IYA012 – QUÍMICA

PRÁCTICAS VIRTUALES
GRUPO III: PRÁCTICA 4. PVM – GENERACIÓN E
INTERPRETACIÓN DE CURVAS DE CALIBRACIÓN

INTRODUCCIÓN

La refractometría es un método óptico que determina la velocidad de propagación de

la luz en un medio, la cual se relaciona directamente con su densidad. Para emplear
este principio se utiliza la refracción de la luz, la escala de medición de este principio se
llama índice de refracción.

En el siguiente video se expone el funcionamiento de este instrumento de medición:

VIDEO

En este experimento se pretende determinar el contenido de un analito (sacarosa) de

algunas muestras de bebidas azucaradas y edulcoradas y comparar el dato
experimental obtenido con la información que se indica en el etiquetado de la bebida.

Para realizar este objetivo utilizaremos varias disoluciones de concentración conocida

de sacarosa en agua a partir de una disolución patrón y determinaremos la relación
existente entre concentración en % masa/volumen de sacarosa y los Brix.

Después obtendremos dos gráficos en los que se verán reflejadas las relaciones entre
Brix y el %m/v y la molaridad de la disolución de sacarosa.

OBJETIVOS

• Preparar varias disoluciones de concentración conocida de sacarosa en agua a partir

de una disolución patrón. Determinar la relación existente entre concentración en %
masa/volumen de sacarosa y los Brix.
• Determinar el contenido de sacarosa de algunas muestras de bebidas azucaradas y
edulcoradas y comparar el dato experimental obtenido con la información que se
indica en el etiquetado de la bebida.

1
NORMAS DE SEGURIDAD

Se describe una práctica que sólo puede desarrollarse en un laboratorio físico. La

persona que la desarrollara debería cumplir con las siguientes normas de seguridad:

• Realizar este experimento debe desarrollarse en el interior de una campana de

gases por motivos de seguridad.
• Utilizar guantes y gafas de seguridad.
• Queda totalmente prohibido la aspiración con la boca de reactivos.
• Utilizar bata.

MATERIALES Y REACTIVOS

Figura 1. Materiales.

Materiales
• Matraz aforado 10 mL.
• 11 Tubos y una gradilla.

• Pipeta graduada 10 mL.

• Pera de goma.
• 2 vasos de precipitados
Figura 2. Equipo.
100 mL.

• Pipetas Pasteur.
• Vortex.
• Refractómetro ºBrix.
(Hanna).

2
 Figura 3. Reactivos.

Reactivos y muestras
• Disolución de sacarosa
0.5M
• Agua destilada
• Muestras problema (coca-
cola, coca-cola zero,
nestea)

NORMAS DE SEGURIDAD

1. Para realizar esta práctica en laboratorio es necesario el uso de guantes de látex y

bata de laboratorio como medidas de protección.

PROCEDIMIENTO

Los pasos que se seguirán durante el desarrollo de esta práctica incluyen:

1. Preparación de muestra patrón.

2. Preparación de los patrones secundarios a partir de la solución de patrón primario.
3. Obtención de datos y generación de rectas de calibración
4. Medida y cálculo de la sacarosa de las muestras problema y del error relativo.

Se describen a continuación cada uno de ellos:

1. Preparación de muestra patrón

Para preparar la muestra patrón se necesita de forma previa, desarrollar los cálculos
que permitan preparar una disolución patrón de sacarosa de concentración
0.5M. Estos son:
a) Datos:
i. Concentración: 0.5 M
ii. Volumen: 100 mL = 0.1 L
iii. Peso molecular de sacarosa: 342.29g/mol

3
 b) Fórmulas:

𝑛𝑛º 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚
Molaridad =
𝑣𝑣𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑚𝑚𝑚𝑚𝑛𝑛 (𝐿𝐿)

𝑀𝑀𝑀𝑀𝑚𝑚𝑀𝑀 (𝑔𝑔)
nº moles= 𝑔𝑔
𝑃𝑃𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑚𝑚𝑀𝑀𝑙𝑙 ( )
𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚

c) Desarrollo de los cálculos:

