UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADADAS-“E.S.P.

E”
INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
MICROBILOGÍA I
Nombre: Stefany Recalde Calificación: 3/4
NRC: 9194
Fecha: 2020-06-27

Título: Determinación de la contaminación directa, indirecta y ambiental en cajas Petri en el

Laboratorio de Microbiología, con levaduras y microorganismos ambientales.
Resumen
El objetivo de la práctica consistió en demostrar la posibilidad de contaminación con
microorganismos en el área de trabajo del laboratorio de microbiología. Se realizó para
reconocer los tipos de contaminación que existen. El procedimiento se llevó a cabo integra la
utilización de normas de bioseguridad y el uso de cajas Petri como unidades experimentales
para inocularlas y comprobar los tipos de contaminación producidos en el laboratorio. Una
vez incubadas las cajas Petri a 37º C se observaron los resultados de los cuales se evidenció
como varios microorganismos crecieron, no solo las levaduras utilizadas durante el
experimento. Como conclusión se obtuvo que la contaminación se puede reproducir en todas
partes y para evitarla se deben utilizar varias medidas, con el fin de minimizar la proliferación
de los microorganismos.
Palabras clave: riesgos, inoculación, bioseguridad, experimento.
Introducción:
Antecedentes
Desde siempre, el hombre ha estado rodeado de microorganismos, provocando
contaminación en nuestro alrededor. Los microorganismos fueron observados por primera
vez con un microscopio por Anton Van Leeuwenhoek en 1683. Sin embargo, el estudio de
los microrganismos aparece como una ciencia especializada a finales del siglo XIX,
encabezada por Pasteur y Koch con el cultivo de los mismos (Stella, Castañeda, & Romero,
2015) .
La Universidad de Cundinamarca en Bogotá, realizó el control de la contaminación
biológica en los laboratorios de docencia de la misma institución. El diagnóstico fue
sustentado con análisis microbiológicos de cultivo y crecimiento. Se obtuvieron resultados de
diseminación de contaminación y se plantearon medidas para la disminución de presencia de
patógenos en los laboratorios [ CITATION Álv03 \l 12298 ]
 Justificación
Es conveniente demostrar la existencia de microorganismos y el riesgo de
contaminación de cultivos o a personas en el trabajo en el Laboratorio, debido a que de esa
manera se puede prevenir dicho acontecimiento. Además, resulta imprescindible para la
carrera de Ingeniería en Biotecnología, conocer la manera de prevenir la contaminación de
microorganismos con los que interactuamos y los riesgos que conlleva el trabajo con estos en
el laboratorio.
Marco Teórico
La contaminación se refiere a la presencia desconocida y no deseada por agentes
microbianos infecciosos o no infecciosos presentes en nuestros alrededor, como en los
instrumentos de trabajo, en la ropa, agua, medios de cultivo, etc. (Manual de prácticas de
microbiología, 2020).

Un laboratorio de Microbiología es un lugar habilitado para manejar y estudiar

microorganismos, por ello es propenso a sufrir contaminación directa, indirecta o ambiental.

La contaminación por microorganismos puede darse, principalmente por descuidos en

la desinfección de los materiales y lugares de trabajo, por inadecuada manipulación de
muestras, fallida esterilización del medio de cultivo o por defectos en el funcionamiento y
manipulación de las cabinas de flujo laminar u otros equipos [ CITATION Yel00 \l 12298 ].

Por ello es importante la bioseguridad, que es un conjunto de normas, protocolos y

medidas que son aplicados en las múltiples actividades dentro del laboratorio, con el fin de
contribuir a l prevención de riesgos o infección por microrganismos (Combol, 2016).
Objetivo General:
Determinar la contaminación directa, indirecta y ambiental en cajas Petri en el
Laboratorio de Microbiología con Levaduras y microorganismos ambientales
Objetivos Específicos:

 Determinar la posibilidad de contaminación directa en el laboratorio.

 Establecer la posibilidad de contaminación indirecta en el laboratorio.

 Identificar la posibilidad de contaminación ambiental en el laboratorio.

Hipótesis
Existe contaminación indirecta, directa y ambiental, en el laboratorio de
Microbiología de la UFA-ESPE.
Materiales y Métodos:
1. Contaminación directa
Se limpió y desinfectó el área de trabajo con savlón, se verificaron los mecheros y
fueron encendidos, para luego etiquetar las cajas Petri con letras a-f, identificando el ejercicio
a desarrollar. Por último, antes de los ejercicios, se contaminó un dulce con levaduras.

Una persona del grupo de seis personas tocó el dulce contaminado con sus dedos y
posteriormente tocó la superficie del Agar nutriente de la primera caja Petri etiquetada. La
siguiente persona tocó los dedos del anterior compañero y mientras este iba a lavarse las
manos, la persona número 2 tocó la superficie del Agar nutriente de la siguiente caja. Así se
realizó hasta terminar con la sexta persona. Toda la actividad se realizó en la mesa de trabajo
junto al mechero. Las cajas etiquetadas fueron selladas con parafilm y fueron llevadas a la
incubadora y permanecieron ahí por 24h a 37°C.
2. Contaminación indirecta
Utilizando el mismo chocolate contaminado con levaduras, para el procedimiento se
procedió a realizar los siguientes pasos. Evitando la lavada de manos de los participantes y
manteniendo un mechero prendido, primero se rotularon con letras (a-f) seis cajas Petri
dispuestas a ser contaminadas. Segundo, el primer participante colocó sus dedos directamente
con el chocolate, inoculó una caja Petri (a) con medio agar nutriente y luego tocó una toalla.
La siguiente persona puso sus manos en la toalla, inoculó la caja Petri (b) y contaminó un
jabón. Una tercera persona cogió el jabón con sus dedos, los pasó por la caja Petri (c) y la
mesa. Luego se repitió el procedimiento para inocular las cajas faltantes pero contaminando
un lápiz y el mandil de otra persona. Todos los participantes debieron lavarse las manos
después de realizar la práctica. Las cajas Petri se incubaron a 37º C por 24 horas y se
observaron los resultados obtenidos.
3. Contaminación ambiental
Se destaparon dos cajas de PDA estéril, previamente etiquetadas, en el laboratorio. Las
cajas permanecieron abiertas por 20 minutos y posteriormente fueron selladas con parafilm,
llevadas a la incubadora y permanecieron ahí por una semana a 37℃.
Los procedimientos dados fueron obtenidos de (Manual de prácticas de microbiología, 2020)
Resultados:
1. En cada una de las cajas se puede observar un tipo de nata color blanco que recubre la
caja Petri, esto significa el crecimiento masivo de microorganismos.

