Manual de Técnicas de Necroidentificación INACIF-1 PDF

2016
Manual de
Necroidentificación Humana
Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala (INACIF)
Guatemala, diciembre de 2016.

MANUAL DE NECROIDENTIFICACIÓN HUMANA
INSTITUTO NACIONAL DE CIENCIAS FORENSES DE GUATEMALA (INACIF)
Director General
Dr. Jorge Nery Cabrera Cabrera
Jefe del Departamento Técnico y Científico
Dr. Sergio René Rodas Muñoz
Jefe de Medicina Forense Metropolitana
Dr. Carlos Augusto Rodas González
Jefe de Medicina Forense y Clínica Regional
Dr. Jorge Destarac Godoy
Jefe de Laboratorios de Criminalística
Licda. Ruth Oralia García Marroquín
Apoyo
Comité Internacional de la Cruz Roja (CICR)
Guatemala, Diciembre de 2016.

Manual de Necroidentificación Humana
Contenido
I. Prólogo ....................................................................................................................................... 3
II. Objetivo del manual .................................................................................................................. 5
III. Justificación del manual ........................................................................................................... 5
IV. Presentación ............................................................................................................................... 5
V. Proceso de necroidentificación humana .................................................................................. 6
1.0 Recepción de cadáveres .................................................................................................. 9
2.0 Identificación de cadáveres por medicina forense...................................................... 14
3.0 Necroidentificación humana por medio de comparaciones dactilares ..................... 30
4.0 Necroidentificación humana por medio de odontología forense ............................... 41
5.0 Necroidentificación humana por medio de antropología forense ............................. 52
6.0 Entrevista técnica para identificación de cadáveres y búsqueda de desaparecidos 60
7.0 Necroidentificación humana por medio de genética forense ..................................... 72
8.0 Entrega de cadáveres identificados ........................................................................... 142
9.0 Inhumación de cadáveres ........................................................................................... 155
Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 2

I. Prólogo
Etimológicamente, la palabra Identidad, deriva de la raíz latina ídem, que significa "el mismo"
o "lo mismo"; es decir, que para un sólo individuo existe un conjunto de rasgos propios que lo
caracterizan y diferencian de los demás y lo definen como él mismo. La identificación es, por
tanto, el proceso de comparación de ese conjunto de características para determinar la identidad
de un individuo desconocido. La definición se convierte más ambigua y abstracta si es abordada
por otras ramas del conocimiento humano, tales como la filosofía, la antropología social, la
sociología, etc. Por ello, es conveniente establecer que la identificación forense -que tiene
atingencia al foro de los tribunales de justicia- es un conjunto de acciones sucesivas,
metodológicamente establecidas, que se fundamentan en el conocimiento derivado de las
ciencias exactas; que son objetivas, imparciales y reproducibles, que se basan en aspectos
biológicos y físicos de un individuo para establecer su preciada identidad.
Una de las tareas más nobles de las ciencias forenses es la identificación de personas fallecidas
(cadáveres) y restos humanos, por cuanto el éxito de esta empresa tiene profundas implicaciones
humanas, tanto en el ámbito emocional y social, al favorecer el cierre del círculo del duelo a los
familiares o allegados sobrevivientes, permitiéndoles conocer qué fue lo que le sucedió a su ser
querido, así como saber del destino de sus restos mortales. Así mismo, facilitan la reparación
debida, coadyuvando a esclarecer los hechos durante la investigación judicial y les permiten
ejercer sus derechos ciudadanos en el ámbito civil, ofreciendo medios de prueba categóricos para
la ejecución de procesos sucesorios testamentarios, cobro de seguros de vida, cambios en el
registro del estado civil, etc. Las consecuencias de una correcta identificación forense tienen, por
tanto, un relevante significado a nivel humanitario, constituyendo el saber de los familiares y/o
allegados como un derecho inherente a ellos, un deber moral hacia la sociedad y el
esclarecimiento de cualquier implicación jurídica.
Esta insigne tarea de identificación forense se lleva a cabo en un ámbito en el que convergen una
gran variedad de factores sociales entremezclados, que suponen un gran esfuerzo adicional para
llevar a feliz término las actividades de las distintas disciplinas forenses. Las víctimas del
conflicto armado en la última mitad del siglo XX; la migración interna en las temporadas de
cosecha, las migraciones en general el turismo, la trata de personas, los secuestros, el crimen
organizado, la delincuencia común, y también, por qué no, los eventos fortuitos con desenlaces
mortales, tales como los desastres naturales, accidentes aéreos, terrestres y marítimos. Todos
ellos confluyen, en siniestra confabulación, dificultando el trabajo de identificación.
Con la creación del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala se inició un esfuerzo
por emancipar y fortalecer el desarrollo de las distintas disciplinas forenses que tanto necesitaba
nuestro país. Al enriquecimiento tecnológico se agregó la regulación procedimental -
internacionalmente aceptada- de los procesos de investigación científica en cada una de las áreas
del quehacer forense. Al principio, como habitualmente sucede, los progresos fueron discretos y
lentos. Pero a medida que los mecanismos de abordaje de los casos fueron dando frutos, se hizo
evidente que trabajando solos nunca se iban a alcanzar los objetivos planteados. Por ésta razón,
al inicio de la gestión administrativa 2012-2017 se concretaron convenios de cooperación
interinstitucional entre INACIF y RENAP y, entre INACIF y el Gabinete de Identificación de
la Policía Nacional Civil, adscrita al Ministerio de Gobernación, que aunado a la adquisición del
Sistema Automatizado de identificación por medio de Huellas -AFIS- vino a eficientar los
procesos de comparación de huellas dactilares, siendo éste método uno de los más confiables por
las características de inmutabilidad, perennidad y variedad de formas, que las hacen únicas para
cada ser humano.

Sin embargo, esta valiosa herramienta para la identificación humana tiene sus limitaciones: sólo
contrasta las huellas dubitadas con registros previamente establecidos, por lo que, personas que
nunca fueron inscritas en el Registro Nacional de Personas, la destrucción o deterioro de los
archivos del antiguo Registro Civil, menores de edad a quienes aún no se les han enrolado sus
registros dactilares en la base de datos AFIS, extranjeros, etc. no pueden ser identificados por
este medio.
En consecuencia, durante la presente administración, se llevó a cabo un arduo trabajo de

investigación y recopilación de métodos y mejores prácticas para estandarizar un esquema de
trabajo que permitiera la recopilación de datos de interés identificativo por medio de un formato
de recolección de datos post mortem, que incluye características individualizantes de orden
médico, odontológico, antropológico y genético, según sea el caso.
Al mismo tiempo, se trabajó en mejorar las técnicas de entrevista y en los formularios de

recolección de datos ante mortem, conscientes que las posibilidades de éxito en el cotejo
identificativo dependen de la calidad y cantidad de información disponible para el cotejo.
Finalmente el auge y desarrollo tecnológico de la determinación del genoma humano nos ofrece
en la actualidad una poderosa herramienta que nos permite superar los límites de las otras
disciplinas forenses en materia de identificación humana. La inversión y desarrollo tecnológico
del laboratorio genético no tiene parangón en la región centroamericana. Su crecimiento durante
esta administración ha sido sustancial. No sólo se ha tratado de equipamiento sino
enriquecimiento de sus posibilidades de actuación: luego de muy estrictas medidas de evaluación,
el laboratorio de genética fue autorizado para poder utilizar la base de datos del CoDIS
(Combined DNA Index System), que permite relacionar perfiles genéticos entre sí para establecer
filiaciones. Ésta herramienta es de vital importancia para la identificación de restos humanos
encontrados en desatares naturales, como el suscitado el uno y dos de octubre de 2015 en la
Colonia El Cambray 2, ubicado en el municipio de Santa Catarina Pínula, donde un alud arraso
con las viviendas que encontró a su paso, dejando cientos de víctimas sin identificar. Su utilidad
fue puesta a prueba y los resultados fueron más que alentadores.
Hemos llegado al punto en que cada una de las disciplinas forenses dedicadas a la identificación
humana ha alcanzado niveles de especialización admirables; sin embargo, muchos casos de la
vida real dependen de más de una disciplina forense para ser resuelto. Es entonces que la
coordinación y el trabajo en equipo se convierten en un elemento indispensable para conseguir
una identificación positiva.
Ese es el objetivo del presente manual: compilar en un solo documento todos los procedimientos
que han probado ser exitosos para la identificación humana, estandarizar criterios de actuación
y establecer los mecanismos de interacción entre todas las especialidades forenses para eficientar
nuestros procesos y, con ello, reducir nuestros tiempos de respuesta.
Confío en la mística de nuestros expertos y tengo la certeza que, con la aplicación de los
preceptos de este manual, los resultados de nuestra pasión por servir al prójimo, se verá coronada
con el éxito.
Un agradecimiento especial a la Cruz Roja Internacional por su incondicional apoyo al instituto,

al sistema de justicia y a los ciudadanos guatemaltecos en la creación de este manual.
Dr. Jorge Nery Cabrera Cabrera

Director General del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala (INACIF).

II. Objetivo del manual
Documentar el proceso de identificación humana para el Instituto Nacional de Ciencias Forenses

de Guatemala INACIF, que permita la estandarización de las actividades de identificación de
cadáveres en la práctica forense, de manera controlada, confiable y reproducible, que realiza el
Área de Tanatología en las sedes periciales del Instituto.
III. Justificación del manual
El manual de necro identificación humana es una herramienta que permite integrar una serie de
acciones encaminadas a una gestión eficaz y eficiente de cadáveres no identificados o
presuntamente identificados, que ingresan a las diferentes sedes periciales del Instituto y a
mejorar la calidad del servicio proporcionado a personas usuarias que reclaman el cuerpo de la
persona fallecida qué están en búsqueda de una persona desaparecida.
IV. Presentación
Este manual es el resultado del trabajo grupal realizado por profesionales y técnicos
especializados del INACIF, quienes actúan en las posibles rutas de trabajo para identificar a
personas fallecidas sujetas a procesos periciales del Instituto.
Cabe destacar que el instituto cuenta con los procedimientos, instructivos y formularios
necesarios para el desarrollo de las actividades médico legales y que de éstas se extraen
elementos importantes para establecer y estandarizar lineamientos y flujos de trabajo claros,
respecto a la identificación humana, además de establecer nuevos procedimientos para la
atención de usuarios que se avocan a las sedes periciales en búsqueda de una persona
desaparecida.
La identificación humana en el ámbito forense es una comprobación de carácter legal realizada

mediante el análisis científico de las concordancias entre la información disponible acerca de
una persona y las características individualizantes de un cadáver. El análisis multidisciplinario
para determinar la identidad de una persona fallecida se facilita con la centralización de la
información disponible a nivel institucional (fichas de datos antemortem y post mortem).
De la comparación de la información obtenida por medicina forense, lofoscopia, odontología y

antropología, enfatizan la necesidad de abordar la identificación como un proceso secuencial que
agote primero los recursos altamente eficaces y mucho menos costosos de estas disciplinas antes
de realizar las pruebas genéticas.
De tal manera, se ofrece el presente trabajo, para una mejor comprensión de la labor que lleva a
cabo el equipo integrado por distintas disciplinas forenses, con la finalidad de coadyuvar con el
conocimiento en esta disciplina científica.

V. Proceso de necroidentificación humana
La identificación forense de cadáveres y restos humanos es un proceso que tiene relevancia tanto
jurídica como humanitaria. La correcta identificación científica de personas fallecidas
comprende la utilización de todos los elementos que las ciencias forenses aportan al estudio de
cadáveres y restos humanos en la resolución de los casos judiciales, pues la identificación de las
personas puede conducir al esclarecimiento de los hechos, además del derecho de saber que
tienen las familias y/o allegados sobre el paradero de los mismos.
Para una adecuada identificación forense de los cadáveres se debe tener en cuenta los siguientes
aspectos básicos: determinación de la talla, rango de edad, sexo y ascendencia racial y
descripción de características individualizantes que aporten a la identificación.
Para el desarrollo de los métodos de identificación humana se deben llevar a cabo una serie de
pasos que aporten elementos claves que ayuden a confirmar la identificación de las personas, ya
sea de forma comparativa que hacen referencia al cotejo de los antecedentes, reseñas y registros
con los hallazgos encontrados en un cadáver a identificar y la forma reconstructiva, donde por
la condición del cadáver no es posible utilizar otras formas de identificación. A su vez, los
elementos de identificación se clasifican en fehacientes e indiciarios, siendo la primera aquella
donde hay un grado de certeza que la persona es ella y no hay duda de que es otra, mientras que
en la segunda el indicio no proporciona certeza por sí mismo, sino que se basa en varios factores
individuales que, aunque ninguno de ellos por sí mismo justifica el establecimiento de la
identidad, tomados todos ellos en conjunto son suficientes para establecer una posible o
presuntiva identificación. Para el efecto no se deben tener hallazgos irreconciliables.
Bajo este contexto, el INACIF lleva a cabo este proceso de identificación humana por medio de
actividades técnico científicas, que se conceptualiza y caracteriza en los siguientes elementos:
Un proceso es un conjunto de actividades en las que intervienen diferentes unidades

organizativas y funcionales dentro y fuera de una institución, que tiene una duración determinada
a través de un inicio y un fin. Las entradas y salidas están identificadas, tiene un resultado que
debe estar orientado a las partes interesadas del proceso, tiene un propósito y sus actividades
pueden ser desarrolladas en forma secuencial o simultánea.
El proceso de identificación humana del INACIF está descrito a través de las siguientes
actividades y sus posibles rutas secuenciales:

Conceptualizando este proceso de identificación humana, de manera general inicia con la

recepción de cadáveres, osamentas o restos humanos (1.0)que son remitidos por autoridad
competente como “XX”, “XX y/o presunto nombre” para realización de necropsia médico legal,
quienes son registrados y asignados a peritos profesionales de la medicina, quienes en el

desarrollo del procedimiento de necropsia(2.0) realizan para propósitos de la identificación:
reseñas de impresiones dactilares, extracción de muestras para futuros cotejos genéticos y
cuando no esté confirmada la identificación de la persona por cotejo dactilar (3.0) recolectar
datos post mortem del caso en estudio,. En adición, se realiza la evaluación odontológica
forense(4.0)para contribuir a la identificación a través del aporte de características
individualizantes de la estructuras del sistema estomatognático. En ambas situaciones se
obtienen datos postmortem a considerar para cotejarlos con datos ante mortem que se obtengan
en las actividades de entrevista técnica(6.0)a usuarios que están en la búsqueda de una persona
desaparecida.
Para el caso de cadáveres en avanzado estado de descomposición, carbonizados, con cambios

tafonómicos con antropofagia cadavérica a quienes se les practica la necropsia y que no se logra
establecer como requisitos mínimos sexo, talla y rango de edad, se remiten para estudio
antropológico (5.0) que aporta información post mortem sobre perfil biológico, traumas
antemortem y osteopatologías a fin de esclarecer la identificación del individuo en procesos de
entrevistas técnicas con usuarios que reportan la desaparición de una persona.

Cuando los diferentes métodos forenses realizados no aportan suficiente información o que la
información disponible del caso no logre vincularse con datos antemortem recolectados y,
siempre que se tenga una muestra idónea indubitada de referencia podrá realizarse la
identificación humana por medio del análisis genético (7.0).
De las posibles interrelaciones que puedan generarse en los diferentes métodos o disciplinas
forenses que intervienen en este proceso puede tenerse como resultado final la identificación de
cadáveres para la emisión del certificado de defunción por parte del médico autopsiante y
entrega a sus familiares cuando son reclamados (8.0); o pasar a un procedimiento de
inhumación de cadáveres (9.0) cuando no se ha logrado hacer la identificación o cuando estos
cadáveres no han sido reclamados aun siendo identificados.
La secuencia pericial o ruta secuencial para la identificación de una persona en las diferentes
disciplinas, no tiene un orden específico y no depende directamente de las condiciones de cómo
se recibe el cadáver, sino más bien, de la información que se tenga para poder caracterizarlo o
individualizarlo.
A continuación se describen algunas posibles rutas secuenciales dentro del proceso de

necroidentificación humana:
En cadáveres recientes:
• Si es adulto, debe obtenerse huellas útiles para cotejos dactiloscópicos; adicionalmente, en

todos los casos debe documentarse características individualizantes tales como: edad, sexo,
estatura, ascendencia racial y rasgos característicos como odontograma, cicatrices, lunares,
tatuajes, prendas de vestir, entre otros y extracción de muestras para futuros cotejos genéticos,
cuando sea requerido.
• Si es subadulto, debe obtenerse en necropsia características individualizantes: sexo, estatura,
estimación de un rango de edad biológica, ascendencia racial y otros rasgos característicos
como cicatrices, lunares, marcas de nacimiento, resecciones quirúrgicas (amigdalectomía,
apendicectomía, etc.), osteopatologías mediante examen físico o estudios radiográficos
(donde esté disponible), entre otros y extracción de muestras idóneas para futuros cotejos
genéticos, en todos los casos. Cuando se estime una edad biológica menor de 5 años debe
tomarse las huellas plantares y a partir de los 5 años huellas dactilares.
En cadáveres en estado de descomposición, quemados y con cambios tafonómicos por

antropofagia cadavérica:
• Se debe proceder de la misma forma que con los cadáveres recientes. Sin embargo, de no
poder establecer como mínimo rango de edad, sexo, estatura y no se tiene ninguna
característica individualizante suficiente para establecer la identidad; deberá remitirse al
laboratorio de antropología forense para la determinación de estos extremos y extracción de
muestras idóneas para futuros análisis genéticos.
Osamentas:
• Debe documentarse fotográficamente el caso, remitir a especialidades de antropología y

odontología forense para confirmar si corresponden a osamentas humanas y proceder a
determinaren la medida de lo posible sexo, estimar rango de edad, talla, otras características
individualizantes y extracción de muestras para futuros cotejos genéticos, en todos los casos.

De acuerdo a lo descrito, se presentan los procedimientos que intervienen en estas actividades

generales de necroidentificación humana:
1.0 Recepción de cadáveres
Constituye el punto de partida en el proceso de necroidentificación humana, iniciando esta

etapa del proceso por la asignación de un número correlativo que permitirá dar trazabilidad
a cada caso ingresado en las diferentes sedes periciales del INACIF. Dicho número de
referencia es asignado por el Sistema de Información Nacional Forense -SINAF-de
INACIF al momento de registrar el requerimiento de autoridad competente. El ingreso de
cada cadáver, osamenta o restos humanos, expediente y cadena de custodia que se recibe,
se realiza verificando que la hoja de levantamiento y remisión de autoridad competente
consigne los datos mínimos necesarios para ingresarlos al sistema. Firma y sello de
documentos y asignación del caso al Perito Profesional de la Medicina que corresponda.
Para el desarrollo de los pasos de esta etapa, se cuenta con el documento: Procedimiento
de recepción de cadáveres, osamentas y restos humanos:

Procedimiento Código:PRO-DTC-MF-000
Versión: 01
Vigente a partir de:
RECEPCIÓN DE CADÁVERES,
OSAMENTAS Y RESTOS HUMANOS
Página __ de __
1. OBJETIVO
Establecer los lineamientos para la recepción de cadáveres, osamentas y restos humanos que
ingresan a las sedes de patología del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala -
INACIF-, por orden de autoridad competente.
2. ALCANCE
El procedimiento aplica a los cadáveres que son remitidos por autoridad competente a las sedes
periciales del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala -INACIF-, para realización de
peritaciones pertinentes. El procedimiento abarca la recepción para ingreso a sala de necropsias y
su resguardo posterior a la peritación.
3. RESPONSABILIDADES
No. Puestos Responsabilidad

Técnico Forense;
Técnico en Tanatología;
Auxiliar Administrativo;
Perito en Medicina Tanatología Forense
y Clínica Forense; 1. Realizar cada una de las actividades
1. Perito Profesional I de la Medicina Área conforme lo describe el
Patología Forense y Clínica Forense; procedimiento.
Perito Profesional II de la Medicina Área
Patología Forense y Clínica Forense;
Perito en Medicina Legal, Tanatología y
Clínica Forense
4. GLOSARIO
4.1 Cadena de custodia: Conjunto de procedimientos utilizados para garantizar la

integridad e identidad del indicio.
4.2 Certificado de defunción: Documento público que se expide para acreditar la
defunción de todo individuo. En él se certifican las causas y circunstancias de muerte
de una persona.
4.3 Pulsera plástica de color rosada, azul o blanca: Destinada para diferenciar los
cuerpos de sexo femenino, masculino o indeterminado respectivamente. Igualmente
destinada para consignar el número de necropsia.
4.4 Pulsera individualizante de cadáver: Placa metálica con un número único en toda
la República usado con el propósito de diferenciar cada cadáver inhumado por INACIF.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Sistema de Información Nacional Forense -SINAF- de INACIF.
5.1.2 Equipo de cómputo.
5.1.3 Impresora.

Versión: 01
Página __ de __
5.2 Logísticos
5.2.1 Camillas
5.2.2 Equipo de protección personal
5.2.3 Insumos de oficina
5.2.4 Cuartos refrigerados.
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Todos los cadáveres deben ser tratados con la dignidad y respeto inherente a su
condición humana.
6.2 Todos los cadáveres deben ser tratados y manejados como fuente de patógenos, por
lo que deben observarse las precauciones universales de bioseguridad.
6.3 El equipo de protección personal desechable debe depositarse en contenedores
destinados para el desecho de residuos biológicos (recipientes rojos, debidamente
identificados). El equipo de protección personal no desechable (batas, uniformes,
gabachas), se enviará a la lavandería.
7. DESARROLLO DE ACTIVIDADES
Dependencia Personal Número de

Descripción de la actividad
responsable responsable actividad
Técnico Forense Revisión de documentos e indicios.

• Recibe el cadáver remitido por autoridad competente con
Técnico en la hoja de levantamiento o remisión de cadáveres o el
Tanatología documento mediante el cual la autoridad competente
ordena la realización de la necropsia médico legal.
Auxiliar • Verifica que todos los datos relacionados al caso estén
Administrativo debidamente consignados en el documento: número de
referencia de la autoridad competente que remite el
Perito en cadáver, nombre del cadáver, sexo, fecha y hora de
Medicina y Clínica Forense - Regional
Medicina levantamiento de cadáver, dirección del lugar donde se

Medicina Forense –Metropolitana
Tanatología realizó el levantamiento del cadáver.

Forense y • Verifica que el cadáver tiene el brazalete de identificación
7.1
Clínica Forense; colocado por especialistas de escena del crimen del
Perito Ministerio Público y confirmar que los datos consignados
Profesional I de en éste coincidan con la información proporcionada en el
la Medicina Área documento mediante el cual se remite el cadáver.
Patología • Realiza búsqueda del brazalete en el orden siguiente,
Forense y dependiendo de las características del cadáver o
Clínica Forense; espécimen remitido: tercio distal del antebrazo (muñeca),
Perito derecho, tercio distal del antebrazo (muñeca) izquierdo,
Profesional II de tobillo derecho, tobillo izquierdo. Cuando este extremo es
la Medicina Área imposible por las características de los restos humanos,
Patología se busca en el embalaje en el que viene remitido el
Forense y espécimen.
Clínica Forense; Registro y asignación del caso para necropsia
Perito en • Verificar en Sistema de Información Nacional Forense -
Medicina Legal, 7.2 SINAF- de INACIF, si el número de referencia del caso
Tanatología y proporcionado por la autoridad competente que remite el
Clínica Forense cadáver ya existe en el sistema para adicionar el caso a

Versión: 01
Página __ de __

dicho número correlativo INACIF o en caso contrario,
crear un nuevo número correlativo INACIF.
• Ingresar los datos del caso al Sistema de Información
Nacional Forense -SINAF- de INACIF, generando el
correlativo de necropsia, según sede pericial.
Preparación de documentos para necropsia

• Colocar una copia de cadena de custodia en blanco al
reverso del documento a través del cual se remite el
cadáver, para que la persona encargada de entregar el
cadáver consigne sus datos.
• Imprimir la boleta de identificación de camilla y adherirla
a los pies de la camilla en donde se encuentra el cadáver.
• Anotar y coloca brazalete de identificación de cadáver:
número de referencia del caso asignado por la autoridad
Técnico Forense
competente que remite el cadáver, número de Necropsia,

número de caso INACIF, nombre del cadáver como fue

Técnico en consignado por la autoridad competente que solicitó la
Tanatología pericia. Utiliza color rosado para mujeres, color azul para
hombres y color blanco para sexo indeterminado.
Auxiliar • Consigna los datos requeridos en el libro de registro de
Administrativo 7.3
control diario de ingreso y egreso de cadáveres.
• Integra la documentación a ser utilizada por el Perito
Perito en Profesional de la Medicina en el procedimiento de
Medicina necropsia, que incluye: formulario en blanco Necropsia
Tanatología médico legal (FOR-DTC-MF-038), hoja de levantamiento
Forense y y remisión de cadáver o documento mediante el cual la
Clínica Forense; autoridad competente remite el cadáver y ordena la
Perito realización de la necropsia médico legal, con su
Profesional I de respectiva cadena de custodia, ficha de correlativo de
la Medicina Área caso y correlativo de necropsia para documentación
Patología fotográfica, testigos métricos, formulario en blanco de
Forense y datos de necropsia finalizada para recepción de
Clínica Forense; cadáveres, formulario de certificado de defunción en
Perito blanco, formulario de hoja de traslado de cadáveres
Profesional II de (carencia o no de enfermedades infectocontagiosas).
la Medicina Área
Patología Traslado de cadáveres, osamentas y restos humanos a
Forense y sala de necropsias.
Clínica Forense;
• Traslada el cadáver al vestíbulo de la sala de necropsias

Perito en o lugar designado para cadáveres en estado de

Medicina Legal, putrefacción.
Tanatología y • Asigna el caso al Perito Profesional de la Medicina al que
Clínica Forense se designó según Sistema de Información Nacional
Forense -SINAF-, y traslada el expediente, verificando
7.4
que firme y selle la hoja de cadena de custodia y la copia.
• El Perito Profesional de la Medicina realiza
procedimiento “Necropsia médico legal” (PRO-DTC-MF-
006).
• Al finalizar el procedimiento de necropsia, el Técnico
recibe la ficha de necropsia finalizada, FOR-DTC-MF-083
y lo anexa a la copia de hoja de levantamiento y remisión
de cadáver.

