Lectura Previa N°2

bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.07.30.227553 ; esta versión publicada el 30 de julio de 2020.
El titular de los derechos de autor de esta preimpresión (que

no fue certificado por revisión por pares) es el autor / financiador, quien ha otorgado a bioRxiv una licencia para exhibir la preimpresión a perpetuidad. Está hecho
disponible bajo un Licencia internacional CC-BY-NC-ND 4.0 .
El ADN mitocondrial circulante es un indicador temprano de enfermedad grave y mortalidad por COVID-19
Davide Scozzi 1,12; Marlene Cano 2,12; Lina Ma, MS 2; Dequan Zhou 1; Ji Hong Zhu 1 ,; Jane A O'Halloran 3; Charles Goss 4; Adriana
M. Rauseo 3; Zhiyi Liu 1; Valentina Peritore 8; Monica Rocco 9; Alberto Ricci 10; Rachele Amodeo 11; Laura Aimati 11; Mohsen
Ibrahim 1,8; Ramsey Hachem 2; Daniel Kreisel 1; Philip A. Mudd 5; Hrishikesh S. Kulkarni 2,6,13 * y Andrew E.
Gelman 1,7,13 *.
1 División de Cirugía Cardiotorácica, Departamento de Cirugía, Divisiones de 2 Medicina pulmonar y de cuidados intensivos, y 3 Enfermedades
Infecciosas, Departamento de Medicina, 4 Departamento de Bioestadística,
5 Departamento de Medicina de Emergencia, 6 Departamento de Microbiología Molecular, 7 Departamento de Patología e
Inmunología, Facultad de Medicina de la Universidad de Washington, St. Louis, Missouri, Estados Unidos. 8 División de Cirugía
Torácica y 9 Anestesiología, Departamento de ciencia médico-quirúrgica y medicina traslacional, 10 División de Neumología,
Departamento de Medicina Clínica y Molecular, 11 Sección de citometría de flujo de análisis de laboratorio, Universidad Sapienza
de Roma, Italia
12 Estos autores contribuyeron igualmente como primeros autores
13 Estos autores contribuyeron igualmente como autores principales.
* Correspondencia: agelman@wustl.edu (AEG) hkulkarn@wustl.edu (HSK)
1
bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.07.30.227553 ; esta versión publicada el 30 de julio de 2020. El titular de los derechos de autor de esta preimpresión (que
RESUMEN
El ADN mitocondrial (MT-ADN) son ácidos nucleicos intrínsecamente inflamatorios liberados por órganos sólidos
dañados. Aún no se ha determinado si la aparición de ADN-MT libre de células está relacionada con resultados
deficientes de COVID-19. Aquí, cuantificamos MT-DNA circulante en muestras de plasma libre de células
recolectadas prospectivamente de 97 sujetos con COVID-19 en el momento de la presentación en el hospital. Los
MT-ADN circulantes estaban muy elevados en pacientes que finalmente murieron, requirieron ingreso en la UCI o
intubación. El análisis de regresión multivariante reveló que los niveles elevados de MT-ADN circulante son un
factor de riesgo independiente para todos estos resultados después de ajustar por edad, sexo y comorbilidades.
Además, encontramos que el MT-ADN circulante tiene un área bajo la curva similar o superior en comparación
con las medidas clínicamente establecidas de inflamación sistémica.
terapia. Estos resultados muestran que los niveles altos de MT-ADN circulante son un indicador potencial de resultados deficientes de
COVID-19.
PALABRAS CLAVE
COVID-19; Biomarcador; ADN libre de células; Mitocondrias; Síndrome de distrés respiratorio agudo; Inmunidad innata
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INTRODUCCIÓN
La enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19) es una infección del tracto respiratorio causada por el
síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2) que ha resultado en una emergencia de
salud global, causando una tensión considerable en los sistemas económicos, sociales y médicos (Lipman et
al. al., 2020). COVID-19 se presenta en un amplio espectro de gravedad. Aunque la mayoría de los
pacientes desarrollan una enfermedad leve o sin complicaciones, otros requieren hospitalización prolongada,
cuidados en la UCI e intubación para el apoyo respiratorio. En casos graves, los pacientes pueden
desarrollar síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA), tormenta de citocinas, insuficiencia
multiorgánica y muerte (Lipman et al., 2020). Aunque los mecanismos subyacentes de la enfermedad grave
por COVID-19 siguen sin estar claros, parece que se ve agravada por una respuesta inmune innata
exuberante (Vabret et al., 2020).
Trabajos anteriores han establecido que la infección viral puede desencadenar la necrosis celular, que a su vez inhibe la
replicación viral junto con la amplificación de las respuestas inmunes antivirales mediante la liberación de patrones
moleculares asociados al daño (DAMP) (Nailwal y Chan,
2019). Los DAMP, en particular, son potentes desencadenantes de respuestas innatas a través de la participación de
receptores de reconocimiento de patrones como los receptores toll-like (TLR) que impulsan la expresión de citocinas
inflamatorias y la presentación de antígenos virales (Kulkarni et al., 2020a). El ADN mitocondrial (MT-ADN) es miembro de un
grupo de DAMP mitocondriales (MT-DAMP) liberados por células lesionadas o moribundas y es reconocido por TLR9 debido
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a motivos CpG hipometilados codificados que recuerdan a un origen bacteriano ancestral (Zhang et al., 2010). Se ha
demostrado previamente que los niveles de MT-ADN están elevados en el plasma de pacientes que desarrollan SDRA y
disfunción multiorgánica durante la sepsis, así como durante una lesión estéril que incluye traumatismo, choque
hemorrágico e isquemiareperfusión (Faust et al., 2020; Hauser et al. al., 2010; Nakahira et al., 2013; Puskarich et al.,
2012; Scozzi et al., 2019; Simmons et al., 2013). La liberación de MT-ADN a menudo va acompañada de la liberación de
otros MT-DAMP, como péptidos N-formilados, citocromo cy cardiolipina, que en conjunto involucran múltiples TLR y el
receptor-1 del péptido Nformilado que a su vez no solo inducen citocinas inflamatorias. expresión (Grazioli y Pugin, 2018;
Wu et al., 2019; Zhang et al., 2014), sino también la generación de especies reactivas de oxígeno y la facilitación del
tráfico y activación de neutrófilos (Dorward et al., 2017; Nakayama y Otsu, 2018; Scozzi et al., 2019). A través de estos
efectos, los MT-DAMP pueden contribuir directamente a la lesión pulmonar aguda y la inflamación sistémica (Zhang et al.,
2010). Dado que el SDRA secundario a la infección por SARS-CoV2 también está relacionado con la lesión del tejido
pulmonar y la activación de las células inmunitarias (Mangalmurti y Hunter, 2020), preguntamos si los niveles elevados de
MT-ADN circulante podrían usarse como un indicador de riesgo para el desarrollo de enfermedades graves. enfermedad.
Aquí, demostramos que los pacientes con COVID-19 con altos niveles circulantes de ADN-MT son más propensos a requerir
intubación y cuidados a nivel de la UCI y tienen un mayor riesgo de muerte. Además, la cuantificación de MT-ADN como
predictor de resultados deficientes de COVID-19 es comparable o mejor que los indicadores de inflamación comúnmente
utilizados en la práctica clínica actual, así como ciertos marcadores inmunes emergentes.
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RESULTADOS
Participantes y datos descriptivos
Se evaluó la elegibilidad de un total de 107 sujetos desde el 26/03/2020 hasta el 26/04/2020. De estos, 97 sujetos adultos
con COVID-19 confirmado por laboratorio se incluyeron en nuestro estudio ( Tabla 1, Figura 1). Se excluyeron 10 sujetos
por no contar con muestras del día de la presentación. La mediana de edad de la población de nuestro estudio fue de 65
años (54-73). Entre estos sujetos, el 55,6% (54/97) eran hombres, el 77,3% (75/97) eran afroamericanos, el 46,4% (45/97)
eran obesos (IMC ≥ 30) y el 46,3% (45/97) tenían antecedentes de tabaquismo positivos. El tiempo medio de seguimiento
fue de 81 días (74-87).
Datos de resultados