CAJA 1-a CAJA 1-b

CAJA 1-c CAJA 1-d

CAJA 1-f

CAJA 1-e

Figura 1. Fotografía cajas Petri del ejercicio por contaminación directa, se inocularon tocando
directamente al microorganismo.

1. En las cajas a,b,d,f y e se presenta crecimiento masivo, mientras que en las cajas g y c
se observa crecimientos de colonias aisladas.
 CAJA 2-a
CAJA 2-b

CAJA 2-c CAJA 2-d

CAJA 2-e CAJA 2-f

Figura 2. Fotografía de cajas Petri del experimento-contaminación indirecta, se tocaron varios

objetos por diferentes personas para observar la presencia de microorganismos.

3. En la caja se puede observar el crecimiento de diferentes microorganismos en colonias

aisladas.

Figura 3. Fotografía caja Petri del experimento –contaminación ambiental, para observar la existencia
de microorganismos, la caja se dejó expuesta.
En la caja control-1 se puede observar que la caja Petri permanece estéril, sin la presencia de
crecimiento de microorganismos y en la caja control-2 se puede observar el crecimiento de las
levaduras.
 Control-1

Control-2

Figura 4. Fotografías cajas Petri-control, en el control-1 la caja se encuentra estéril, en el control-2 se

inoculó con levaduras.
Discusión:
En el 2012 se descubrió contaminación cruzada de chocolate en EEUU, el cual resultó
positivo para Salmonella en un laboratorio. No se reveló este microorganismo en un inicio
porque era muy insignificante la cantidad de células en el momento del empaque, más no se
esperaba que proliferen posteriormente y no se puedan detectar en el momento adecuado
(Moreno & Berlanga Herranz, 2017). Esta situación explicaría que existe contaminación por
medio de los instrumentos usados en el laboratorio y la incapacidad que se tiene para evaluar
previamente la contaminación indirecta, sino hasta después cuando observamos los resultados
de crecimiento masivo en las cajas Petri finales.

En la universidad Distrital de Bogotá, se realizó un estudio, en donde se evaluaba la

presencia de diferentes microorganismos en las aulas de dicha universidad, se encontró que
en cada aula había presencia de ellos.
El ambiente interno de las edificaciones, en este caso los laboratorios, es un hábitat natural
para los microorganismos cuyas fuentes incluyen la entrada de aire por puertas y ventanas.
Estos microorganismos pueden permanecer inactivos por un tiempo en el polvo y en las
superficies [ CITATION Rod17 \l 3082 ].

Los resultados obtenidos en el procedimiento de contaminación ambiental indican

que, además de las bacterias que se acumulan normalmente en nuestra piel, cuando se entra
en contacto con bacterias, también existe microrganismos en el ambiente del laboratorio de
microbiología, aumentando los riesgos de contaminación.
Conclusión:
 La manipulación directa o indirecta de objetos contaminados en el laboratorio trae
como consecuencia una proliferación de la contaminación en otros medios. Aun así, la
 contaminación se encuentra en todas partes, pero se puede controlar mas no erradicar
mediante medidas de bioseguridad.
 Un laboratorio de microbiología siempre va a estar expuesto a contaminación, por ello
es importante trabajar con la desafección adecuada, con el fin de evitar infecciones o
alteración de nuestros resultados en la siembra de cultivos.

BIBLIOGRAFÍA

Álvarez de Weldefort, A., & Campuzano, S. (2003). Control de la contaminación biológica en

los laboratorios de docencia de la Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca en
Bogotá,Colombia. NOVA, 5.

Capó, Y. A. (2000). Control y prevención de la contaminación microbiana en la

micropropagación de plantas. CENIC, Ciencias Biológicas, 5.

Rodríguez, I. (2017). En nuestro cuerpo viven unos 48 billones de bacterias, 60 billones de

virus y varios miles de millones de hongos. Recuperado el 17 de Octubre de 2018, de
La Nación: https://www.nacion.com/ciencia/aplicaciones-cientificas/en-nuestro-
cuerpo-viven-unos-48-billones-de-bacterias-60-billones-de-virus-y-varios-miles-de-
millones-de-hongos/ZBPGABKRE5AZLJUVGTHZ2GMP4Q/story/

Combol, A. (2016). BIOSEGURIDAD.

Moreno, R. G., & Berlanga Herranz, M. (2017). AMBIOCIENCIAS-REVISTA DE

DIVULGACIÓN CIENTÍFICA 100 FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y
AMBIENTALES. UNIVERSIDAD DE LEÓN-La Evolución y la Microbiología-Darwin y
la enorme diversidad microbiana.

Stella, G., Castañeda, F., & Romero, A. (2015). Artículo original producto de La
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Koch, A. (2020) Manual de prácticas de