Versión: 01
Página __ de __

• Ingresar los datos del formulario de datos de necropsia
finalizada en: Sistema de Información Nacional Forense -
SINAF-, libro de control diario de ingreso y egreso de
cadáveres a la morgue y en la tabla de control de ingresos
de cadáveres del mes.
8. CÁLCULOS
N/A
9. REGISTROS ASOCIADOS
Nombre Código
Libro de registro de control diario de ingreso y egreso de cadáveres N/A

Tabla de control de ingresos de cadáveres N/A
Solicitud de necropsia (Ministerio Público) FOR-DTC-MF-085
Formulario de necropsia médico legal FOR-DTC-MF038
Ficha de necropsia finalizada FOR-DTC-MF-083
10. REFERENCIAS
10.1 Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala INACIF, Decreto
32-2006.
10.2 Reglamento de la Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses. Acuerdo
No.002-2007
10.3 Reglamento de Organización y Funcionamiento del Instituto Nacional de Ciencias
Forenses de Guatemala. Acuerdo No. CD-INACIF-027-2012.
10.4 Reglamento de cementerios y tratamiento de cadáveres, Acuerdo Gubernativo N° M de
S.P y A.S. 21-70 tomo 91, pág.289. artículos 35 y 36.
11. CONTROL DE CAMBIOS
N/A
12. ANEXOS
N/A

2.0 Identificación de cadáveres por medicina forense
La realización de necropsia médico legal es realmente desde la perspectiva criminalística

el manejo de una parte muy importante del escenario del crimen, lo cual hace que revista
importancia enorme en el esclarecimiento de los hechos; está regulado en el Código
Procesal Penal, art. 238, que establece que ésta se realiza en caso de muerte violenta o
sospechosa de criminalidad.
Por lo tanto, la realización de la necropsia es un procedimiento técnico y científico que

tiene por objetivo documentar lesiones que presenta el cuerpo, recolectar indicios que
puedan establecer vínculos investigativos, tomar muestras biológicas útiles para el
diagnóstico, establecer la causa de muerte (cuando fuere factible), identificar a la persona
(en situaciones en que no hubiese sido previamente identificada por el Ministerio Público
o autoridad competente) y emitir el certificado de defunción. La necropsia es el punto de
partida en el proceso de necroidentificación humana y de este procedimiento surgen
muchos peritajes aleatorios que por su naturaleza, se amparan legalmente por la orden
inicialmente emanada por autoridad competente.
Tomando como punto de partida la práctica de la necropsia para efectos de identificación

de personas que ingresan a sedes periciales del INACIF como cadáveres “XX” o cadáveres
XX y/o “presunto nombre”, es importante que los Peritos Profesionales de la Medicina y
personal técnico de apoyo, recolecten de manera eficaz datos post mortem para identificar
a los cadáveres y la extracción de muestras idóneas que aporten valor para futuros cotejos
genéticos.
Por lo anterior, es importante considerar los siguientes criterios para la secuencia pericial
de estos casos:
• Es responsabilidad del Perito Profesional de la Medicina agotar todos los medios

disponibles para identificar a cada cadáver que recibe.
• Los médicos deben establecer como requisito mínimo en sus necropsias el sexo, rango
de edad, estatura y ascendencia racial. Esta premisa es un requisito indispensable
principalmente en aquellos casos en los que se inhumará el cadáver sin haberse
identificado.
• El Perito Profesional de la Medicina, debe confirmar al finalizar la necropsia, si el

cadáver aún no ha sido identificado, en cuyo caso elabora la ficha postmortem, la que
deberá tener bien documentadas fotográfica y descriptivamente las características
individualizantes del cadáver incluyendo el odontograma, las prendas de vestir e
indicios asociados para fines de identificación (por ejemplo: anillos, billeteras, aretes
y otros objetos personales).
• La ficha de recolección de datos post mortem y las fotografías para fines de

identificación del cadáver, deben ser remitidas a la Unidad de Medicina Forense
Metropolitana en todos los casos que se inhume un cadáver sin identificar.
• Debe remitirse a la Unidad de Medicina Forense Metropolitana, la información de los
formularios de recolección de datos ante mortem que no tuvieron correspondencias
con alguno de los cadáveres no identificados ingresados a las sedes periciales

departamentales, para centralizar la información y se puedan realizar futuras

búsquedas de personas a nivel nacional.
• Todo cadáver no identificado en estado de descomposición que no hayan llegado a la

fase de reducción esquelética, el Perito Profesional de la Medicina debe recolectar
toda la información posible en formulario de recolección de datos post mortem y como
mínimo establecer el sexo, el rango de edad (establecido por las diferentes disciplinas),
talla y ascendencia racial; así como, tomar muestra ósea, dental, sangre fijada en papel
filtro y frotis de médula ósea fijada en papel filtro para futuros cotejos genéticos,
previo a su inhumación. Una copia del formulario de datos post mortem y fotografías
para fines de identificación forense, deben remitirse a la Unidad de Medicina Forense
Metropolitana.
• Todo cadáver que se encuentre en estado de reducción esquelética, carbonizados o

con cambios tafonómicos por antropofagia cadavérica que ingrese a sedes periciales
de INACIF, en el que no se logra establecer sexo, talla o rango de edad y, que no haya
sido identificado por otros medios de convicción, debe enviarse para estudio
antropológico y odontológico previo a su inhumación; es decir, no depende tanto de
la condición del cadáver, sino de la calidad y cantidad de información post mortem
que se obtuvo para poder caracterizar e identificar a la persona.
• El abordaje de osamentas y restos óseos en salas de necropsias será:

o El Perito Profesional de la Medicina debe documentar fotográficamente
los restos óseos u osamenta, haciendo énfasis en prendas de vestir e
indicios asociados útiles para la identificación.
o Todos los casos que serán remitidos al laboratorio de antropología, no
debe tomarse muestra ósea para cotejo genético delegando esta
actividad a la antropólogo forense.
• Para reducir el número de inhumaciones de cadáveres no identificados se establecen

los siguientes centros de derivación de cadáveres para resguardo en cuartos fríos en
cualquiera de estas sedes: Ciudad de Guatemala, Chimaltenango, San Benito, Poptún,
Escuintla, Retalhuleu, Coatepeque, Malacatán, Salamá, Cuilapa, Jutiapa, Chiquimula
y Quezaltenango.
• El tiempo de resguardo de cadáveres en los que no se haya generado un proceso de

cotejo será hasta un máximo de 10 días; de existir un proceso de cotejo se preservarán
hasta obtener los resultados para su inhumación. Si el cadáver no es identificado en el
plazo establecido se inhumarán un cementerio nacional como XX.
• Considerar los siguientes criterios para el manejo de extremidades o especímenes

humanos (exceptuando cráneos y torsos) que ingresen a la sede pericial:
o De manos o dedos se debe tomar huella dactilar, de acuerdo a procedimientos
establecidos, salvo que fenómenos cadavéricos transformadores destructores no
lo permitan.
o De extremidades inferiores que no se logren asociar a un cuerpo, se debe tomar
una muestra idónea para cotejo genético (fragmento óseo, sangre fijada en papel
filtro, frotis de médula ósea en papel filtro).
o A criterio del Perito Profesional de la Medicina se puede solicitar análisis
antropológico, cotejo genético o cualquier otro peritaje para fines de
identificación forense, aunque no exista orden expresa de autoridad competente.

Dicha solicitud debe ser refrendada por el Coordinador de Sede y por el

Coordinador Regional, debiendo ser consensuada con la Jefatura de Medicina
Forense Metropolitana.
o En aquellos casos en los que no se tiene un perfil para hacer un cotejo genético
con las muestras tomadas al cadáver, deberán ser embaladas y remitidas al
almacén del Ministerio Público observando el procedimiento de cadena de
custodia.
• En los cadáveres que ingresan sin identificar o presuntamente identificados a las sedes
periciales de INACIF y que posteriormente son identificados por métodos forenses,
deben reportarse a la Unidad de Medicina Forense Metropolitana en el formulario
respectivo.
Para el logro de la necroidentificación humana partiendo de la realización de peritajes

médicos forenses, se han establecido las posibles rutas secuenciales según se muestra en
el siguiente esquema y la documentación de los procedimientos de necropsias médico
legales y recolección de datos post mortem de cadáveres no identificados:

Versión: 01
NECROPSIAS MÉDICO LEGALES
Página __ de __
1. OBJETIVO
Establecer la metodología para la realización de las necropsias médico legales en el Instituto

Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, aplicando conocimientos, técnicas y métodos de la
anatomía patológica. Con el fin de establecer: causa de muerte, estimar el tiempo aproximado de
muerte, certificar la defunción e identificar a la persona fallecida.
2. ALCANCE
Este procedimiento es de observancia para los trabajadores que participan en el procedimiento de

necropsia desde la designación del caso hasta la entrega de los indicios para el análisis que
corresponda.

Perito en Medicina Tanatología
Forense y Clínica Forense; 1. Conocer y aplicar procedimiento de
Perito Profesional I de la Necropsias medico legales descritas en el
Medicina Área Patología procedimiento del INACIF.
Forense y Clínica Forense; 2. Realizar cada una de las actividades
1.
Perito Profesional II de la conforme lo describe el procedimiento.
Medicina Área Patología 3. A criterio del Perito ordenar los estudios de
Forense y Clínica Forense; diagnóstico pertinentes que permitan cumplir
Perito en Medicina Legal, con los objetivos del peritaje.
Tanatología y Clínica Forense
Técnico Forense;
2. 1. Atender las instrucciones del perito.
Técnico en Tanatología
4. GLOSARIO

4.2 Cadáver no identificado: aquel cadáver que ingresa sin identificación (nombres y
apellidos) en el documento de remisión y levantamiento de cadáver.
4.3 Cadáver en estado de descomposición: cadáver que ha sufrido un proceso de
fermentación pútrida de origen bacteriano. Los gérmenes responsables de la
putrefacción se desarrollan en la materia orgánica cadavérica, produciendo enzimas
que actúan selectivamente sobre los principios orgánicos (proteínas, grasa, glúcidos),
dando lugar a modificaciones profundas del cadáver que conducen a su destrucción.
4.4 Causa básica de la muerte: La causa básica se define como: a) La enfermedad o
lesión que inició la cadena de acontecimientos patológicos que condujeron
directamente a la defunción, o b) Las circunstancias del accidente o de la violencia
que produjo la lesión fatal.
4.5 Certificado/Informe de defunción: Documento público que se expide para hacer
constar el fallecimiento de una persona, con fines registrales.
4.6 Indicios: Son las muestras, vestigios, rastros, huellas, objetos, residuos de posibles
fluidos recolectados durante la realización del peritaje del cuerpo y/o prendas de la
persona y que pueden orientar la investigación dentro del sistema de justicia.
4.7 Muestra de referencia para análisis genético: muestra de sangre o células
epiteliales en saliva de origen conocido (indubitado).

Versión: 01
Página __ de __
4.8 Necropsia médico legal: Es el examen externo e interno de un cadáver, realizado

por un Médico a solicitud de autoridad competente.
4.9 Solicitud de Necropsia médico legal: Es la instrucción escrita o Solicitud de
necropsia (FOR-DTC-MF-085) emanado por autoridad competente.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Cámara fotográfica digital
5.1.2 Mesa de necropsia
5.1.3 Equipo de Radiología -cuando aplica-
5.1.4 Equipo de Histopatología -cuando aplica-
5.2 Logísticos
5.2.1 Materiales
a. Instrumental paradisección
b. Instrumental para suturar
c. Recipientes para muestras biológicas
d. Sobres de papel para embalaje de muestras
e. Cinta de seguridad con logotipo del INACIF
f. Testigo métrico
g. Equipo de protección personal
h. Insumos de oficina
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Todas las necropsias y las muestras de ellas obtenidas deben ser tratadas y
manejadas como fuente de patógenos, por lo que deben observarse las precauciones
universales de bioseguridad.
6.2 En todo procedimiento de necropsia, el cuerpo, las muestras o indicios son sujetos a
ser contaminados por el personal a cargo, por lo cual deben tomarse las medidas para
abolir la contaminación para ello, todo el personal involucrado debe utilizar equipo de
protección personal, incluyendo: traje para sala de necropsias, gorro o cofia para el
cabello, cubiertas para zapatos, guantes, mascarilla, lentes de seguridad, entre otros.

Versión: 01
Página __ de __

Recepción Solicitud de Necropsia Médico Legal:
• Recibe la solicitud de necropsia médico legal de peritaje
Perito: de la autoridad competente.
• Verificar el registro completo en la Solicitud de necropsia
En Tanatología (FOR-DTC-MF-085) de los campos del numeral 2
Forense y Clínica “Referencias” (Fecha, Referencia MP, Fiscalía, Agencia
Forense; 7.1 Fiscal, Agente Fiscal, Auxiliar Fiscal, Dirección y
teléfonos de referencia); numeral 3 “Información del
Medicina y Clínica Forense –Regional-
Profesional I de la Cadáver” (Lugar, fecha y hora del levantamiento) y

Medicina Forense -Metropolitana-
Medicina Área numeral 9 (Referencia MP del Caso, Nombre del

Patología Forense responsable del traslado, Institución donde labora, cargo,
y Clínica Forense; fecha, hora y firma, vehículo asignado y Placa)
• Debe firmar y sellar cadena de custodia.
Profesional II de la
Revisión de Antecedentes del Caso:
Medicina Área
• Lee la historia y las circunstancias en que ocurrió la
Patología Forense
7.2 muerte y determina la técnica a emplear;
y Clínica Forense;
• Establece tipo de peritaje a realizar según Solicitud de
Necropsia de autoridad competente
En Medicina Legal,
Tanatología y Individualización del Cadáver:
Clínica Forense. • Revisa que la hoja de identificación de camilla para
cadáveres corresponda al cadáver que porta;
• Revisa que el cadáver porte el brazalete del Ministerio
Técnico: 7.3 Público y que los datos consignados en la Solicitud de
Forense; Necropsia coincidan;
Tanatología • Verifica que los datos: Número de Necropsia; correlativo
del INACIF; y Nombre en el brazalete del INACIF que
porta el cadáver coincidan con la Solicitud.
Perito: Necropsia:
En Tanatología Realiza:
Forense y Clínica
Forense; EXAMEN EXTERNO
1. Documentación fotográfica, diagramática y
Profesional I de la descriptiva:
Medicina Área a. Para identificación forense: elementos

Patología Forense individualizantes, según el procedimiento de
y Clínica Forense; recolección de datos post mortem de cadáveres
no identificados, PRO-DTC-MF-000.
Profesional II de la b. Para determinación del tiempo estimado de
7.4
Medicina Área muerte: Signos de muerte cierta
Patología Forense c. Para documentación de lesiones: Los signos de
y Clínica Forense; trauma.
2. Recolección y embalaje de indicios:
En Medicina Legal, a. Toma de muestras y fluidos corporales a
Tanatología y solicitud de autoridad competente y según los
Clínica Forense; hallazgos del perito.
b. Reseña de impresiones necrodactilares.
Técnico:
Forense;
Tanatología

Versión: 01
Página __ de __

EXAMEN INTERNO
1. Exposición de cavidades craneana, torácica y
Perito: abdominal,
En Tanatología 2. Recolección y embalaje de indicios:
Forense y Clínica a. Toma de muestras y fluidos corporales a
Forense; solicitud de autoridad competente y según
los hallazgos del perito.
Profesional I de la b. Documentación de lesiones o de
Medicina Área hallazgos patológicos encontrados
Patología Forense durante el examen interno. (Fotográfica y
y Clínica Forense; Descriptiva)
c. Recolección de cuerpos extraños y otros
Profesional II de la indicios encontrados.
Medicina Área 3. Eviscerar y disecar los órganos y toma de muestras
Patología Forense para estudios histopatológicos cuando sea
y Clínica Forense; pertinente.
Nota:
En Medicina Legal, • Registra los hallazgos del examen externo e
Tanatología y interno en el formulario de Necropsia médico legal,
Clínica Forense; (FOR-DTC-MF-038);
• Realiza la descripción diagramática en los
Técnico: formularios que correspondan:
Forense; FOR-DTC-MF-001
Tanatología FOR-DTC-MF-002
FOR-DTC-MF-004
FOR-DTC-MF-005
FOR-DTC-MF-006
FOR-DTC-MF-007
FOR-DTC-MF-008
FOR-DTC-MF-009
FOR-DTC-MF-010
• Embala los indicios recolectados durante el examen
interno.
Determinación de Causa de Muerte
Correlacionar siguiendo una secuencia lógica entre
7.5
antecedentes del caso, las lesiones externas y las lesiones
internas.
Preparación final del cadáver:
• Sutura cadáver
Técnico:
• Lavar el cadáver
Forense 7.6
• Embala el cadáver
Tanatología
• Deposita el cadáver en el lugar destinado para la
entrega o en el cuarto frio.
Perito: Documentación de remisión de análisis:

Llena el formulario Muestras procedentes de sala de
Forense –Regional-
Medicina Forense -
•
Medicina y Clínica
Metropolitana-
En Tanatología 7.7 necropsias Solicitud de análisis, muestras procedentes

Forense y Clínica de sala de necropsias (FOR-DTC-MF-053); firma y sella
Forense cadena de custodia
Elaboración y firma del certificado de defunción
Profesional I de la 7.8 Completa como mínimo las casillas siguientes del formulario:
Medicina Área • Numeral I, Información General

Versión: 01
Página __ de __

Patología • Numeral II, Datos del Fallecido: Nombre; DPI, Partida de
Forense y Clínica Nacimiento u otro documento de Identificación legal y
Forense valido; sexo, edad y estado conyugal.
• Numeral III, Causa de Defunción consignando en primer
Profesional II de lugar la enfermedad o estado patológico que produjo la
la Medicina Área muerte directamente, a continuación, estados morbosos,
Patología si existiera alguno, que produjeron la causa directa de la
Forense y Clínica muerte, mencionándose en último lugar la causa básica
Forense de muerte.
• Numeral IV, En casos de defunción fetal. Como mínimo
En Medicina debe consignarse la CAUSA DEL MORTINATO.
Legal, • Numeral V, Defunción de Mujeres entre 10 y 54 años:
Tanatología y Si estaba embarazada cuando falleció; en caso de ser
Clínica Forense afirmativo: edad gestacional.
• Numeral VI, Otros datos de la defunción: Si hubo
necropsia y lugar de la misma; si hubo operación o
procedimiento médico; clase de asistencia recibida; sitio
donde ocurrió la defunción y quien certifica o informa la
defunción.
• Lugar y fecha de emisión del certificado.
• Sello institucional, Sello del Perito y Firma del Perito en el
certificado.
Resguardo, traslado y entrega de Indicios (cadena de
custodia)
7.9
El perito es responsable de la integridad e identidad de los
indicios hasta el momento de su entrega en RCD
8. CÁLCULOS
N/A
Nombre Código
Solicitud de necropsia FOR-DTC-MF-085
Formulario necropsia médico legal FOR-DTC-MF-038
Figura masculina proyección anterior y posterior FOR-DTC-MF-001
Figura masculina proyecciones laterales FOR-DTC-MF-002
Figura masculina proyección anterior y posterior de tronco y pelvis FOR-DTC-MF-003
Figura femenina proyección anterior y posterior FOR-DTC-MF-004
Figura femenina proyecciones laterales FOR-DTC-MF-005

Versión: 01
Página __ de __
Nombre Código
Figura humana de cabeza y cara, proyecciones anterior, posterior,
FOR-DTC-MF-007
laterales y submandibular
Figura humana de cráneo, vista aérea y submandibular y huesos
FOR-DTC-MF-008
de la bóveda del cráneo
Figuras de manos humanas, plantas palmares y dorsales, derecha
FOR-DTC-MF-009
e izquierda
Figuras de pies humanos plano plantar derecho e izquierdo FOR-DTC-MF-010
Solicitud de análisis, muestras procedentes de sala de necropsias FOR-DTC-MF-053
Certificado de defunción N/A
Formulario de recolección de datos post mortem FOR-DTC-MF-000
10. REFERENCIAS
10.1 Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala INACIF,
Decreto 32-2006.
No.002-2007
10.4 Carrillo, A. Lecciones de Medicina Forense y Toxicología. 3ª edición. Guatemala,
Editorial Universitaria, 1981.
10.5 Conte, M.; Salls, F. Manual de autopsias y exámenes físicos, ICF-1071-PAT Rev. 5.
Puerto Rico, Instituto de Ciencias Forenses de Puerto Rico, 2008.
10.6 Guía de procedimientos para la realización de necropsias médico legales. 2ª edición.
Colombia, Instituto Nacional de Medicina Legal y Ciencias Forenses, 2004.
10.7 Gisbert Calabuig. Medicina Legal y Toxicología. 6ª edición. Editor Enrique Villanueva.
Barcelona, Masson, 2005.
10.8 Vargas Alvarado, E. Medicina Legal 2ª edición. México, Trillas, 1999.
10.9 Certificación Médica de Defunción. OMS, 1980
10.10 Procedimiento de recolección de datos post mortem de cadáveres no identificados,
PRO-DTC-MF-000.
N/A
12. ANEXOS
N/A

Procedimiento Código:INS-DTC-MF-000
Versión: 01
RECOLECCIÓN DE DATOS POST Vigente a partir de:

MORTEM DE CADÁVERES NO
IDENTIFICADOS
Página __ de __
1. OBJETIVO
Establecer los pasos para observar y documentar las características individualizantes de los cadáveres no
identificados que ingresan a las sedes periciales como “XX”, “XX y/o presunto nombre”, así como cadáveres
ingresados con una identificación de la que se tiene duda, con el propósito de crear y mantener una base de
datos para posibles búsquedas.
2. ALCANCE
Este procedimiento es de observancia para los Peritos Profesionales de la Medicina y personal técnico que
participan en el procedimiento de identificación forense desde la designación del caso hasta la entrega de los
indicios para el análisis que corresponda.

Técnico Dactiloscopista.
Peritos Profesionales (I, II y III)

en: Tanatología Forense y
Clínica Forense; Medicina Área 1. Realizar cada una de las actividades
Patología Forense y Clínica conforme lo describe el presente
1. procedimiento.
Forense; Medicina Área
2. Garantizar el cumplimiento de la cadena de
Patología Forense y Clínica custodia para cada caso documentado.
Forense; Medicina, Tanatología
Forense y Clínica Forense;
Legal, Tanatología y Clínica
Forense.
1. Atender instrucciones del Perito Profesional
2 Auxiliar Administrativo
de la Medicina.
4. GLOSARIO
4.1 Cadena de custodia: Conjunto de procedimientos utilizados para garantizar la integridad e

identidad del indicio.
4.2 Cadáver no identificado: aquel cadáver que ingresa sin identificación (nombres y apellidos)
en el documento de remisión y levantamiento de cadáver.
4.3 Cadáver en estado de descomposición: cadáver que ha sufrido un proceso de fermentación
pútrida de origen bacteriano, dando lugar a modificaciones profundas del cadáver que
conducen a su destrucción.
4.4 Características individualizantes: Elementos indiciarios que ayudan a identificar a una
persona, basados en: características físicas.
4.5 Controles biométrico/Identificadores móviles: Dispositivos portátiles de un sistema de
biométrico que fundamenta sus decisiones de reconocimiento mediante una característica
personal que puede ser reconocida o verificada de manera automatizada.
4.6 Dactiloscopia: Es la ciencia que estudia las huellas dactilares de las personas.
4.7 Huella dactilar: Es la impresión visible o moldeada que produce el contacto de las crestas
papilares de un dedo de la mano sobre una superficie.
4.8 Huellas naturales: Son las que se encuentran grabadas visiblemente en la epidermis.

Versión: 01

IDENTIFICADOS
Página __ de __
4.9 Identidad: Conjunto de elementos que individualizan a una persona y la diferencian de las
demás (características físicas, psíquicas y aspectos socioculturales de su entorno particular).
4.10 Identidad registral: Existencia jurídica de una persona natural que es reconocida legalmente
mediante la inscripción de sus datos personales en una institución autorizada que avala su
identidad mediante la expedición de un documento de identificación.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Cámara fotográfica digital.
5.1.2 Controles biométrico/identificadores móviles.
5.2 Logísticos
5.2.1 Mesa de necropsia.
5.2.2 Materiales:
• Rodillo.
• Plancha.
• Tinta.
• Fichas para toma de huellas dactilares.
• Atomizador con agua y jabón.
• Toallas o papel absorbente.
• Bata.
• Equipo de protectores de brazos
• Guantes.
• Mascarilla.
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 En todo procedimiento en sala de necropsia, el cuerpo, las muestras o indicios son sujetos a ser
contaminados por el personal a cargo, por lo cual deben tomarse las medidas para evitar la
contaminación de las mismas. Para ello, todo el personal involucrado debe utilizar equipo de
protección personal, incluyendo: traje para sala de necropsias, gorro o cofia para el cabello,
guantes, mascarilla, lentes de seguridad, entre otros.
6.2 El equipo de protección personal desechable debe depositarse en contenedores destinados para
el desecho de residuos biológicos (recipientes rojos, debidamente identificados). El equipo de
protección personal no desechable (batas, uniformes, gabachas), se enviará a la lavandería.

Técnico
Medic
Foren
Metro
polita
se -
na-
7.1 Identificación de casos para procesar:

ina
Dactiloscopista

Versión: 01

IDENTIFICADOS
Página __ de __

• Consulta el registro de control de cadáveres de las horas
previas en el último horario de turno para identificar número
de casos de cadáveres XX a documentar.
• Prepara equipo de trabajo para realizar documentación
fotográfica: cámara fotográfica, ficha de toma de huellas
dactilares FOR-DTC-MF-000, rodillo, plancha, tinta,
atomizador con agua y jabón, toallas o papel absorbente,
bata, equipo de protectores de brazos, guantes y mascarilla.
• Revisa condición de cámara fotográfica, verificando la
batería de la misma y que tenga memoria disponible.
• Se traslada a sala de necropsia de la morgue para realizar
la documentación de aquellos casos que ya fueron
procesados.
Peritos
Profesionales
(I, II y III) en:
Tanatología
Forense y Clínica
Forense; Medicina
Área Patología Recolección de datos post mortem
Forense y Clínica Si al finalizar la necropsia aún no se ha identificado el cadáver,
Forense; Medicina 7.2 debe consignar la información solicitada en el formulario de
Área Patología recolección de datos post mortem FOR-DTC-000 y remitirla al
Forense y Clínica archivo de casos no identificados.
Forense; Medicina,
Tanatología
Forense y Clínica
Forense; Legal,
Tanatología y
Clínica Forense.
Peritos Documentación fotográfica de cadáveres recientes.
Profesionales • Localiza los casos previamente verificados
(I, II y III) en: administrativamente.
Tanatología • Retira del cuarto frío los cadáveres que se les ha realizado
Forense y Clínica
Forense;
la necropsia médico forense.
• Ubica el cadáver en un área que no interfiera con las
Medicina Área
Patología Forense actividades de necropsia médico legal y que esté a

y Clínica Forense; temperatura ambiente.

Medicina Área • Realiza fotografía de la hoja de identificación de camilla
Patología Forense para cadáveres.
y Clínica Forense; • Abre bolsa que contiene al cadáver para realizar los
Medicina, 7.3 siguientes pasos:
Tanatología • Si existe vestuario, toma las fotografías que sean
Forense y Clínica
Forense; Legal,
necesarias para documentar el caso, tales como:
Tanatología y camisa, pantalón, blusa, tenis, accesorios u objetos
Clínica Forense. que acompañan al cadáver, entre otros.
• Realiza limpieza corporal del cadáver, utilizando el
Técnico atomizador con jabón líquido y una esponja.
Dactiloscopista • Realiza la toma de huellas dactilares entintadas a los
dedos pulgar, índice y medio en mano derecha y mano
Técnico Forense izquierda, utilizando la ficha de toma de huellas
Técnico en dactilares FOR-DTC-MF-000, para su fijación. En
Tanatología

Versión: 01

IDENTIFICADOS
Página __ de __

ausencia de alguno de los anteriores, se tomará las
huellas que estén presentes.
• Toma fotografía panorámica de la ficha de toma de
huellas dactilares FOR-DTC-MF-000 y fotografía
individual por huella tomada.
• Realiza primera evaluación del cadáver (observación
visual) para identificar características individualizantes
como: forma y tamaño de las cejas, nariz, labios,
lunares, cicatrices, color del iris de los ojos, tatuajes,
perforaciones, amputaciones, anomalías congénitas,
entre otras.
• Toma fotografías de las diferentes características
particulares localizadas en la observación visual, tanto
panorámicas como a detalle.
• Adicionalmente toma fotografía: color de los ojos,
dentadura, rostro frontal, lateral izquierdo y derecho en
ángulo de 90°.
• Prepara cadáver y lo traslada nuevamente al cuarto
frío.
Notas:
• En los casos de cadáveres que aún no han sido autopsiados
o que se ha iniciado su necropsia, debe documentar el caso
de acuerdo a indicaciones del médico forense asignado.
• Para el caso de los Técnicos Forenses y en Tanatología de
las sedes periciales departamentales, realizan esta
documentación fotográfica para identificación humana
durante la necropsia siguiendo indicaciones del médico
forense asignado al caso.
• Cuando se cuente con identificadores móviles, realiza la

reseña de impresiones necrodactilares, ficha los 10 dedos
y registro de datos del caso en el dispositivo móvil que está
conectado con el Sistema automatizado de identificación de
huellas dactilares de Cogent (CAFIS) para realizar el rastreo
de huellas.
En el caso de cadáveres con avanzado estado de

descomposición
• Toma fotografía de ropa y accesorios.
• Toma fotografía a la ficha de hoja de identificación de
camilla para cadáveres, una foto panorámica del cadáver,
dentadura y perfiles izquierdo, derecho y frontal del rostro.
• Si aún cuenta con estrato córneo de la piel de los dedos,
realiza limpieza de los dedos para la fijación de huellas en
la ficha de toma de huellas dactilares, FOR-DTC-MF-000,
realiza toma de fotografía panorámica de la ficha y de cada
huella dactilar tomada y, fotografía la cara palmar de la
falange distal del dedo entintada.
• Cuando el estrato córneo de cara palmar de la falange distal
se encuentra parcial o totalmente desprendida, retira
cuidadosamente procurando mantener la integridad del

Versión: 01

IDENTIFICADOS
Página __ de __

tejido y se enfunda a manera de guante en el extremo distal
del dedo del reseñador y procede a hacer la impresión como
lo descrito en el punto anterior.
• Cuando no hay estrato córneo en la piel de los dedos, limpia
y seca con un entintado suave las líneas papilares de los
dedos y toma fotografía de esa huella natural. Posterior a
esto reseñar en la carpeta de formato de huella dactilares.
En el caso de cadáveres quemados o momificados.