El resultado primario de mortalidad se observó en el 25,8% (25/97) de los sujetos de nuestro estudio ( Tabla 1). Los que
murieron eran mayores [76,2 frente a 61,1 años, OR 1,08 (1,04-1,13), p =
0,0003], tenían más probabilidades de ser fumadores [64% versus 40,3%, OR 2,63 (1,04-7), p =
0,04] y tienen una mayor proporción de diabetes mellitus tipo 2 [72% frente a 45,8%, O
3,04 (1,17-8,64), p = 0,02], enfermedad de las arterias coronarias [48% versus 19,4%, OR 3,8 (1,44-
10,34), p = 0,007] y 2 o más comorbilidades [84% versus 56,9%, OR 5,54 (1,72-
24,91, p = 0,009] en el análisis univariado ( Tabla 1).
56,7% de los sujetos con COVID-19 (55/97, Tabla 2) requirió una admisión en la UCI. Estos sujetos eran mayores
[71 frente a 54,4, OR 1,1 (1,06-1,15), p <0,0001] y tenían más probabilidades de tener diabetes mellitus tipo 2
[65,5% frente a 35,7%, OR 3,41 (1,49-8,07), p =
5
0,004] y 2 o más comorbilidades [72,7% versus 52,4%, OR 2,66 (1,14-6,38), p =
0.02]. El 25,8% (25/97) requirió ventilación mecánica invasiva como tratamiento de la insuficiencia respiratoria aguda.
La principal característica clínica asociada con un mayor riesgo de intubación fue la edad, con una mediana de 70 años
para los sujetos intubados en comparación con 61 años para los no intubados [OR 1,05 (1,01-1,09), p = 0,005] en el
análisis univariante, Tabla 3].
RESULTADOS PRINCIPALES
Los pacientes con COVID-19 con MT-ADN circulante alto tienen un mayor riesgo de mortalidad
Para evaluar los niveles de MT-ADN en pacientes con COVID-19, utilizamos un método de PCR cuantitativa in situ
previamente establecido (Scozzi et al., 2019) para medir la acumulación de fragmentos derivados del gen citocromo b
(MT-CYTB) codificado por mitocondrias dentro de la célula. plasma circulante libre. Los niveles plasmáticos de MT-CYTB
estaban elevados en los sujetos que murieron por COVID-19 [7.881 (6.897 - 8.488, n = 25)] en comparación con los que
sobrevivieron [7.082 (6.650 - 7.693), n = 72, p = 0.009, Figura 2A] y se asociaron con un mayor riesgo de mortalidad en la
regresión logística univariante (OR 1,960; IC del 95%: 1,236 -
3,28, p = 0,006). Para MT-CYTB, el área bajo la curva (AUC) para la mortalidad fue 0,68 (IC del 95%: 0,54 - 0,81, Figura 2B). En
la regresión logística multivariable, los niveles plasmáticos de MT-CYTB siguieron siendo un factor de riesgo independiente de
mortalidad cuando se ajustaron por edad, sexo y 2 o más comorbilidades (OR adj, 1,92, IC del 95% 1,154 - 3,355, p = 0,015, Tabla
4).
Es probable que los pacientes con COVID-19 con MT-ADN circulante alto requieran ingreso en la UCI e intubación
6
Los niveles plasmáticos de MT-CYTB estaban elevados en aquellos sujetos con COVID-19 que requirieron un ingreso en la UCI
[7.779 (6.882 - 8.257), n = 55] en comparación con los que no ingresaron en la UCI [6.856 (6.544 - 7.293), p <0,0001, n = 42, Figura
3A]. Los niveles de MT-CYTB se asociaron con la admisión en la UCI en la regresión logística univariante (OR 3,335, IC del
95%: 1,890 - 6,564, p <0,001). Para MT-CYTB, el AUC para la admisión en la UCI fue de 0,75 (IC del 95%: 0,65 - 0,85, Figura
3B). En la regresión logística multivariable, los niveles plasmáticos de MT-CYTB siguieron siendo un factor de riesgo
independiente para el ingreso en la UCI después de ajustar por edad, sexo y 2 o más comorbilidades (OR adj, 3,146, IC del 95%
1,652 - 6,972, p = 0,002, Mesa
5). En particular, también hicimos hallazgos similares para otro gen codificado por ADN mitocondrial MT-COX3 ( Figura
S1D y E, O adj. para edad, sexo y 2 o más comorbilidades, 1,561, IC 95% 1,170 - 2,188, p = 0,005, AUC de COX3
para ingreso en UCI 0,69, IC 95% 0,58 -
0,79).
De manera similar, los niveles plasmáticos de MT-CYTB estaban elevados en aquellos sujetos con COVID-19 que requirieron
intubación [8.192 (7.830 - 9.101, n = 25)] en comparación con aquellos que no requirieron intubación [6.963 (6.603 - 7.597), n = 72, p
<0,0001, Figura 4A]. Los niveles plasmáticos de MT-CYTB se asociaron con la intubación en la regresión logística univariante (OR
6,251, IC del 95%
3,010 - 16,110, p <0,0001). Para MT-CYTB, el AUC para la intubación fue de 0,86 (IC del 95%: 0,76 -
0,95, Figura 4B). En la regresión logística multivariable, los niveles plasmáticos de MT-CYTB siguieron siendo un factor de
riesgo independiente para la intubación (OR adj, 5.881, IC del 95% 2.814 - 15.520, p <0.0001, Tabla 6). Se observaron
hallazgos similares con MT-COX3 [ Figura S1F y S1G, O adj. para edad, sexo y 2 o más comorbilidades, 2.759, IC 95% 1.791
- 4.921, p <
0,0001, AUC para intubación 0,80 (IC del 95%: 0,69 - 0,91)].
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Los niveles circulantes de MT-ADN muestran una precisión similar o mejorada con respecto a las mediciones de inflamación
clínicamente establecidas que se usan típicamente en pacientes con COVID-19
Los niveles plasmáticos de MT-CYTB tuvieron un AUC similar para la mortalidad en comparación con los niveles de LDH, ferritina o
dímero D, y fueron mejores que la PCR extraída dentro de las primeras 24 horas de la presentación ( Figura 5A). Es importante
destacar que el AUC de los niveles plasmáticos de MT-CYTB fue superior a los niveles de PCR, LDH, ferritina y dímero D al predecir
la necesidad de una admisión en la UCI ( Figura 5B) o intubación Figura 5C). Se identificó un patrón similar para MT-COX3 en
comparación con los niveles de CRP, LDH, ferritina y dímero D para predecir la necesidad de una admisión en la UCI ( Figura S2B) pero
fue superior a estos marcadores clínicamente utilizados para la necesidad de intubación ( Figura S2C).
Los niveles circulantes de MT-ADN se correlacionan con otros marcadores emergentes de gravedad de COVID-19
Los niveles plasmáticos de MT-CYTB se correlacionaron moderadamente con los niveles medidos simultáneamente de IL-
6, que se ha implicado en la patogenia de COVID-19 [r = 0,389, IC del 95%: 0,194
- 0,554, p = 0,0001, n = 92, Figura 6A]. De manera similar, los niveles de MT-CYTB se correlacionaron altamente con sC5b-9 en
plasma, que es un marcador de activación del complemento y sugiere la formación de un complejo de ataque a la membrana
(MAC) [r = 0.49, 95% CI 0.31 - 0.63, p <0.0001, n = 95, Figura 6B]. MT-CYTB también se correlacionó con la proporción de
neutrófilos a linfocitos [r = 0,37, IC del 95%: 0,17 - 0,54, p = 0,0003, n = 90, Figura 6C]. Los niveles plasmáticos de MT-CYTB
tuvieron una precisión similar o mejorada en comparación con IL-6 para la mortalidad ( Figura S3A), Admisión en UCI ( Figura
S3B) e intubación Figura S3C).
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También observamos correlaciones significativas con otros biomarcadores que han sido implicados en la patogénesis de
COVID-19 como MIG [r = 0.31, 95% CI 0.11 - 0.49, p = 0.002, n = 93, Figura S4A], MCP-1 [r = 0,25, IC del 95%: 0,04 -
0,44, p = 0,01, n = 93, Figura S4B], IP-10 [r = 0,25, IC del 95%: 0,05 - 0,44, p = 0,01, n = 94, Figura S4C], IL1RA [r =
0,43, IC del 95%: 0,24 - 0,59, p <0,0001, n = 94, Figura S4D] e IL-2R [r = 0,28, IC del 95% 0,08 - 0,46, p = 0,005, n = 94, Figura
S4E]. De manera similar, los niveles de HGF se correlacionaron altamente con MT-CYTB en COVID-19 [r = 0.47, IC 95%
0.29 –0.62, p <0.0001, n = 94, Figura S4F].
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DISCUSIÓN
Aquí observamos que los niveles elevados de MT-ADN circulante son un factor de riesgo temprano e independiente de enfermedad
grave y mortalidad en pacientes hospitalizados con COVID-19, después de ajustar por edad, sexo y comorbilidades. Es importante
destacar que hicimos hallazgos similares para dos genes MT-DNA, MT-CYTB y MT-COX3, aunque este último objetivo no alcanzó
significación para el riesgo de mortalidad. Las razones de esta incongruencia no están claras. Sin embargo, en comparación con
