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Guía de laboratorio de
Biología
PROFESOR
RECOMENDACIONES GENERALES
MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA GENERAL 1
UNIVERSIDAD NACIONAL DE I N G E N I E RÍA
Facultad de Ingeniería Ambiental
Departamento de Estudios Generales
ÍNDICE DE LABORATORIOS
LABORATORIO N°1
OBJETIVO GENERAL:
FUNDAMENTO TEORICO
Algunos seres vivos pueden observarse a simple vista. Sin embargo, existen
organismos tan pequeños (al rededor de 0.1 mm) que a simple vista no los percibimos,
por lo que se recurre a instrumentos ópticos como la lupa o el microscopio ya sea para
organismos pequeños de menos de 0.1 mm o partes de organismos; y además, ayuda
a superar esta limitación.
El microscopio compuesto es un aparato de observación de cuerpos
transparentes. El ojo humano tiene una capacidad de resolución relativamente alta,
pero objetos y organismos pequeños no son visibles a simple vista. Los microscopios
tienen un poder de resolución mucho más alto que el ojo humano, y el poder de
resolución es: la propiedad que se tiene para poder ver dos puntos muy juntos con
toda claridad.
El microscopio es una de las herramientas más valiosas que nos permite
descifrar parte de los misterios de la vida en general. Es un instrumento delicado.
Mediante la práctica de montaje, enfoque y observación, es posible determinar las
características cualitativas y cuantitativas de estructuras muy pequeñas y
transparentes con el fin de penetrar al micro mundo que era casi inexistente hasta
antes de su invención.
Como los microscopios son instrumentos ópticos, es necesario obtener el
aumento total de la combinación del aumento del ocular y el aumento del objetivo, y se
obtiene de la siguiente manera: el ocular tiene un determinado aumento, que
generalmente es de 10 aumentos o de 10X, los objetivos tienen diferente poder de
resolución que puede ser: 4X, 10X, 40X y 100X, el resultado final de número de
aumentos se da multiplicando el aumento del ocular por el aumento del objetivo que se
está utilizando; ejemplo: ocular 10X y el objetivo es de 40X, el resultado será 400
aumentos o 400X.
Materiales:
Equipos
- Portaobjetos
- Microscopio compuesto
- Gotero
- Cubreobjetos Reactivos:
- Azul de metileno
- Papel filtro - Lugol
- Agua estancada
- Catafila de cebolla
PROCEDIMIENTO
Antes de iniciar la práctica, el profesor de práctica dará a conocer a los alumnos las
partes de un microscopio óptico compuesto, mencionando la parte mecánica y de
soporte, la parte óptica y la de iluminación. También, indicara el uso de cada una de
las partes así como su cuidado y transporte.
1. En un portaobjetos limpio y seco coloca una gota de agua estancada, cubre
con el cubreobjetos y observa al microscopio, retira el exceso de agua con el papel
filtro.
2. Observa primero con el objetivo de menor aumento (4X ó 10X) y por último
con el objetivo de mediano aumento (40X). Para observar correctamente, debes tener
la muestra a una distancia de aproximadamente de 1 cm o 1.5 del objetivo, enciende
la fuente de luz del microscopio procurando que la muestra quede centrada en el rayo
de luz que pasa por la platina. Posteriormente ve acercando lentamente la platina
hacia el objetivo con el tornillo macrométrico, siempre observando a través de los
oculares hasta que la imagen sea clara, y finalmente con el tornillo micrométrico se
enfoca más finamente y aclarando mejor la imagen de lo observado. En caso de no
poder enfocar pide la ayuda de tu profesor
3. Repite las operaciones con la muestra fija, cuando realices el cambio de
objetivo no cambies la iluminación en forma inmediata, hasta que primero observes
con la iluminación inicial.
4. Escribe las partes del microscopio al final de las líneas del esquema
siguiente. Anota las observaciones realizadas durante el desarrollo de la práctica.