• Toma fotografías de huellas naturales.
• En algunos casos, si se puede tomar huella.
• Humedecer las yemas de los dedos con agua entre 5 a 10
minutos. Si se logra ablandar la piel del dedo, entintar y
fotografiar la huella natural e intentar reseñar la huella
dactilar.
Nota:
• Para el caso de los Técnicos Forenses y en Tanatología de
las sedes periciales departamentales, realizan esta
documentación fotográfica para identificación humana
durante la necropsia siguiendo indicaciones del médico
forense asignado al caso.
• Cuando se cuente con identificadores móviles, realiza
la reseña de impresiones necrodactilares, ficha los 10
dedos y registro de datos del caso en el dispositivo
móvil que está conectado con e lSistema automatizado
de identificación de huellas dactilares (CAFIS) para
realizar el rastreo de huellas.
Técnico Trabajo técnico administrativo
Dactiloscopista • Crea una carpeta digital con el número del caso. Ejemplos:
PCEN-2016-2378; PESC-2016-1345, PSAN-2016-657.
Técnico Forense • Traslada las fotografías de la memoria de la cámara
Técnico en
fotográfica para la carpeta del caso.
• Coloca en carpeta general de cadáveres no identificados la
Tanatología
carpeta digital creada para el caso.

Peritos Técnico Dactiloscopista continúa paso 7.6.

Profesionales Técnico Forense o Técnico en Tanatología continúan paso 7.5
(I, II y III) en:
Tanatología
Forense y Clínica
7.4
Forense;
Medicina Área
Patología Forense
y Clínica Forense;
Medicina Área
Patología Forense
y Clínica Forense;
Medicina,
Tanatología
Forense y Clínica
Forense; Legal,
Tanatología y
Clínica Forense.

Versión: 01

IDENTIFICADOS
Página __ de __

Archivo de fichas de huellas dactilares en salas de
Forense –Regional-
necropsia.
Medicina y Clínica
Técnico Forense • Embala, rotula y adjunta al expediente del caso en

Necropsias.
Técnico en 7.5
• En horario de oficina, entrega fotografías de huellas
Tanatología dactilares a Auxiliar Administrativo (oficinista) para realizar
solicitud de rastreo al Laboratorio de Lofoscopia o a
Medicina Forense Metropolitana, según corresponda.
Solicitud de rastreo de huellas dactilares tomadas.
Medicina y Clínica Forense –
Auxiliar • Elabora solicitud de búsqueda, especificando el número del
Administrativo caso y adjunta las fotografías de cada huella dactilar fijada.

• Envía solicitud para el rastreo de huellas a través de los
Regional-
Técnico Forense sistemas AFIS del RENAP y del Gabinete Criminalístico, de

7.6 acuerdo a lo establecido:
Técnico en • Al Laboratorio de Lofoscopia: De lunes a viernes de
Tanatología 8:00am a 4:00pm.
• A Medicina Forense Metropolitana: De lunes a viernes
de 4:00pm a 6:00pm; sábados y domingos de 8:00am
a 4:00pm.
Archivo de fichas de huellas dactilares.
Metropolitan
Forense -
Técnico • Archiva las fichas de huellas dactilares obtenidas para la

Medicina
Dactiloscopista 7.7 identificación.

a-
• Continúa con procedimiento de Identificación Humana por

medio de Comparaciones Dactilares, PRO-DTC-MF-000.
Peritos
Profesionales
(I, II y III) en: Recolección de datos post mortem
Tanatología Si al finalizar la necropsia aún no se ha identificado el cadáver,

Forense y Clínica debe consignar la información solicitada en el formulario de

Forense; recolección de datos post mortem, FOR-DTC-MF-000, para
Medicina Área identificación de cadáveres, osamentas y restos humanos no
Patología Forense identificados.
y Clínica Forense;
Medicina Área
7.8
Patología Forense En los casos que luego del cotejo de datos ante mortem y post
y Clínica Forense; mortem no haya coincidencias con cadáveres sin identificar,
Medicina, deberá llenar el formulario de datos antemortem POST
Tanatología MORTEM y remitirlo a la Unidad de Medicina Forense
Forense y Clínica metropolitana junto con la ficha la carpeta de fotografías con
Forense; Legal, fines de identificación.
Tanatología y
Clínica Forense.
8. CÁLCULOS
N/A

Versión: 01

IDENTIFICADOS
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Nombre Código
Hoja de identificación de camilla para cadáveres N/A
Ficha de toma de huellas dactilares FOR-DTC-MF-000
Formulario de entrevista ante mortem FOR-DTC-MF-000
10. REFERENCIAS
10.1 Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala INACIF, Decreto 32-
2006.
10.2 Reglamento de la Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses. Acuerdo No.002-
2007
10.3 Reglamento de Organización y Funcionamiento del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de
Guatemala. Acuerdo No. CD-INACIF-027-2012.
10.4 La ciencia de la dactiloscopia, Clasificación y Usos. Departamento de Justicia de Estados Unidos.
Dirección Federal de Investigaciones (FBI). Centro Regional de Ayuda Técnica, Agencia para el
Desarrollo Internacional (AID), México / Buenos Aires. 1970.
N/A
12. ANEXOS
N/A

3.0 Necroidentificación humana por medio de comparaciones

dactilares
La lofoscopia es el estudio de las imágenes obtenidas que dejan las crestas papilares de
los dedos. El papel de las huellas digitales ha sido determinante en la identificación de
personas, por lo que es uno de los sistemas más utilizado en el mundo y es el método más
eficaz y eficiente desde que se cuenta con bases de datos de estos registros. Estos dibujos
o rugosidades también son conocidos como crestas papilares; lo cual individualiza a cada
ser humano al no existir dos patrones iguales.
La dactiloscopia es el procedimiento técnico que tiene por objeto la obtención, el estudio

y cotejo de las impresiones dactilares de la última falange de los dedos de las manos con
el fin de identificar a las personas. El procedimiento de toma de impresiones dactilares en
un cadáver, varía según cada caso, por una serie de factores como: el estado de
conservación, la causa de la muerte, el transcurso de tiempo que ha ocurrido entre la
muerte y el hallazgo del cuerpo. Las crestas papilares o crestas de las huellas digitales
incluidas sus extremos, separaciones y relación entre sí, constituyen la base para la
identificación a través de las huellas digitales. Las crestas papilares son relieves
epidérmicos que formando una variedad de dibujos, aparecen visibles en los dedos, palmas
de las manos y plantas de los pies.
La importancia de la dactiloscopia en la identificación humana se debe a lo sencillo y

económico que resulta su utilización, a la certidumbre física que proporciona, a la
transcendente connotación de que a cada persona corresponde una única huella digital y
al indiscutible factor de que sin importar la influencia del tiempo, las circunstancias
ambientales, éstas son inmutables, lo cual hace de ellas un elemento permanente e
invariable de un individuo durante toda su existencia.
Criterios para la reseña de impresiones necrodactilares.
• A todo cadáver que ingresa a las sedes periciales del INACIF debe hacerse una cartilla
con la reseña de los dedos pulgar, índice y medio de ambas manos, además de hacer
la reseña decadactilar y fotografía del rostro con un identificador móvil, cuando esté
disponible. En caso de no tener registros útiles, se debe tomar fotografías de la cara
palmar de las falanges distales entintadas de cada uno de los dedos.
• La utilidad de las impresiones necrodactilares depende de la nitidez y limpieza de las

reseñas efectuadas, por lo que debe asegurarse la calidad de las mismas.
• En los casos que se confirme la identificación de la persona después de haber sido

inhumada, el Laboratorio de Lofoscopia debe actualizar en el Sistema de Información
Nacional Forense -SINAF-de INACIF, el estatus del caso identificado como XX con
los datos de la identificación obtenida.
Para la identificación humana por medio de la dactiloscopia, se han establecido las rutas
secuenciales según se muestra en el siguiente esquema y la documentación del
procedimiento de identificación humana por medio de comparaciones dactilares, así:


Versión: 01
IDENTIFICACIÓN HUMANA POR Vigente a partir de:

MEDIO DE COMPARACIONES
DACTILARES
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1. OBJETIVO
Establecer los pasos para lograr la identificación de una persona desconocida, mediante el cotejo de
las reseñas necrodactilares, con registros dactilares indubitados.
2. ALCANCE
Este procedimiento es de observancia para el personal que realiza actividades de cotejo de huellas
dactilares en los diferentes sistemas registrales disponibles al INACIF.

Técnico en Dactiloscopia
Perito Especialista I y II en
Lofoscopia.
1. Realizar cada una de las actividades
1. Perito Especialista I Área de
conforme lo describe el procedimiento.
Criminalística.
Perito Profesional I Área de
Criminalística.
4. GLOSARIO

4.2 Cotejo: Procedimiento utilizado para comparar uno o más indicios que se desean
individualizar o identificar.
4.3 Correspondencia dactilar: Identificación positiva de 2 huellas o impresiones
dactilares cuando entre ellas hay coincidencia de tipo de patrón (morfología y
topografía) y coincidencia de entre 8 y 12 puntos características individualizantes.
4.4 Dactiloscopia: Es la ciencia que estudia las huellas dactilares de las personas.
4.5 Dactilograma: Es el dibujo que se observa en las falanges distales de los dedos de
las personas, o el dibujo que de ellos se pueda reproducir.
4.6 Huella dactilar: Es la impresión visible o moldeada que produce el contacto de las
crestas papilares de un dedo de la mano sobre una superficie.
4.7 Identificación dactilar: Resultado que se obtiene al cotejar dos huellas o impresiones
dactilares y se encuentran de 8 a 12 puntos característicos exactamente iguales,
además de la coincidencia exacta de características generales.
4.8 Impresión dactilar: Dibujo que se observa impreso, como resultado de entintar las
crestas papilares presentes en los dedos de las manos.
4.9 No correspondencia dactilar: identificación negativa de 2 huellas o impresiones
dactilares cuando entre ellas no hay coincidencia de tipo de patrón (morfología y
topografía) ni coincidencia de características individualizantes.
4.10 Patrón dactilar: Es el diseño propio de un dactilograma; de conformidad con el
sistema Henry, hay tres tipos generales de patrones dactilares que se dividen así:
Arcos (planos o peniformes), lazos o presillas (cubitales o radiales) y Verticilos
(simples, bolsa central, doble lazo o presilla y accidentales).
4.11 Sistema AFIS: Es un sistema de información que permite la captura, consulta y
comparación automática de huellas dactilares.

Versión: 01

DACTILARES
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5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Acceso a Internet.
5.1.2 Acceso al sistema AFIS – RENAP.
5.1.3 Acceso al sistema AFIS – PNC.
5.1.5 Identificadores móviles.
5.1.6 Impresora.
5.1.7 Cámara digital.
5.2 Logísticos
5.2.1 Materiales
a. Insumos de oficina.
b. Lupas.
c. Lámparas.
d. Puntero especial para conteo de crestas.
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Las impresiones dactilares que se van a considerar como patrones de carácter
indubitado y las que originan el estudio comparativo, deben poseer características
generales y específicas suficientes para poder realizar una identificación plena y
convincente de la persona.
6.2 En los casos que sea necesario, deberá proporcionarse asesoría u orientación para la
toma de huellas dactilares y la toma fotografías de cada huella para garantizar la
búsqueda en los sistemas AFIS.
6.3 Los registros institucionales de personas fallecidas identificadas a través de los
sistemas AFIS de RENAP y PNC deben mantenerse actualizados y disponibles para
su consulta.

Actualización de carpeta digital de casos de cadáveres XX
Medicina Forense –
de morgue central.
Metropolitana
• Abre carpeta digital con el número de necropsia asignado,

Técnico
7.1 ubica las fotografías de reseñas de impresiones dactilares
Dactiloscopista
y las convierte a formato *.wsq
• Actualiza carpeta digital con nuevas fotografías en formato
*.wsq
Consulta y cotejo de huellas necrodactilares contra
huellas dactilares del Registro Nacional de las Personas,

Metropolitana
Técnico
RENAP
Dactiloscopista
7.2 • Ingresa al portal del RENAP.
• Realiza búsqueda de huellas dactilares obtenidas de
cadáveres “XX” contra las huellas contenidas en el Sistema
RENAP, ingresando las fotografías de las huellas al módulo

Versión: 01

DACTILARES
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de consulta para comparar, según orden establecido hasta
encontrar una coincidencia:
• Pulgar derecho y pulgar izquierdo.
• Índice derecho e índice izquierdo.
• Medio derecho y medio izquierdo.
• Pulgar derecho e índice izquierdo.
• Pulgar derecho y medio izquierdo.
• Índice derecho y pulgar izquierdo.
• Índice derecho y medio izquierdo.
• Medio derecho y pulgar izquierdo.
• Medio derecho e índice izquierdo.
• Para cada consulta, el sistema RENAP puede confirmar la
existencia o inexistencia de personas candidatas.
• En caso de que existan candidatos, el sistema muestra
número(s) de CUI (Código Único de Identidad) y por medio
de éste obtiene el desplegado dactilar del registro de la
persona, su fotografía y datos generales como: nombre,
fecha de nacimiento y otros datos.
• El Técnico verifica la comparación dactilar de huellas de
acuerdo a puntos característicos individualizantes de un
dactilograma, tipos y subtipos de patrones dactilares.
En los casos que no existan candidatos, continúa con el paso
7.4
Documentación de resultados positivos durante el cotejo
de huellas dactilares por medio de sistema RENAP.
• Crea una imagen del desplegado digital del RENAP,
utilizando un programa utilitario editor de gráficos.
• Selecciona sólo una de las huellas individuales del
desplegado digital del RENAP, para referencia en la
elaboración de resultados.
• Selecciona una imagen de la impresión necrodactilar para
incluirla en la boleta de resultados a elaborar. Si se toma del
índice derecho, debe tomar la misma pieza de las huellas
dactilares indubitadas.
• Marca los puntos de coincidencia en los respectivos
dactilogramas.
• Almacena las imágenes en la carpeta digital del caso que
Técnico
7.3 está documentado.
Dactiloscopista
• Toma datos generales de la persona identificada para
incluirla en la boleta de resultados a elaborar.
• Elabora boleta de resultados de cotejo dactiloscópico para
identificación de cadáveres, FOR-DTC-LAB-106 que
contiene datos de referencia del caso, del documento
referencia utilizado para hacer el cotejo dactiloscópico,
resultado obtenido y cuadro demostrativo, Perito que
elabora (firma y sello).
• Traslada la boleta de resultados de cotejo dactiloscópico a
la Subárea de Atención a Usuarios con una copia.
• Ingresa información del caso al registro de personas
fallecidas identificadas a través de sistema AFIS de
RENAP, denominada “Personas identificadas por medio
de huellas dactilares”.

Versión: 01

DACTILARES
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• Traslada carpeta digital del caso que resultó positivo y lo
ubica en carpeta de casos resueltos del año.
Documentación de resultados negativos durante cotejo de

huellas dactilares por medio de sistema RENAP.
• De los resultados de la consulta del RENAP que no
encuentran un candidato, prepara fotografías dactilares
reseñadas al cadáver.
• Elabora y envía correo de solicitud al Laboratorio de
Lofoscopia para que realice el rastreo de huellas en el
Medicina Forense -Metropolitana
Sistema automatizado de Identificación de huellas dactilares

AFIS, estación INACIF-PNC.
• Recibe respuesta por el mismo medio (correo electrónico)
del Laboratorio de Lofoscopia.
Técnico
7.4 • En caso de ser positivo recibe “Boleta de Resultados” y se
Dactiloscopista
agrega al expediente del caso “carpeta electrónica”.
• Traslada carpeta del caso que resultó positivo y lo ubica en
carpeta de casos resueltos del año.
• Realiza copia de boleta de resultados del Laboratorio de
Lofoscopia y la entrega a la Subárea de Atención al Deudo.
Continúa con el paso 7.5.
• Si no existe coincidencia, se archiva el caso en la carpeta
electrónica y física, para dejar constancia documental de
cadáveres que no lograron ser identificados y servir como
datos post mortem para futuros cotejos de características
individualizantes en entrevistas con usuarios.
Trámites en el RENAP, con el posible nombre del cadáver
identificado por medio de CAFIS de PNC.
• Con el dato del supuesto nombre verifica la existencia de un
registro previo en el RENAP (Cédula de Vecindad)
consultándolo a una Delegación del RENAP (Sede Central).
Si existe un registro, elabora un oficio solicitando al Registro
de Ciudadanos local o regional, el acceso al libro de
asientos de Cédulas de Vecindad del ciudadano/a del que
Medicina Forense -Metropolitana
se quiere reconfirmar su identificación.

• Toma fotografía panorámica al asiento de cédula, al rostro
que aparece en dicho registro de cédula y una foto individual
a la huella dactilar entintada que aparece en este registro.
Técnico • Realiza comparación de la muestra obtenida en RENAP
7.5
Dactiloscopista (muestra indubitada) con la muestra necrodactilar del
cadáver con el supuesto nombre (muestra dubitada) para
determinar o confirmar la coincidencia o no a través de
puntos característicos de cada muestra dactilar.
o Si hay coincidencia se elabora una “Boleta de
Resultados”, le entrega a Atención a Deudos para la
confirmación de la identificación del cadáver que se
encuentra en morgue.
o De todo lo actuado, conoce los Técnicos de
Dactiloscopia y el Técnico de Atención de Deudos.
• Si no existe coincidencia, se archiva el caso en la carpeta
electrónica/física, para dejar constancia documental de
cadáveres que no lograron ser identificados y servir como

Versión: 01

DACTILARES
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datos post mortem para futuros cotejos de características
individualizantes en entrevistas con usuarios.
• de los casos que se lograron identificar personas, elabora
oficio para solicitar certificado de asiento cédula de vecindad
del cadáver y para inscripción de la defunción en la
delegación del RENAP.
Gestión de registro de huellas dactilares.
Medicina Forense
–Metropolitana
• En el caso de extranjeros, gestiona con embajadas el

Técnico trámite de obtención del registro de huellas dactilares.
7.6
Dactiloscopista • En el caso de personas privadas de libertad, gestiona con
los Centros de detención la obtención del registro de huellas
dactilares con la mediación del Ministerio Público.
Recepción de solicitudes vía correo electrónicopara
búsqueda de huellas dactilares en sistemas AFIS.
El Perito Profesional I:
• Revisa correo electrónico de sedes periciales de la Unidad
de Medicina y Clínica Forense Regional, solicitando el
rastreo de huellas de personas no identificadas en sistemas
AFIS.
• Confirma que las fotografías de huellas tomadas son aptas
para la búsqueda. Si estas no tienen la calidad suficiente
para la búsqueda, se comunica a sede pericial y
Profesional I proporciona asesoría para que se tomen nuevamente
Área de fotografías en huellas fijadas haciendo uso de lupas,
Laboratorio de Lofoscopia
Criminalística. cámaras fotográficas y escáner de alta resolución, hasta

Perito lograr obtener huellas de calidad óptima.
Especialista I y II • Crea carpeta digital con el número de caso asignado y ubica
en Lofoscopia. 7.7 en ésta las fotografías de reseñas de impresiones dactilares
Perito recibidas.
Especialista I • Asigna el caso de identificación al Perito de turno.
Área de • Realiza los pasos anteriores para el caso de solicitudes de
Criminalística. la Unidad de Medicina Forense Metropolitana, con la
Perito diferencia que a estás únicamente se rastrean en el Sistema
automatizado de identificación de huellas dactilares de
Cogent (CAFIS), según lo descrito en el paso 7.10
Perito de turno:
• Abre carpeta del caso asignado.
• Convierte fotografías recibidas en formato *.jpeg, *.png o
*.jpg a formato *.wsq, con las medidas establecidas para la
búsqueda en sistema AFIS de RENAP.
• Incorpora las fotografías convertidas a formato *.wsq a la
carpeta del caso.
• Clasifica carpetas por año, sede y número de caso.
Perito Consulta y cotejo de huellas necrodactilares contra

Especialista I y II huellas dactilares del Registro Nacional de las Personas,
Laboratorio de
Lofoscopia
en Lofoscopia. RENAP
Perito 7.8 Perito de turno:
Especialista I • Ingresa al portal del RENAP.
Área de • Realiza búsqueda de huellas dactilares obtenidas de
Criminalística. cadáveres “XX” contra las huellas contenidas en el Sistema

Versión: 01

DACTILARES
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Perito RENAP, ingresando las fotografías de las huellas al módulo
Profesional I de consulta para comparar, según orden establecido hasta
Área de encontrar una coincidencia:
Criminalística. • Pulgar derecho y pulgar izquierdo.
• Índice derecho e índice izquierdo.
• Medio derecho y medio izquierdo.
• Pulgar derecho e índice izquierdo.
• Pulgar derecho y medio izquierdo.
• Índice derecho y pulgar izquierdo.
• Índice derecho y medio izquierdo.
• Medio derecho y pulgar izquierdo.
• Medio derecho e índice izquierdo.
• Para cada consulta, el sistema RENAP puede confirmar la
existencia o inexistencia de personas candidatas.
• En caso de que existan candidatos, el sistema muestra
número(s) de CUI (Código Único de Identidad) y por medio
de éste obtiene el desplegado dactilar del registro de la
persona, su fotografía y datos generales como: nombre,
fecha de nacimiento y otros datos.
• El Perito verifica la comparación dactilar de huellas de
acuerdo a puntos característicos individualizantes de un
dactilograma, tipos y subtipos de patrones dactilares.
En los casos que no existan candidatos, continúa con el paso
7.10
Documentación de resultados positivos durante el cotejo
de huellas dactilares por medio de sistema RENAP.
Perito de turno:
• Crea una imagen del desplegado digital del RENAP,
utilizando un programa utilitario editor de gráficos.
• Selecciona sólo una de las huellas individuales del
desplegado digital del RENAP, para referencia en la
elaboración de resultados.
• Selecciona una imagen de la impresión necrodactilar para
Laboratorios de Criminalística
incluirla en la boleta de resultados a elaborar. Si se toma del

índice derecho, debe tomar la misma pieza de las huellas
Sección de Lofoscoia
Perito dactilares indubitadas.

Especialista I en • Marca los puntos de coincidencia en los respectivos
Lofoscopia 7.9 dactilogramas.
Perito • Almacena las imágenes en la carpeta digital del caso que
Especialista II está documentado.
• Toma datos generales de la persona identificada para
incluirla en la boleta de resultados a elaborar.
• Elabora boleta de resultados de cotejo dactiloscópico para
identificación de cadáveres, FOR-DTC-LAB-106 que
contiene datos de referencia del caso, del documento
referencia utilizado para hacer el cotejo dactiloscópico,
resultado obtenido y cuadro demostrativo, Perito que
elabora (firma y sello).
Nota:
Los pasos del 7.7 al 7.9 los puede realizar el Técnico
Dactiloscopista de Medicina Forense Metropolitana en

Versión: 01

DACTILARES
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horarios de L-V 4:00pm a 6:00pm, sábados y domingos de
8:00am a 4:00pm.
Perito Profesional I:
• Envía boleta de resultados de cotejo dactiloscópico a sede
pericial que solicitó y remite copia del mismo a Jefe de
Medicina y Clínica Forense Regional, Jefe de Laboratorios
de Criminalística y a Jefe del Departamento Técnico –
Científico.
• Ingresa la información del caso al cuadro de identificación
de cadáveres – sedes periciales departamentales.
• Actualiza la base de datos del Sistema de Información
Nacional Forense -SINAF-, en el módulo de identificación
de cadáveres “Laboratorio de Lofoscopia”.
Consulta y cotejo de huellas necrodactilares en Sistema
automatizado de identificación de huellas dactilares de
Cogent (CAFIS)
Perito de turno:
• Ingresa al sistema CAFIS.
• Ingresa fotografías de huellas dactilares de cada caso,
generando una nueva transacción para que el sistema
realice e escaneo y confirme lista de posibles candidatos.
• De resultar candidatos, realiza el cotejo o comparación
dactilar, aplicando las técnicas de dactiloscopia. Verifica y
confirma las coincidencias de las impresiones.
• Si se confirma la identificación de la persona:
• Elabora boleta de resultados de cotejo dactiloscópico
para identificación de cadáveres, FOR-DTC-LAB-106
Laboratorios de Criminalística
que contiene datos de referencia del caso, del

Sección de Lofoscoia
documento referencia utilizado para hacer el cotejo

Perito
dactiloscópico, resultado obtenido y cuadro
Especialista I en
demostrativo, Perito que elabora (firma y sello).
Lofoscopia 7.10
Perito
Perito Profesional I:
Especialista II
• Realiza control de calidad del resultado del estudio
comparativo.
• Envía boleta de resultados de cotejo dactiloscópico a sede
pericial departamental que solicitó y remite copia del mismo
a Jefe de Medicina y Clínica Forense Regional, Jefe de
Laboratorios de Criminalística y a Jefe del Departamento
Técnico – Científico.
• Ingresa la información del caso a la base de datos “AFIS
PNC – cuadro de identificación de cadáveres.
• Actualiza la base de datos del Sistema de Información
Nacional Forense -SINAF-, en el módulo de identificación
de cadáveres “Laboratorio de Lofoscopia”.
De no haber candidatos, responde correo electrónico a la sede

pericial departamental que remitió, informando que no se ha
encontrado registro en ninguno de los sistemas consultados.

Versión: 01

DACTILARES
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Reseñas necrodactilares recibidas por medio de los
identificadores móviles:
• Identifica transacciones con estado “verificar coincidencias”.
• Verifica cada uno de los candidatos generados por el
sistema.
• Confirma las coincidencias de las impresiones.
• Si se confirma la identificación de la persona:
• Se confirma en sistema AFIS de RENAP la identidad
de la persona por medio de nombres y apellidos
reportados. De encontrarse un registro con esos
nombres y apellidos se realiza un cotejo manual del
desplegado de huellas decadactilares para constatar
que se trata de la misma persona.
• Si no se confirma identificación, se copia el formato
*.tdf que contienen las imágenes necrodactilares y se
convierte a *.wsq y a continuación a formato a *.jpg y
luego a formato *.wsq.
• A continuación se realiza una búsqueda en el sistema
AFIS del RENAP, según lo descrito en el paso 7.8. Si
no confirma identidad al finalizar este paso reporta el
resultado obtenido únicamente de la base de datos
PNC; debiendo agotar como último recurso el paso 7.5.
• Al confirmar la identidad en la base de datos de AFIS
de RENAP, elabora boleta de resultados de cotejo
dactiloscópico para identificación de cadáveres, FOR-
DTC-LAB-106 que contiene datos de referencia del
caso, del documento referencia utilizado para hacer el
cotejo dactiloscópico, resultado obtenido y cuadro
demostrativo, Perito que elabora (firma y sello).
• Si no se obtiene una identificación en AFIS de PNC, se
copia el formato *.tdf que contienen las imágenes
necrodactilares y se convierte a *.wsq y a continuación a
formato a *.jpg y luego a formato *.wsq.
• Realiza búsqueda en el sistema AFIS del RENAP, según lo
descrito en el paso 7.8; si al finalizar este paso no se
encuentran coincidencias, se termina el procedimiento y se
informa del resultado.
Actualización de tablas de control de datos de personas
Laboratorio de Lofoscopia
fallecidas identificadas por medio de sistemas AFIS

• Semanalmente se comparten tablas de control de datos

Perito
Metropolitana
actualizadas de cadáveres XX que han sido identificados

Profesional I
por medio de comparación dactilar en los sistemas AFIS del
7.11
RENAP y PNC entre el Laboratorio de Lofoscopia y la
Técnico
Unidad de Medicina Forense Metropolitana, centralizando la
Dactiloscopista
información para facilitar el universo de búsqueda.
• Gestionan tablas de control de datos para la búsqueda de
personas reportadas como desaparecidas.