Calcular los moles de sacarosa necesarios para preparar la disolución patrón:
𝑛𝑛º 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚
Molaridad =
𝑣𝑣𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑚𝑚𝑚𝑚𝑛𝑛 (𝐿𝐿)

0.5M=número de moles/0.1L
Nº moles sacarosa= 0,5 M x 0.1L
Nº moles sacarosa= 0.05
Convertiremos los moles de sacarosa a gramos:
𝑀𝑀𝑀𝑀𝑚𝑚𝑀𝑀 (𝑔𝑔)
Nº moles= 𝑔𝑔
𝑃𝑃𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑚𝑚𝑀𝑀𝑙𝑙 ( )
𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚

0.05 moles= Masasacarosa(𝑔𝑔)/342.29 (𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚)

Masasacarosa= 0.05moles x 342.29 g/mol
Masasacarosa= 17.11 g
Para la preparación de una disolución de 100 mL de disolución se deberán utilizar
los 17.11g de sacarosa calculados para 100 mL de agua destilada.
2. Preparación de preparación de los patrones secundarios a partir de la solución de
patrón primario.
Para ello, se deberán disolver distintos volúmenes del patrón primario. En las
actividades a desarrollar sobre esta práctica se te pedirá que realices los cálculos
necesarios para preparar la siguiente serie de diluciones de 10 mL.
Tabla 1. Concentración del patrón secundario y volumen correspondiente del patrón primario
utilizado

4
 La fórmula que necesitarás emplear para estos cálculos es la siguiente:

Fórmula: C0 x V0 = C1 x V1

Nota: Para la solución de concentración de 0.5 no es necesario diluir porque el

patrón ya tiene esta concentración: 0.5M x V0 = 0.5M x 10mL => V0 = 10 mL. Sin
embargo, deberás realizar los mismos cálculos para determinar el volumen de
disolución patrón 0.5 M de sacarosa necesario para preparar los otros patrones.

A continuación, se describe de manera visual los pasos a seguir en el laboratorio. Para

ello, se necesita conocer de manera previa cuáles son los cálculos que has desarrollado:

1. Preparar la solución patrón.

Figura 4. Trasvase de la solución de sacarosa 0.5M a un vaso para mayor comodidad de trabajo.

5
2. Preparar cada una de las soluciones patrón siguiendo el procedimiento siguiente:
Figura 5. Pipeteo.

6
Paso 1: Medición de volumen de solución patrón con pipeta.
Figura 6. Trasvase al matraz.

Paso 2: Trasvase del volumen de sacarosa medido al matraz.

Figura 7. Aforamiento.

7
 Paso 3: Aforar con agua destilada hasta la marca de enrase.
Figura 8. Menisco.

Paso 3: Matraz aforado a 10 mL.

Figura 9. Trasvase a los tubos.

Paso 4: Trasvase del matraz al tubo correspondiente.

3. Una buena organización del trabajo es imprescindible. En tal sentido, se debe:
• Almacenar cada disolución en tubos de ensayo debidamente rotulados.
• Rotular el cuerpo del tubo y no el tapón puesto que los tapones pueden llegar a
confundirse de tubos.

8
 Figura 10. Disoluciones.

4. Una vez preparadas todas las disoluciones se procederá con la medición de los ºBrix
de cada una de ellas. Para ello, es preciso contar con un refractómetro.
Figura 11. Refractómetro.

Los pasos a dar para su uso son:

Paso 1: Calibración del refractómetro:
Encender el refractómetro y calibrarlo con agua destilada (la lente debe
quedar perfectamente cubierta por el agua destilada) colocando una gota en
el lector y pulsando a continuación el botón “cero”.

