Determinar la concentración de las muestras y las desviaciones estandar asociadas a estas.

Las medidas de las absorban

analisis de hierro con o-fenantrolina que forman un complejo purpura cuya absorbancia mide 510 nm, una vez calibrad

PATRON MUESTRA
Soluci C (ppm) Absorbancia CFeII (ppm) Absorbancia
P1 0.2 0.0458 M1 X1 0.757
P2 0.4 0.0835 M2 X2 0.434
P3 0.6 0.119 M3 X3 0.124
P4 0.8 0.158
P5 1 0.197
P6 2 0.387
P7 3 0.58
P8 4 0.77
P9 5 0.963
9n
1.- La recta de calibración y la prueba de correlación significativa

Curva Patron
1.2

1
f(x) = 0.192995729537367
0.191241420664207 x + 0.005799538745387
0.8 R² = 0.999932776268708
0.999987539194951
Absorbancia

0.6

0.4

0.2

0
0 1 2 3 4 5 6
C ppm

Fig1. Recta de calibración obtenida con los datos

y= a + bx
Ecuación de la recta: A= 0.0057995 + 0.1912 CFeII
Coeficiente de regreción r2= 0.999994

b.- Desviación estandar de la regresion y del corte, pendiente se calculan con las siguientes expresiones:

√(𝟐&(∑8_𝟏▒ 〖〖 (𝒀 〗 _𝒊 〖 −𝒀 ̂〗 _𝒊) 〗 ^𝟐 )/(𝒏−𝟐))

√(𝟐&(∑8_𝟏▒ 〖〖 (𝒀 〗 _𝒊 〖 −𝒀 ̂〗 _𝒊) 〗 ^𝟐 )/(𝒏−𝟐))
𝑺_𝒃 =𝑺_(𝒀∕𝑿)/√(𝟐&∑8_𝒊▒ 〖〖 (𝑿 〗 _𝒊 −(

X
Numero C Fe II (ppm)
1 0
2 0.2
3 0.4
4 0.6
5 0.8
6 1
7 2
8 3
9 4
10 5
10 1.88888889
9 ppm

Los intervalos de confianza para el corte y la pendiente serán:

t(0.05;7) = 2.3646
〖𝑰𝑪〗 _𝒂=𝒂±𝒕(∝,𝑮𝑳)𝒙𝑺_𝒂 0.0057995 ± 0.00162

〖𝑰𝑪〗 _𝒃=𝒃±𝒕(∝,𝑮𝑳)𝒙𝑺_𝒃
0.1912 ± 0.00065

Calculo de la concentración, el error asociado e intervalo de confianza para ∝=0.05

Las concentraciones de las muestras se calculan por medio de la ecuación de la recta y el error asociado y

𝑪_𝑭𝒆^𝑰𝑰=(𝑨−𝒂)/(𝒃 〖𝒑𝒑𝒎〗 ^(−𝟏) )

𝑪_𝑭𝒆^𝑰𝑰=(𝑨−𝟎.𝟎𝟏𝟒𝟑)/(𝟎.𝟎𝟕𝟖𝟑 〖𝒑𝒑𝒎〗 ^(−𝟏) )

〖𝑰𝑪〗 _𝒄=𝑪𝒑𝒑𝒎±𝒕(∝,𝑮𝑳)𝒙𝑺_𝒄
 Muestra

m=1 1
2
3
promedio=
stas. Las medidas de las absorbancias son el promedio de 3 mediciones
ia mide 510 nm, una vez calibrado el método se analizaron las 3 muestras

En la figura se ve r=0,99999, a pesar de ello hacemos la prueba t de correlación significativa:

Las hipotesis para la prueba son:
𝐻_0 : Ɇ correlación Si texp>t(∝,GL) Se rechaza la hipotesis nula y se
𝐻_𝐴 acepta la hipotesisi alternariva,
: E correlación concluyendo que si existe una
correlacion significativa entre Y y
Los grados de libertad son: (n-2)= 7 y el estadistico t para estos grados de libertad
∝=0.05 es: 2.365
𝑡_𝑒𝑥𝑝 " =" (|𝑟|𝑋√(2&𝑛−2))/√(1−𝑟^2 )
texp= 1080 > 2.3646

r= 0.999994
n= 9

ntes expresiones:

)/(𝒏−𝟐)) 𝑺_𝒂 =𝑺_(𝒚∕𝒙) √(𝟐&(∑▒𝑿_𝒊^𝟐 )/(∑8_𝒊▒(𝑿_𝒊 −𝑿 ̅ )𝟐))

)/(𝒏−𝟐)) 𝑺_𝒂 =𝑺_(𝒚∕𝒙) √(𝟐&(∑▒𝑿_𝒊^𝟐 )/(∑8_𝒊▒(𝑿_𝒊 −𝑿 ̅ )𝟐))
〖〖 (𝑿 〗 _𝒊 −( 〖𝑿 ) 〗 ^𝟐 ) ̅ 〗 )

Y
A(y) Ў (Y-Ў) (Y-Ў)2 (X-Ẍ) 𝑋_𝑖^2
(X-Ẍ) 2

0.0058 -0.0058 3.36E-05 -1.888888889 3.56790123 0

0.046 0.044 0.0018 3.24E-06 -1.688888889 2.85234568 0.04
0.084 0.082 0.0015 2.25E-06 -1.488888889 2.21679012 0.16
0.119 0.121 -0.0020 4.00E-06 -1.288888889 1.66123457 0.36
0.158 0.159 -0.0010 1.00E-06 -1.088888889 1.18567901 0.64
0.197 0.197 0.0000 0.00E+00 -0.888888889 0.79012346 1
0.387 0.388 -0.0010 1.00E-06 0.1111111111 0.01234568 4
0.580 0.579 0.0010 1.00E-06 1.1111111111 1.2345679 9
0.770 0.771 -0.0010 1.00E-06 2.1111111111 4.45679012 16
0.963 0.9618 0.0010 1.00E-06 3.1111111111 9.67901235 25
∑▒( 𝑌− 𝑌 ̂ )2 ∑▒( 𝑋− 𝑋 ̂ )2
1.45E-05 27.6567901 56.2

𝑺_(𝒀∕𝒙) 1.44E-03 Sa 6.84E-04

Sb 2.74E-04
LDD 9.21E-03

de la recta y el error asociado y el intervalo de confianza para el 95 de chance se calculan por las expresiones explicadas :

〖𝒑𝒑𝒎〗 ^(−𝟏) ) ´ )𝟐
( 𝐀𝐨 - 𝐀
𝐒𝐂 𝐀
𝐒
= 𝐲/𝐱 𝐱
𝐛
√ 𝟏 𝟏
+ +
𝐦 𝐧 𝐛𝟐 X ∑ ( 𝐗 𝐢 - 𝐗
𝐢
´ )𝟐

Para facilitar el calculo el discriminate de la raiz se descompone en res partes

 𝒓=𝟏/𝒎+𝟏/𝒏 𝒑=(𝑨_𝒐 "-" 𝑨 ̅ )2 ∅=𝒃^𝟐 𝒙∑▒(𝑿_𝒊−𝑿 ̅ )𝟐

en la tabla siguiente se calcula la concentración y la desviacion estandar asociada, Sc para tres mediciones (m)
y 9 puntos de calibración, (n)
Y Yblanco b
𝒓=𝟏/𝒎+𝟏𝒑=(𝑨_𝒐 r ∅=𝒃^𝟐
p 𝒙∑▒(𝑿_𝒊−𝑿 ̅ )𝟐
"-" 𝑨 ̅ )2
Absorbancia corte en Y pendiente C Fe ppm Sy/x/𝒏
÷b

0.757 0.0057995 0.1912 3.93 7.52E-03 1.11111 -0.7512005

0.434 0.0057995 0.1912 2.24 -0.4282005
0.124 0.0057995 0.1912 0.62 -0.1182005
0.43833333333333 𝑡_𝑒𝑥𝑝 " =" (|𝑟|𝑋√(2&𝑛−2))/√(1−𝑟^2 )
%𝑪𝑽=𝑺_𝑨/𝑪_𝑨

C Fe ppm S ca t (95%,1) ±t x S %Cv

3.93 0.0097 1080 1080.130 0.25%
2.24 0.0086 1080 1080.129 0.38%
0.62 0.0080 1080 1080.128 0.11%
e rechaza la hipotesis nula y se
cepta la hipotesisi alternariva,
oncluyendo que si existe una
orrelacion significativa entre Y yC