Versión: 01

DACTILARES
Página __ de __
8. CÁLCULOS
N/A
Nombre Código
Ficha de toma de huellas dactilares FOR-DTC-MF-000
Boleta de resultados de cotejo dactiloscópico para identificación de
FOR-DTC-LAB-106
cadáveres.
Tabla de control de datos de identificación de cadáveres – RENAP N/A
Tabla de control de datos de identificación de cadáveres – PNC N/A
10. REFERENCIAS
10.1 Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala INACIF, Decreto 32-2006.
10.2 Reglamento de la Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses. Acuerdo No.002-2007
10.3 Reglamento de Organización y Funcionamiento del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de
Guatemala. Acuerdo No. CD-INACIF-027-2012.
10.4 La ciencia de la dactiloscopia, Clasificación y Usos.Departamento de Justicia de Estados
Unidos. Dirección Federal de Investigaciones (FBI). Centro Regional de Ayuda Técnica,
Agencia para el Desarrollo Internacional (AID), México / Buenos Aires. 1970.
N/A
12. ANEXOS
N/A

4.0 Necroidentificación humana por medio de odontología forense
Una aplicación de la odontología forense consiste en el uso de conocimientos

odontológicos con fines de identificación forense de cadáveres, que trata del abordaje y
examen adecuados de la evidencia estomatognática, la valoración y presentación de los
hallazgos de interés identificativo en el tercio inferior del rostro y toma de muestras
idóneas para cotejo genético.
El método científico de identificación a través de la carta dental encuentra su sustento

objetivo en la comparación de las características habidas en un cadáver con las
documentadas en una historia clínica, estudios radiológicos e información aportada en las
entrevistas de recolección de datos ante mortem.
La importancia de este método está dada por la considerable resistencia de los dientes, los
cuales pueden llegar a constituir en algunos casos, la única parte del cuerpo que pueda ser
utilizada como material de estudio con miras a obtener una identificación positiva del
cadáver, además de ser un método científico para la valoración estimada de la edad, uno
de los componentes de la cuarteta de la identificación humana.
Criterios a considerar en la realización de la necropsia oral.
• El Perito Profesional de Odontología o Perito Profesional de la Medicina debe

elaborar el odontograma en el formulario de recolección de datos post mortem y
documentar fotográficamente las arcadas dentales, en todos aquellos casos en los que
no ha sido posible establecer la identidad de la persona fallecida, previo a su
inhumación.
• Es responsabilidad del Perito Profesional de Odontología analizar y cotejar los datos

post mortem y ante mortem recolectados para emitir conclusiones en materia de
identificación forense.
• Cuando el cadáver presente un estado de descomposición avanzado, pérdida de

características individualizantes tales como: rasgos faciales, cicatrices, tatuajes y
lunares, como consecuencia de carbonización o cambios tafonómicos por
antropofagia cadavérica que no permita establecer la identidad por estos medios,
obligatoriamente se deben tomar como mínimo 2 piezas dentales en buen estado que
no presenten tratamientos dentales ni caries profundas, para realizar cotejo genético.
• Cuando los familiares cuentan con ficha clínica dental de la persona

desaparecida y la presenten en entrevistas, ésta debe ser evaluada por Perito
Profesional de Odontología y si ésta es coincidente con la carta dental post
mortem, se puede proceder a entregar el cadáver.
• Cuando los familiares no cuenten con ficha clínica dental de la persona

desaparecida, durante la entrevista de recolección de datos ante mortem se
debe indagar acerca de características individualizantes del aparato
estomatognático para obtener datos indiciarios para la identificación.

Para la identificación humana por medio de la odontología forense, se han establecido las
rutas secuenciales según se muestra en el siguiente esquema y la documentación del
procedimiento de necropsia oral, así:

Versión: 02
NECROPSIA ORAL
Página __ de __
1. OBJETIVO
Examinar, documentar y determinar por medio de la necropsia oral, las características

individualizantes de las estructuras del sistema estomatognático y contribuir con la identificación de
cadáveres.
2. ALCANCE
Este procedimiento se aplica a la realización de necropsia oral efectuada por Perito Profesional de
la Odontología Forense o Perito Profesional de la Medicina, en un cadáver no identificado o indiciario.
Este proceso se inicia con la recepción de solicitud de necropsia proveniente de la autoridad
competente para los casos de cadáveres ingresados como “XX” o que existe duda de su identidad,
finalizando con la elaboración, firma y envío del dictamen médico a la autoridad solicitante o entrega
del informe de resultados de cotejo odontológico al área al Perito Profesional de la Medicina. Se
realiza en las áreas de morgue de INACIF.
Perito Profesional Odontología

Forense
Perito: 1. Conocer y aplicar procedimiento de

En Tanatología Forense y identificación a cadáveres no identificados.
Clínica Forense; 2. Realizar cada una de las actividades
Profesional I de la Medicina conforme lo describe el procedimiento.
1.
Área Patología Forense y 3. A criterio del perito profesional ordenar los
Clínica Forense; estudios de diagnóstico pertinentes que
Profesional II de la Medicina permitan cumplir con los objetivos del
Área Patología Forense y peritaje.
Clínica Forense;
En Medicina Legal, Tanatología
y Clínica Forense.
2. Técnico Forense 1. Atender las instrucciones del Perito.
4. GLOSARIO
4.2 Características individualizantes: Corresponde a aquellos detalles propios,
específicos de un órgano, tejido o materiales pueden probar de manera fehaciente que
provienen de una fuente o persona específica. Ej.: caries, diastemas, mal posiciones
dentarias, tratamientos de los dientes, fracturas, desgastes, abrasiones, entre otras.
4.3 Carta dental o ficha clínica dental: Registro de una evaluación odontológica en la cual
se identifican características únicas e irrepetibles en el aparato estomatognático,
incluyendo un odontograma, lesiones y patologías.

Versión: 02
NECROPSIA ORAL
Página __ de __
4.4 Estructuras del sistema estomatognático: El sistema estomatognático se encuentra

ubicado en el tercio inferior de la cara y está constituido por las siguientes estructuras:
4.4.1 Tejidos duros:
a. Maxilares superiores y mandíbula: Son estructuras óseas en las que se
encuentran los alveolos dentales, los cuales alojan las raíces de los dientes.
b. Dientes o estructuras dentales: Son estructuras duras visibles en la
cavidad bucal, con funciones precisas tales como la masticación, estética
y fonación. En ellos se reconocen dos partes anatómicas: la corona y la
raíz que se unen a través de la línea cervical o cuello del diente. En la
dentadura permanente encontramos 32 dientes y en la temporal 20.
4.4.2 Tejidos blandos:
a. Encía: parte de la mucosa de la cavidad oral que recubre el hueso,
formando el surco o saco fisiológico y las papilas interdentales.
b. Mucosa: tejido que recubre la parte intraoral del sistema estomatognático,
como los rebordes alveolares, lengua, el paladar y el vestíbulo de la
cavidad oral.
c. Lengua: órgano musculoso de la boca recubierto por mucosa, asiento
principal del gusto y parte importante en la fonación, la masticación y la
deglución de los alimentos. Se extiende desde el hueso hioides, en la parte
posterior de la boca, hacia los labios.
d. Labios: pliegues carnosos que bordean la entrada de la cavidad oral.
e. Músculos masticatorios, arterias y nervios que participan en la función
masticatoria.
4.4.3 Tejido mixto:
a. Articulación témporo mandibular: es una de las estructuras que participan
en la realización de los movimientos mandibulares, ubicada en la parte
anterior del conducto auditivo.
4.5 Tejidos de la estructura dental
4.5.1 Esmalte: capa más dura e inorgánica del diente que cubre la totalidad de la
corona (parte clínica) y resistente a altas temperaturas.
4.5.2 Dentina: existe tanto en la corona como en la raíz, dejando en su interior dos
espacios comunicados entre sí; espacio coronal se llama cámara pulpar y el
espacio radicular se denomina conducto, radicular, el cual tiene un orificio
llamado foramen apical.
4.5.3 Cemento: capa externa que cubre la raíz.
4.5.4 Pulpa dental: es un tejido conjuntivo rico en vasos y nervios que se encuentra
en la cámara pulpar y conducto radicular del diente.
4.5.5 Ligamento periodontal: es un tejido conjuntivo que fija la raíz del diente a los
procesos alveolares.
4.5.6 Foramen apical o ápice: es el orificio que se encuentra en el extremo libre de
la raíz del diente que permite la entrada del paquete vasculo nervioso.
4.6 Superficies dentales: La corona presenta cinco superficies: vestibular, lingual o
palatina, mesial, distal, incisal u oclusal.
4.6.1 Superficie vestibular: es la superficie que está en contacto con el vestíbulo o
carrillo de la boca.
4.6.2 Superficie lingual o palatina: es la cara opuesta de la vestibular, llamada
lingual para los dientes inferiores por su proximidad a la lengua, y palatina
para los dientes superiores próximos al paladar.
4.6.3 Superficie mesial:es la cara proximal o interdental en cada diente, más
cercana a la línea media o plano sagital.

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NECROPSIA ORAL
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4.6.4 Superficie distal:es la cara proximal o interdental en cada diente, más lejana
de la línea media o plano sagital, contraria a la mesial.
4.6.5 Superficie incisal u oclusal: son las superficies cortantes situadas en el
extremo de trabajo masticatorio de los dientes. En incisivos y caninos se
denomina incisal y en premolares y molares oclusal.
4.7 Necropsia Oral: Procedimiento forense que realizara el Perito Profesional de
Odontología y el Perito Profesional de la Medicina para documentar y preservar la
evidencia física y signos traumáticos presentes en el sistema estomatognático de un
cadáver que así lo requiera, bien sea porque no ha sido identificado ni reconocido
plenamente, o porque es allí en donde puede encontrarse ciertos indicios según los
hechos que se investigan.
4.8 Nomenclatura dental: Mecanismo por medio del cual se identifica y ubica un diente
específico mediante un número dentro de la cavidad oral.
4.9 Tratamientos odontológicos más comunes con fines de identificación forense
4.9.1 Amalgama: obturación de color plateado; generalmente se ubica en los
dientes posteriores (premolares, molares, área palatina de incisivos laterales
superiores), en cualquiera de sus superficies.
4.9.2 Cemento temporal: se trata de un material de obturación que se coloca antes
de restaurar definitivamente el diente. Su apariencia es de color blanco o
lechoso. Puede estar ubicado en cualquier diente y en cualquiera de sus
superficies.
4.9.3 Resina: obturación definitiva que toma un color muy similar al del diente; se
utiliza en los dientes anteriores y dientes posteriores, en cualquiera de sus
superficies.
4.9.4 Sellantes de fosas y fisuras: material resinoso que tiene como función sellar
las fosetas oclusales de premolares, molares y linguales de incisivos
superiores; en algunas ocasiones tiene una coloración blancuzca y en otras
es transparente, lo que nos obliga a ser muy cuidadosos a la hora de examinar
estas superficies. Se diferencia de las resinas porque sigue la sinuosidad del
surco.
4.9.5 Prótesis removible: es un aparato dental que reemplaza uno o varios dientes;
se puede remover de la boca para higiene personal. El soporte está hecho de
un material acrílico rosado que simula el color de la mucosa oral y/o de metal,
los dientes son de acrílico, con un color que imita el color natural de los
dientes. puede estar sostenido a las piezas dentales por ganchos metálicos
para darle estabilidad funcional.
4.9.6 Prótesis total: se usa cuando en alguno de los maxilares no hay ninguna
estructura dental, es decir, reemplaza la totalidad de los dientes del maxilar
superior o inferior, según el caso. El soporte está hecho de un material acrílico
rosado que simula el color de la mucosa oral y los dientes son de acrílico, con
un color que imita el esmalte dental.
4.9.7 Prótesis fija: puede remplazar una o varias estructuras dentales, hasta la
totalidad de los dientes; se coloca sobre el soporte dental de manera definitiva.
Está hecha de metal, la cual puede estar recubierta con material acrílico o
porcelana de un color muy similar al diente. Se sostiene de las piezas dentales
contiguas de manera definitiva.
4.9.8 Corona protésica: es una pieza dental que reemplaza la superficie expuesta
del diente total o parcialmente. Puede ser de metal, acrílico o porcelana
pudiendo tener un color muy similar al del diente, aunque algunas veces
presenta una de sus superficies en metal plateado o dorado, está colocada de
manera definitiva en la boca.
4.9.9 Ortodoncia: Es un tratamiento que se aplica para corregir mal posiciones
dentales.

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NECROPSIA ORAL
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4.9.10 Aparatos fijos y removibles de ortodoncia: Son de diferentes tipos y se aplican

para corregir malas posiciones dentales, mantener espacios interdentales o
romper hábitos.
4.9.11 Arcos de Erich: Son bandas metálicas que presentan enuna de sus caras
lengüetas y se fijan al cuello de los dientes por medio de alambres, su función
es fijar fracturas, por lo cual se encuentran en ambas arcadas dentales y
fijadas entre sí por bandas elásticas.
4.9.12 Otras características individualizantes
a. Alteración de número: Son alteraciones que ocurren durante la formación
de la lámina dental, la cual da origen al germen dental.
i. Ausencias: cuando el diente no está presente en la boca, puede tratarse
de una pérdida antigua, de una pérdida reciente, un diente sin
erupcionar por encontrarse retenido o por que no se formó. Para hacer
un buen diagnóstico diferencial, se deben tener en cuenta las
características de la mucosa y/o el alvéolo, la posición del diente
ausente, la edad de la persona examinada y la cronología de la
erupción. Para descartar que se trate de un diente incluido o sin
erupcionar, se debe tomar una radiografía.
ii. Edéntulo: es la ausencia total de las piezas dentales debido a la pérdida
de éstas.
iii. Dientes supernumerarios: Son aquellos dientes que exceden el número
normal de dientes en boca: más de 20 dientes en la dentición primaria
y más de 32 dientes en la dentición permanente.
b. Anomalías de posición: hacen referencia a la manera como está ubicado
el diente dentro del alvéolo, teniendo en cuenta la relación de sus superficies
con las estructuras vecinas. Pueden ser: inclinación, rotación o giroversión
y migración. Para diferenciarlos entre sí, se hacer a partir de la superficie
vestibular de los dientes.
i. Inclinación: desviación de la posición vertical del diente, el cual queda
angulado.
ii. Rotación: el diente está girado; será rotación mesial cuando la
superficie vestibular queda mirando hacia la línea media y, rotación
distal cuando la superficie vestibular queda mirando al lado contrario de
la línea media.
iii. Migración: Es cuando el diente se movilizó con toda su estructura
anatómica para ocupar un lugar que no le corresponde.
iv. Apiñamientos: los dientes de una misma arcada están superpuestos
unos delante o atrás de otros.
v. Diastemas: son espacios fisiológicos notorios entre uno y otro diente.
c. Alteración de la estructura del esmalte dental
Atrición: es el desgaste de las superficies cortantes y de trituración de los
dientes.
Abrasión: es el desgaste de la estructura dentaria a través de procesos
mecánicos anormales, tales como cepillado dental inadecuado.
Erosión: Es el proceso mediante el cual la estructura dentaria pierde su
integridad de forma patológica, localizada, dolorosa y crónica cuando es
atacada por sustancias ácidas, generalmente.
Fractura: es la pérdida parcial o solución de continuidad de un diente; puede
ser completa o incompleta, reciente (con borde cortante) o antigua (con
borde romo).Se deben describir sus características (bordes, dirección, etc.)
y ubicación de manera precisa, teniendo en cuenta la siguiente clasificación:

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NECROPSIA ORAL
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i. Fracturas a nivel de tercio incisal.

ii. Fracturas a nivel del tercio medio.
iii. Fracturas a nivel del tercio cervical.
iv. Fracturas radiculares.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Computadora.
5.1.2 Impresora.
5.1.3 Cámara digital fotográfica.
5.1.4 Calibrador métrico digital.
5.1.5 Cámara de rayos “X”
5.1.6 Cámara intra oral.
5.1.7 Cubetas de impresión.
5.2 Logísticos
5.2.1 Materiales
a. Mesa de necropsia.
b. Instrumental odontológico.
• Explorador dental.
• Espejo dental.
• Fórceps dental No. 150, 151, 16L, 18L, 16R, 18R, universal.
• Elevadores rectos.
• Elevador en bandera.
• Hoja de bisturí.
• Mango de bisturí.
• Linterna.
• Gasas.
• Abrebocas de goma o plásticos.
• Retractores de labios de varios tamaños.
c. Material para tomar modelos de impresión:
• Juego de cubetas de acero inoxidable para toma de impresiones
dentales.
• Copa de hule para mezclar material dental.
• Espátula plástica para mezclar material dental.
d. Materiales de impresión dental:
• Alginato de uso dental.
• Yeso tipo III (yeso piedra) para modelos dentales.
• Hojas de papel acetato.
• Cera rosada para registro de mordedura.
• Marcador permanente.
e. Sobres de papel para embalaje.
f. Cepillo.
g. Jabón.

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NECROPSIA ORAL
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h. Equipo de protección para el médico (medidas universales).

i. Papelería.
j. Hisopos estériles.
k. Seda dental.
l. Bolígrafo.
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Las muestras obtenidas en el desarrollo de la necropsia oral, deben manejarse

adecuadamente, por lo que deben observarse las precauciones universales de
bioseguridad.
6.2 En todo procedimiento de necropsia, el cuerpo, las muestras o indicios son sujetos a
ser contaminados por el personal a cargo, por lo cual deben tomarse las medidas para
abolir la contaminación. Para ello, todo el personal involucrado debe utilizar equipo de
protección personal, incluyendo: traje para sala de necropsias, gorro o cofia para el
cabello, cubiertas para zapatos, guantes, mascarilla, lentes de seguridad, entre otros.
6.4 En caso de cadáveres que, por el estado de putrefacción o en casos complejos por
carbonización, que dificulten la identificación, será necesario la evaluación del Perito
Profesional en área de Antropología.

Responsable responsable actividad
Revisión de la información disponible del caso.
• Revisa tabla de control de ingreso de cadáveres e
Medicina y Clínica Forense –Regional.
identifica casos de cadáveres XX.

• Coordina con personal de atención a usuarios si ha venido

familia a preguntar por estos cadáveres, si han sido
entrevistados, si existen datos e información antemortem
de su ficha dental, o si se tienen familiares pendientes de
Perito Profesional
entrevistas para apoyar.
Odontología 7.1
Forense • Gestiona con personal de Recepción y Control de
Cadáveres el correlativo de odontología, previa
confirmación de casos que no se ha tenido una
confirmación de identificación por medio de cotejo
dactilar.
• Previo al procedimiento, revisa el expediente y/o
información disponible proporcionada por la autoridad que
remite el caso (hoja de levantamiento).

Versión: 02
NECROPSIA ORAL
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Realización de necropsia oral
Desarrolla este procedimiento durante o después de la
necropsia médico legal, en la que se registrará cada hallazgo
de la cavidad oral siguiendo el orden que a continuación se
indica:
• Toma fotografías externas e intraorales.
• Desarrolla examen extraoral: Examina el tercio inferior de
Perito Profesional
la cara y valorar los tejidos blandos y duros, con el fin de
Odontología
Forense; registrar toda anomalía postmortem y/o características
individualizantes ante morten.
Peritos • Desarrolla de examen intraoral: Para abrir la cavidad oral

Profesionales se cuenta con varias técnicas, las cuales varían de

(I, II y III) en: acuerdo con el tiempo de muerte:
Tanatología a. Cadáveres recientes.
Forense y Clínica b. Cadáveres descompuestos o carbonizados.
Forense; c. Cadáveres esqueletizados u osamentas.
Medicina Área 7.2 - Realiza examen clínico de tejidos blandos y describe
Patología Forense
y Clínica Forense; características que puedan ser útiles para la
Medicina Área identificación: tatuajes, lesiones, fracturas, entre
Patología Forense otras.
y Clínica Forense; - Examen clínico de tejidos duros: describir
Medicina, tratamientos antemortem como amalgamas,
Tanatología fracturas, sellantes y prótesis.
Forense y Clínica • Registra los hallazgos del examen extraoral e intraoral en
Forense; Legal, los siguientes formularios: Ficha Dental Post-Mortem,
Tanatología y
FOR-DTC-MF-03 y Hoja de Odontograma, FOR-DTC-
Clínica Forense.
MF-034.
• En casos que lo ameriten, toma radiografías.
• Debe realizar la toma de impresiones dentales por orden
de autoridad competente o cuando el caso lo amerite.
Perito Profesional Toma de muestras

Odontología • Antes de tomar la muestra etiqueta el recipiente (sobre de
Forense; papel).
Peritos • Toma muestras odontológicas necesarias según cada
Profesionales
caso:
(I, II y III) en:

a. Análisis genético
Tanatología
Forense y Clínica En cadáveres descompuestos, esqueletizados,
Forense; carbonizados o por orden de autoridad competente,
Medicina Área se debe tomar dientes para realizar análisis de ADN;
Patología Forense de preferencia los caninos y molares, en su defecto
y Clínica Forense; 7.3 puede utilizarse otras estructuras dentales sin
Medicina Área tratamientos endodónticos (tratamiento de
Patología Forense conducto) o caries profundas.
y Clínica Forense; • Coloca en sobres de papel ya que la muestra se
Medicina, encuentre seca.
Tanatología • Embala y etiqueta las muestras y sigue estrictamente la
Forense y Clínica cadena de custodia.
Forense; Legal, • Entrega la muestra para análisis posteriores.
Tanatología y
Clínica Forense.

Versión: 02
NECROPSIA ORAL
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Estimación de edad
Realiza esta estimación del rango de edad, según método:
• En el caso de adultos (mayores de 21 años), se aplica el

Metropolitana
método de Lamendín.
Perito Profesional
• En el caso de osamentas, aplica fisuras palatinas, método
Odontología 7.4
Forense. de Lamendín y método Ubelaker.
• En casos de menores de 21 años, utiliza el método de
Ubelaker y desarrollo de la tercera molar. De acuerdo a
la técnica o método desarrollado se efectúa la estimación
de edad.
Documentación y remisión de resultados.
• Entrega resultado a la Subárea de Atención al Deudo
(original) y la copia a la Subárea de Identificación Humana
para su archivo.
Metropolitana
Perito Profesional • En los casos que ameriten y/o a solicitud de autoridad

Odontología 7.5 competente, elabora dictamen pericial y se remite a través
Forense. de RCD.
• Cuando existe una carta dental o entrevista previa se
realiza el cotejo y elabora informe de resultados de cotejo
odontológico para identificación de cadáveres, FOR-DTC-
MF-000.
8. CÁLCULOS
N/A
Nombre Código
Ficha dental post-mortem FOR-DTC-MF-036
Odontograma FOR-DTC-MF-034
Informe de resultados de cotejo odontológico para identificación de
FOR-DTC-MF-000
cadáveres
Entrega de expediente y traslado de indicios FOR-DT-MF-000
Correlativo odontología y
Dictamen pericial
número INACIF

Versión: 02
NECROPSIA ORAL
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10. REFERENCIAS
10.1 Ley Orgánica del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala INACIF,
Decreto 32-2006.
No.002-2007
10.4 Guía práctica para el dictamen odontológico forense. Duque Piedrahita. Máximo Alberto.
Colombia 2004.
10.5 Anatomía dental. Espada Vila, Rafael. Quinta Edición. México. 2004.
10.6 Nomenclatura Anatômica ilustrada. Fenis, H. México. 2006.
10.7 Erosión dental provocada por bebidas. Ramírez Ossa, Diana Milena, Colombia. 2003.
Número de versión Descripción del cambio con respecto a la versión anterior
1 • Emisión del documento.
• Se adaptó procedimiento a la nueva estructura documental, según

procedimiento de elaboración y control de documentos y registros del
2 Sistema de Gestión de la Calidad PRO-DG-GAC-001.
• Se han establecido los pasos que debe contener un procedimiento de
necropsia oral, eliminando aquellas actividades que se describen con
mayor detalle y que deben estar contenidas en un instructivo.
12. ANEXOS
N/A.

5.0 Necroidentificación humana por medio de antropología forense
La antropología forense se encarga de la identificación de restos humanos en casos

complejos.
Esta disciplina se ocupa principalmente de las características individualizantes a nivel

óseo que aporten valor para la identificación de restos humanos siguiendo un orden lógico:
determinar especie (si es de origen humano o no), determinar el número mínimo de
individuos, determinar el sexo, estimar el rango de edad biológica, estimar rango de
estatura, determinar la afinidad biológica (Ancestría), identificar osteopatologías trauma
ante mortem, patrones de traume peri mortem y otros elementos identificativos.
La identificación es un proceso comparativo y reconstructivo tendiente a ubicar a una

persona desaparecida dentro de un universo biosocial conocido. De ahí la importancia de
identificar a la persona por medio de la antropología, ya que la mayoría de cadáveres y
restos óseos que ingresan a las morgues de las diferentes sedes periciales en calidad de
“XX”, “XX y/o presuntamente identificados” están relacionados con hechos violentos o
sospechosos de criminalidad, colaborando de esta forma, con la justicia y la tranquilidad
emocional de la familia.
Criterios para la toma la realización de la antropología forense.
• Los restos humanos en estado de reducción esquelética deberán remitirse

obligatoriamente a la subárea de antropología.
• Los restos óseos mezclados deberán pasar a la subárea de antropología
• En caso de cadáveres que, por el avanzado estado de descomposición, severos

procesos térmicos (Carbonización y/o calcinación), cambios tafonómicos por
antropofagia cadavérica o casos complejos que dificulten la identificación, será
necesario la evaluación del Perito Profesional en el sub área de Antropología.
Para la identificación humana por medio de la antropología forense, se ha establecido la

ruta según se muestra en el siguiente esquema y procedimiento:


Versión: 01
IDENTIFICACIÓN HUMANA POR
MEDIO DE ANTROPOLOGÍA FORENSE
Página ___ de ___
1. OBJETIVO
Establecer los lineamientos pertinentes para la recolección idónea de datos post-mortem y muestras
óseas para cotejo genético de restos humanos que ingresan a la Sub-área de Antropología, unidad
de Medicina Forense Metropolitana del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala –
INACIF–, con el fin de establecer el perfil biológico, traumas antemortem, patrones de lesiones peri
mortem y osteopatologías con la finalidad de aportar al esclarecimiento de la identificación del
individuo.
2. ALCANCE
Este procedimiento aplica a restos humanos en diversos estados de descomposición,

desmembrados, con procesos térmicos, mezclados y cambios tafonómicos por antropofagia
sometidos a procesos térmicos severos (carbonización o calcinación), restos humanos mezclados y
provenientes de desastres masivos que ingresan a las sedes periciales del INACIF como cadáveres
no identificados.
1. Conocer y aplicar el procedimiento de

Perito Profesional antropología forense para Identificación de
1. cadáveres “XX”.
Antropología Forense
2. Realizar cada una de las actividades
4. GLOSARIO
4.1 Perfil biológico: Grupo de características como edad, sexo, estatura, filiación
ancestral y características individualizantes como anomalías óseas, condiciones
patológicas que pueden haber sido médicamente reconocidas y/o tratadas,
restauraciones dentales y evidencias de procesos de la enfermedad e incluso
cicatrices del embarazo.
4.2 Afinidad biológica: Es una serie de características o rasgos morfológicos
(especialmente óseos) expresados de manera más o menos continua en los
integrantes de una población determinada.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Cámara fotográfica digital.
5.1.2 Mesa de necropsia –cuando aplica-
5.1.3 Equipo de radiología –cuando aplica-
5.1.4 Estereoscopio.
5.1.5 Micrótomo.
5.2 Logísticos
5.2.1 Materiales
a. Instrumental para disección.
b. Estufa eléctrica o de gas.