MT-CYTB, generalmente detectamos números de copia más bajos para MT-COX3, lo que sugiere la posibilidad de que esta parte
del genoma de las mitocondrias sea más intrínsecamente inestable cuando se expone al plasma (Scozzi et al., 2019).
Aunque nuestros estudios no se diseñaron específicamente para identificar los mecanismos que impulsan la acumulación de
ADN-MT en sangre periférica, las correlaciones significativas entre LDH e IL-6 con los niveles de ADN-MT apuntan a un
posible papel deletéreo de la necrosis celular en la fisiopatología de COVID-19. La liberación de LDH y la producción de IL-6
son indicadores reportados de necrosis celular (Chan et al., 2013; Vanden Berghe et al., 2006). Se ha demostrado que una
forma específica de necrosis, la necroptosis, induce la liberación de mitocondrias dañadas (Maeda y Fadeel, 2014). La
necroptosis se caracteriza por la eventual pérdida de la integridad de la membrana plasmática debido a la actividad quinasa de
las proteínas que interactúan con el receptor (RIPK) 1 y RIPK3 (He et al., 2009) y se ha informado que actúa como un
mecanismo de defensa del huésped cuando la muerte apoptótica las vías están inhabilitadas por la infección viral (Cho et al.,
2009). Por ejemplo, en un modelo de ratón de infección por influenza, se demostró que la necroptosis inhibe la replicación viral
pero con consecuencias perjudiciales para la integridad del epitelio bronquial (Rodrigue-Gervais et al., 2014). En humanos,
tanto H5N1 como H1N1
10
Se ha demostrado que el síndrome de dificultad respiratoria aguda inducido por la influenza está asociado con la muerte
de células necróticas dentro del epitelio pulmonar distal (Gu y Korteweg, 2007; Mauad et al., 2010). Curiosamente,
recientemente se ha demostrado que el marco de lectura abierto de la proteína accesoria 3a (Orf3a) expresado en el
genoma altamente relacionado del SARS-CoV-1 induce necroptosis mediante la activación de RIPK3 (Yue et al.,
2018). El SARS-CoV-2 también expresa una proteína accesoria Orf3a (Bojkova et al., 2020). Sin embargo, aún no se ha
determinado si el SARS-CoV-2 Orf3a promueve la necroptosis. Cierta liberación de MT-ADN también puede resultar de la
activación de células inmunes innatas. Por ejemplo, los neutrófilos humanos después de la activación extruyen su ADN-MT
debido a la incapacidad de completar la mitofagia (Caielli et al., 2016). Además, las trampas extracelulares de neutrófilos
(NET), que se han encontrado en los pulmones de pacientes con COVID-19 (Zuo et al.,
2020), son ricas en MT-DNA (Yousefi et al., 2009). También se ha identificado que los neutrófilos se someten a
reprogramación metabólica en el contexto del SARS-CoV-2 (McElvaney et al., 2020). Además de los neutrófilos, las
plaquetas activadas también liberan mitocondrias, que a su vez pueden inducir la generación de NET (Caudrillier et al.,
2012), posiblemente contribuyendo a las complicaciones pulmonares protrombóticas observadas en pacientes con
enfermedad grave por COVID-19 (Middleton et al., 2020). La fuente y los mecanismos de liberación de MT-ADN en
respuesta a la infección por SARS-CoV-2 es un tema de investigación futura.
Actualmente se están evaluando múltiples biomarcadores clínicamente establecidos como LDH, ferritina, CRP y dímeros
D para evaluar el riesgo de deterioro clínico a partir de un diagnóstico de COVID-19 (Cummings et al., 2020; Luo et al.,
2020; McElvaney et al. ., 2020; Messner et al., 2020; Song et al., 2020; Wu et al., 2020) . Sin embargo, como productos
de la expresión génica
11
en respuesta a estímulos tanto agudos como crónicos, tienden a ser en gran medida medidas inespecíficas de
inflamación sistémica con la excepción de la LDH, un marcador de muerte celular. Sin embargo, las células
que sufren apoptosis también pueden liberar LDH, una forma predominantemente antiinflamatoria de muerte
celular (Kumar et al., 2018). Por el contrario, se acumulan observaciones de que las células necróticas
generan grandes cantidades de liberación de MT-ADN (Vringer y Tait, 2019). Además, se ha demostrado que
niveles altos de MTDNA se asocian con lesión pulmonar aguda, en múltiples cohortes independientes (Faust
et al., 2020; Huang et al., 2020; Nakahira et al., 2013). Aquí, Observamos que los niveles de MT-ADN son
aproximadamente 10 veces más altos en pacientes con COVID-19 que desarrollaron disfunción pulmonar
severa o finalmente murieron, lo que sugiere que es al menos un biomarcador tan sensible como otros
indicadores exploratorios y clínicamente establecidos utilizados en modelos de predicción. Para realizar las
mediciones de MT-ADN en plasma empleamos una técnica de ensayo de PCR rápida que tarda unos 60
minutos en completarse debido a la eliminación del paso de purificación de ADN. En entornos con recursos
limitados, esto puede ser especialmente importante dada la necesidad actual de identificar a los sujetos con
mayor riesgo de deterioro clínico. Además, los ensayos basados en PCR que miden el ADN-MT tienden a
ser menos costosos y no necesitan equipos especializados, lo que facilita su implementación. Sin embargo,
Con base en nuestros datos de este estudio, no es posible determinar claramente si el ADN-MT circulante contribuye a la
patogénesis de la enfermedad COVID-19. Sin embargo, libre de células
12
El MT-DNA es en sí mismo un marcador signatario para la liberación de otros MT DAMP, que colectivamente impulsan la
expresión de citocinas proinflamatorias a través de la participación de PRR en células inmunes innatas (Kulkarni et al., 2020a).
Los MT DAMP impulsan la expresión de IL-6 por los macrófagos (Maeda y Fadeel, 2014) y estimulan la liberación de IL-8 por
los neutrófilos (Hauser et al., 2010). En particular, la IL-6 suprime la linfopoyesis (Maeda et al., 2005) mientras que la IL-8
promueve la liberación de neutrófilos de la médula ósea (Terashima et al., 1998) y, por lo tanto, posiblemente podría explicar
nuestra correlación observada entre los niveles y elevaciones de MT-ADN. en la proporción de neutrófilos a linfocitos. Además,
notamos una correlación significativa entre el complejo de ataque a la membrana y los niveles de ADN-MT. Se ha informado
que las mitocondrias extracelulares activan el complemento. Se ha observado que la lectina de unión a manano se une a las
mitocondrias libres de células, lo que resulta en el consumo de C3 en la sangre periférica de los ratones (Brinkmann et al.,
2013). Por lo tanto, es interesante observar que el consumo de C3 es un signo general de la actividad de la convertasa C3,
que sería un requisito previo para la generación posterior de componentes de ataque a la membrana (Leslie
y Nielsen, 2004). En ese sentido, la activación del complemento se ha implicado en la patogénesis del daño de órganos
diana relacionado con COVID-19, incluida la lesión pulmonar aguda (Java et al., 2020; Magro et al., 2020), con posibles
implicaciones terapéuticas (Kulasekararaj et al. al., 2020; Smith et al., 2020). Por último, se ha informado que los MT DAMP,
a diferencia de otros marcadores inflamatorios relacionados con los malos resultados de los pacientes afectados por
COVID-19, causan directamente disfunción pulmonar aguda y daño tisular (Lee et al.,
2017). La administración de MT DAMP en el torrente sanguíneo o las vías respiratorias pulmonares de roedores promueve la
lesión pulmonar aguda mediada por la quimiotaxis de neutrófilos y la generación de especies reactivas de oxígeno a péptidos
formilados mitocondriales (Hauser et al., 2010;
13
Scozzi et al., 2019). En estos estudios, se demostró que el inhibidor del receptor-1 del péptido formilado ciclosporina H inhibe la
lesión pulmonar aguda mediada por MTDAMP. Dados los ensayos clínicos en curso que se dirigen a los efectos de la IL-6, la
activación del complemento y los TNE en pacientes con COVID-19 (Desilles et al., 2020; Kulkarni et al., 2020b; Maes et al.,