CUESTIONARIO
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LABORATORIO N° 2
OBJETIVO GENERAL
Distinguir las principales estructuras que diferencian las células vegetales de las
células animales y conocer algunos organismos microscópicos
FUNDAMENTO TEORICO
MATERIALES: EQUIPOS:
- Portaobjetos - Microscopios
- Cubreobjetos
- Mechero de alcohol o Bunsen REACTIVOS:
- Algodón - Solución de azul de metileno
- Bisturí - Solución salina saturada
- Agua destilada
- Lancetas descartables MATERIAL BIOLOGICO
- - Hojas de geranio
- Una cebolla
- Agua estancada
PROCEDIMIENTO
1. Desprende una capa fina de la parte interior (catafila) del bulbo de la cebolla y corta
pedazos en forma de cuadrado de 1 cm de lado o 1 cm de diámetro.
2. Coloca los cortes sobre un portaobjetos y añade una gota de agua, luego cubre con
el cubreobjetos sobre la muestra.3. Observa al microscopio la muestra vegetal,
primero con el objetivo de 10X y después con objetivo de 40X. Localiza el núcleo, la
pared celular, vacuolas.
4. Retira el cubre objeto y coloca una solución salina saturada (20%) sobre la muestra,
espera unos tres minutos y observa con el objetivo de 10X como el citoplasma se
contrae por la perdida de agua, la membrana celular se separa de la pared celular,
realiza tus dibujos y observaciones.
OBSERVACIÓN DE CELULA ANIMAL.-
Célula de la mucosa Bucal
a) Realiza un hisopo con el palillo y algodón (también, se puede realizar con sólo
el palillo), introdúcelo a tu boca en la parte interna de la mejilla, realizar un
presión a la mucosa de la mejilla.
b) En un portaobjeto limpio y seco coloca una gota pequeña de agua, realiza un
frotis con el hisopo de la muestra (esto se logra, frotando el hisopo o palillo
sobre la gota de agua extendiéndola).
c) La muestra pásala varias veces por la flama del mechero sin que se caliente
demasiado hasta que se evapore el agua, este proceso es para que las células
epiteliales se adhieran al vidrio del portaobjetos,.
d) Una vez seca la muestra agrega una o dos gotas de azul de metileno, evita que
el azul de metileno se evapore, si así ocurre, agrega otra gota más de azul de
metileno.
e) Deja la muestra con el azul de metileno durante 3 o 4 minutos, lava el exceso
de colorante evitando que se escurra la muestra (el agua no debe tocar la
muestra), pon una gota de agua o glicerina sobre la muestra y coloca el
cubreobjetos.
f) Coloca la preparación en el microscopio, enfoca con el objetivo de 10X o 20X e
identifica las células animales que ahí aparecen. Cambia al objetivo de mayor
aumento.
g) Observa con cuidado las células animales y compáralas con las células
vegetales, examina las semejanzas y diferencias de sus estructuras y partes
que las componen.
h) Dibuja con detalle una de las células animales y señala la membrana celular, el
citoplasma y el núcleo.
Células Sanguíneas
a) Limpia con un algodón humedecido de alcohol la yema del dedo de la mano
b) Realiza una punción con una lanceta estéril y obtenga una gota de sangre
c) Realiza un frotis extendiendo la gota de sangre con el borde de otro portaobjeto
formando un ángulo de 45°
d) Deja secar la muestra por 5 minutos o se debe fijar la lamina con alcohol
acetona o al calor
e) Colorea la muestra con el colorante Giemsa por 15 a 20 minutos. Luego se
lava y secar la muestra
f) Coloca una gota de aceite de inmersión en la muestra y procede a observar
con el objetivo de 100X
g) Identifica y dibuja los tipos de células y la forma de los núcleos
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la diferencia fundamental entre una célula animal y una célula vegetal?
2. ¿Qué indica la presencia de cloroplastos en la célula vegetal?
3. ¿Cuál es la diferencia entre una membrana celular y una pared celular?
4. Explica ¿por qué decimos que la membrana celular es permeable?
5. Cuantas clases de células sanguíneas se conocen en la sangre humana?