Versión: 01
Página ___ de ___
c. Extractor de olores para químicos tóxicos.

d. Ollas de acero inoxidable.
e. Tabla osteométrica.
f. Mandibulómetro
g. Calibrador Universal.
h. Moldes de sínfisis púbica.
i. Moldes de extremo esternal de costilla.
j. Sobres de papel para embalaje de muestras.
k. Cinta métrica.
l. Cinta de seguridad con logotipo de INACIF.
m. Testigo métrico.
n. Bolsas de papel kraft.
o. Equipo de protección personal.
p. Cajas de cartón
q. Insumos de oficina.
5.2.2 Reactivos
a. Detergente no iónico.
b. Carbonato de sodio.
c. Amoníaco.
d. Cianoacrilato.
e. Acelerador de Cianoacrilato.
6. PUNTOS CRÍTICOS

destinados para el desecho biológico. El equipo de protección personal no desechable
se enviará a la lavandería.
6.2 Aplicar las medidas de bioseguridad necesarias durante la manipulación de químicos
utilizados en el proceso de maceración.

Gestión de solicitudes de antropología para identificación
humana.
Recibe indicios y solicitud expresa emitida por autoridad
Medicina Forense –Metropolitana.
•
competente, según hoja de levantamiento u oficio emitido
con requerimiento puntual de análisis antropológico.
Perito • Sin requerimiento puntual de autoridad competente,
Profesional recibe solicitudes e indicios de peritos profesionales de la
7.1 medicina, para complementar información sobre restos
Antropología
humanos en relación a identificación forense. Confirma el
Forense
tipo de consulta en la boleta de solicitud a través del
formulario: Solicitud de Análisis a otras especialidades,
FOR-DTC-MF-069.
• Realiza registro de solicitudes en tabla de control de
datos de casos antropología, con la información general
del caso.

Versión: 01
Página ___ de ___

Revisión de documentación disponible previo a iniciar el
análisis antropológico.
Perito responsable revisa la documentación e
•
información del caso:
a. Formato para el levantamiento y remisión de
Perito cadáveres o documento mediante el cual la
Profesional autoridad competente ordena la realización del
7.2 procedimiento antropológico.
Antropología
b. Verifica la hoja de interconsulta a otras
Forense
especialidades, FOR-DTC-MF-000 emitida por el
Perito Profesional de la Medicina.
c. Hoja de identificación de camilla para cadáveres,
proporcionada por el personal de Recepción de
Cadáveres o Registro, Control y Distribución de
Evidencias.
Documentación de los indicios
• Toma fotografía a restos humanos y revisa coincidencia
de indicios recibidos con el documento de referencia,

Metropolitana.
Perito
Profesional previo al proceso de limpieza.
7.3 • Inspeccionar y separa previamente al proceso de
Antropología
limpieza los indicios asociados al cadáver y toma
Forense
fotografías.
• Actualiza base de datos del caso con la fecha de toma de
fotografía.
Toma de muestras
• En todos los casos debe extraerse el número necesario
Perito de muestras óseas para posteriores cotejos genéticos
Profesional (occipital para ADN craneal y postcraneal). Es importante
7.4
Antropología realizar esta etapa de extracción, previó al proceso de
Forense maceración.
• Embala la muestra y rotula el embalaje con correlativo
correspondiente.
Procesamiento de los restos humanos para su limpieza:
• Realiza rayos X a restos humanos.
Perito • Cuando aplique, realiza la maceración o solamente
Profesional limpieza de restos humanos, según su estado de
7.5 descomposición (utilizar cepillo de cerdas suaves y agua,
Antropología
cepillar sin agua).
Forense
• Secado de restos óseos (cuando aplique).
• Marcaje a cada uno de los restos óseos con el número
correlativo asignado por antropología al caso.

Versión: 01
Página ___ de ___

Procesamiento de la información post mortem en el
análisis antropológico.
• Inicia expediente del caso con la siguiente
documentación: solicitud de análisis antropológico (hoja
de levantamiento MP con cadena de custodia, solicitud
de análisis de otras especialidades, rayos X, y el
manuscrito con las generalidades del caso
(nomenclatura/correlativo Antro, el objetivo del peritaje).
• Realiza documentación escrita del análisis antropológico:
a. Establecer especie: si se trata de restos de origen
humano, o si se trata de restos de origen animal.
b. Realiza la reconstrucción de los fragmentos óseos,
cuando sea factible.
c. Posterior extender en una mesa los restos óseos
sistemáticamente en posición anatómica.
d. Si corresponden a uno o más individuos, utilizar el
formulario para número mínimo de individuos,
Análisis de Partes Óseas, FOR-DTC-MF-06
e. Elabora inventario óseo de subadulto o adulto,
FOR-DTC-MF-070, indicando la presencia,
ausencia o duplicación de cada elemento.
• Determinación del perfil biológico:

a. Determinación de sexo a través de cráneo, cintura
Perito pélvica y variaciones métricas.
Profesional b. Estimación de edad entre adultos y sub adultos.
7.6
Antropología c. Estimación de talla.
Forense d. Estimación de afinidad biológica.
• Actualiza el manuscrito con información de los restos
humanos.
• Establece tipo de trauma (post mortem, ante mortem y/o
peri mortem).
• Describe inventario dental, según formulario
Odontograma Antropológico de Adulto, FOR-DTC-MF-
055, Odontograma Antropológico de Niño, FOR-DTC-
MF-059 y Odontograma Antropológico de Dentición
Mixta, FOR-DTC-MF-074.
• Identifica y describe osteopatologías o variantes
morfológicas. Actualización de manuscrito con diagramas
de traumas, patologías, estructuras dentales y aspectos
que aporten información al procedimiento de
identificación humana (según diagramas
correspondientes) por ejemplo: Odontograma
Antropológico de Niño, FOR-DTC-MF-059,Odontograma
Antropológico de Dentición Mixta, FOR-DTC-MF-074,
individualizados con el número asignado de antropología,
fecha, firma y sello del perito profesional.
• Elabora dibujos sobre los hallazgos que considere
pertinentes, según formularios de figuras humanas de
cráneo, esqueleto de adulto o subadulto, FOR-DTC-MF-
000, FOR-DTC-MF-000 y FOR-DTC-MF-000,
respectivamente.

Versión: 01
Página ___ de ___

• Fotografía los indicios óseos y hallazgos relacionados a
los mismos.
Elaboración de informe / dictamen

• Elabora dictamen para la autoridad competente con los
resultados de análisis antropológico y conclusiones.

• Elabora informe de datos postmortem en respuesta a
interconsultas recibidas de las distintas sedes periciales
Perito del INACIF, “Hoja de Resultados de Análisis
Profesional Antropológico”, FOR-DTC-MF-000y envío al médico
7.7
Antropología correspondiente (informe físico en morgue metropolitana
Forense o escaneo y envío por correo electrónico a sedes
periciales.
• Recepción y análisis de datos ante mortem recolectados
en entrevista técnica y cotejo con datos post mortem.
Elaboración de informe de resultados.
• Actualiza tabla de control de datos de casos antropología.
Entrega de indicios para análisis odontológico
• Coordina con Perito Profesional en Odontología Forense
Perito la entrega de cráneo, mandíbula y piezas dentales (según
Profesional sea el caso) para realización de peritaje odontológico
7.8
Antropología forense correspondiente.
Forense • Finalizado el análisis odontológico forense, recibe del
Perito Profesional en Odontología Forense los indicios
para su evacuación.
Evacuación de restos humanos
• Cuando los restos óseos provienen de las sedes
periciales departamentales del INACIF, se entregan a la
sección de registro control y distribución de los indicios.
• Casos remitidos por la unidad de medicina metropolitana
Perito forense son entregados en receptoría de cadáveres de la
Profesional morgue metropolitana.
7.9
Antropología • Las muestras óseas para cotejo genético son remitidas al
Forense laboratorio de genética a través de la sección de
Recepción, Control y Distribución de Indicios del
Departamento Técnico Científico, cuando existe un perfil
genético indubitado para cotejo. Caso contrario, las
muestras se remiten al almacén de evidencias del
Ministerio Público.
8. CÁLCULOS
N/A

Versión: 01
Página ___ de ___
Nombre Código
Solicitud de Análisis a otras especialidades FOR-DTC-MF-069
Tabla de control de datos de casos antropología FOR-DTC-MF-000
Figura humana - esqueleto de adulto: vistas anterior y posterior FOR-DTC-MF-000
Figura humana - esqueleto de adulto: vistas lateral izquierdo y
FOR-DTC-MF-000
derecho
Figura humana – cráneo FOR-DTC-MF-000
Figura humana – cráneo: vista superior e inferior FOR-DTC-MF-000
Figura humana – esqueleto de subadulto FOR-DTC-MF-000
Inventario óseo de adulto FOR-DTC-MF-070
Análisis de partes óseas FOR-DTC-MF-068
Odontograma antropológico de adulto FOR-DTC-MF-055
Odontograma antropológico de niño FOR-DTC-MF-059
Odontograma antropológico de dentición Mixta FOR-DTC-MF-074
Hoja de resultados de análisis antropológico FOR-DTC-MF-000
10. REFERENCIAS
32-2006.
No.002-2007
10.3 Reglamento de Organización y Funcionamiento del Instituto Nacional de Ciencias Forenses
de Guatemala. Acuerdo No. CD-INACIF-027-2012.
10.4 Human Osteology, Third Edition, Tim D. White, Michael T. Black y Pieter A. Folkerns, 2012,
USA
10.5 Standards for data collection from human skeletal remains. Buikstra, J. E., and Ubelaker,
D. H. (Eds.) (1994) Fayetteville, AR: Arkansas Archaeological Survey Report No. 44. 206
pp. The essential osteological standards volume in North America.
10.6 Recovery, Analisis, and Identification of Commingled Human Remains. Bradley J. Adams,
Phd, Hickam AFB, HI (2008) New York, NY.
10.7 The Forensic Anthropology Laboratory. Warren, Michael W., Walsh-Haney, Heather A. and
Freas, Laurel E. CRC Press, Taylor & Francis Group, United States (2008)
N/A
12. ANEXOS
N/A

6.0 Entrevista técnica para identificación de cadáveres y búsqueda de

desaparecidos
Los usuarios que visitan las diferentes sedes periciales de INACIF en busca de una persona
desaparecida o que reclaman un cadáver ingresado a la sede pericial sin ser identificado o
estar presuntamente identificado, con frecuencia se presentan en estado de zozobra y
franca angustia. Por lo anterior, el personal profesional, técnico y administrativo que se
encargan de atenderlos deben brindar un trato cordial y respetuoso.
La entrevista forense se realiza en un ambiente tenso, pues en la mayoría de casos, la

persona fallecida ha sido víctima de un hecho violento. Por ello, antes, durante y después
de la entrevista, es necesario atender aspectos emocionales de los familiares de las
víctimas, teniendo en cuenta la situación que están experimentando. La entrevista que
merece llamarse técnica, reúne aspectos de atención a las necesidades emocionales con
los propios de la práctica forense.
Debe ponerse especial atención a hecho que dependiendo del abordaje de la entrevista, el
procedimiento puede revictimizar a los familiares de la persona fallecida o por el contrario,
ofrecer elementos reparadores que les ayude a superar el círculo del duelo.
Criterios para la realización de entrevistas técnicas:
• En la medida de lo posible, las sedes departamentales deben considerar la asesoría a

distancia del Perito Profesional en Odontología Forense para la documentación del
odontograma antemortem con las características individualizantes proporcionadas por
las personas entrevistadas.
• En la morgue metropolitana siempre que esté disponible, la recolección de datos ante

mortem odontológicas deben realizarse con acompañamiento del Perito Profesional
de Odontología Forense.
• En el caso de cadáveres recientes, al momento del abordaje inicial para entrevista

técnica de los familiares y ellos refieren características individualizantes ante mortem
que presentan coincidencias convincentes con las características post mortem
observadas durante el proceso de necropsia, no es necesario llenar el formulario de
recolección de datos post mortem, limitándose a enviar el formulario de confirmación
de identidad a la Unidad de Medicina Forense Metropolitana para incorporación de
estadísticas.
• En los casos de cadáveres en estado de descomposición avanzada, carbonizados, con

cambios tafonómicos por antropofagia cadavérica, restos humanos, en los cuales no
ha sido posible establecer los datos de la cuarteta básica o coincidencias convincentes
que permitan la identificación, debe consignarse toda la información posible requerida
en el formulario de recolección de datos ante mortem, mediante la realización de una
entrevista técnica.

Para la identificación humana por medio de la entrevista técnica, se ha establecido la ruta

según se muestra en el siguiente esquema y procedimiento:

Versión: 01
ENTREVISTA TÉCNICA PARA Vigente a partir de:

IDENTIFICACIÓN DE CADÁVERES Y
BÚSQUEDA DE DESAPARECIDOS
Página __ de __
1. OBJETIVO
Obtener información precisa y confiable ante mortem de una persona desaparecida y confrontar las
diferentes características proporcionadas en la entrevista con la información consignada en formato
de recolección de datos post mortem de cadáveres pendientes de identificar.
2. ALCANCE
Este procedimiento es aplicable a todas las entrevistas técnicas realizadas a usuarios que se
presentan a las diferentes Sedes Periciales de Tanatología de INACIF en búsqueda de personas
desaparecidos.

Técnico Forense
Atención a Usuarios
Perito en Dactiloscopia
Técnico Forense
Técnico en Tanatología 1. Conocer y aplicar cada una de las actividades
1.
Arqueólogo Forense conforme lo describe el procedimiento.
Perito Profesional en
Odontología Forense
Perito Profesional de la
Medicina.
4. GLOSARIO
4.1 Características individualizantes: Conjunto de características fenotípicas y
genotípicas que presentan los individuos y que los hacen únicos y permite diferenciarlo
de otras personas.
4.2 Entrevista técnica: Es una conversación con preguntas estructuradas y dirigidas con
el propósito de obtener datos ante mortem y enfocada a buscar características
individualizantes útiles, para la identificación de cadáveres que se les ha practicado la
necropsia médico legal.
4.3 Entrevistado: Es la persona que conociendo al individuo buscado de una manera muy
cercana, puede describir sus características individualizantes, útiles para su
identificación, con el mayor detalle y precisión posible.
4.4 Entrevistador: Es el personal de INACIF con la responsabilidad de recolectar
información con fines de identificación de cadáveres y con idoneidad en el manejo de
aspectos específicos relacionados a la atención de personas, que comprenda y domine
el proceso de necroidentificación humana como se describe en el presenta manual,
conocimiento básico y de técnica s de abordaje para obtener información.
4.5 Ficha ante mortem: Conjunto de preguntas específicas acerca de características
individualizantes de la persona que se busca, que permiten establecer su perfil
biológico a través de la memoria individual. La Ficha ante mortem es un documento
testimonial de aquellas personas, familiares o no, que brindan información acerca de
la persona desaparecida.

Versión: 01

Página __ de __
4.6 Persona desaparecida: Es el individuo de quien se desconoce su paradero y se

sospecha su fallecimiento. Familiares o allegados indagan por él al haber desaparecido
en circunstancias que indican un comportamiento fuera de su rutina, o cuando temen
que pueda estar en riesgo su integridad física.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Equipo audiovisual.
5.2 Logísticos
5.2.1 Espacios y mobiliario adecuados para entrevista.
5.2.2 Materiales:
a. Insumos de oficina.
b. Papel toalla.
c. Sobres de embalaje.
d. Papel filtro.
e. Lancetas.
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Garantizar que los espacios para la entrevista sean amplios, confortables, con
muebles básicos, libre de distractores. El espacio para la entrevista debe ser acogedor,
libre de ruidos y confidencial.
6.2 Confirmar al inicio de las entrevistas técnicas si la persona a atender, ya fue
entrevistada previamente para evitar la duplicidad de información.

Técnico Forense Atención de usuarios para entrevistas técnicas.
Atención a
Usuarios Saludo inicial y pregunta propósito de la visita.

•
• Recolecta información preliminar relacionada a la identidad
Auxiliar de la persona que busca.
Administrativo • Realiza búsqueda de la persona por nombre en el Sistema
de Información Nacional Forense -SINAF-, tabla de control
Peritos 7.1 de ingresos de cadáveres o libro de control diario de ingreso
Profesionales y egreso de cadáveres.
(I, II y III) en: • Realiza búsqueda en carpeta electrónica de personas no
Tanatología identificadas de la sede, por rango de edad, sexo, talla,
Forense y Clínica fecha de desaparición.
Forense; • De haber coincidencias convincentes de identificación
Medicina Área proceder a mostrar las fotografías, siendo éstas: hoja de
Patología identificación de camilla para cadáveres, prendas de vestir

Versión: 01

Página __ de __

Forense y Clínica y accesorios, características individualizantes, rostro: lateral
Forense; izquierdo, derecho y de frente.
Medicina Área • De lo actuado solo se requiere llenar el formulario de
Patología informe de identificación de cadáver, FOR-DTC-MF-000 y
Forense y Clínica remitir una copia a la Unidad de Medicina Forense
Forense; Metropolitana.
Medicina, • De no haber coincidencias convincentes dar aviso al
Tanatología personal de turno para que realice la entrevista, según lo
Forense y Clínica establecido en el Procedimiento de Recepción e
Forense; Legal, Información a Usuarios, INS-DTC-MF-000.
Tanatología y
Clínica Forense.
Desarrollo de la entrevista técnica para recolección de

datos ante mortem
Técnico en • El entrevistador se apersona en la sala de espera e
Dactiloscopia. identifica a la persona que se entrevistará.
• Se presenta con su nombre completo y conduce al usuario
Arqueólogo a la sala de entrevista.
Forense • Explica en qué va a consistir la entrevista (según guía de
entrevista, véase anexo), tiempo estimado para
Perito desarrollarla y objetivo de la utilización de la información
Profesional en que se va a recolectar que es para fines de identificación.
Odontología • Se debe consignar la información requerida en la boleta de
Forense consentimiento informado y obtener la firma de la persona
a entrevistar.
Técnico Forense • Inicia el llenado del formulario de recolección de datos ante
mortem FOR-DTC-MF-000, con los datos generales de la

Técnico persona a entrevistar y de la persona desaparecida.

Tanatología. • Realiza preguntas generadoras de información relativas a:
o Aspectos externos tales como: edad, peso, estatura,
características faciales, cabello, vello facial y corporal,
Perito: 7.2 tatuajes, aretes, perforaciones, implantes, lunares,
En Tanatología manchas en la piel (vitíligo), cicatrices,
Forense y protuberancias, depresiones, deformidades,
Clínica Forense; amputaciones, forma y tamaño de ojos, nariz, boca,
Profesional I de orejas, labios; características de manos y uñas,
la Medicina Área prendas de vestir y objetos asociados (accesorios).
Patología o Aspectos internos tales como: cirugías, fracturas,
Forense y prótesis, material de osteosíntesis, marcapasos,
Clínica Forense; implantes, tratamientos odontológicos, enfermedades
Profesional II de y otras características individualizantes.
la Medicina Área • Consigna los datos obtenidos según preguntas
Patología generadoras en el registro ante mortem correspondiente.
Forense y • Solicita datos de la persona entrevistada, su firma e
Clínica Forense; impresión de huella dactilar en formulario de entrevista.
En Medicina • Informa a la persona entrevistada que se realizará la
Legal, búsqueda en la base de datos de cadáveres no
Tanatología y identificados ingresadas a morgue a partir de la fecha
Clínica Forense; reportada de la desaparición de la persona y que estén
dentro del rango de sexo, edad, estatura y ascendencia
racial, según sea el caso:

Versión: 01

Página __ de __

• Si el rango del tiempo de desaparición está entre 1 a 30
días, el tiempo de búsqueda se realiza de forma
inmediata e indica a la persona esperar por resultados
preliminares.
• Si el rango del tiempo de desaparición es mayor a 30
días, establece una cita con la persona o establece
comunicación posterior para que se presente
nuevamente a la sede pericial para conocer resultados
de posibles candidatos, mostrándole fotografías del
caso; si por el contrario, no se encuentran coincidencias
en los registros de INACIF se informa del resultado por
vía telefónica inquiriendo si ya ha sido localizado con
vida.
• Si no se ha establecido el paradero de la persona
reportada como desaparecida, copia el formulario de
recolección de datos ante mortem, FOR-DTC-MF000
debe remitirse a la Unidad de Medicina Forense
Metropolitana para mantener una búsqueda activa.
Búsqueda de personas desaparecidas y cotejo con datos
post mortem.
• Realiza búsqueda de personas en los registros de la sede
Técnico en pericial de INACIF, según características individualizantes
Dactiloscopia. proporcionadas en la entrevista:
Arqueólogo a. Mecanismo de cotejo de sub adultos (menor de edad):
Forense • De acuerdo al rango de fecha de desaparición, la edad
y el sexo, localiza los casos o expedientes que se tienen
Perito: documentados y que coincidan con alguno de los
En Tanatología criterios de búsqueda.
Forense y Clínica
• Revisa el registro digital de la hoja de identificación de

Forense; camilla para cadáveres que se tienen en cada
expediente del caso para confirmar datos de edad y
Profesional I de sexo y que coincidan con los datos del registro ante
la Medicina Área mortem de personas desaparecidas.
Patología 7.3 • Luego confirma que las características individualizantes
Forense y Clínica (médicas, antropológicas y odontológicas)
Forense; documentadas en el caso coincidan con las
proporcionadas en la entrevista.
Profesional II de o De acuerdo a criterios de coincidencias encontradas
la Medicina Área entre datos ante mortem y datos post mortem,
Patología documenta las fotografías del caso para ser
Forense y Clínica mostradas a la persona entrevistada, siendo éstas:
Forense; hoja de identificación de camilla para cadáveres,
prendas de vestir y accesorios, características
En Medicina Luego confirma que las características
Legal, individualizantes, rostro: lateral izquierdo, derecho y
Tanatología y de frente.
Clínica Forense

Versión: 01

Página __ de __

• Si no se encuentran suficientes elementos de convicción
como consecuencia del cotejo, se debe remitir muestras
para cotejo genético del cadáver y del presunto familiar
idóneo, según lo establecido en el procedimiento de
necroidentificación humana por análisis genético. El
Coordinador de Sede debe refrendar la solicitud en
consenso con el Jefe de la Unidad de Medicina Forense
Metropolitana, previo a su envío.
b. Mecanismo de cotejo de Adultos – morgue
metropolitana:
• Realiza búsqueda por nombre de la persona
desaparecida en la base de datos de cadáveres
identificados previamente en INACIF por cotejo de
huellas.
• De acuerdo al rango de fecha de desaparición, la edad y
el sexo, localiza los casos o expedientes que se tienen
documentados.
Técnico en • Revisa el registro digital de la hoja de identificación de
Dactiloscopia. camilla para cadáveres que se tienen en cada expediente
del caso para confirmar datos de edad y sexo y que
Arqueólogo coincidan con los datos del registro ante mortem de
Forense personas desaparecidas.
o individualizantes documentadas en el caso
Perito: coincidan con las proporcionadas en la entrevista.
En Tanatología Si es positiva:
•
Forense y Clínica
o Realiza un segundo cotejo para confirmar la

Forense; correspondencia de la huella dactilar del índice
derecho de la ficha RENAP contra el caso que
Profesional I de coincide el dato de identificación.
la Medicina Área o Elabora boleta de resultados del cotejo
Continúa
Patología dactiloscópico para identificación de cadáveres
7.3
Forense y Clínica FOR-DTC-MF-106 y lo envía al Perito Profesional
Forense; de la Medicina de turno, con una copia.
o De acuerdo a criterios de coincidencias encontradas
Profesional II de del cotejo de huellas, documenta las fotografías del
la Medicina Área caso para ser mostradas a la persona entrevistada,
Patología siendo éstas: hoja de identificación de camilla para
Forense y Clínica cadáveres, prendas de vestir y accesorios,
Forense; características individualizantes, rostro: lateral
izquierdo, derecho y de frente.
En Medicina • Si no se encuentra en la base de datos de cadáveres
Legal, identificados previamente en INACIF, se procede a
Tanatología y realizar una búsqueda en la base de datos de RENAP,
Clínica Forense por nombre y por huellas, según procedimiento de
identificación de cadáveres por comparaciones
dactilares, PRO-DTC-MF-000.
• Si se encuentra una coincidencia, proceder según lo
descrito en el paso 7.5 del Procedimiento de
identificación por comparaciones dactilares, PRO-DTC-
MF-000.

Versión: 01

Página __ de __
Mecanismo de cotejo de Adultos – Sedes periciales de la

Unidad de Medicina Forense Regional:
• De acuerdo al rango de fecha de desaparición, la edad y
el sexo, localiza los casos o expedientes que se tienen
documentados y que coincidan con alguno de los criterios
de búsqueda.
• Revisa el registro digital de la hoja de identificación de
camilla para cadáveres que se tienen en cada expediente
del caso para confirmar datos de edad y sexo y que
coincidan con los datos del registro ante mortem de
personas desaparecidas.
• Luego confirma que las características individualizantes
(médicas, antropológicas y odontológicas)
Técnico en documentadas en el caso coincidan con las
Dactiloscopia. proporcionadas en la entrevista.
o De acuerdo a criterios de coincidencias encontradas
Arqueólogo entre datos ante mortem y datos post mortem,
Forense documenta las fotografías del caso para ser
mostradas a la persona entrevistada, siendo éstas:
Perito: hoja de identificación de camilla para cadáveres,
En Tanatología prendas de vestir y accesorios, características
Forense y Clínica individualizantes, rostro: lateral izquierdo, derecho y

Forense; de frente.
• Si no se encuentra en la base de datos de cadáveres
Profesional I de identificados previamente en INACIF, se procede a
la Medicina Área realizar una búsqueda en la base de datos de RENAP,
Continúa por nombre y por huellas, según procedimiento de
Patología
7.3 identificación de cadáveres por comparaciones
Forense y Clínica
Forense; dactilares, PRO-DTC-MF-000
• Si se encuentra una coincidencia, proceder según lo
Profesional II de descrito en el paso 7.5 del Procedimiento de
identificación por comparaciones dactilares, PRO-DTC-
la Medicina Área
Patología MF-000
Forense y Clínica • Si no se encuentran suficientes elementos de convicción
como consecuencia del cotejo, se debe remitir muestras
Forense;
para cotejo genético del cadáver y del presunto familiar
En Medicina idóneo, según lo establecido en el procedimiento de
Legal, necroidentificación humana por análisis genético. El
Tanatología y Coordinador de Sede debe refrendar la solicitud en
consenso con el Jefe de la Unidad de Medicina Forense
Clínica Forense
Metropolitana, previo a su envío.
Una vez agotados todos los mecanismos de cotejo, sin haber

obtenido coincidencias, debe remitirse a la Unidad de
Medicina Forense Metropolitana copia del formulario de
recolección de datos ante mortem FOR-DT-MF-000 de la
persona reportada como desaparecida para consolidar y
realizar búsquedas ulteriores.