2020; Rilinger et al., 2020) ; Smith et al., 2020) los enfoques futuros que bloqueen la necroptosis o el reconocimiento de MT
DAMP también podrían estar justificados.
Nuestro estudio tiene varias limitaciones. En primer lugar, no pudimos inscribir al mismo tiempo un grupo negativo para COVID19 con
enfermedad respiratoria grave. Nuestro centro, como muchos otros, experimentó una disminución en las presentaciones hospitalarias
por enfermedades distintas de COVID-19 durante este tiempo, lo que hizo que no fuera posible un grupo de control concurrente y
adecuadamente emparejado. Además, como nuestras muestras se extrajeron como parte de un estudio prospectivo de sujetos con
positividad conocida para SARS-CoV-2, cualquier otro grupo de control adecuadamente emparejado no sería completamente
comparable, ya que no se extrajo al mismo tiempo. Es importante destacar que no pretendemos proponer que los niveles de MT-ADN
sean diferentes en aquellos con COVID-19 en comparación con aquellos con lesión pulmonar aguda debido a otras etiologías.
Múltiples estudios emergentes sugieren que los biomarcadores pueden no ser diferentes en sujetos con lesión pulmonar inducida por
COVID-19 frente a aquellos debidos a otras etiologías (Sinha et al., 2020b). Sin embargo, la fuerza de nuestro estudio radica en un
ensayo que puede identificar potencialmente a los sujetos que presentan COVID-19 que es probable que desarrollen resultados
adversos durante el curso de su hospitalización, lo que se vuelve cada vez más importante cuando los recursos son limitados, como
desafortunadamente ha sido común durante este período. pandemia (Barrett et al., 2020; Litton et al., 2020; Moghadas et al., 2020) . En
segundo lugar, este estudio no evalúa cómo se correlaciona el ADN-MT
14
con carga viral en COVID-19, que es especialmente importante en el contexto de decidir cuándo intervenir con terapias
dirigidas (Catanzaro et al., 2020; Du y Yuan, 2020; Maggi et al., 2020). Por lo tanto, serán necesarios más estudios para
evaluar si puede ser un predictor de respuesta al tratamiento (Sinha et al., 2020a). En tercer lugar, la toma de decisiones
en la UCI cambió durante el transcurso de nuestra inscripción. Por ejemplo, hubo una tendencia a la intubación más
temprano en el curso de la enfermedad crítica en los primeros meses de la pandemia de COVID-19. Sin embargo,
identificamos al MT-DNA como un predictor de gravedad utilizando la mortalidad como criterio de valoración principal, y
luego la admisión en la UCI y el requisito de intubación como criterios de valoración secundarios independientes.
En resumen, demostramos que el MT-ADN medido al principio del curso de la enfermedad puede predecir el estado de
supervivencia, el requisito de cuidados intensivos y la necesidad de intubación endotraqueal. También mostramos que
los niveles de MT-ADN están asociados con biomarcadores exploratorios implicados en la patogénesis de la morbilidad
y mortalidad relacionada con COVID-19. Se necesitarán más estudios para discernir la contribución de MT DAMP
como MT-DNA a la patogénesis de COVID-19, así como para comprender si el MTDNA y otros mediadores
inflamatorios, como el complemento activado, actúan sinérgicamente para promover la lesión celular.
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EXPRESIONES DE GRATITUD
AEG cuenta con el apoyo del Programa de Investigación COVID-19 del Instituto de Ciencias Clínicas Traslacionales de la
Universidad de Washington (ICTS), la Fundación Judía Barnes, NIH R01HL094601 y NIH P01AI116501. HSH es apoyado por
NIH K08HL148510 y el Children's Discovery Institute. JAO, CG y PAM cuentan con el apoyo de la subvención ICTS de la
Universidad de Washington UL1TR002345 del Centro Nacional para el Avance de las Ciencias Traslacionales (NCATS) de los
NIH. El contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no necesariamente representa la opinión oficial de los NIH. La
obtención de muestras y la recopilación de datos de los resultados del paciente fueron respaldadas por la subvención
UL1TR002345 de los NIH de ICTS de la Universidad de Washington.
CONTRIBUCIONES DE AUTOR
Conceptualización: HSK, AEG, MI, Metodología: DS, MC, CG, HSK, AEG, Software: DS, MC, HSK,
Validación: JO, AAR, CG, Análisis formal: DS,
MC, VP, MR, AR, RA, LA, HSK, AEG, Investigación: LM, DZ, JZ, Curación de datos: LM, DS, MC, HSK,
AEG, Redacción - Borrador original: DS, MC, HSK,
AEG, escritura - revisión y edición: DS, MC, LM, JH, CG, AR, ZL, RH, MI,
DKHSK, AEG, Visualización: DS, MC, Supervisión: HSK, AEG, Administración de proyectos: HSK,
AEG, Adquisición de fondos: HSK, RRH, DK, AEG
DECLARACION DE INTERESES
Los autores declaran no tener conflictos de intereses
dieciséis
FIGURAS LEGENDARIAS
Figura 1. Diagrama de flujo de consorte que muestra la inscripción de pacientes, la asignación y
los resultados.
Figura 2. Niveles elevados de MT-ADN circulante predicen un mayor riesgo de mortalidad en pacientes con COVID-19. El
plasma para la determinación de los niveles circulantes de MT-CYTB se obtuvo en el momento de la presentación en el hospital ( A) Gráfico
de caja y bigotes de MT - Niveles de CYB en relación con el estado de mortalidad en pacientes con COVID-19. ( B) Curvas de
características operativas del receptor (ROC) para predecir el resultado de la mortalidad según los niveles de MT-CYTB. (** P <. 01)
Figura 3. Los niveles elevados de MT-ADN circulante predicen un mayor riesgo de necesidad de UCI en pacientes con
COVID-19. El plasma para la determinación de los niveles circulantes de MT-CYTB se obtuvo en el momento de la presentación en el
hospital ( A) Gráfico de caja y bigotes de MT - Niveles de CYB en relación al ingreso en UCI en pacientes con COVID-19. ( B) Curvas de
características operativas del receptor (ROC) para predecir el resultado de la UCI según los niveles de MT-CYTB. (**** P <. 0001).
Figura 4. Los niveles elevados de MT-ADN circulante predicen un mayor riesgo de intubación en pacientes con COVID-19. El
plasma para la determinación de los niveles circulantes de MT-CYTB se obtuvo en el momento de la presentación en el hospital ( A) Gráfico
de caja y bigotes de MT - Niveles de CYB en relación con la necesidad de intubación en pacientes con COVID-19. ( B) Curvas de
características operativas del receptor (ROC) para predecir el resultado de la intubación según los niveles de MT-CYTB. (**** P <. 0001).
17
Figura 5. Los niveles circulantes de MT-ADN tienen una precisión similar o mejorada con respecto a los biomarcadores
utilizados clínicamente para los resultados de gravedad en COVID-19. Se recolectaron muestras de sangre para la
determinación de los niveles de biomarcadores dentro de las 24 horas posteriores a la presentación en el hospital. Curvas de
característica operativa del receptor (ROC) para predecir el resultado ( A) mortalidad, ( B) admisión a la UCI y ( C) Intubación basada
en MT-CYTB (rojo), proteína C reactiva (CRP) (azul), ferritina (negro), láctico
Niveles de deshidrogenasa ácida (LDH) (púrpura) y D-Dimer (verde). El área bajo la curva (AUC) con IC del 95% y los
valores de P para los diferentes biomarcadores se resumen en las tablas correspondientes.
Figura 6. Los niveles circulantes de MT-ADN se correlacionan con otros marcadores emergentes de inflamación
encontrados en pacientes con COVID-19. Se recolectaron muestras de sangre para la determinación de indicadores inflamatorios
dentro de las 24 horas posteriores a la presentación en el hospital. Gráficos de dispersión que muestran la correlación entre
MT-CYTB y ( A) IL-6,
(B) C5b-9 (complejo de complemento terminal y ( C) Relación de neutrófilos a linfocitos (NLR).
18
MESAS
Tabla 1. Características demográficas y clínicas asociadas a la mortalidad
Total Viva Fallecido O para la mortalidad PAG