(𝑿_𝒊 −𝑿 ̅ )𝟐))

(𝑿_𝒊 −𝑿 ̅ )𝟐))

0.0241

nes explicadas :
mediciones (m)

𝑳𝑫𝑫=(𝒀_𝒎𝒊𝒏 −𝒀 ̅_𝒃)/𝒃
∅=𝒃^𝟐 𝒙∑▒(𝑿_𝒊−𝑿 ̅Ø)𝟐 𝑰𝑪=𝑪_𝑴 ± 𝒕_((∝,𝑮𝑳) ) 𝑌_𝑚𝑖𝑛=
×𝑺_𝑨 Sca 𝑌_𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 +3𝑆_(𝑦∕𝑥)

1.01106144553086 9.72E-03 3.93 ± 0.002 1.01E-02

1.01106144553086 8.55E-03 2.24 ± 0.002
1.01106144553086 7.98E-03 0.62 ± 0.002
(𝒀_𝒎𝒊𝒏 −𝒀 ̅𝑌_𝑚𝑖𝑛=
_𝒃)/𝒃 𝑳𝑫𝑪=(𝒀_𝒎𝒊𝒏 −𝒀 ̅_𝒃)/𝒃
𝑌_𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 +10𝑆_(𝑦∕𝑥)

2.02E-02
0.02 0.075
En cuatro balones aforados de 50mL se introduce alicuotas de 2mL de una muestra desconocida que contiene hi
0,2,4 y 6 mL de solucion amortiguadora de acido acetico y 10 mL de solucion de sulfasalisilico para la formacion d
con agua destilada. Las absorbancias respectivas se muestran en la siguiente tabla:

Vo (mL) 2 2 2 2
Ves (mL) 0 2 4 6
Vf(mL) 50 50 50 50
A 0.082 0.338 0.54 0.756

Representat graficamente la absorvancia en funcion del volumen del estandar agregado se obtiene la línea recta

A
0.8
f(x) = 0.11105 x + 0.0951
0.7 R² = 0.997417105860444

0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0 1 2 3 4 5 6 7

Ecuación de la línea recta A=0.0951+0.1111xVes

Pendiente: b= -0.1111 mL-1
Corte del eje de la absorbancia a= 0.0951

Para calcular la concentración del analito es:

Cfe= 43 ppm
𝐶_𝐹𝑒=𝑎/𝑏x𝐶
_𝑒𝑠/𝑉_𝑜
Por la extrapolación de la recta A=f(Ves) se puede calcular la concentracion del analito
El valor extrapolado coreesponde al volumen de reactivo a la cual coresponde una absorbancia igual a cero
Vo (mL) 2 2 2 2
Ves (mL) 0 0 2 4 6
Vf(mL) 50 50 50 50
A 0 0.082 0.34 0.537 0.756

CA=[−𝐶_𝑒𝑠 𝑥 CA= 42.8 ppm

(𝑉_𝑒𝑠^𝑜)/𝑉_𝑜 ]
esconocida que contiene hierro, Se agregan respectivamente
salisilico para la formacion de complejo rojo. Se enrasan los balones

ado se obtiene la línea recta:

bsorbancia igual a cero

 𝒀=𝑲𝑪…………………(1)

𝒀=𝒂+𝒃𝑪 ........................(2)

Calibración: Se refiere a la comprobación de la relación lineal dada por la ecuación 2, asi como la optimizacion de la longitud d
una relación exacta y precisa que permita relacionar un conjunto de datos espectroscopicos con los datos referenciales de lab
desconocidas por analizar

3. Calibración con un patron

3.1Calibración con un patron
Se prepara un solo patron de concentración conocida Cp y se mide su señal dada por Yp

𝒀_𝒑=𝒂+𝑲 𝑪_𝒑 =𝑲 𝑪_𝒑...........................3.1

𝑲_𝒑= □(64&𝒀_𝒑/𝑪_𝒑 ) ........................................................ 3.2

Para la muestra, al medir su señal esta dada por:

𝒀_𝑨 = 𝑲_𝑨
𝑪_𝑨.................................................3.3
En condiciones experimentales constantes Kp=KA y la concentración de la muestra esta dada por:

𝑪_𝑨= □(64&𝒀_𝑨/𝑲_𝒑 ) ........................................................ 3.4

 la optimizacion de la longitud de onda de trabajoque genera
on los datos referenciales de laboratorio y de las muestras

A.- Ejemplo libro: Hg+2 en sangre.

