SISTEMA LÓGICO

Para realizar la Biorremediación en suelos contaminados con explosivos se deben de realizar los
siguientes pasos.
- Seleccionar los puntos de muestreo de acuerdo a la línea de tendencia donde se realizó la
explosión, retirando la cobertura vegetal del lugar si la hay, después se toma la muestra
de suelo a 30 cm de profundidad, la masa de la muestra debe de oscilar entre los 150 g y
200g por cada punto de muestreo. (Rozo, 2011)

- Realizar la caracterización del suelo, para establecer afectación en la estructura y

morfología de este. (Rozo, 2011)

- Pre-enriquecimiento: En esta etapa debido a que se realizará una atenuación natural se

debe de enriquecer las muestras de suelo con más del explosivo contaminante esto se
realiza con el fin de aumentar la población microbiana presentes en el suelo a tratar.
(Rozo, 2011)

- Aislamiento microbiano: Para eso se realizan diluciones seriadas desde 10-1 hasta 10-7
realizando la siembra por triplicado a partir de las diluciones 10-4 hasta 10-7 ya que son
las concentraciones más altas. Estas siembras se dejan en incubación durante 30 días a
una temperatura de 25°C y con una concentración del explosivo a 100 mg/L debido a
que la adaptación del microorganismo a estas condiciones es muy lenta. (Rozo, 2011)

- Selección de colonias. Para esta selección se tiene en cuenta las características

morfotipicas de los microorganismos tales como la forma, elevación color y borde. En
este proceso se realiza una resiembra para aislar las colonias seleccionadas y estas son
sometidas a una concentración de 200mg/L del explosivo; esta resiembra se realiza con
el fin de asegurar que los microorganismos escogidos tienen la capacidad de crecer en
medio de altas concentraciones del contaminante. El tiempo de incubación son 30 días a
25°C. (Rozo, 2011)

- Para cada una de las colonias seleccionadas se debe de realizar una pre inoculación, por
triplicado en un medio mineral líquido que contenga una concentración de 100mg/L del
explosivo más 5 g de cada una de las cepas aisladas, esta pre inoculación debe de ser
agitada a 120 rpm (revoluciones por minuto) por 24 horas a una temperatura de 25°C.
(Rozo, 2011)

- Preparación de inóculos. Se tomará 5 ml del pre inoculo ya realizado por cada cepa
seleccionada y se agregará a 45ml del medio mineral liquido con una concentración de
100mg/L y de nuevo se someterá a agitación de 120 rpm en ausencia de luz a una
 temperatura de 25°C, cada día se debe de realizar la medida de la absorbancia de cada
inoculo con el fin de determinar si hay una fase exponencial el cual se da a partir de una
absorbancia de 0.12. (Rozo, 2011)

- Evaluación del potencial de degradación. En esta etapa se debe de tomar una muestra
por cada inoculo y se realizará la evaluación por tiempos por medio de la cromatografía
liquida de alta eficiencia. Las muestras deben mantener las condiciones de temperatura
de 25°C, ausencia de luz y una agitación de 120 rpm. (Rozo, 2011)

- Realizar análisis estadístico según los resultados por lo general se usa hipótesis
alternativa y nula. (Rozo, 2011)

Tabla 1. Bacterias degradadoras de PETN y/o TNT. Rozo, L. (2011). Aislamiento y evaluación
de bacterias degradadoras de pentolita, obtenidas a partir de muestras de suelos, agua y lodos
con presencia de explosivos

BIBLIOGRAFÍA
Rozo, L. (2011). Aislamiento y evaluación de bacterias degradadoras de pentolita, obtenidas a
partir de muestras de suelos, agua y lodos con presencia de explosivos. (tesis de pregrado).
Universidad de la Salle. Bogotá, Colombia.