(n = 97) (n = 72) (n = 25) (IC del 95%) valor
Demografía
Edad, año a 65 (54-73) 61,1 (50,3-70,5) 76,2 (65,3-84,9) 1.08 (1.04-1.13) 0,0003
Hombre n (%) B 54 (55,6) 39 (54,17) 15 (60) 1,26 (0,5-3,27) 0,6
Afroamericano B 75 (77,3) 57 (79,2) 18 (72) 0,6 (0,24-2) 0.4
IMC a 29,1 (24,7-34,4) 28,9 (24,7-33,3) 30,9 (24,5-37,6) 1.02 (0.96-1.08) 0.4
Historial de tabaquismo B 45 (46,3) 29 (40,3) 16 (64) 2,63 (1,04-7) 0,04
Comorbilidades
HTN B 73 (75,2) 51 (70,8) 22 (88) 3,02 (0,91-13,71) 0,09
DMIII B 51 (52,5) 33 (45,8) 18 (72) 3,04 (1,17-8,64) 0,02
EPOC B 13 (14,4) 7 (9,7) 6 (24) 2,93 (0,85-9,89) 0,08
ERC> 2 B 37 (38,1) 24 (33,3) 13 (52) 2,16 (0,85-5,53) 0,1
ESRD B 8 (8,2) 4 (5,6) 4 (16) 3,23 (0,71-14,80) 0,1
CANALLA B 26 (26,8) 14 (19,4) 12 (48) 3,8 (1,44 -10,34) 0,007
CVA B 21 (21,6) 14 (19,4) 7 (28) 1,61 (0,54-4,53) 0,3
TEV B 16 (16,4) 14 (19,4) 2 (8) 0,36 (0,05-1,42) 0,1
2 o más 62 (63,9) 41 (56,9) 21 (84) 5,54 (1,72-24,91) 0,009