Versión: 01

Página __ de __

Información de resultados de la búsqueda
Resultados negativos:
• Si el resultado de la búsqueda es negativo, informa al
Técnico en
entrevistado y proporciona número de teléfono de la sede
Dactiloscopia.
pericial con el propósito de obtener retroalimentación
respecto al avistamiento de la persona desaparecida en
Arqueólogo
centros preventivos, hospitales, amigos o que regresó a
Forense
casa, entre otros.
• Informa que dará seguimiento de los datos proporcionados
Técnico Forense
realizando búsquedas en tablas de control de datos del
resto de sedes periciales y que se comunicará para
Técnico
informarle.
Tanatología.
• Da seguimiento con el Laboratorio de Lofoscopia o
Medicina Forense Metropolitana para conocer resultados de
Perito:
las búsquedas.
En Tanatología
Forense y
Resultados positivos
Clínica Forense;
• Si el resultado de la búsqueda es positivo, informa al
entrevistado que se tiene una persona con características
Profesional I de
similares y que es necesario realizar su reconocimiento.
la Medicina Área
7.4 • Prepara al entrevistado en la sala de entrevista y muestra
Patología
las fotografías del caso en este orden: hoja de identificación
Forense y
de camilla para cadáveres, prendas de vestir y accesorios,
Clínica Forense;
características individualizantes, lateral izquierdo y derecho
y finalmente del rostro.
Profesional II de
• Se asegura que se agoten los medios para lograr una
la Medicina Área
identificación fehaciente del cadáver para indicar al
Patología
entrevistado sobre los trámites de entrega de su familiar.
Forense y
• En los casos que habiendo una confirmación fehaciente de
Clínica Forense;
la identificación del cadáver con el aporte de datos ante
mortem y post mortem y, que la persona entrevistada aún
En Medicina
tenga duda que es su familiar y se niegue a reclamarlo, se
Legal,
procederá a inhumarlo en el cementerio nacional una vez
Tanatología y
cumplido el plazo de espera establecido en este manual (10
Clínica Forense;
días).
• Informa al usuario de los pasos a seguir y documentos que
deberá presentar para retirar al cadáver de la morgue.
Nota:
• En los casos que se confirme que el cadáver de la persona
ya fue inhumado, se debe informar al entrevistado del lugar
de inhumación.
8. CÁLCULOS
N/A

Versión: 01

Página __ de __
Nombre Código
Tabla de control de ingreso de cadáveres N/A
Libro de control diario de ingreso y egreso de cadáveres N/A
Formulario de informe de identificación de cadáver FOR-DTC-MF-000
Formulario de recolección de datos ante mortem FOR-DTC-MF-000

Boleta de resultados del cotejo dactiloscópico para identificación de
FOR-DTC-MF-106
cadáveres
Solicitud de análisis a otras especialidades FOR-DTC-MF-000
Hoja de resultados de análisis antropológico FOR-DTC-MF-000

Informe de resultados de cotejo odontológico para identificación de
FOR-DTC-MF-000
cadáveres
10. REFERENCIAS
32-2006.
No.002-2007
N/A
12. ANEXOS
Guía para el desarrollo de entrevistas técnicas
1. Preparación del entorno para la entrevista.

• Asegurarse que los entornos de la entrevista sean espacios confortables y con muebles
básicos.
• Evitar tener el menor número de distractores dentro de la sala, para garantizar un
espacio acogedor, libre de ruidos y de objetos perturbadores.
• Preparar y llevar consigo los materiales a utilizar en la entrevista técnica (lápiz, papel,
formulario de entrevista).
• Evitar tener el menor número de distractores dentro de la sala, para garantizar un
espacio acogedor, libre de ruidos y de objetos perturbadores.

Versión: 01

Página __ de __
2. Desarrollo de la entrevista.
• Presentarse con el usuario a entrevistar con el nombre completo, comentar en qué va
a consistir la entrevista y para qué es la información que se le va a preguntar y que se
requiere de su consentimiento informado.
• Dar instrucciones cortas y sencillas el objetivo de la entrevista, dejar claro a la persona
entrevistada que si no conocen todas las respuestas a las preguntas que se le realicen,
que no importa, que no se trata de adivinar; que cuente las cosas que realmente sabe,
sin ocultar un dato que sea importante.
• Plantear que el objetivo de la entrevista consiste en obtener información veraz, puntual
y fidedigna que permita al entrevistador conocer tres aspectos importantes: datos de la
persona desaparecida, hechos relacionados o que motivaron la desaparición y acciones
que se han llevado a cabo con motivo de la misma.
• Crear y mantener un ambiente relajado y amistoso.
• Respetar el espacio personal del entrevistado.
• No mirar fijamente a la persona entrevistada, pero estar atento a sus expresiones, se
puede sentir cohibida.
• Evitar reacciones emocionales ante la descripción de los hechos.
• No sugerir sentimientos o respuestas al entrevistado.
• Tener en cuenta como aspecto fundamental que la muerte o desaparición de un familiar
o allegado del usuario, genera reacciones afectivas a veces contradictorias, que pueden
incluir incertidumbre, angustia, estrés, negación del hecho, impotencia ante la realidad,
actitudes violentas, culpa, tristeza, depresión, entre otras; tales reacciones en ocasiones
interfieren con la información que aporta el usuario y que se requiere para la
identificación de un cadáver; por lo que es importante que el entrevistador del impacto
emocional que experimente el entrevistado, y evidencia la necesidad de un clima de
confianza y empatía para atenuar sus niveles de ansiedad.
• Ofrecer solidaridad y comprensión por una situación agobiante y una actitud de
prudencia que respeta el dolor que la persona puede estar experimentando,
manifestado en sus silencios o vacilaciones, requiere disponer de cierto tiempo,
necesario para expresar sentimientos frente al hecho o, simplemente, para comprender
y responder a las preguntas que se le plantean.
• Si se tiene dificultad para comprender lo que la persona entrevistada dice, pedir que
repita el comentario con frases, “No comprendí, qué fue lo que me dijo…”
• Desarrollar las preguntas generadoras, según formulario con el propósito de recabar
información referente a la persona desaparecida: nombre completo, apodo o alias, edad,
lugar y fecha de nacimiento, nacionalidad, domicilio, documentos de identidad, estudios

Versión: 01

Página __ de __
realizados y otras relativas al perfil biológico, tales como: edad, sexo, estatura, peso,
lateralidad, complexión; características externas como: cabello, rostro, frente, ojos,
cejas, nariz, boca, orejas; marcas en la piel o señales particulares como: cicatrices,
lunares, tatuajes, machas, pecas, quemaduras, barba o bigote, aretes o perforaciones,
verrugas, acné, fracturas, implantes, amputaciones, deformaciones, uñas; y otro tipo de
características individualizantes relativas a adicciones o hábitos y antecedentes
médicos.
• Indagar sobre la información odontológica de la persona desaparecida con apoyo del
gráfico que contiene la hoja de registro de datos ante mortem, para recabar información
referente a: expediente dental, características dentales, tratamientos odontológicos,
ausencias dentales, hábitos relacionados al deterioro de la dentadura (tabaquismo,
onicofagia u otras).
• Es necesario que el entrevistado describa a detalle las prendas de vestir, calzado y
accesorios que usaba la persona al momento de la desaparición.
• Deberán tomarse los datos del árbol genealógico para la realización de pruebas de
genética, cuando apliquen.

7.0 Necroidentificación humana por medio de genética forense
El ADN es el compuesto más importante del ser vivo, pues es la sustancia bioquímica
encargada de transmitir las características genéticas y de regular la vida en las diferentes
especies. (López, P. 2003)
Tanto el hombre como la mujer tienen 23 cromosomas, de los cuales, del cromosoma 1 a
la 22, la información es de “estructura general”, es decir, aspecto tales como el color de
los ojos, la estatura y ciertas enfermedades hereditarias y el cromosoma 23 tiene la
información del sexo de la persona. La madre aporta siempre un cromosoma 23
denominada “X”, de su par de cromosomas “XX”
El ácido desoxirribonucleico es una molécula conformada por ácidos nucleicos que

codifican la información genética de los organismos vivos. Esta se compone de dos hebras
anti paralelas complementarias, unidas por puentes de hidrógeno, logrando una cadena
doble en forma de hélice dextrógira. Cada nucleótido está compuesto de un azúcar
desoxirribosa, un grupo fosfato y una base nitrogenada (adenina, citosina, guanina y
timina).
La comparación entre perfiles genéticos es lo que permite determinar si dos muestras de

ADN proceden de personas diferentes o de un mismo individuo o si existe una relación
biológica entre dichos individuos; siendo el ADN la base de la herencia.
Los análisis de ADN, se fundamentan en el mismo principio que soporta a otras disciplinas
forenses que laboran en el campo de la identificación de personas: “La diversidad
humana”. Del mismo modo como la dactiloscopia, la patología, la odontología y la
antropología, buscan en el cadáver rasgos anatómicos que puedan constituirse en indicios
de identidad, las pruebas genéticas detectan variantes de ADN en las personas, que
constituyen códigos de identidad prácticamente individuales.
Criterios para la toma la realización de análisis genéticos forenses:
• Los casos para genética forense deben estar autorizados por el Jefe o Coordinador de
la sede pericial, con sus debidas justificantes.
• Para solicitar un análisis genético para identificación humana, es indispensable contar
con la muestra de un familiar.
• El análisis genético aplica:
o Cuando ninguno de los otros métodos o disciplinas forenses no aporten
suficiente información o la información disponible no puede cotejarse con datos
antemortem.
o Cuando el cadáver o restos humanos presenten desmembramiento y no es
posible relacionar los segmentos por cualquier otra disciplina forense.
• Orden de predilección de los candidatos a dar muestra para identificación.
• Es importante considerar que cuando se haga la entrevista se recolecten los datos del
árbol genealógico para tomar la muestra en este orden: madre, padre, hijos, hermanos,
abuelos, primos hermanos, sobrinos de primos hermanos. En caso no se tenga
disponibilidad de madre, padre o hijos, se consultará al Laboratorio de Genética para
elegir la muestra o muestras útiles para la identificación, según el contexto familiar
del caso.


Instructivo Código:INST-DTC-LAB-024
Versión: 01
RECEPCIÓN DE SOLICITUDES DE
PERITAJE, INDICIOS Y OFICIOS
PROCEDENTES DE LA SECCIÓN DE
RECEPCIÓN, CONTROL Y
DISTRIBUCIÓN DE INDICIOS Página __ de __
1. INTRODUCCIÓN
El presente instructivo describe el procedimiento de recepción de indicios y oficios de solicitud de

análisis, diligencias de toma de muestras y/o citaciones a debate en el Laboratorio de Genética, luego de
habérseles asignado un número correlativo del Laboratorio de Genética por la Sección de Recepción,
Control y Distribución de Indicios (RCD).
Establece la forma en que se realiza la revisión, recepción, registro y almacenamiento temporal, de los
indicios recibidos en el Laboratorio de Genética, con solicitud de una autoridad competente.
2. OBJETIVOS
2.1. Establecer el procedimiento para la revisión, recepción, registro y almacenamiento temporal

indicios biológicos que ingresan al Laboratorio de Genética, para preservar y asegurar la integridad
e identidad de los mismos.
2.2. Establecer el procedimiento para la recepción en la sección de RCD de documentación identificada
con correlativos correspondiente al Laboratorio de Genética.
2.3. Establecer el procedimiento para la gestión de oficios de solicitud de análisis, toma de muestra y/o
citaciones a debate que ingresan al Laboratorio de Genética.
3. ALCANCE
Este instructivo aplica para la revisión, recepción, registro, almacenamiento y/o gestión de indicios y
oficios que ingresan al Laboratorio de Genética a través de la sección de RCD.
4. RESPONSABLES
No. PUESTO RESPONSABILIDAD

Peritos Profesionales del Laboratorio de
1 1. Conocer y ejecutar el procedimiento descrito.
Genética
Personal designado del Laboratorio de
Genética
1. Velar por el cumplimiento del procedimiento
3 Jefe del Laboratorio de Genética descrito.
2. Conocer y ejecutar el procedimiento descrito.
5. GLOSARIO
5.1. Cadena de custodia: conjunto de procedimientos que garantizan la identidad e integridad de los
indicios. La cadena de custodia procesal se refiere a la serie de marcas que se hacen a un indicio
cuando están en posesión de una persona, puede incluirse el nombre del perito, el número de caso
y/o la firma. La cadena documental es el registro escrito que se genera cada vez que existe
transferencia de custodia del indicio, lo firma la persona que entrega y la persona que recibe.
5.2. Caso: expediente que documenta una investigación de tipo criminal, el cual se forma tomando
como referencia una o más solicitudes de análisis, requeridas al Laboratorio de Genética.

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5.3. Embalaje: envoltorio que se utiliza para depositar el indicio. Se deben utilizar embalajes
apropiados de papel o cartón, que permitan la ventilación de los indicios de acuerdo a su naturaleza,
los cuales deben estar debidamente identificados. Se consigna número de investigación o proceso,
descripción del indicio (clase, cantidad, estado, color, etc.), fecha, hora, lugar donde se practicó la
recolección y la identificación del responsable.
5.4. Identidad: conjunto de características propias de un indicio que lo diferencia del resto y que
permite asegurar que el indicio extraído o levantado, es el mismo que se remite a los laboratorios
para su análisis y posteriormente al almacén correspondiente.
5.5. Indicio: todo objeto, instrumento, huella, marca, rastro, señal o vestigio, que se usa y/o se produce
en la comisión de un hecho, convirtiéndose en evidencia.
5.6. Integridad: prueba que el indicio no ha sido alterado, dañado o contaminado y ha sido preservado
adecuadamente.
5.7. Medidas universales de precaución: concepto que requiere que la sangre y otros fluidos de
organismos biológicos y piezas de evidencia que estuvieron en contacto con éstos, se manejen
como si estuvieran potencialmente contaminados con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH),
con hepatitis B o con cualquier otro agente bioinfeccioso
5.8. Muestra biológica: mancha o muestra de fluido o tejido corporal. Ejemplos: sangre, orina, saliva,
semen, sudor, piel, órganos, pelo, diente y restos óseos, entre otros.
5.9. Número de caso o referencia: número de pericia o incidente, según la agencia que investiga el
caso criminal (Ministerio Público u Organismo Judicial) y somete a análisis los indicios.
5.10. Perito analista: individuo que realiza el análisis de muestras, interpreta los datos, llega a
conclusiones, emite informe y comparece a los tribunales como perito.
5.11. Portador: funcionario u oficial autorizado a someter y entregar los indicios a la Sección de
Recepción, Control y Distribución de Indicios del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de
Guatemala, quien para fines de descripción se convierte en portador de los indicios para entregarla
al Laboratorio correspondiente.
5.12. Receptor: personal del Laboratorio de Genética autorizado y calificado para recibir, manejar,
documentar, preservar, custodiar y disponer de los indicios y solicitudes recibidas en el Laboratorio
de Genética.
6. RECURSOS
6.1. Tecnológicos
6.1.1. Computadora
6.1.2. Escáner
6.2. Logísticos
6.2.1. Materiales
a. Canastas plásticas o recipientes para traslado de indicios y documentos recibidos
b. Insumos de oficina
c. Cinta adhesiva con el logo de INACIF
d. Sello Personal
e. Equipo de protección (bata y guantes desechables)
6.2.2. Patrones y materiales de referencia

El empleo de patrones de referencia, no aplica para este instructivo, debido a que es
utilizado únicamente para la recepción de solicitudes de peritaje, indicios y oficios
procedentes de la Sección de RCD, el cual no requiere la utilización de patrones o
materiales de referencia.

Versión: 01
7. PUNTOS CRÍTICOS
7.1. Utilizar bata y en los casos que se considere necesario utilizar guantes desechables.
7.2. Las muestras biológicas depositadas en soportes como papel FTA, papel filtro, hisopos, prendas de
vestir, machetes, etc. deberán ser almacenadas a temperatura ambiente y en un lugar seco.
7.3. Los indicios biológicos como fetos y órganos deberán ser congelados entre -15 y -20oC para
asegurar su preservación.
7.4. Verificar la naturaleza de los indicios recibidos para establecer si será necesario congelarlos o si
corren el riesgo de quebrarse durante el traslado y almacenamiento. Asegurarse de informar estos
extremos al encargado de almacenamiento o de gestionar personalmente el aseguramiento de la
preservación e integridad de este tipo de indicios.
8. ACTIVIDADES
8.1. Normas generales

8.1.1. En las cadenas de custodia y documentación relacionada, utilizar de preferencia bolígrafo
con tinta azul o negra en todos los documentos oficiales, internos o externos, que se
generen. No usar lápiz, marcador y/o bolígrafo con tinta roja.
8.1.2. Utilizar de preferencia tinta negra o azul para entintar las almohadillas de los sellos de
hule que se utilizan en los documentos oficiales.
8.1.3. Evitar utilizar abreviaturas en los documentos oficiales externos o internos, fuera del
contexto de los procedimientos establecidos.
8.1.4. No utilizar corrector líquido ("Liquid Paper" o producto similar) en los documentos
oficiales.
8.1.5. No se hacen tachones en documentos oficiales internos o externos. En los errores se
dibuja encima una línea, se coloca la rúbrica o firma y se coloca la fecha.
8.1.6. El receptor será responsable del indicio que reciba y mientras éste se encuentre bajo su
custodia.
8.1.7. De ser posible identificar la evidencia recibida con el correlativo GEN correspondiente.
8.1.8. La bodega de almacenamiento temporal de indicios en el Laboratorio de Genética es un
área de acceso restringido, a la cual puede ingresar únicamente la persona encargada del
manejo, control y disposición de indicios del almacén temporal del Laboratorio de
Genética y el Jefe del Laboratorio de Genética.
Nota: otro miembro del personal podrá ingresar al almacén siempre y cuando exista una
autorización por escrito emitida por la Jefatura del Laboratorio de Genética o su
representante.
8.1.9. Si el perito receptor rechaza algún documento o indicio deberá documentarse utilizando
el formulario FOR-DTC-LAB-000 Rechazo de solicitudes de peritaje, oficios y/o
indicios procedentes de la sección de recepción, control y distribución de indicios.
8.2. Recepción de indicios, solicitudes de análisis, diligencias de toma de muestras y citaciones a

debates
8.2.1. El personal del Laboratorio de Genética, recibirá del personal de la sección de RCD las
solicitudes de análisis y diligencias de toma de muestras y citaciones a debates.
8.2.2. Corroborar que los indicios y/o solicitudes a recibirse provengan de las instituciones a
las cuales presta servicio el INACIF (Ministerio Público y/o Organismo Judicial).
8.2.3. En el caso de diligencias de toma de muestras, verificar el correlativo asignado, la fecha,
hora y lugar de programación de la misma.
Nota: en el caso de toma de muestras departamentales deberá corroborarse que el
personal de la Sección de RCD haya asignado el correlativo de la sede correspondiente,
para asegurar que la diligencia sea atendida de forma oportuna.

Versión: 01
8.2.4. En el caso de citaciones a debate, corroborar el correlativo asignado, que el perito citado
pertenezca al Laboratorio de Genética, la fecha, hora y lugar de programación del debate.
8.2.5. En el caso de la recepción de indicios adjuntos a cadena de custodia, corroborar el
correlativo asignado, la solicitud de análisis para el ingreso de indicios al Laboratorio de
Genética o la razón por la que se trasladan y realizar la comparación del embalaje de los
indicios con la información descrita en cadena de custodia. Los datos a verificar son:
a. Número de correlativo GEN
b. Número de correlativo INACIF
c. Número de evaluación clínica o necropsia (según aplique)
d. Número de caso o referencia de la entidad solicitante
e. Nombre, firma y sello de la autoridad solicitante (según aplique)
f. Nombre, firma y sello del médico o perito responsable de la toma de muestras
clínicas o muestras tomadas durante procesos de necropsia, exhumaciones, análisis
antropológico u odontológico, entre otros.
g. Identificación completa de la(s) persona(s) relacionadas al caso (según aplique)
h. Lugar de recolección de indicios (según aplique)
i. Número y descripción de indicios
Nota 1: si los datos anteriormente descritos no concuerdan, los indicios serán
recibidos hasta que el portador, funcionario responsable o emisor de la solicitud
rectifique, incluya o amplíe la información necesaria. Deberá procederse según se
describe en el inciso 8.1.8.
Nota 2: en caso se determine que un dato está consignado erróneamente en la
cadena de custodia -no así en el indicio-, el portador debe asegurarse de obtener la
rectificación por parte de la autoridad o perito profesional responsable del indicio
para que pueda ser recibido en el Laboratorio de Genética. Deberá procederse según
se describe en el inciso 8.1.8.
Nota 3: por razones de bioseguridad y para evitar la posible contaminación de
indicios como resultado de la abertura del embalaje, se comparará en el momento
de la recepción únicamente la información descrita en el embalaje con la cadena de
custodia. En los casos que el perito lo considere absolutamente necesario deberá
abrirse el embalaje y corroborar físicamente las características del indicio. Durante
el análisis se compararán las características físicas del indicio, si en este punto
llegara a identificarse la necesidad de solicitar ampliaciones o rectificaciones se
consultará con la Jefatura del Laboratorio de Genética para las gestiones respectivas.
8.2.6. El portador, entrega original y copia de la solicitud de análisis y cadena de custodia del
indicio, así como todos los documentos relacionados al caso. Ambos, portador y receptor,
deben quedar registrados al llenar los encasillados de la cadena de custodia consignando
los siguientes datos (según aplique):
a. Fecha de recepción
b. Hora de recepción
c. Número y/o descripción de indicios recibidos según solicitud de análisis
d. Firma y sello
e. Otros datos (Ejemplo: aclaraciones u observaciones)
8.2.7. Entregar copia de solicitud de análisis con cadena de custodia sellada de recibido al
portador, y la cadena original es trasladada por el receptor al Laboratorio de Genética
junto con los indicios recibidos.
Nota: en el caso de recepción de oficios, diligencias de toma de muestras y citaciones a
debate, el portador retiene el folio original y la copia es trasladada al Laboratorio de
Genética por el receptor para realizar lo procedente.

Versión: 01
8.2.8. Entregar indicios a la persona encargada del manejo, control y resguardo de indicios del
almacén temporal del Laboratorio de Genética.
Nota: idealmente los indicios serán recibidos directamente por la persona encargada del
almacén temporal de indicios del Laboratorio de Genética, en los casos en los que sean
recibidos por una persona distinta, deberá consignarse adicionalmente el traslado de los
indicios a dicha persona.
8.2.9. Entregar los oficios y las cadenas de custodia de los indicios a la persona encargada del
registro del ingreso de indicios al Laboratorio de Genética.
8.3. Ingreso de información a la base de datos de control de ingresos y manejo de solicitudes
8.3.1 Todos los oficios de solicitudes y cadenas de custodia de los indicios recibidos, son
ingresados a la base de datos de control de ingresos del Laboratorio de Genética en orden
ascendente de correlativo, consignando los siguientes datos:
a. Fecha de ingreso
b. Número de caso o referencia
c. Número de correlativo INACIF
d. Número de correlativo del Laboratorio
e. Tipo de caso
f. Descripción de ingreso/observaciones – indicio o personas relacionadas.
Nota: en el caso de citaciones a debate, se consigna la fecha, hora, lugar, Dictamen
Pericial a ratificar, ampliar y/o modificar y el nombre del perito citado.
8.3.2 Los oficios de solicitudes y cadenas de custodia de los indicios recibidos son clasificados
y repartidos de la siguiente manera:
a. Documentos relacionados a casos de filiaciones: deberán ser entregados a la persona
encargada del manejo de base de datos de filiaciones.
b. Documentos relacionados a casos de criminalística e identificaciones: deberán ser
entregados a la persona encargada del manejo de base de datos de criminalística e
identificaciones.
c. Oficios de diligencia de toma de muestras que se llevarán a cabo en la ciudad capital,
Mixco, Amatitlán y Villa Nueva: deberán ser escaneados por la persona encargada
de su registro de ingreso -identificándolos con el correlativo GEN y guardándolos
en una carpeta exclusiva para dicho fin- el oficio en físico deberá ser entregado al
perito encargado del control, asignación y entrega de tomas de muestra.
d. Oficios de diligencia de toma de muestras departamentales: deberán ser entregados
a la persona encargada del manejo de base de datos de paternidades y criminalística
e identificaciones, según corresponda.
e. Oficios de citación a debate: serán entregados a los peritos citados o al personal
responsable de gestionar citaciones de peritos que ya no laboren en la institución.
Nota: en el caso que el perito citado a debate se encuentre de vacaciones, deberá
consultarse con la Jefatura de Laboratorio de Genética para las disposiciones
respectivas.
9. REGISTRO
Documento Código

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Rechazo de solicitudes de peritaje, oficios y/o indicios

procedentes de la sección de recepción, control y FOR-DTC-LAB-000
distribución de indicios.
10. REFERENCIA
10.1. Rudin, N., Inman, K. 2001. An Introduction to Forensic DNA Analysis. 2nd. Edition. CRC Press.
11. SITUACIONES EXCEPCIONALES
La Dirección General, su representante autorizado o el personal designado por éste son los
responsables de resolver cualquier aspecto relacionado con este procedimiento, que no fue considerado en
el mismo.

