Volumen de

Tubo amilosa a 1 [S] en uM V 1/[S] 1/V

uM
1 10 0.01 39.75 100 0.025157233
2 20 0.02 79 50 0.012658228
3 30 0.03 118.5 33.33333333 0.008438819
4 40 0.04 158 25 0.006329114
5 50 0.05 196.6 20 0.00508647
6 60 0.06 230.5 16.66666667 0.004338395
7 70 0.07 257.4 14.28571429 0.003885004
8 80 0.08 277.7 12.5 0.003601008
9 90 0.09 293.3 11.11111111 0.003409478
10 100 0.1 303.9 10 0.003290556

350

300

250

200
Column E
150

100

50

0
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12
 0.03

0.025

0.02

0.015
Column G

0.01

0.005

0
0 20 40 60 80 100 120

Column E
Column G
Reactivos (en
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
µL)
Sustrat
o
Amilos 10ul 20ul 30ul 40ul 50ul 60ul 70ul 80ul 90ul 100ul
a 1 uM
Tampó
n
ensayo
csp
500 ul
·         Homogenizar los tubos y pre - incubar a 37 ºC por 5 min.
Enzima

·         Homogenizar cada uno de los tubos e inmediatamente llevar a Baño María a 37 ºC durante 5 min

DNSA 500 500 500 500 500 500 DNSA 500 500 500 500
·         A continuación medir la absorbancias en los distintos tubos a 540.ŋm.
Absorbancia
540 ŋm
Absorbancia
real

DAbs./min (V)

µmoles de
maltosa en 5 3.95 7.9 11.85 15.8 19.66 23.05 25.74 27.77 29.33 30.39
min

µmoles de
0.79 1.58 2.37 3.16 3.932 4.61 5.148 5.554 5.866 6.078
maltosa/min

UI 39.5 79 118.5 158 196.6 230.5 257.4 277.7 293.3 303.9