comorbilidades B
3 o más 50 (51,5) 32 (43,8) 18 (75) 3,21 (1,23-9,15) 0,02

comorbilidades B
Definición de abreviaturas: HTN = hipertensión; DMII = diabetes mellitus tipo II; EPOC = Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica; ERC> 2 = enfermedad renal crónica; ESRD =
enfermedad renal en etapa terminal; CAD = enfermedad de las arterias coronarias; CVA = accidente cerebrovascular; TEV = tromboembolismo venoso. Las variables continuas se
informan como mediana (rango intercuartílico).
Los valores de p indican diferencias entre pacientes con COVID 19 vivos y fallecidos.
a Valores presentados como mediana y rango intercuartílico
B Valores presentados como número y% del total de la columna
19
Tabla 2. Características demográficas y clínicas asociadas al ingreso en UCI
No UCI UCI O para UCI Valor p

(n = 42) (n = 55) (IC del 95%)
Demografía
Edad, año a 54,4 (38,5-64,2) 71 (63,8-78,9) 1,1 (1,06-1,15) <0,0001
Hombre n (%) B 19 (45,2) 35 (63,6) 2,11 (0,93-4,86) 0,07
Afroamericano B 33 (78,6) 42 (76,4) 0,88 (0,32-2,29) 0,8
IMC a 30,2 (25,3-34,8) 28,4 (24,4-33) 0,98 (0,92-1,03) 0,5
Historial de tabaquismo B 15 (35,7) 30 (54,5) 2,16 (0,95-5) 0,067
Comorbilidades
HTN B 29 (69) 44 (80) 1,79 (0,7-4,61) 0,2
DMIII B 15 (35,7) 36 (65,5) 3,41 (1,49-8,07) 0,004
EPOC B 6 (14,3) 7 (12,7) 0,87 (0,26-2,93) 0,8
ERC> 2 B 12 (28,6) 25 (45,5) 2,08 (0,89-5) 0,09
ESRD B 4 (9,5) 4 (7,3) 0,74 (0,16-3,33) 0,7
CANALLA B 8 (19,1) 18 (32,7) 2,06 (0,81-5,61) 0,1
CVA B 7 (16,7) 14 (25,5) 1,7 (0,63-4,94) 0,3
TEV B 8 (19,1) 8 (14,6) 0,72 (0,24-2,15) 0,5
2 o más 22 (52,4) 40 (72,7) 2,66 (1,14-6,38) 0,02

comorbilidades B
3 o más 16 (38,1) 34 (61,8) 2,63 (1,16-6,11) 0,02

comorbilidades B
Los valores de p indican diferencias entre los pacientes con COVID 19 no admitidos en la UCI y en la UCI.
20
Tabla 3. Características demográficas y clínicas asociadas a la intubación
No intubado Intubado O para intubación Valor p

(n = 42) (n = 55) (IC del 95%)
Demografía
Edad, año a 61 (50,35-71,9) 69,8 (63,9-78,5) 1.05 (1.01-1.09) 0,005
Hombre n (%) B 38 (52,8) 16 (64) 1,59 (0,63-4,19) 0,3
Afroamericano B 56 (77,8) 19 (76) 0,9 (0,31-2,81) 0,8
IMC a 28,9 (24,4-34,8) 29,7 (25-32,9) 1,0 (0,94-1,06) 0,9
Historial de tabaquismo B 32 (44,5) 13 (52) 1,35 (0,54-3,4) 0,5
Comorbilidades
HTN B 53 (73,6) 20 (80) 1,43 (0,49-4,70) 0,5
DMIII B 36 (50) 15 (60) 1,5 (0,6-3,87) 0.4
EPOC B 8 (11,1) 5 (20) 2,0 (0,55-6,71) 0,3
ERC> 2 B 25 (34,7) 12 (48) 1,73 (0,68-4,39) 0,2
ESRD B 5 (6,9) 3 (12) 1,82 (0,35-8,07) 0.4
CANALLA B 17 (23,6) 9 (36) 1,82 (0,66-4,82) 0,2
CVA B 14 (19,4) 7 (28) 1,61 (0,54-4,53) 0.4
TEV B 13 (18) 3 (12) 0,61 (0,13-2,14) 0,5
2 o más 44 (61,1) 18 (72) 2,01 (0,74-6,08) 0,2

comorbilidades B
3 o más 34 (47,2) 16 (64) 1,98 (0,79-5,25) 0,2

comorbilidades B
Los valores de p indican diferencias entre pacientes con COVID 19 no intubados e intubados.
21
22
Tabla 4. Análisis multivariado asociado a mortalidad
OR ajustado para la mortalidad Valor p

(IC del 95%)
MT-CYTB 1.921 (1.154 - 3.355) 0,015
Edad 1.074 (1.026 - 1.131) 0,003
Sexo masculino) 1.380 (0.460-4.362) 0.570
2 o más comorbilidades 2.578 (0.611-14.200) 0,225
N = 97 (25 eventos de mortalidad)
Tabla 5. Análisis multivariado asociado al ingreso en UCI

(IC del 95%)
MT-CYTB 3,146 (1,652 - 6,972) 0,002
Edad 1,113 (1,062 - 1,180) <0,0001
Sexo masculino) 2.060 (0.688 - 6.478) 0,201
2 o más comorbilidades 0,465 (0,113 - 1,713) 0,264
N = 97 (55 eventos de UCI)
Tabla 6. Análisis multivariado asociado a intubación