Procedimiento Código:PRO-DTC-LAB-082
Versión: 01

EXTRACCIÓN DE ADN EN RESTOS
ÓSEOS Y PIEZAS DENTALES POR EL
MÉTODO DE DESMINERALIZACIÓN
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1. INTRODUCCIÓN
Los restos óseos y piezas dentales deben ser sometidos a un proceso de limpieza
y fragmentación previo a la extracción de ADN (Ácido Desoxirribonucléico). El
pulverizado resultante evita que se tenga suficiente contacto con los componentes de
la célula y como consecuencia que no se lleve a cabo la extracción de manera eficiente.
Por lo tanto, la extracción de ADN requiere el uso de detergentes iónicos, enzimas y
agentes desmineralizantes para la lisis celular y desnaturalización de proteínas.
El ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) es un secuestrador de calcio y actúa
desintegrando la matriz ósea. Debido a que la doble hebra de ADN tiene fuerte afinidad
por la hidroxiapatita, el empleo de esta sustancia permite que pueda ser removida con
el fin de recuperar el ADN inmerso en ella. Además, el EDTA inhibe la acción de las
nucleasas y disminuye compuestos contaminantes en el extracto que tienden a
precipitar con el ADN y causar la inhibición de la Reacción en Cadena de la
Polimerasa(PCR).
El proceso de extracción de ADN, finaliza con la eliminación de restos celulares que
se realiza de forma primaria purificando y concentrando el extracto por medio de
columnas de filtración y centrifugación. Dichas columnas, tienen capacidad de eliminar
restos celulares mayores a 100 kDaltons. Por último, se lleva a cabo la purificación del
extracto con la finalidad de eliminar inhibidores moleculares, por medio de una columna
comercial especial de Qiagen®.
2. OBJETIVO
Extraer, aislar, concentrar y purificar material genético de restos óseos y piezas

dentales para la determinación de perfiles genéticos, utilizando el método de
desmineralización con EDTA y purificación con columna comercial especial de Qiagen®.
3. ALCANCE
Este procedimiento se aplica a los restos óseos y piezas dentales que ingresan a
Genética, adjunto a la solicitud de autoridad competente, para el análisis de ADN.
4. RESPONSABLES
4.1. Peritos profesionales Área Química Biológica

4.2. Coordinador de Sección

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5. LISTA DE DISTRIBUCIÓN
5.1. Dirección General

5.2. Jefe Departamento Técnico Científico
5.3. Jefe Unidad de Laboratorios de Criminalística
5.4. Coordinador de Sección
6. GLOSARIO
6.1. Ácido Desoxirribonucléico (ADN): Molécula que codifica la información

genética de los organismos vivos. Esta se compone de dos cadenas
complementarias de nucleótidos que forman una cadena de doble hélice. Cada
nucleótido está compuesto de una azúcar desoxirribosa, un grupo fosfato, y una
base nitrogenada: adenina, citosina, guanina o timina.
6.2. Control blanco de reactivos: Muestras que sufren de forma paralela, el mismo
procedimiento a las muestras experimentales. Los controles son utilizados como
medidas de aseguramiento de calidad para garantizar resultados precisos y
confiables. El control denominado “blanco de reactivos” contiene todo lo utilizado
excepto la muestra.
6.3. Control negativo: Muestra conocida de la que se tiene la certeza que no
contiene ADN. Es utilizada para asegurar que durante el proceso de extracción
de ADN en una corrida no ocurrió contaminación entre las muestras.
6.4. Control positivo interno: Muestra conocida de la que se tiene la certeza que
contiene ADN. Es utilizada para asegurar la eficiencia del proceso de extracción
en una corrida.
6.5. Inhibidores: Sustancias exógenas presentes en los indicios, que causan
interferencia en el PCR. Algunos Inhibidores son la hematina, calcio, tintes y
metales.
6.6. Hidroxiapatita: Mineral formado por fosfato de calcio cristalino
(Ca10(PO4)6(OH)2), representa un depósito del 99% del calcio corporal y 80% del
fósforo total. Constituye alrededor del 60-70% del peso seco del tejido óseo,
haciéndolo muy resistente a la compresión.
6.7. Nucleasas: Enzimas que cortan, deterioran y degradan el ADN, a través de una
hidrolización en los enlaces fosfodiéster de la cadena polinucleótida de los ácidos
nucléicos.
6.8. Osteocitos: Células óseas maduras, derivadas de osteoblastos, que se alojan
dentro de la matriz ósea calcificada. Existen hasta 20000 a 30000 osteocitos por
mm3 de material óseo.
6.9. Revoluciones por minuto (rpm): Unidades usadas para denotar la velocidad a
la que rota la microcentrífuga.
6.10. RCF: Fuerza Centrífuga Relativa. La fuerza generada en la centrifuga por la
rotación que es expresada en unidades relativas de fuerza de gravedad (e.i. X g).
RCF = [ 1.118 X 10-5/cm · rpm2] [ radio de la centrífuga (cm) ] X [ rpm2]

Versión: 01

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7. RECURSOS
7.1. Tecnológicos
7.1.1. Agitador magnético
7.1.2. Agitador orbital
7.1.3. Autoclave
7.1.4. Balanza digital
7.1.5. Centrífuga para tubos de 15 y 50 mL (0-7,000 rpm)
7.1.6. Congelador (-20°C)
7.1.7. Contenedor para nitrógeno líquido
7.1.8. Cronómetro o temporizador
7.1.9. Estufa con agitador magnético
7.1.10. Esterilizador de luz ultravioleta tipo Crosslinker
7.1.11. Herramienta eléctrica con fresas y discos de corte (dremel o similar)
7.1.12. Incubadora tipo horno (21°C - 65°C)
7.1.13. Martillo
7.1.14. Microcentrífuga con adaptadores para tubos de 1.5 mL (0-15,000 rpm)
7.1.15. Potenciómetro
7.1.16. Micropipeta automática de volumen variable (10-100 µL, 20-200µL, 100-
1000µL, 0.5-10 mL)
7.1.17. Pulverizador o molino criogénico
7.1.18. Refrigeradoras
7.1.19. Termómetro
7.1.20. Ultrapurificador de agua (Conductividad > 17.00 MΩ)
7.1.21. Vórtex
7.2. Logísticos
7.2.1. Materiales
a. Bandeja o gradilla para tubos de 1.5 mL, 15 mL y 50 mL
b. Bisturí o navaja
c. Botella de vidrio con tapadera (100 mL, 500mL y 1000mL)
d. Caja de petri
e. Cepillo de dientes
f. Concentrador para purificación de ADN (membrana 0.45 micrón);
capacidad de 4 mL y 15 mL
g. Disco de corte para herramienta eléctrica
h. Equipo de protección personal (bata desechable, cofia, guantes de
nitrilo libres de polvo, lentes de protección, mascarilla de seguridad
tipo N95)
i. Fresas de desgaste para herramienta eléctrica
j. Magneto agitador
k. Pinza quirúrgica no dentada
l. Pipetas plásticas estériles de transferencia de 3 mL de punta fina
m. Pizetas
n. Probetas graduadas (100 mL)

Versión: 01

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o. Puntas para pipeta con filtro para PCR (10 µL, 20 µL, 100 µL, 200 µL,
1000µL, 10mL); catálogo No. 702160, 702162,702164, 702166,
702168 o equivalentes
p. Recipientes de vidrio con tapadera, con capacidad de 100, 250 y 500
mL
q. Recipiente para desechos biológicos
r. Recipiente para desechos de reactivos
s. Tijeras
t. Tubos criogénicos
u. Tubos para microcentrífuga de 1.5 mL de tapa plana; catálogo No.
780400 y o equivalentes.
v. Tubos de centrifuga plásticos estériles (15 mL, 50 mL); catálogo No.
114818 y 114821 o equivalente.
w. Sierra
x. Vasos de precipitado (100 mL, 1000mL).
7.2.2. Reactivos
a. Ácido etilen diamino tetracetico (EDTA). Grado Biología Molecular.
b. Agua ultrapura (>17 MΩ).
c. Dodecil sulfato de sodio (SDS). Grado Biología Molecular.
d. Etanol (100%). Grado Reactivo.
e. Hidróxido de sodio (NaOH). Grado Reactivo.
f. Laurilsacorsina (Sarcosyl). Grado Biología Molecular.
g. Kit QIAQuick® PCR Purification; catálogo No. 28106 o su equivalente
(Almacenar de 15-25°C).
h. Proteinasa K. Grado Biología Molecular. (Almacenar a -20°C).
i. Trishidroximetilaminometano–ácido clorhídrico (Tris-HCl). Grado
Biología Molecular.
Nota: todos los reactivos deben cumplir especificaciones de conformidad con la Sociedad Americana
de Química (American Chemical Society, ACS) y/o las especificaciones de reactivos según la USP.
7.2.3. Preparación de Soluciones

a. Generalidades
i. Excepto indicación puntual, todas las soluciones deben
almacenarse a temperatura ambiente.
ii. Excepto indicación puntual, todas las soluciones expiran en un
año.
iii. Todas las soluciones deben identificarse con la etiqueta
“Identificación de reactivos y soluciones”.
b. EDTA 0.5M, pH 8.0
i. Pesar 94.05 g de EDTA; trasladar a un recipiente de vidrio
adecuado con tapadera y capacidad de 500 mL.
ii. Agregar 200 mL de agua ultrapura.
iii. Ajustar el pH a 8.0 con 20 perlas de NaOH o con una solución de
NaOH 10 N. Si el valor de pH se excede, utilizar HCl concentrado
(36.5%) para disminuirlo.
iv. Completar a 500 mL con agua ultrapura.

Versión: 01

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c. Hidróxido de Sodio (NaOH) 10N

i. Pesar 200 g de NaOH; trasladar a un recipiente de polipropileno
con tapadera y capacidad de 500 mL.
ii. Agregar 400 mL de agua ultrapura y disolver con agitación
magnética.
iii. Esperar que la solución se encuentre a temperatura ambiente y
completar a 500 mL con agua ultrapura.
d. Hidróxido de Sodio (NaOH) 1N
a. En un recipiente de polipropileno con tapadera y capacidad de
1000 mL, agregar 100mL de la solución de NaOH 10N y 900 mL
de agua ultrapura.
e. Proteinasa K 20 mg/mL
i. En un tubo de propileno estéril con capacidad para 15 mL, agregar
100 mg de Proteinasa K y 5 mL de agua ultra pura y permitir que
se disuelva.
ii. Rotular y preparar los tubos de PCR con capacidad de 0.5 mL a
utilizar.
iii. Con una pipeta volumétrica trasvasar alícuotas de 100µL a cada
uno de los tubos de PCR.
iv. Colocar los tubos de PCR en una gradilla debidamente
identificada.
v. Almacenar a -20ºC.
Nota: Este reactivo es teratogénico. No se debe volver a congelar y a utilizar una alícuota
ya descongelada. Descartar la porción sobrante de la alícuota.
Precaución: La Proteinasa K en polvo y/o en solución causa irritación en las membranas

mucosas. Usar mascarillas, lentes y guantes apropiados cuando se trabaje, manipule o
transporte este reactivo.
f. Solución amortiguadora de desmineralización

i. Agregar 500 mL de EDTA 0.5M en un recipiente de vidrio con
tapadera.
ii. Agregar 5 g de N-laurilsarcosina.
iii. Agitar con agitador magnético hasta su completa disolución.
iv. Almacenar a temperatura ambiente.
Nota: Esta solución deberá emplearse por un máximo de dos semanas. Preparar
nuevamente después de transcurrido este tiempo.
8. INTERFERENCIAS
8.1. Muestras que presentan ADN degradado pueden limitar la detección del material
genético necesario para el análisis.
8.2. Los inhibidores presentes en las muestras biológicas deben ser removidos
durante la extracción y concentración del ADN. Esto se debe realizar para evitar
inhibir el proceso de la PCR.

Versión: 01

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9. PRECAUCIONES
9.1. Manejar todos los indicioso muestras como potencialmente infecciosas.

9.2. Usar el equipo de protección básico (cofia, mascarilla tipo N95, bata, lentes y
guantes).
9.3. Desechar navajas u objetos punzo cortantes en el recipiente destinado para este
propósito.
9.4. Desechar todo el material contaminado en los recipientes identificados como
desechos bioinfecciosos.
9.5. Luego de utilizar los guantes, lavarse las manos con jabón desinfectante y
abundante agua.
9.6. Tener contacto con el molino criogénico y nitrógeno líquido puede causar daños
y quemaduras severas. Usar guantes y lentes de seguridad cuando se esté en
este paso.
9.7. Todos los tubos de microcentrífuga deben estar esterilizados, libres de nucleasas
(ARNasas y ADNasas) y pirógenos.
10. ACTIVIDADES
10.1. Generalidades
10.1.1. Registrar en el formularioFOR-DTC-LAB-073“Extracción de ADN”, la
siguiente información:
a. Número de lote y fecha de preparación de los reactivos a utilizar.
b. Correlativo, descripción y tipo de muestra biológica de los indicios
a procesar.
c. Marcar “Desmineralización” como el tipo de extracción.
d. Fecha de inicio y finalización.
e. Firma y sello del perito
10.1.2. Previo a realizar el análisis, limpiar el área de trabajo con Cloro al
10% y Etanol al 70%.
10.1.3. Utilizar puntas con filtro para pipetas resistentes al aerosol.
10.2. Preparación de restos óseos y piezas dentales para extracción

10.2.1. Preparación de la muestra
a. Limpiar y retirar todo tipo de tejido blando que presente el resto
óseo o pieza dental, utilizando SDS u otro detergente molecular.
b. Lijar y cepillar la superficie del resto óseo o pieza dental para
remover el esmalte y residuos de calcio.
Nota: para realizar este paso puede utilizarse una herramienta eléctrica con fresas.
c. Cortar el resto óseo o pieza dental a un tamaño apropiado para el

tubo criogénico (cuando sea necesario).
Nota: para realizar este paso puede utilizarse una herramienta eléctrica con fresas.

Versión: 01

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10.2.2. Limpieza de la muestra

a. Depositar el resto óseo o la pieza dental en un tubo de centrifuga
de 50mL con tapadera.
b. Agregar 10 mL de la solución de cloro y agitar por 15-30 segundos.
c. Remover la solución de hipoclorito de sodio y agregar 10 mL de
agua ultrapura. Agitar de 45 a60 segundos y descartar.
d. Agregar 10 mL de agua ultrapura, agitar de 45 a60 segundos y
descartar.
e. Agregar 10 mL de etanol al 70%, agitar de 45 a60 segundos y
descartar.
f. Agregar 10 mL de agua ultra pura, agitar de 45 a60 segundos y
descartar.
g. Permitir que la muestra se seque en un gabinete biológico
individual por 16 a 24 horas.
10.2.3. Fragmentación de la muestra(Mazo y Nitrógeno liquido)

a. Colocar el resto óseo o pieza dental en un recipiente plástico.
b. Agregar Nitrógeno líquido (N2) hasta sumergir el resto óseo o pieza
dental.
c. Esperar que el Nitrógeno líquido (N2) se evapore
d. Envolver el resto óseo o pieza dental con papel encerado y plástico.
e. Martillar hasta fragmentar.
10.2.4. Pulverización de restos óseos y piezas dentales (mediante

pulverizador o molino criogénico)
a. Llenar el depósito del molino criogénico hasta el nivel indicado
(aproximadamente 5 litros) con Nitrógeno líquido (N2) y esperar 05
minutos rellenando lo evaporado
Nota: Antes y después de utilizar el molino criogénico, todos los accesorios que
entren en contacto con la muestra deben ser limpiados con una solución de cloro al
10% y/o etanol al 70%, esterilizar en autoclave y exponer a luz UV durante un mínimo
de 20 minutos.
b. Colocar la(s) muestra(s) (fragmentos del resto óseo o pieza dental)
en el molino criogénico. .
c. Cerrar la tapa del molino criogénico y esperar 1 minuto con la(s)
muestra(s) en el interior.
d. Seleccionar el programa del molino criogénico con los siguientes
parámetros:
i. Cycles: 1 cycle
ii. Pre-cool: 0 minutes
iii. Run time: 7 minutes
iv. Cold time: 1 minute
v. Rate: 10 cps
e. Abrir la tapa del molino criogénico y comprobar el estado
pulverizado de la muestra, realizando una nueva etapa de
pulverizado si fuera necesario.
f. Retirar el tubo del molino criogénico y colocarlo en una gradilla
hasta que alcance la temperatura ambiente.
Nota: Precaución al manipular el tubo criogénico, ya que el contacto directo puede causar
quemaduras.

Versión: 01

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10.3. Extracción del ADN de restos óseos y piezas dentales

10.3.1. Transferir de 0.5 g a 1 g de polvo de resto óseo a un tubo cónico de
polipropileno de 50 mL. Limpiar el área de trabajo con cloro al 10% y
etanol al 70%. Cambiar el papel y los guantes entre cada muestra.
Nota: es preferible utilizar 1.0g de polvo de resto óseo o pieza dental, para incrementar la
recuperación de ADN. Se debe tomar en cuenta que las muestras inhibidas pueden otorgar
mejores resultados con menor cantidad de resto óseo o pieza dental en polvo.
10.3.2. Agregar 15 mL de solución amortiguadora de desmineralización y 1 ml

de Proteinasa K (20 mg/ml).
10.3.3. Incubar las muestras en un agitador orbital a 56°C de 16 a 48 horas.
Los tubos deben estar en una posición angular durante la agitación
para asegurar el mezclado.
10.3.4. Centrifugar los tubos por 3 minutos a 4000 rpm.
10.3.5. Transferir el sobrenadante a los sistemas de filtración Amicon Ultra-15
o Amicon Ultra-4. Centrifugar el sistema de filtración a 4000 g por 10-
20 minutos y/o hasta tener un volumen final de 500 µL. No permitir que
la membrana del sistema de filtración se seque.
10.3.6. Agregar 2 mL de agua ultra pura grado biología molecular y centrifugar
a 4000 g de 10-20 minutos. Se debe centrifugar hasta que se obtenga
un volumen final de 50 a 100 µL.
10.3.7. Transferir el concentrado a un tubo de 1.5 mL.
10.3.8. Agregar de 50-100 µL de agua ultrapura para recuperar remanentes en
el concentrador. Transferir el remanente a un tubo de 1.5 mL.
10.3.9. Almacenar el extracto a 2-8°C o proceder inmediatamente al primer
paso de purificación con el kit QIAQuick®.
10.4. Purificación del extracto y eliminación de inhibidores moleculares

10.4.1. Agregar 5 volúmenes de “Buffer PB” a un volumen de extracto. Colocar
en vórtex por 2-8 segundos.
10.4.2. Colocar una columna “QIAQuick spin” en un tubo colector de 2 mL.
Agregar 650 µL de la mezcla del extracto/”Buffer PB” a la columna y
cerrar.
10.4.3. Centrifugar a 13,000 rpm de 15 a 30 segundos. Descartar lo filtrado
por la columna. Repetir las adiciones hasta que se agote la mezcla de
extracto/”PB Buffer”.
10.4.4. Realizar un lavado de la columna con 750 µL de “buffer PE”.
Centrifugar a 13,000rpm de30 a60 segundos.
10.4.5. Nuevamente descartar el filtrado y centrifugar 60 segundos a 13,000
rpm.
10.4.6. Descartar el tubo colector de 2 mL y colocar la columna en un tubo
estéril de 1.5 mL.
10.4.7. Para eluir de la columna, agregar 50-200uL de “Buffer EB” en el centro
de la columna y centrifugar a 13000 rpm por 60 segundos.
10.4.8. Almacenar el extracto purificado a 4°C por un corto tiempo y a 20°C
por un periodo de tiempo más prolongado.
10.4.9. Proceder de acuerdo al procedimiento de trabajo PRO-DTC-LAB-086
“Cuantificación y normalización de ADN utilizando los kits Quantifiler®
y termociclador en tiempo real”.

Versión: 01

Página __ de __
11. REFERENCIAS
11.1. Amicon Ultra Centrifugal Filter Devices User Guide, Rev. A. 2007
11.2. Armed Forces DNA Identy Lab SOP. Demineralization Extraction Procedure for
Aged Skeletal Remains. 2006.
11.3. Butler, J. Forensic DNA Typing, Biology, technology, and genetics of STR
Markers. San Diego. Elsiever Academic Press. 2005.
11.4. Lewin, B. Genes VIII. Octava edición. New Jersey. Pearson Prentice Hall. 2004.
11.5. Lewin, B. Essential Genes.New Jersey. Pearson Prentice Hall. 2006.
11.6. Qiagen QIAquick Spin Handbook. 2006.
11.7. Sambrook, J., Fritish, F., y Mariatis, T. Molecular Cloning: A Laboratory Manual.
Segunda edición. Estados Unidos. ColdSpringHarbor Press. 1999.
12. REGISTROS
Documento Código Tiempo de retención
Extracción de ADN FOR-DTC-LAB-073 Indefinido
La Dirección General, su representante autorizado o el personal designado por ésta

son los responsables de resolver cualquier aspecto relacionado con este procedimiento,
que no fue considerado en el mismo.

Versión: 01

EXTRACCIÓN
DE ADN POR EL METODO DE
“CHELEX®”
Página __ de __
1. INTRODUCCIÓN
Este procedimiento describe los pasos para extraer y aislar ácido

desoxirribonucléico -ADN- de material biológico (sangre y saliva) contenido en un
indicio.
La resina Chelex® es una resina tipo quelante con gran afinidad a iones metálicos
polivalentes. Está compuesta por copolímeros de estireno divinilbenceno que contienen
iones pareados de iminodiacetato que actúan como grupos quelantes; clasificada como
una resina ácido débil de intercambio catiónico debido a la presencia de grupos
carboxílicos. La presencia de Chelex® previene la degradación del ADN al unirse a los
iones metálicos usados por las nucleasas que catalizan la digestión del ADN cuando
son sometidas a altas temperaturas en soluciones de fuerza iónica baja. La resina
Chelex® también atrapa cationes que pueden inhibir la reacción en cadena de la
polimerasa -PCR-. Además, la resina crea un ambiente alcalino (pH 10-11) para facilitar
la lisis de la membrana celular.
El procedimiento consiste en un lavado para remover algunos de los contaminantes
como el grupo hemo de la hemoglobina y proteínas, seguido de un calentamiento de la
muestra en solución de Chelex® al 20% (p/v). Luego la fracción del sobrenadante es
usada para la concentración, cuantificación y amplificación del ADN.
2. OBJETIVO
Extraer y aislar material genético de muestras biológicas para la determinación de

perfiles genéticos, utilizando el método de Chelex®.
3. ALCANCE
Este procedimiento se aplica a las muestras biológicas para el análisis de ADN que
ingresan al Laboratorio de Genética, adjunto a la solicitud de Autoridad Competente.
4. RESPONSABLES
4.1 Peritos Profesionales del Laboratorio de Genética

4.2 Jefe del Laboratorio de Genética
5. LISTA DE DISTRIBUCIÓN
5.1 Director General

5.2 Jefe del Departamento Técnico Científico

Versión: 01

EXTRACCIÓN
“CHELEX®”
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5.3 Jefe de Laboratorios de Criminalística

5.4 Jefe del Laboratorio de Genética
6. GLOSARIO
6.1. Ácido Desoxirribonucleico (ADN): molécula de ácidos nucleicos que codifica

la información genética de los organismos vivos. Esta se compone de dos hebras
antiparalelas complementarias de desoxirribonucleótidos, unidas por puentes de
hidrógeno, logrando una cadena en forma de hélice. Cada nucleótido está
compuesto de un azúcar desoxirribosa, un grupo fosfato, y una base nitrogenada
(adenina, citosina, guanina o timina).
6.2. Agente quelante: compuesto químico que atrapa, atrae y se une a iones
presentes en una solución.
6.3. Control negativo: muestra conocida de la que se tiene la certeza que no
contiene ADN. Es utilizada para asegurar que durante el proceso de extracción
de ADN en una corrida no ocurrió contaminación entre las muestras.
6.4. Control positivo interno: muestra conocida de la que se tiene la certeza que
contiene ADN. Es utilizada para asegurar la eficiencia del proceso de extracción
de una corrida.
6.5. Inhibidores: sustancias exógenas presentes en la evidencia, que causan
interferencia en la reacción en cadena de la polimerasa -PCR-. Algunos ejemplos
de inhibidores son hematina, calcio, tintes y metales.
6.6. Nucleasas: enzimas que cortan, deterioran y degradan el ADN a través de una
hidrolización en los enlaces fosfodiéster entre dos nucleótidos presentes en una
hebra de la cadena de ácidos desoxirribonucleicos.
6.7. Precauciones universales: concepto que establece que la sangre humana y
otros fluidos biológicos corporales deben ser manejados como una muestra
potencialmente infectada con algún patógeno como Hepatitis B y VIH.
6.8. RCF: Fuerza Centrífuga Relativa. La fuerza generada en la centrifuga por la
rotación que es expresada en unidades relativas de fuerza de gravedad (e.i. X g).
RCF = [1.118 X 10-5/cm · RPM2 ] [radio de la centrífuga (cm) ] X [ RPM2 ]
6.9. RPM: Revoluciones Por Minuto. Unidades usadas para denotar la velocidad a la
que rota la microcentrífuga.
6.10. Soporte: material especial para fijar muestras de células de la cavidad bucal o
sangre.(papel, gasa, algodón, tela de algodón, hisopo, etc.).
7. RECURSOS
7.1. Tecnológicos
7.1.1. Autoclave
7.1.2. Balanza analítica
7.1.3. Bloque térmico o baño seco (±0 a100°C)
7.1.4. Cronómetro o temporizador
7.1.5. Agitador magnético con calefacción

Versión: 01

EXTRACCIÓN
“CHELEX®”
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7.1.6. Esterilizador de luz ultravioleta tipo Crosslinker

7.1.7. Microcentrífuga con adaptadores para tubos de 1.5 mL. (0-15,000 RPM)
7.1.8. Micropipetas de volumen variable (1-10 µL, 2-20 µL, 10-100 µL,20-200
µL y 100-1000µL)
7.1.9. Refrigeradora (2 - 8°C)
7.1.10. Ultrapurificador de agua (Conductividad > 17.00 MΩ)
7.1.11. Agitador tipo vórtex
7.1.12. Termómetro
7.2. Logísticos
7.2.1. Materiales
a. Aplicadores de madera
b. Aplicadores de algodón estéril
c. Bandeja o gradilla para tubos de 1.5 o 1.6 mL
d. Equipo de protección personal (bata desechable, cofia, guantes de
nitrilo libres de polvo, mascarilla de seguridad tipo N95)
e. Bisturí
f. Agitador magnético
g. Perforador semiautomático de papel de 1.2 mm y 2.0 mm
h. Pinza quirúrgica no dentada
i. Pipetas plásticas estériles de transferencia de punta fina
j. Pizetas
k. Probetas graduadas (100 mL)
l. Puntas para micropipeta de volumen variable con filtro para PCR (10
µL, 20 µL, 100 µL, 200 µL y 1000 µL)
m. Tubos para microcentrífuga de 1.5 o 1.6 mL de tapa plana
n. Tubo de propileno estéril de 15 mL
o. Tubo para PCR de 0.2 mL
p. Recipiente para desechos biológicos
q. Tijeras
7.2.2. Reactivos
a. Agua Ultrapura
b. Cloro comercial al 10%
c. Resina Chelex® 100 forma sódica. Rango de Mesh desde 100 hasta
400
d. Proteinasa K Grado Biología Molecular
e. Etanol al 70%
Nota: Todos los reactivos deben cumplir especificaciones de conformidad con la Sociedad
Americana de Química (American Chemical Society, ACS) y/o las especificaciones de reactivos
según la USP.

Versión: 01

EXTRACCIÓN
“CHELEX®”
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7.2.3. Preparación de Soluciones
a. Generalidades:
i. Excepto indicación puntual, todas las soluciones deben
almacenarse a temperatura ambiente.
ii. Excepto indicación puntual, todas las soluciones expiran en un
año.
iii. Todas las soluciones deben identificarse con el nombre de la
solución y componentes (cuando aplique), fecha en que fue
preparada e iniciales de la persona que preparó la solución.
g. Solución Chelex® 20% (p/v)

i. Pesar 20 gramos de resina de Chelex® (100 – 400 mesh) y
trasladar a un recipiente de vidrio con tapadera y capacidad de
100mL.
ii. Agregar 100mL de agua ultrapura y agitar con magneto hasta que
las partículas se distribuyan de forma homogénea.
c. Proteinasa K 10 mg/mL
vi. En un tubo de propileno estérilcon capacidad para 15mL, agregar
100mg de proteinasa K y 10mL de agua ultra pura y permitir que
se disuelva.
vii. Rotular y preparar la cantidad necesaria de tubos de PCR con
capacidad de 0.2 mL.
viii. Con una pipeta volumétrica trasvasar alícuotas de 15, 25, 50 y
100µL a cada uno de los tubos de PCR.
ix. Colocar los tubos de PCR en una gradilla debidamente
identificada.
x. Almacenar a -20ºC.
Nota: Éste reactivo es teratogénico. No volver a congelar y a utilizar una alícuota ya

descongelada. Descartar la porción sobrante de la alícuota.
Precaución: La proteinasa K en polvo y/o en solución causa irritación en las membranas

mucosas.
Use mascarillas y guantes apropiados cuando trabaje, manipule o transporte este reactivo.
8. INTERFERENCIAS
8.1. Muestras biológicas que presentan ADN degradado pueden limitar la detección
del material genético necesario para el análisis.
8.2. La resina Chelex® y otros inhibidores presentes en las muestras biológicas deben
ser removidos durante el proceso de extracción y concentración. De no ser así,
el proceso de PCR puede ser inhibido.