Para gráfico
Cp ppb Abs (u.a.) Yp λ (nm) Kp
1.75 0.474 0.270857 Error por calibraci
0.5
CA ppb Abs (u.a.) YA λ (nm) KA 0.45
1.33280591 0.361 0.270857 0.4
0.35

Absorbancia
0.3
0.25
A.- Para azul de metileno 0.2
0.15
0.1
Cp ppm Abs (u.a.) Yp λ (nm) Kp
0.05
0
1.3 1.35 1.4 1.45 1.5
Conce

B.- Para Ag@Chako

Cp ppm Abs (u.a.) Yp λ (nm) Kp

10

C.- Para mezcla AM+Ag@chako

CA ppm Abs (u.a.) Yp λ (nm) Kp
10
 Error por calibració con un punto

1.35 1.4 1.45 1.5 1.55 1.6 1.65 1.7 1.75 1.8
Concentración
 Ejemplo: En las tablas se muestran las absorbancias leídas para 6 patrones de un complejo de Fe II con o-fenantrolina y tres m
Obtener la recta de calibración y su ecuación respectiva calculada por los mínimos cuadrados así como el error de la regresión
Determinar la concentración de las muestras y las desviaciones estandar asociadas a estas. Las medidas de las absorbancias s

PATRON MUESTRA
CFeII (ppm) Absorbancia CFeII (ppm) Absorbancia
2 0.164 1 0.107
5 0.425 2 0.721
8 0.628 3 1.538
12 0.951
16 1.266
20 1.582
a.- Curva patron

Curva Patron FE (II)

1.8
1.6
f(x) = 0.078259179265659 x + 0.014278617710583
1.4 R² = 0.999585134591507
1.2
Absorbancia

1
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 5 10 15 20 25
C ppm

Fig1. Recta de calibración obtenida con los datos

Ecuación de la recta: A= 0.0143 + 0.0783 CFeII
Coeficiente de regreción r2= 0.9996

b.- Desviación estandar de la regresion y del corte, pendiente se calculan con las siguientes expresiones:

&(∑8_𝟏▒ 〖〖 (𝒀 〗 _𝒊 〖 −𝒀 ̂〗 _𝒊) 〗 ^𝟐 )/(𝒏−𝟐))

𝑺_𝒃 =𝑺_(𝒀∕𝑿)/√(𝟐&∑8_𝒊▒ 〖〖 (𝑿 〗 _𝒊 −( 〖𝑿 )
〗)
 Numero C Fe II (ppm)
1 2
2 5
3 8
4 12
5 16
6 20
6 10.5

Los intervalos de confianza para el corte y la pendiente serán:

2.78
〖𝑰𝑪〗 _𝒂=𝒂±𝒕(∝,𝑮𝑳)𝒙𝑺_𝒂 0.0143 ± 0.02707

〖𝑰𝑪〗 _𝒃=𝒃±𝒕(∝,𝑮𝑳)𝒙𝑺_𝒃 0.0783 ± 0.00222

Las concentraciones de las muestras se calculan por medio de la ecuación de la recta y el error asociado y el inte

〖𝒑𝒑𝒎〗 ^(−𝟏) )
𝑪_𝑭𝒆^𝑰𝑰=(𝑨−𝒂)/(𝒃𝑪_𝑭𝒆^𝑰𝑰=(𝑨−𝟎.𝟎𝟏𝟒𝟑)/(𝟎.𝟎𝟕𝟖𝟑 〖𝒑𝒑𝒎〗 ^(−𝟏) )

〖𝑰𝑪〗 _𝒄=𝑪𝒑𝒑𝒎±𝒕(∝,𝑮𝑳)𝒙𝑺_𝒄

Muestra
1
2
3
 ejo de Fe II con o-fenantrolina y tres muestras de aguas frescas tratadas de igual manera que los patrones
drados así como el error de la regresión y de la pendiente.
stas. Las medidas de las absorbancias son el promedio de 3 mediciones
minimos cuadrados

x y
2 0.164
5 0.425
8 0.628
12 0.951
16 1.266
20 1.582

ntes expresiones:

)/(𝒏−𝟐))
𝑺_𝒂 =𝑺_(𝒚∕𝒙) √(𝟐&(∑▒𝑿_𝒊^𝟐 )/(∑8_𝒊▒(𝑿_𝒊 −𝑿 ̅ )𝟐))
〖 (𝑿 〗 _𝒊 −( 〖𝑿 ) 〗 ^𝟐 ) ̅
 A(y) Ў (Y-Ў) (Y-Ў)2 (X-Ẍ) (X-Ẍ)2 𝑋_𝑖^2
0.164 0.1709 -0.0069 4.761E-05 -8.5 72.25 4
0.425 0.4058 0.0192 0.00036864 -5.5 30.25 25
0.628 0.6407 -0.0127 0.00016129 -2.5 6.25 64
0.951 0.9539 -0.0029 8.41E-06 1.5 2.25 144
1.266 1.2671 -0.0011 1.21E-06 5.5 30.25 256
1.582 1.5803 0.0017 2.89E-06 9.5 90.25 400
∑▒( 𝑌− 𝑌 ̂ )2 ∑▒( 𝑋− 𝑋 ̂ )2
ppm 0.00059005 231.5 893

𝑆_(𝑌∕𝑥) 0.01214547 Sa 0.00973843

Sb 0.00079825
𝑌_𝑚𝑖𝑛=𝑌_𝑏𝑙𝑎𝑛𝑐𝑜 +3𝑆_(𝑦∕𝑥) Ymin= 0.05073642 LDD 0.465

𝑳𝑫𝑫=(𝒀_𝒎𝒊𝒏 −𝒀 ̅_𝒃)/𝒃

de la recta y el error asociado y el intervalo de confianza para el 95 de chance se calculan por las expresiones explicadas :

𝒑𝒑𝒎〗 ^(−𝟏) ) ´ )𝟐
( 𝐀𝐨 - 𝐀
𝐒𝐂 =
𝐀
𝐒𝐲 / 𝐱
𝐛
𝐱
√ 𝟏 𝟏
+ + 𝟐
𝐦 𝐧 𝐛 X ∑ ( 𝐗𝐢- 𝐗
𝐢
´ )𝟐

Para facilitar el calculo el discriminate de la raiz se descompone en res partes

𝒓=𝟏/𝒎+𝟏/𝒏 𝒑=(𝑨_𝒐 "-" 𝑨 ̅ )2 ∅=𝒃^𝟐 𝒙∑▒(𝑿_𝒊−𝑿 ̅ )𝟐

en la tabla siguiente se calcula la concentración y la desviacion estandar asociada, Sc para tres mediciones (m)
y 6 puntos de calibración, (n)
r p
Absorbancia corte en Y pendiente C Fe ppm Sy/x ÷b 𝒓=𝟏/𝒎+𝟏 ∅=𝒃^𝟐 𝒙∑▒(𝑿_𝒊−𝑿 ̅ )𝟐
𝒑=(𝑨_𝒐 "-" 𝑨 ̅ )2
/𝒏
0.107 0.0143 0.0783 1.18390805 0.15511459 0.50000 -0.0927
0.721 0.0143 0.0783 9.02554278 -0.7067
1.538 0.0143 0.0783 19.4597701 -1.5237

C Fe ppm S ca t (95%,1) ±t x S %Cv

1.18 0.1103 12.710 12.8203 9.32%
9.03 0.1432 12.710 12.8532 1.59%
19.46 0.2267 12.710 12.9367 0.00%
𝑿_𝒊 −𝑿 ̅ )𝟐))
 ppm

esiones explicadas :

𝑿_𝒊−𝑿 ̅ )𝟐

tres mediciones (m)

Ø 𝑡_𝑒𝑥𝑝 " =" (|𝑟|𝑋√(2&𝑛−2))/√(1−𝑟^2 )

∅=𝒃^𝟐
2 𝒙∑▒(𝑿_𝒊−𝑿 ̅ )𝟐 SCA t (95%,6)
=(𝑨_𝒐 "-" 𝑨 ̅ ) 𝑰𝑪=𝑪_𝑴 ± 𝒕_((∝,𝑮𝑳) )
×𝑺_𝑨 texp
1.419301035 0.11034466 1.18 ± 0.03 2.78 1,943
1.419301035 0.14316672 9.03 ± 0.03 2.78 1,943
1.419301035 0.22668914 19.46 ± 0.03 2.78 1,943