(IC del 95%)
MT-CYTB 5,881 (2,814 - 15,52) <0,0001
Edad 1.059 (1.008 - 1.119) 0,03
Sexo masculino) 1.339 (0.381 - 4.920) 0,649
2 o más comorbilidades 0,831 (0,166 - 4,368) 0,821
N = 97 (25 eventos de intubación)
23
MÉTODOS
Diseño del estudio, entornos y participantes
Este estudio de cohorte prospectivo utilizó muestras de plasma libre de células que se habían recolectado prospectivamente de 97
pacientes adultos con COVID-19 confirmado que se presentaron en el Hospital Barnes-Jewish desde el 15 de marzo de 2020 hasta el 24
de abril de 2020. El diagnóstico de COVID-19 se basó en una prueba de frotis nasofaríngea positiva.
Aprobación del estudio
El estudio fue aprobado por la Junta de Revisión Institucional de la Facultad de Medicina de la Universidad de Washington (ID #
202004091 y # 202003085). Se obtuvo el consentimiento informado por escrito de todos los sujetos.
Definición de resultado
Se siguió a los sujetos hasta el 29 de junio de 2020. El resultado primario fue la mortalidad. Los resultados secundarios incluyeron (a)
la necesidad de una admisión en la UCI y (b) intubación endotraqueal. Estos resultados se extrajeron utilizando un sistema de
intermediario honesto a partir de registros médicos electrónicos.
Recolección y procesamiento de muestras
El ADN-MT y otras citocinas se midieron en el plasma libre de células de los sujetos dentro de las primeras 24 horas después de la
presentación en el departamento de emergencias. Se recogieron muestras de sangre en recipientes al vacío que contenían EDTA (BD
Biosciences, San José, CA) y se sometieron a 2 rondas de centrifugación para generar plasma pobre en plaquetas. Primero a 2500 xg
durante 20 minutos para generar plasma. El plasma se retiró de los recipientes al vacío y se centrifugó a 13.000 xg en
24
tubos Eppendorf sin nucleasa (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA) durante 10 min para eliminar las plaquetas. Estas muestras
pobres en plaquetas se almacenaron inmediatamente a -80 ° C hasta su posterior análisis. Los marcadores clínicos medidos
simultáneamente (es decir, proteína C reactiva, ferritina, lactato deshidrogenasa, dímero D) se obtuvieron de la historia clínica
electrónica.
Cuantificación de MT-ADN
La cuantificación de MT-DNA Real-Time PCR se realizó en una máquina BioRad CFX-Connect utilizando una mezcla de reacción que
contenía 0,1 μ L de plasma libre de células, 10 μ L iQ SYBR Green Supermix (Bio-Rad), 0.5 μ L de 5 μ M cebadores directos e inversos y 8,9 μ
L H2O. Los ensayos se realizaron por triplicado en las siguientes condiciones: 1 ciclo a 95 ° C durante 3 min, luego hasta 40 ciclos a 95 °
C durante 10 segundos y 55 ° C durante 30 segundos y luego se realizó una curva de fusión desde 65 ° C a 95 ° C (0.5 ° C cada 5
segundos). Cebadores para el citocromo B humano (CYB; adelante 5 ′ -
ATGACCCCAATACGCAAAAT-3 ′ y retroceder 5 ′ - CGAAGTTTCATCATGCGGAG-3 ′), Subunidad III de la citocromo C oxidasa humana
(COX3: adelante 5 ′ - ATGACCCACCAATCACATGC-3 ′ y retroceder 5 ′ - ATCACATGGCTAGGCCGGAG-3 ′) fueron sintetizados por
tecnologías de ADN integrado (IDT, Coralville, IA). El número de copias se estimó mediante comparación con una curva de
amplificación estándar de PCR en tiempo real generada a partir de cantidades conocidas de ADN-MT humano purificado y analizado
después de un registro 10 transformación.
Cuantificación de citocinas y activación del complemento.
El plasma libre de células se analizó utilizando un panel humano Cytokine 35-Plex,
que proporcionan medición simultánea de 35 citocinas (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA). El ensayo se realizó de acuerdo
con las instrucciones del fabricante con cada muestra de sujeto realizada por duplicado y luego analizada en un instrumento
Luminex FLEXMAP 3D. La activación del complemento se evaluó en muestras de plasma libre de células (no
25
descongelado) utilizando el ensayo de C5b-9 soluble (sC5b-9) (equipo de ELISA BD OptEIA Human C5b-9, Franklin Lakes, Nueva Jersey, EE. UU.).
Análisis estadístico
Las variables continuas se informaron como mediana (rango intercuartílico). El valor predictivo de cada biomarcador se expresó
como área bajo la curva (AUC) derivada de la curva ROC relativa. Se calculó el coeficiente r de Spearman para estimar la correlación
entre dos variables continuas. Se utilizó un análisis de regresión logística univariante para calcular las razones de posibilidades no
ajustadas. Las variables independientes que se sabe que tienen una relación biológica con los resultados se seleccionaron a priori
con base en la literatura existente para el modelo logístico multivariado para calcular las razones de probabilidades ajustadas
(Lederer et al., 2019; Petrilli et al., 2020; Williamson et al.,
2020). Los diagnósticos del modelo se realizaron con el Criterio de información de Akaike corregido (AICc), la probabilidad logarítmica
y la desviación del modelo. Se calcularon todos los análisis estadísticos y todas las cifras se prepararon utilizando Graphpad Prism
8.4.2 (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA). Para todos los análisis, se consideró significativo un valor de p <0,05.
26
INFORMACIÓN SUPLEMENTARIA
Supl. Fig. 1. Tendencias comparables observadas usando MT-COX3 como una medida independiente de MT-DNA. (A) Gráficos
de dispersión que muestran la correlación entre Mediciones MT-CYTB y MTCOX3. Gráfico de caja y bigotes de MT - Niveles de
COX3 en relación con ( B) estado de mortalidad, ( D) Admisión en UCI y ( F) intubación en pacientes con COVID-19. Curvas de
característica operativa del receptor (ROC) para predecir el resultado ( C) mortalidad, ( MI) Admisión en UCI y ( GRAMO) intubación
basada en niveles de MT-COX3 en COVID-19. (** P <. 01, **** P <. 0001)
Supl. Figura 2. Comparación de los valores predictivos de MT-COX3 con los biomarcadores de gravedad de la enfermedad usados
clínicamente en la actualidad en pacientes con COVID-19. Se recolectaron muestras de sangre para la determinación de los niveles de
biomarcadores dentro de las 24 horas posteriores a la presentación en el hospital. Curvas de característica operativa del receptor (ROC) para
predecir el resultado ( A) mortalidad, ( B) admisión a la UCI y ( C) Intubación basada en niveles de MT-COX3 (rojo), proteína C reactiva (CRP)
(azul), ferritina (negro), ácido láctico deshidrogenasa (LDH) (violeta) y dímero D (verde). El área bajo la curva (AUC) con IC del 95% y los
valores de P para los diferentes biomarcadores se resumen en las tablas correspondientes.
Supl. Fig. 3. Comparación entre los valores predictivos de MT-CYTB e IL-6 sobre los resultados de la gravedad de la
enfermedad en pacientes con COVID-19. Curvas de característica operativa del receptor (ROC) para predecir el resultado ( A) mortalidad,
( B) admisión a la UCI y ( C) Intubación basada en MT-CYTB (rojo) e IL-6 (azul). El área bajo la curva (AUC) con IC del 95% y los
valores de P se resumen en las tablas correspondientes.
Supl. Figura 4 . Los niveles de MT-CYTB se correlacionan positivamente con los marcadores emergentes de gravedad de la enfermedad en
pacientes con COVID-19. Muestras de sangre para la determinación de indicadores inflamatorios.
27
se recogieron dentro de las 24 horas siguientes a la presentación en el hospital. Gráficos de dispersión que muestran la correlación entre
MT-CYTB y ( A) MIG ( B) MCP-1 ( C) IP-10 ( D) IL-1RA, ( MI) IL2R y ( F) HGF.
28
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5.
34
Figura 1
Figura 2
A B
figura 3
A B
****
Figura 4
Figura 5
A MORTALIDAD
UCI
100
80
60
40
20
0
0 20 40 60 80 100
C
TUBACION
Figura 6
C Neutrophil_Lympho correlaion con CYTB