9
 Figura 12. Calibración con agua destilada

Figura 13. Medición patrón 0M (0.0 ºBrix)

Paso 2: Medición de cada una de las soluciones para cada patrón secundario
con el refractómetro. Para cada disolución se debe:
Tomar una muestra de cada disolución con una pipeta Pasteur y depositarlo
sobre el lector del refractómetro
Leer la medición de los ºBrix de la muestra que es dada por el refractómetro
para cada patrón que se coloca sobre el lector.
Figura 14. Medición de disoluciones.

Anotar cada medición en la fila ºBrix de la siguiente tabla:

10
Concentración (M) de
ºBrix %m/v
disolución patrón

0.5

0.45

0.4

0.35

0.3

0.25

0.2

0.1

0.15

0.1

0.0

Enjuagar y secar la lente con papel absorbente entre lectura y lectura

Tras desarrollar todas las mediciones, obtenemos los siguientes datos:

Concentración (M) de
ºBrix %m/v
disolución patrón

0.5 16.2

0.45 14.8

0.4 12.4

0.35 11.5

0.3 9.9

0.25 8.5

0.2 6.8

0.1 5.1

0.15 3.4

0.1 1.7

0.0 0

11
5. El siguiente paso consistirá en convertir cada una de las concentraciones C2 [M] en
[%m/v] para completar la última fila de la tabla. Para ello, se necesitan las siguientes
fórmulas:

𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑠𝑠𝑚𝑚
𝑀𝑀 =
𝐿𝐿𝑑𝑑𝑑𝑑𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑚𝑚𝑑𝑑ó𝑛𝑛

𝑚𝑚 𝑔𝑔𝑠𝑠𝑚𝑚𝑚𝑚𝑠𝑠𝑠𝑠𝑚𝑚
% = 𝑚𝑚𝐿𝐿 ·100
𝑣𝑣 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑠𝑠𝑚𝑚𝑚𝑚𝑠𝑠𝑑𝑑𝑑𝑑ó𝑛𝑛

Pmolecular=masa (g)/nº moles

Convertimos cada concentración (M) en %m/v utilizando la siguiente fórmula que

integra las tres anteriores:

0.5𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 342.29 𝑔𝑔 1𝐿𝐿

· · x 100 = 17.11% m/v
𝐿𝐿 1 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 1000 𝑚𝑚𝐿𝐿

Sabiendo que el peso molecular sacarosa es de 342.29 g/mol, podemos relacionar

los datos de molaridad para convertirlos en % m/v:

𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑠𝑠𝑚𝑚
𝑀𝑀 =
𝐿𝐿𝑑𝑑𝑑𝑑𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑣𝑣𝑚𝑚𝑑𝑑ó𝑛𝑛

La molaridad es el número de moles en 1L de disolución M=0.5mol/L.

La masa molecular es el número de gramos de una mol de moléculas de sacarosa
342.29g/1mol.
Al multiplicar estos dos obtenemos la masa de sacarosa presente en un litro de
disolución, porque, utilizando la fórmula del peso molecular:

Pmolecular=masa (g)/1 mol

nº de moles presentes en la solución*Pmolecular= masa de soluto presente en la

solución
Este resultado es el numerador de la fórmula de la masa molecular.
La fórmula de la molaridad relaciona la masa en gramos de soluto con los mL de
disolución

𝑚𝑚 𝑔𝑔𝑠𝑠𝑚𝑚𝑚𝑚𝑠𝑠𝑠𝑠𝑚𝑚
% = 𝑚𝑚𝐿𝐿 ·100
𝑣𝑣 𝑑𝑑𝑑𝑑𝑠𝑠𝑚𝑚𝑚𝑚𝑠𝑠𝑑𝑑𝑑𝑑ó𝑛𝑛

por esto hemos de convertir litros a mililitros 1L/1000mL, y para tener la fórmula de
del porcentaje masa volumen solo nos falta multiplicar por 100:

0.5𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 342.29 𝑔𝑔 1𝐿𝐿

· · x 100 = 17.11% m/v
𝐿𝐿 1 𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 1000 𝑚𝑚𝐿𝐿

Así tenemos para la solución de 0.5M la siguiente fórmula:

(0.5mol/1L)*(342.29g/1mol)*(1L/1000mL)*100

12
 Las unidades destacadas a amarillo están presentes en numerador y denominador
por lo que se anulan y el resultado final será:

17.11% m/v para solución la solución [0.5M]

Realizando los mismos cálculos para los otros patrones secundarios llegamos a las
siguientes soluciones:
• 0.50M x 342.29𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚/1000mL= 0.1711g/L x 100= 17.11%
• 0.45M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.1540g/L x 100= 15.40%
• 0.40M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.1369g/L x 100= 13.69%
• 0.35M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.1196g/L x 100= 11.96%
• 0.30M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.1026g/L x 100= 10.26%
• 0.25M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.0855g/L x 100= 8.55%
• 0.20M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.0684g/L x 100= 6.84%
• 0.15M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.0513g/L x 100= 5.13%
• 0.10M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.0342g/L x 100= 3.42%
• 0.05M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.0171g/L x 100= 1.71%
• 0.00M x 342.29 𝑔𝑔/𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 /1000mL= 0.0000g/L x 100= 0.00%
Tabla 1. Concentración (M) de disolución patrón, ºBrix y %m/v para cada patrón secundario

Concentración (M) de
ºBrix %m/v
disolución patrón

0.5 16.2 17.11

0.45 14.8 15.40

0.4 12.4 13.69

0.35 11.5 11.96

0.3 9.9 10.26

0.25 8.5 8.55

0.2 6.8 6.84

0.1 5.1 5.13

0.15 3.4 3.42

0.1 1.7 1.71

0.0 0 0.00

13
6. Con los datos obtenidos, generar dos rectas de calibración, una en la que se enfrenta
la concentración Molar frente a los ºBrix, y otra en la que se enfrenta la concentración
%m/v frente a los ºBrix.

7. Una vez realizados los cálculos, se procede con la medida del del contenido de
sacarosa de las muestras de bebidas proporcionadas. Para ello, se debe proceder
del mismo modo empleado para medir los ºBrix de las disoluciones con el
refractómetro y se obtienen los siguientes datos:
Tabla 2. Resultado del ºBrix de cada muestra problema

Muestra ºBrix

Nestea 7.7

Coca-cola 10.3

Coca-cola zero 0.0

Para calcular la concentración de sacarosa debemos sustituir el x de la ecuación por el

ºBrix correspondiente para cada muestra.

14
Para calcular la concentración %m/v de las muestras problema, se debe emplear la
ecuación de la recta obtenida en el gráfico donde se encuentra enfrentados ºBrix frente
a [%m/v].

El cálculo del error relativo se hace utilizando la siguiente fórmula:

[𝐶𝐶]𝑠𝑠𝑚𝑚ó𝑙𝑙𝑑𝑑𝑚𝑚𝑀𝑀 − [𝐶𝐶]𝑚𝑚𝑒𝑒𝑒𝑒𝑚𝑚𝑙𝑙𝑑𝑑𝑚𝑚𝑚𝑚𝑛𝑛𝑠𝑠𝑀𝑀𝑚𝑚
𝐸𝐸𝐸𝐸𝐸𝐸𝑚𝑚𝐸𝐸 𝐸𝐸𝑟𝑟𝑚𝑚𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑚𝑚 (%) = 𝑥𝑥100
[𝐶𝐶]𝑠𝑠𝑚𝑚ó𝑙𝑙𝑑𝑑𝑚𝑚𝑀𝑀

El resultado es el porcentaje de error, el desfase relativamente al valor esperado.

CUESTIONARIO

Completa la Plantilla de Prácticas Virtuales dando respuesta a:

Calcula el porcentaje de sacarosa presente en las muestras

Nota: Si alguna concentración es negativa la debes considerar cero.

Considerando que las etiquetas indican las siguientes masas de azúcares para 100
mL:
• Nestea 7.7g .
• Coca-cola 10.6.
• Coca-cola zero 0.

Calcula el error relativo.

15
16