CÓDIGO: FO-DOC-112

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS PÁGINA: 1 de

VERSIÓN: 01
5
PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016

LABORATORIO DE FISIOLOGÍA VEGETAL.

UNIDAD ACADEMICA: Ingeniería Agronómica
CURSO: Fisiología vegetal.
PRACTICA Nº 02: Calidad de semillas

1. OBJETIVOS
 Identificar los mecanismos de latencia de una semilla y las prácticas para superar la misma.
 Determinar la viabilidad de tres diferentes tipos de semillas por el método de test de tetrazolio.
 Comprender los factores más determinantes para hacer un diagnóstico preciso de la viabilidad de
semillas.

2. CONSULTA PREVIA
1. Tipos de emergencia de plántulas.
2. Fórmula para calcular el tiempo medio de germinación (TMG), y la velocidad media de germinación (VMG).
3. Que es el T50 y T50´.
4. En que consiste la prueba de trifeniltetrazolio cloruro. Nombre las ventajas y desventajas de esta prueba.
5. Que otros tipos de pruebas de viabilidad en semillas se realizan.
6. Que procedimientos previos se deben realizar a las diferentes tipos de semillas, para obtener resultados
confiables de la prueba de trifeniltetrazolio cloruro.
7. Dibuje los patrones viables y los inviables para las especies que trabajo.

En cada caso debe citar cada autor (Apellido, año)

3. FUNDAMENTO TEORICO

Las espermatofita se caracterizan por producir semilla. Producto de la fertilización del (los) óvulo(s), se empieza
la formación del embrión el cual es recubierto por varios tejidos que son originados por los grupos celulares
presentes en el óvulo y en el ovario de las flores. El embrión y sus recubrimientos van a dar origen a la semilla
(óvulo) y al fruto (ovario).

Una vez que la semilla ha completado su desarrollo, se da inicio los cambios que darán lugar al establecimiento
del reposo en las semillas. Este reposo o reducción del metabolismo se denomina quiescencia, cuando la causa
de que no ocurra la germinación es fundamentalmente la ausencia de agua. En cambio, el reposo de las
semillas se denomina latencia, cuando la semilla no germina a pesar de encontrarse en un lugar óptimo en
cuanto a la temperatura y la humedad. Las causas de la latencia son diversas y entre ellas tenemos: la
presencia de testa dura y/o impermeable, inmadurez del embrión, crecimiento embrionario inhibido, embrión
dañado, presencia de inhibidores endógenos de la germinación y alteraciones fisiológicas reversibles. Existen
diversos mecanismos promotores de la germinación, que pueden ser tanto físicos como químicos. Entre los
físicos se encuentra la escarificación (rompimiento o eliminación de la testa), la estratificación (tratamiento con
frio), el termoperíodo, el fotoperiodo, entre otros. Entre los métodos químicos se encuentran: la aplicación
exógena de hormonas vegetales, tratamiento con sales (nitrato de potasio) y tiourea.

La latencia es un mecanismo fisiológico de gran importancia en la ecología de las poblaciones de plantas. El

tiempo que se toma la semilla mientras supera la latencia, le permite asegurar el establecimiento de los
organismos en condiciones ambientales óptimas para su desarrollo, ya que pueden escapar de condiciones
extremas como el invierno o periodos de sequía prolongados.

El porcentaje de germinación de las semillas es importante para determinar las actividades agronómicas en el
momento del establecimiento de un cultivo ya sea a nivel de vivero o directamente en campo, ya que si se

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cuenta con una referencia de la viabilidad de geminación se podrán establecer las cantidades adecuadas de
semillas que son necesarias para el establecimiento del cultivo.
La viabilidad de un lote de semillas, no durmientes, hace referencia a su capacidad de germinar y de originar
plántulas normales en condiciones ambientales favorables (García, Villamil s.f.). Para determinar la viabilidad de
las mismas se desarrollan pruebas como el análisis de viabilidad por tetrazolio, que permite conocer si las
semillas presentan dormición, si están inhibidas o si están deterioradas y no van a ser capaces de germinar
(Rodríguez, Adam y Durá, 2008). Esta prueba de tetrazolio no genera un resultado definitivo ya que en algunas
semillas viables finamente no germinan porque pueden presentar algún tipo de letargo que impide su
germinación, en muchas clases de semillas, aparentemente maduras, fracasan en la germinación, aun en el
caso de ser favorables todos los factores ambientales. En tales semillas, la reanudación del crecimiento por el
embrión esta determinado por condiciones existentes en las mismas semillas. (Meyer, Anderson y Bohning
1972).

4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS

Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos

Balanza de precisión 30 semillas Alcohol
Cronómetro 2 vasos de vidrio Ácido Giberélico
2 Pipetas Pasteur o Goteros. Agua destilada
2 toallas de papel filtro (papel toalla). 0.1 gr de
2,3,5- trifeniltetrazolio cloruro
CajaPetri

5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA.

Preparación del 2,3,5- trifeniltetrazolio cloruro.

Con una espátula tome el trifeniltetrazolio cloruro, pese la cantidad de tetrazolio recomendada para cada
especie y disuélvalo en agua destilada, asegúrese de que el recipiente este cubierto con papel aluminio, para
evitar la exposición directa a la luz.

Germinación.
1. Separar las 20 semillas en grupos de 10 semillas (A) y (B), ponerlas en dos cajas de Petri.