40
30
PMN / L
20
10
0
10 6 10 8 10 10 10 12
Dato suplementario
Supl. Figura 1
B D F
ns ** ****
C mi GRAMO
Supl. Figura 2
MORTALIDAD
UCI
B
C INTUBACION
Supl. Fig. 3
MORTALIDAD
A
B UCI
C INTUBACION
Supl. Figura 4
D
A
Correlación MCP1
B mi
5000
4000
3000
MCP-1
2000
1000
0
10 6 10 8 10 10 10 12
Cyt-B (plegado logarítmico)
C F
Correlación IP10
3500
3000
2500
2000
IP-10
1500
1000
500
0
10 6 10 8 10 10 10 12
Cyt-B (plegado logarítmico)

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bioRxiv preprint doi: https://doi.org/10.1101/2020.07.30.227553 ; esta versión publicada el 30 de julio de 2020.

El titular de los derechos de autor de esta preimpresión (que

Infecciosas, Departamento de Medicina, 4 Departamento de Bioestadística,

5 Departamento de Medicina de Emergencia, 6 Departamento de Microbiología Molecular, 7 Departamento de Patología e

Torácica y 9 Anestesiología, Departamento de ciencia médico-quirúrgica y medicina traslacional, 10 División de Neumología,

12 Estos autores contribuyeron igualmente como primeros autores

13 Estos autores contribuyeron igualmente como autores principales.

* Correspondencia: agelman@wustl.edu (AEG) hkulkarn@wustl.edu (HSK)

recolectadas prospectivamente de 97 sujetos con COVID-19 en el momento de la presentación en el hospital. Los

con las medidas clínicamente establecidas de inflamación sistémica.

desarrollar síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA), tormenta de citocinas, insuficiencia

exuberante (Vabret et al., 2020).

moleculares asociados al daño (DAMP) (Nailwal y Chan,

Participantes y datos descriptivos

fue de 81 días (74-87).

murieron eran mayores [76,2 frente a 61,1 años, OR 1,08 (1,04-1,13), p =

10,34), p = 0,007] y 2 o más comorbilidades [84% versus 56,9%, OR 5,54 (1,72-

24,91, p = 0,009] en el análisis univariado ( Tabla 1).

[65,5% frente a 35,7%, OR 3,41 (1,49-8,07), p =

0,004] y 2 o más comorbilidades [72,7% versus 52,4%, OR 2,66 (1,14-6,38), p =

análisis univariante, Tabla 3].

regresión logística univariante (OR 1,960; IC del 95%: 1,236 -

1,652 - 6,972, p = 0,002, Mesa

para ingreso en UCI 0,69, IC 95% 0,58 -

6,251, IC del 95%

clínicamente establecidas que se usan típicamente en pacientes con COVID-19

6, que se ha implicado en la patogenia de COVID-19 [r = 0,389, IC del 95%: 0,194

S3B) e intubación Figura S3C).

0.29 –0.62, p <0.0001, n = 94, Figura S4F].

tanto H5N1 como H1N1

respuesta a la infección por SARS-CoV-2 es un tema de investigación futura.

patogénesis de la enfermedad COVID-19. Sin embargo, libre de células

formilados mitocondriales (Hauser et al., 2010;

DAMP también podrían estar justificados.

segundo lugar, este estudio no evalúa cómo se correlaciona el ADN-MT

UL1TR002345 de los NIH de ICTS de la Universidad de Washington.

Validación: JO, AAR, CG, Análisis formal: DS,

AEG, Redacción - Borrador original: DS, MC, HSK,

AEG, Adquisición de fondos: HSK, RRH, DK, AEG

Los autores declaran no tener conflictos de intereses

Figura 1. Diagrama de flujo de consorte que muestra la inscripción de pacientes, la asignación y

en MT-CYTB (rojo), proteína C reactiva (CRP) (azul), ferritina (negro), láctico

valores de P para los diferentes biomarcadores se resumen en las tablas correspondientes.

(B) C5b-9 (complejo de complemento terminal y ( C) Relación de neutrófilos a linfocitos (NLR).

Tabla 1. Características demográficas y clínicas asociadas a la mortalidad

Total Viva Fallecido O para la mortalidad PAG

Hombre n (%) B 54 (55,6) 39 (54,17) 15 (60) 1,26 (0,5-3,27) 0,6

Afroamericano B 75 (77,3) 57 (79,2) 18 (72) 0,6 (0,24-2) 0.4

Historial de tabaquismo B 45 (46,3) 29 (40,3) 16 (64) 2,63 (1,04-7) 0,04

HTN B 73 (75,2) 51 (70,8) 22 (88) 3,02 (0,91-13,71) 0,09

DMIII B 51 (52,5) 33 (45,8) 18 (72) 3,04 (1,17-8,64) 0,02

EPOC B 13 (14,4) 7 (9,7) 6 (24) 2,93 (0,85-9,89) 0,08

ERC> 2 B 37 (38,1) 24 (33,3) 13 (52) 2,16 (0,85-5,53) 0,1

ESRD B 8 (8,2) 4 (5,6) 4 (16) 3,23 (0,71-14,80) 0,1

CANALLA B 26 (26,8) 14 (19,4) 12 (48) 3,8 (1,44 -10,34) 0,007

CVA B 21 (21,6) 14 (19,4) 7 (28) 1,61 (0,54-4,53) 0,3

TEV B 16 (16,4) 14 (19,4) 2 (8) 0,36 (0,05-1,42) 0,1

2 o más 62 (63,9) 41 (56,9) 21 (84) 5,54 (1,72-24,91) 0,009