosa al ser una molecula
grande, impide que el colorante eluya como debe de ser, provocando de igual manera una asimetria.

Conclusiones:

● A mayor polaridad mayor desplazamiento de la muestra

● El ancho de la banda es directamente proporcional al volumen de muestra aplicado.
● A mayor concentración mayor asimetría en la mancha.
● La interacción analito-fase estacionaria depende de la afinidad del analito por la fase Móvil.
● Se presenta una competencia entre analitos.

Bibliografías:

Melina. A, Soberón. J. R, Sampietro. D. A, y Vattuone. M. A. Cromatografía; Conceptos y Aplicaciones; Facultad de Ciencias

Naturales; https://ri.conicet.gov.ar/bitstream/handle/11336/75465/CONICET_Digital_Nro.3655a360-b03b-44c8-8519-
bc747d073f7c_A.pdf?sequence=2&isAllowed=y