Grupo A de semillas

2. Pesar el lote de semillas.

3. Poner a imbibir en 10 mL de agua el lote de semillas, las semillas deben estar equidistantes.

4. Retirar las semillas de la caja de Petri, secar la superficie y pesar al minuto, devolver las semillas a la caja
de Petri y agregar otros 10 mL de agua en cada una.

5. Repetir el paso número 4 a los 5, 15, 30 y 60 min.

6. Llenar Tabla #1. Peso de las semillas.

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8. A cada valor de peso de la semilla en imbibición se debe restar el peso del lote en seco y hacer una curva de
tiempo contra peso de agua absorbida.

9. Determine el porcentaje de peso que aumentó la semilla luego de una hora de imbibición.

Grupo B de semillas

1. Pesar el lote de semillas.

2. Poner en una solución de 10 ml de ácido giberélico

3. Retirar las semillas de la solución, secar la superficie y pesar después de una hora de iniciar la
imbibición.

4. Luego del dato de los 60 minutos, vuelva a poner cada lote de semillas (A) y (B) en toallas de papel
humedecida y haga un seguimiento a la germinación.

5. Cada día revise el número de semillas germinadas. Asegúrese de que no quede seco el papel en
ningún momento. Limpie las semillas que presenten hongos. ¿Qué criterio utiliza para definir semilla
germinada? ¿Porqué?

Viabilidad.

Pre-acondicionamiento.

Si la especie lo requiere se debe realizar una pre imbibición, para ayudar a que se pueda cortar o perforar con
más facilidad para exponer el embrión y facilitar la acción del trifeniltetrazolio cloruro.

Preparación de semillas.

1. Realizar perforaciones, cortes superficiales u escarificado si la morfología de la semilla lo requiere.

2. Separe 10 semillas,

3. Realice un corte longitudinal lateralmente a lo largo de cada semilla para exponer el embrión. Realice
este procedimiento teniendo en cuenta de no causar daños a la semilla.

Prueba de Tinción.

1. Con ayuda de pipeta agregue 10ml de la solución de trifeniltetrazolio cloruro a una caja de Petri que
contengan las semillas (deben tener las parte expuesta hacia abajo), y deje imbibiendo las semillas en
el horno a una temperatura de 30ºC (el tiempo depende de la especie).

2. Retire la solución de trifeniltetrazolio cloruro, de cada caja y deposítela en el recipiente dispuesta para
residuos.

Evaluación.

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1. Observe cuantas semillas toman una coloración rojiza en el embrión para determinar su viabilidad.

Tenga en cuenta que; Para semillas pre-humedecidas muy pequeñas debe perforarse con una aguja o un
cuchillo afilado, lejos del tejidos esenciales de la semilla, o debe escarificado manualmente.

6. RESULTADOS.
Germinación.

Tabla #1. Peso de las semillas.

Peso (mg)
Lote de semillas Secas 1m 5m 15m 30m 60m
Especie sembrada

Especie sembrada
ácido giberélico AG3
Las semillas con ácido giberélico se pesan en seco y después de una hora de iniciar la imbibición.

1. Llene la siguiente tabla ubicando en las casillas de arriba el número de días después de germinado en
que se toma el dato y en las casillas al frente de cada lote de semillas: la cantidad de semillas que han
germinado.

Tabla # 2. Número de semillas germinadas.

# de semillas germinadas
Días después del inicio
de la prueba
Especie sembrada

Especie sembrada ácido

giberélico AG3

1. Realice las respectivas curvas de germinación.

2. Calcule el tiempo medio de germinación, velocidad media de germinación, T50 y T50´.
3. ¿Cuál semilla imbibe más rápido y por qué?
4. ¿Cuál tratamiento mostró el mejor resultado (mayor porcentaje de germinación en el menor tiempo)?
Explique
5. ¿Qué tipo de latencia presentan cada una de las semillas analizadas? Justifique
6. ¿Qué tipo de emergencia presentan cada una de las semillas?
7. Conclusiones
8. Bibliografía consultada

Viabilidad.

1. Llene la siguiente tabla.

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Tabla #1. Conteo de semillas tratadas con trifeniltetrazolio cloruro al 1%.

  # de semillas viables # de semillas NO viables

Especie
sembrada    

1. Describa los patrones de viabilidad de las semillas que usted observo en la prueba. Elabore dibujos.
2. Mediante un gráfico de barras represente el porcentaje de viabilidad, para cada una de las especies
3. Determine cuál considera que es el factora mas importante para conservar la viabilidad de la semilla en
cada una de las especies.
4. Conclusiones.
5. Bibliografía consultada.

7. BIBLIOGRAFIA
MINISTÉRIO DA AGRICULTURA, PECUÁRIA E ABASTECIMENTO. (2009). Regras para Análise de
Sementes, recuperado de http://www.agricultura.gov.br/arq_editor/file/2946_regras_analise__sementes.pdf.

García F., Villamil j. (s.f.). Viabilidad, vigor, longevidad y conservación de semillas, Viabilidad, recuperado de
http://www.coiaclc.es/wp-content/uploads/2016/05/Viabilidad.pdf.

Rodríguez I. Adam G. Durá J. (2008). Ensayos de germinación y análisis de viabilidad y vigor en semillas
SEMILLAS HORTÍCOLAS recuperado de
https://www.researchgate.net/publication/275328970_Ensayos_de_germinacion_y_analisis_de_viabilidad_y_vig
or_en_semillas

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