Versión: 01

EXTRACCIÓN
“CHELEX®”
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9. PRECAUCIONES
9.1. Manejar todos los indicios o muestras como potencialmente infecciosos.
9.2. Usar el equipo de protección básico (cofia, bata, y guantes).
9.3. El uso de soluciones de resina Chelex® de pH alto puede causar daños en la piel
e irritación de los ojos.
9.4. Utilizar mascarilla para las muestras a procesar.
9.5. Desechar todo el material contaminado en los recipientes identificados como
desechos bioinfecciosos.
9.6. Tener contacto directo con el baño seco puede causar quemaduras severas.
9.7. Luego de utilizar los guantes, lavarse las manos con jabón desinfectante y
abundante agua.
9.8. Todos los tubos de microcentrífuga deben estar esterilizados, libres de nucleasas
10. ACTIVIDADES
10.1. GENERALIDADES
10.1.1. Registrar en el formulario FOR-DTC-LAB-073Extracción de ADN la
siguiente información:
f. Número de lote y fecha de preparación de los reactivos a utilizar.
g. Correlativo, descripción y tipo de muestra biológica de los indicios
a procesar.
h. Marcar Chelex® como el tipo de extracción.
i. Fecha de inicio y finalización.
j. Firma y sello del perito.
10.1.2. Previo a realizar el análisis, limpiar el área de trabajo con Cloro al
10% y Etanol al 70%.
10.2. EXTRACCIÓN DE MUESTRAS INDUBITADAS DE SANGRE FIJADA EN

DIFERENTES SOPORTES CON SOLUCION CHELEX® AL 20% (p/v)
10.2.1. Cortar aproximadamente de uno a tres milímetros cuadrados (1-3 mm2)
de la mancha de sangre fijada en el soporte o con el perforador
semiautomático de papel de 1.2 mm o 2.0 mm realizar una o dos
perforaciones del soporte que contiene la mancha de sangre. Colocar
las perforaciones o la muestra cortada en un tubo de microcentrífuga
de 1.5 o 1.6 mL debidamente identificado con el correlativo del caso y
pieza.
10.2.2. Añadir 1000 µL aproximadamente de agua ultrapura al tubo de
microcentrífuga de 1.5 o 1.6 mL que contiene la muestra.
10.2.3. Colocar la muestra en vórtex por 5-10 segundos aproximadamente.
10.2.4. Mantener a temperatura ambiente por 30 minutos aproximadamente,
mezclar ocasionalmente por inversión.
10.2.5. Colocar la muestra en vórtex por 5-10 segundos aproximadamente.
10.2.6. Centrifugar por 3 minutos a 11,000-14,000 RPM.
10.2.7. Descartar el sobrenadante utilizando una pipeta plástica excepto los
últimos 20-30 µL. No remover el substrato del tubo.
10.2.8. Agregar 170 µL de solución Chelex® al 20 % (p/v). Colocar en vórtex
por 8-10 segundos.

Versión: 01

EXTRACCIÓN
“CHELEX®”
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Nota: Obtener el Chelex® al 20% (p/v) pipeteando de una solución con la resina bien distribuida.
Esto se logra al mezclar con un agitador magnético. Usar una micropipeta automática de volumen
variable con punta con filtro de 1000 µL.
10.2.9. Incubar en baño seco a 56°C por 30 minutos aproximadamente.

10.2.10. Incubar en baño seco a 95-100°C por 8 minutos aproximadamente.
10.2.11. Colocar en vórtex por 5-10 segundos.
10.2.13. Proceder con el procedimiento de cuantificación de ADN.
Nota: De ser necesario, almacenar el material entre 2 a8 °C por un período corto de 2 semanas
máximo.
10.3. EXTRACCIÓN DE ADN EN MANCHAS DE SANGRE DUBITADAS EN

DIFERENTES SOPORTES CON SOLUCION CHELEX® AL 20% (p/v)
10.3.1. Cortar aproximadamente 1-3 mm² de material que contiene la mancha

de sangre seca. Colocar los cortes realizados en un tubo de
microcentrífuga de 1.5 o 1.6 mL debidamente identificado con el
correlativo del caso y pieza.
10.3.2. Transferir 1000 µL de agua ultrapura al tubo de microcentrífuga de 1.5
o 1.6 mL que contiene los cortes.
10.3.3. Colocar la muestra en vórtex de 5 a 10 segundos.
10.3.4. Mantener a temperatura ambiente por 30 minutos aproximadamente,
mezclar ocasionalmente por inversión.
10.3.5. Colocar en vórtex por 5-10 segundos aproximadamente.
10.3.7. Descartar el sobrenadante utilizando una pipeta plástica excepto los
últimos 20-30 µL. No remover el sustrato del tubo.
10.3.8. Agregar 170 µL de solución Chelex® al 20% (p/v) y 2-6 µL de proteinasa
K (10 mg/mL). Colocar en vórtex por 5-10 segundos.
variable con punta con filtro de 1000 µL. Dependiendo de la naturaleza de la matriz de la muestra,
se puede agregar más proteinasa K, hasta un máximo de 10 µL.
10.3.9. Incubar en baño seco a 56°C por 30 minutos aproximadamente.

10.3.10. Incubar en baño seco a 95-100°C por 8 minutos aproximadamente.
10.3.13. Proceder con el procedimiento de cuantificación de ADN.
máximo.

Versión: 01

EXTRACCIÓN
“CHELEX®”
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10.4. EXTRACCIÓN DE ADN DE MUESTRAS INDUBITADAS DE CELULAS DE LA

CAVIDAD BUCAL FIJADA EN DIFERENTES SOPORTES CON SOLUCION
CHELEX® AL 20% (p/v)
10.4.1. Cortar aproximadamente de dos a tres milímetros cuadrados (2-3 mm2)

de las células de la cavidad bucal fijadas en el soporte o con el
perforador semiautomático de papel de 1.2 mm o 2.0 mm realizar una
o dos perforaciones del soporte con células de la cavidad bucal.
Colocar las perforaciones o muestra cortada en un tubo de 1.5 o 1.6
mL debidamente identificado con el correlativo del caso y pieza.
10.4.2. Agregar 170 µL de solución Chelex® al 20% (p/v).
variable con punta con filtro de 1000 µL.
10.4.3. Colocar en vórtex de 5-10 segundos.

10.4.4. Incubar a 56°C por 30 minutos aproximadamente.
10.4.5. Incubar a 95-100 °C por 8 minutos aproximadamente.
10.4.7. Centrifugar a 11,000 - 15,000 RPM por 3 minutos.
10.4.8. Continuar con el procedimiento de cuantificación de ADN.
máximo.
11. REFERENCIAS
11.1. Buckleton, J., C. Triggs y S. Walsh. 2005. Forensic DNA Evidence Interpretations.
CRC Press.
11.2. Butler, J. 2005. Forensic DNA Typing, biology, technology and genetics of STR
markers. Second edition. Elsevier Academic Press. USA. 658 pp.
11.3. Gonzalez, D. 2007. Chelex® DNA Extraction Method ICF-1080-LAB.
Criminalistics Central Laboratory, Forensic DNA Serology Laboratory. Institute of
Forensic Sciences. San Juan, Puerto Rico.
11.4. Lewin, B. 2006. Essential Genes. Pearson Prentice Hall. . New Jersey, USA.
11.5. Sambrook, J., F. Fritish y T. Maniatis.1999. Molecular Cloning: A laboratory
Manual. Segunda Edición. Cold Spring Harbor Press. USA.
11.6. Walsh, S., A. Metzger y R. Higuebi. 1991. Chelex® 100 as a medium for simple
extraction of DNA for PCR-based typing from forensic material. Bio Techniques,
10(4):506-13.

Versión: 01

EXTRACCIÓN
“CHELEX®”
Página __ de __
Número de versión Sección afectada Descripción

1 Todas Elaboración de documentos
Realizar modificaciones en los

siguientes incisos: 1. Introducción;
2. Responsables; 3. Lista de
2 Varios
distribución; 4. Glosario, 5.
Recursos; 6. Actividades; 7.
Referencias.
12. REGISTROS
Extracción de ADN FOR-DTC-LAB-073 Indefinido
La Dirección General, su representante autorizado o el personal designado por ésta

son los responsables de resolver cualquier aspecto relacionado con este procedimiento,

Versión: 02
CUANTIFICACIÓN Y NORMALIZACIÓN Vigente a partir de:

DE ADN UTILIZANDO KITS
QUANTIFILER® Y TERMOCICLADOR
EN TIEMPO REAL
Página __ de __
1. INTRODUCCIÓN
La cuantificación de ADN (Ácido Desoxirribonucleico) es un procedimiento utilizado

para determinar la cantidad de ADN contenida en una muestra previamente extraída.
Uno de los métodos más utilizados para cuantificar ADN es la Reacción en Cadena de
la Polimerasa (PCR) en tiempo real. Este método permite la amplificación in vitro de un
fragmento de ADN específico. La PCR en tiempo real es un ensayo que monitorea la
acumulación de ADN mientras ocurre la amplificación, midiendo en cada ciclo la
fluorescencia emitida por un reportero o fluoróforo.
La PCR en tiempo real consta de tres fases, en la primera fase o fase geométrica
(exponencial), la fluorescencia aumenta de manera directamente proporcional al
aumento del producto de PCR. En esta fase, la amplificación se caracteriza por una
eficiencia alta y constante. Cuando la concentración del ADN blanco alcanza 10-8 M, la
acumulación exponencial del producto de PCR se detiene. En la segunda fase o fase
lineal, la inclinación de la curva de amplificación disminuye constantemente. Esta fase
es llamada lineal porque la amplificación se aproxima a la progresión aritmética, contrario
al aumento geométrico. En la última fase o fase plateau, la señal fluorescente permanece
relativamente constante, y la concentración del ADN blanco alcanza aproximadamente
10-7 M. La medición de la fluorescencia se da lugar en la fase geométrica. Entre menos
ciclos se requieran para detectar la señal de fluorescencia, mayor es la cantidad de ADN
presente.
En el procedimiento para PCR en tiempo real utilizado en este laboratorio, la sonda

TaqMan® MGB se une específicamente al ADN blanco. Cuando la sonda está intacta, la
proximidad del fluoróforo y el “quencher”, resulta en la inhibición de la emisión de
fluorescencia por parte del reportero. Durante la extensión, la enzima ADN polimerasa,
debido a su actividad 5´ → 3´exonucleasa, fragmenta la sonda hibridizada con el ADN
blanco. Este proceso permite la separación del reportero y el “quencher”, logrando de
esta manera el incremento de la fluorescencia emitida por el reportero al ser liberado. El
incremento en la señal de fluorescencia ocurre únicamente si la secuencia de ADN
blanco es complementaria a la sonda y si el ADN blanco es amplificado durante la PCR.
2. OBJETIVO
2.1 Cuantificar y normalizar el ADN humano presente en una muestra previamente

sometida a un procedimiento de extracción, con el fin de:
2.1.1 Determinar la cantidad y calidad de ADN humano presente en una muestra,
evaluando la presencia de inhibidores y/o degradación, según aplique.
2.1.2 Normalizar la cantidad de ADN según los rangos establecidos para el kit de
amplificación a utilizar.

Versión: 02

EN TIEMPO REAL
Página __ de __
3. ALCANCE
Este procedimiento se aplica a las muestras biológicas que han sido sometidas a un
proceso de extracción de ADN, para determinar la cantidad y evaluar la calidad de ADN
presente en la muestra, con el objeto de aumentar la eficacia y eficiencia de la
amplificación posterior.
4. RESPONSABLES

Peritos Profesionales del 1. Conocer y ejecutar el procedimiento
1
Laboratorio de Genética descrito.
1. Velar por el cumplimiento del
procedimiento descrito.
2 Jefe del Laboratorio de Genética
2. Conocer y ejecutar el procedimiento
descrito.
5. GLOSARIO
5.1 Ácido Desoxirribonucléico (ADN): molécula que codifica la información genética

de los organismos vivos. Esta se compone de dos cadenas complementarias de
nucleótidos que forman una cadena de doble hélice. Cada nucleótido está
compuesto de un azúcar desoxirribosa, un grupo fosfato, y una base nitrogenada:
adenina, citosina, guanina o timina.
5.2 Actividad 5´nucleasa de la enzima ADN polimerasa: actividad de la ADN
polimerasa en la cual corta fragmentos de ADN hibridados al ADN blanco durante la
amplificación.
5.3 Amplicón: corresponde al producto de la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR). Durante cada uno de los ciclos de amplificación de la PCR, una copia del
blanco de amplificación de ADN es generada por cada molécula que contiene la
secuencia blanco.
5.4 Blanco autosómico corto (small autosomal target): es un blanco de amplificación
primario para la cuantificación del ADN genómico humano total. El amplicón
corresponde a 80 pares de bases por lo que refleja el tamaño típico de una “mini”
STR y por lo tanto permite detectar ADN en muestras degradadas.
5.5 Blanco autosómico largo (large autosomal target): blanco de amplificación
usado principalmente como indicador de degradación en una muestra, a través de
la comparación entre la proporción de su resultado de cuantificación y el del small
autosomal target.
5.6 Blanco del cromosoma Y (Y chromosome target): el blanco de amplificación del
cromosoma Y permite la cuantificación del ADN genómico humano masculino, es
útil particularmente para el análisis de muestras que presentan una mezcla de ADN
masculino y femenino.
5.7 Ciclo de Umbral (Ct): ciclo en el cual la curva de amplificación cruza el umbral o
nivel de detección.

Versión: 02

EN TIEMPO REAL
Página __ de __
5.8 Coeficientes de regresión: corresponde a los parámetros de la curva estándar

conocidos como pendiente e intercepto-Y.
5.9 Control: muestra conocida que se somete al mismo procedimiento de forma
paralela a la muestra experimental.
5.10 Control interno positivo (IPC): control utilizado para distinguir si una muestra
presenta inhibición en la amplificación de ADN. Consiste en fragmentos de ADN
sintético incluidos en el kit de cuantificación.
5.11 Control sin templado (NTC): plantilla control que contiene la mezcla de reacción
sin muestra de ADN.
5.12 Cuantificación absoluta (AQ): ensayo obtenido a través de un sistema de
detección de secuencia en el cual una curva estándar es usada para calcular la
cantidad de ADN en una muestra desconocida. El ensayo se basa en el número
de ciclo en el cual la fluorescencia sobrepasa el umbral analítico (Ct) y la relación
de este con la curva estándar.
5.13 Cuantificación por PCR en tiempo real: ensayo que monitorea la cantidad de
ADN producido en cada ciclo de amplificación. Permite realizar en tiempo real el
análisis de datos recolectados en los ciclos por los cambios de señal de
fluorescencia, que resulta de la amplificación del fragmento de secuencia del ADN
blanco.
5.14 Curva estándar: curva realizada utilizando estándares de concentración conocida,
permite determinar la concentración de una muestra mediante un gráfico del ciclo
del umbral -Ct- la cual se calcula a partir del ciclo de la PCR en que esta cruza el
umbral. Para determinar el valor de Ct, el software usa un valor de R2 (coeficiente
de correlación) colectado a partir de un límite definido de ciclos de PCR llamado
línea base (baseline).
5.15 Delta RN (ΔRN): cambio en la señal del reportero (comparada con el ruido del
fondo), normalizada con la fluorescencia de un fluoróforo de referencia pasiva.
5.16 Fondo: es un componente inherente espectral de la señal generada por un ensayo
fluorescente que es atribuido al ABI Prism 7500 SDS. La señal de fondo puede
interferir con la sensibilidad del ensayo y puede confundir el programa informático
y su habilidad de determinar el ciclo del umbral.
5.17 FRET: por sus siglas en inglés: Fluorescent Resonant Energy Transfer.Es una
técnica que permite la detección de cambios de fluorescencia ciclo a ciclo mediante
el uso de sondas TaqMan®.
5.18 Hibridación: es la asociación de dos secuencias de ADN complementarias.
5.19 Inhibidores: sustancias exógenas presentes en una muestra que causan
interferencia en la PCR. Algunos Inhibidores son hematina, calcio, tintes y metales.
5.20 Intercepto-Y: indicar el valor de CT esperado para muestras cuya concentración
corresponde a 1 (por ejemplo 1 ng/µL).
5.21 Kit Quantifiler®: conjunto de reactivos que permiten determinar la cantidad de
ADN humano presente en una muestra biológica utilizando un termociclador en
tiempo real.
5.22 Nucleasas: enzimas que cortan y degradan el ADN a través de una hidrolización
en los enlaces fosfodiéster de la cadena polinucleótida de los ácidos nucleicos.
5.23 Pendiente o inclinación de la recta (slope): indica la eficiencia de amplificación.
El 100% de la eficiencia de amplificación es indicada por un valor de 3.3.
5.24 Quencher (secuestrador de fluorescencia): actúa como aceptor que capta
energía pero que no emite una señal detectable de fluorescencia.

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5.25 R2:coeficiente de correlación. Indica un ajuste muy cercano entre la regresión lineal
de la curva estándar y cada uno de los valores de CT de las reacciones de
cuantificación estándar.
5.26 Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real: es un proceso in
vitro que genera millones de copias de un fragmento de ADN específico y
monitorea la acumulación del mismo mientras ocurre la amplificación, midiendo en
cada ciclo la fluorescencia emitida.
5.27 Referencia Pasiva ROX: componente de la mezcla de reacción que normaliza
variaciones pequeñas de fluorescencia no relacionadas con la PCR.
5.28 Sonda Taqman: secuencia corta de nucleótidos (62 bases de longitud) marcada
con un fluoróforo o reportero en el extremo 5´ y un “quencher” o secuestrador de
fluorescencia en el extremo 3´.
5.29 Termociclador en tiempo real: bloque térmico que monitorea la acumulación de
producto de PCR mientras tiene lugar la amplificación, analizando ciclo a ciclo los
cambios en la señal de fluorescencia generada durante las tres fases del PCR,
cuantificando de manera absoluta el producto de la amplificación del ADN.
5.30 Threshold (Umbral): el nivel de detección o el punto en que la reacción alcanza
una intensidad de fluorescencia sobre la línea base (7500 SDS ajuste predefinido
es 0.2).
5.31 Valor de regresión: otorga un valor a la proximidad entre la curva estándar de
regresión y los puntos de datos de cada uno de los Ct de los estándares.
6. RECURSOS
6.1 Tecnológicos
6.1.1 Equipo y Software del 7500 de PCR en Tiempo Real
6.1.2 Computadora
6.1.3 Calculadora
6.1.4 Microcentrífuga para tubos de 1.5 mL (con adaptador para tubos de 0.2 y
0.5mL)
6.1.5 Micropipetas automáticas de volumen variable
6.1.6 Vórtex
6.1.7 Cabina de bioseguridad
6.2 Logísticos
6.2.1 Materiales
a. Base de placa óptica de reacción de 96 pozos o para tubos ópticos
individuales
b. Equipo de protección personal (bata, cofia, guantes, mascarilla)
c. Tubos para microcentrífuga
d. Placa óptica de reacción de 96 pozos o tubos ópticos
e. Marcadores permanentes
f. Puntas para micropipeta con filtro para PCR
g. Herramienta de sellado para placa óptica de 96 pozos/tira de tubos
ópticos/tubos ópticos individuales
h. Sellador de placas óptico/film adhesivo o tapas ópticas para tubos ópticos

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6.2.2 Reactivos
a. Agua ultrapura y autoclaveada
b. Kits para cuantificación: Quantifiler® Human DNA, Quantifiler® DUO DNA,
Quantifiler® Y Human Male DNA, Quantifiler® HP DNA, Quantifiler® Trio
DNA.
6.2.3 Patrones y materiales de referencia

a. Como material de referencia se utiliza el estándar de ADN incluido en
cada kit comercial Quantifiler®. A partir de éste se prepara la curva
estándar que sirve de parámetro para determinar la cantidad de ADN
presente en una muestra desconocida.
7. PUNTOS CRÍTICOS
7.1 La bata debe ser de uso exclusivo para el área de extracción de ADN.
7.2 Nunca utilizar guantes que previamente fueron utilizados en el Laboratorio de
Amplificación-tipificación.
7.3 No utilizar vórtex para mezclar el Quantifler® PCR reaction Mix, únicamente agitar
con la mano suavemente antes de su uso.
7.4 La concentración de la solución estándar de ADN, y la cantidad de puntos para la
curva de calibración, puede cambiar dependiendo de cada kit Quantifiler®, por lo
que deben verificarse de acuerdo con el kit utilizado.
7.5 En cada ensayo de cuantificación se colocan los estándares por duplicado.
7.6 Asegurarse de sellar completamente la placa o los tubos preparados para la
cuantificación, para evitar que ocurra evaporación y se vean alterados los resultados
o la efectividad de la corrida.
7.7 Los valores de temperatura ambiental y humedad relativa en el laboratorio donde se
encuentre instalado el Termociclador en Tiempo Real deben corresponder a 15-
30oC y 20-80% respectivamente. Estos parámetros deberán registrarse en el
Formulario FOR-DG-GAC-017 Control de condiciones ambientales.
8. ACTIVIDADES
8.1 Llenar el formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para cuantificación con

los datos solicitados, incluyendo los cálculos finales de los componentes de la
mezcla de reacción.
8.2 Descongelar los reactivos que se encuentren congelados del kit de cuantificación a
utilizar, previo a iniciar el procedimiento.
8.3 Preparación de estándares para la cuantificación de ADN
8.3.1 Identificar tubos de 0.2 mL para PCR, para cada uno de los puntos de la
curva estándar.
8.3.2 Mezclar en vórtex y centrifugar la solución estándar de ADN y el buffer de
dilución (cuando aplique)
Nota: para este procedimiento mezclar en vórtex y centrifugar implica mezclar durante 3-6 segundos
aproximadamente en vórtex y luego llevar a la microcentrífuga durante 2-4 segundos aproximadamente.

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8.3.3 Realizar las diluciones en serie de los estándares según aplique, de acuerdo
con las tablas 1 y 2.
Nota: después de hacer cada dilución, mezclar en vórtex y centrifugar. Cambiar la punta entre cada
dilución.
Tabla 1. Curva estándar de cinco puntos

(Kits: Quantifiler® HP DNA y Quantifiler® Trio DNA)
Volumen (μL)
Estándar Concentración Factor de
Buffer de
(Std.) (ng/µL) ADN dilución
dilución
1
(100 ng/μL 50.000 10 10 2x
stock)
2 5.000 10 (Std. 1) 90 10x
3 0.500 10 (Std. 2) 90 10x
4 0.050 10 (Std. 3) 90 10x
5 0.005 10 (Std. 4) 90 10x
Nota: las diluciones deben realizarse con el Buffer de dilución THP DNA, incluido en estos Kits de
cuantificación. Pueden almacenarse rotulados por un máximo de una semana a una temperatura de 2-8o C.
Tabla 2. Curva estándar de ocho puntos

(Kits: Quantifiler® Human DNA, Quantifiler® DUO DNA, Quantifiler® Y Human Male DNA)
Volumen (μL)
Estándar Concentració Factor de
Buffer de
(Std.) n (ng/µL) ADN dilución
dilución
1
(200 ng/μL 50.000 10 30 4x
stock)
2 16.700 10 (Std. 1) 20 3x
3 5.560 10 (Std. 2) 20 3x
4 1.850 10 (Std. 3) 20 3x
5 0.620 10 (Std. 4) 20 3x
6 0.210 10 (Std. 5) 20 3x
7 0.068 10 (Std. 6) 20 3x
8 0.023 10 (Std. 7) 20 3x
Nota: las diluciones deben realizarse con el Buffer de dilución incluido en el Kit de cuantificación utilizado.
Si el Kit no incluye Buffer de dilución, utilizar agua ultrapura autoclaveada. Pueden almacenarse rotulados
por un máximo de una semana a una temperatura de 2-8o C.

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8.4 Preparación de las reacciones de cuantificación
8.4.1 Mezclar en vórtex y centrifugar el Primer Mix.

8.4.2 Mezclar suavemente con la mano la PCR Reaction Mix.
Nota: NO UTILIZAR VÓRTEX para reducir el riesgo de generación de espuma.
8.4.3 Mezclar los componentes de la mezcla maestra de acuerdo al cálculo

realizado en el formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para
cuantificación. El volumen de cada componente debe responder al total de
reacciones a utilizar y según aplique, de acuerdo con las tablas 3 y 4.
Nota: esto incluye las reacciones necesarias para colocar los estándares y el NTC.
Tabla 3. Mezcla maestra por reacción

(Kits: Quantifiler® HP DNA y Quantifiler® Trio DNA)
Componente del Kit Volumen por reacción (µL)

Quantifiler® Primer Mix 8
Quantifiler® Reaction Mix 10
Volumen de la mezcla maestra por
18
reacción
Nota: incluir reacciones adicionales en los cálculos para proveer un exceso de volumen por la
pérdida ocurrida durante la transferencia de reactivos.
Tabla 4. Mezcla maestra por reacción

(Kits: Quantifiler® Human DNA, Quantifiler® DUO DNA, Quantifiler® Y Human Male DNA)
Volumen por reacción

Componente del Kit
(µL)
Quantifiler® Primer Mix 10.5
Quantifiler® Reaction Mix 12.5
Volumen de la mezcla maestra por reacción 23
Nota: incluir reacciones adicionales en los cálculos para proveer un exceso de volumen por la
pérdida ocurrida durante la transferencia de reactivos.
8.4.4 Mezclar en vórtex y centrifugar el tubo con la mezcla maestra.

8.4.5 Distribuir el volumen de la mezcla maestra por reacción en cada uno de los
pozos de la placa óptica o tubos ópticos.

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8.4.6 Añadir los estándares de la curva y de extractos de muestra para ser

cuantificados en sus respectivos pozos, según formulario FOR-DTC-LAB-
076 Control de muestras para cuantificación de ADN.
8.4.7 Sellar adecuadamente la placa óptica con el film adhesivo óptico o bien, los
tubos con sus tapaderas ópticas.
Nota: si la placa o los tubos no son sellados apropiadamente, durante la cuantificación ocurrirá una
evaporación que alterará los resultados o la efectividad de la corrida.
8.4.8 Colocar las muestras preparadas dentro del equipo 7500 Real Time PCR
System a utilizar.
8.5 Cuantificación en equipo RT-PCR 7500 Applied Biosystems con “HID Real-
Time PCR Analysis Software v1.2.”
Nota: compatible con los Kits de cuantificación Quantifiler® Human DNA, Quantifiler® DUO DNA, Quantifiler® Y
Human Male DNA, Quantifiler® HP DNA y Quantifiler® Trio DNA.
8.5.1 Preparación del equipo 7500 Real-Time PCR System y de la computadora

asociada.
a. Verificar que la computadora este encendida, de lo contrario proceder
a encenderla:
i. Presionar la combinación de botones CTRL+ALT+DELETE.
ii. Cuando aparezca la ventana de inicio de sesión, seleccionar el
usuario INSTR-USER e ingresar la contraseña respectiva.
iii. Esperar hasta que aparezca el cursor en la pantalla para asegurarse
que haya finalizado el proceso de inicio de sesión.
b. Encender el equipo 7500 y esperar alrededor de 30 segundos.
Nota: debe estar iluminado el indicador donde se lee “POWER”. Se recomienda que el equipo esté
encendido por lo menos 25 minutos antes de utilizarlo.
8.5.2 Preparación de la plantilla de trabajo.

a. Abrir el programa HID Real-Time PCR Analysis Software v1.2.
b. Seleccionar la opción LOG IN AS GUEST dejando como usuario GUEST.
c. Esperar unos segundos hasta que cargue por completo el software.
d. Seleccionar la plantilla a utilizar de acuerdo con el kit de cuantificación
empleado.
e. En la pestaña SETUP, en el icono Experiment properties,en el campo
ExperimentName de la ventana How do you want to identify this
experiment, ingresar el nombre de la corrida incluyendo la fecha del
análisis y perito (s) responsable(s) (ej. 15052015_ESR).
f. En la pestaña “SETUP”, en el icono Plate setup seleccionar la pestaña
Define targets and samples, en esta ventana se observaran dos
diferentes áreas: Defined targets y Define samples.
g. En el área Define samples seleccionar la opción ADD NEW SAMPLE,
automáticamente aparecerá un campo que permitirá el ingreso de la
identificación de la muestras a cuantificar según el formulario FOR-DTC-
LAB-076 Control de muestras para cuantificación de ADN.
h. Repetir el proceso del inciso anterior hasta crear la cantidad de campos
necesaria para ingresar la identificación de todas las muestras a
cuantificar.
Nota 1: cada una de las plantillas diseñadas tiene asignada la posición de los estándares a pozos
específicos.

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Nota 2: idealmente ingresar únicamente el correlativo de la muestra que identifica el caso y el número
que la individualiza, sin que sea necesario agregar GEN y el año de análisis, entendiendo que
corresponden al registro FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para cuantificación de ADN
asociado a la corrida.
i. Para borrar una muestra previamente ingresada seleccionar la muestra a

eliminar y posteriormente seleccionar la opción DELETE SAMPLE del
área Define samples.
j. Una vez ingresadas todas las muestras, seleccionar la pestaña Assign
Targets and Samples, dentro de esta se observaran dos pestañas
nuevas: View plate layout y View well table.
k. En la pestaña View plate layout se observara un mapa de la placa de
reacción. Asignar cada una de las muestras a los pozos correspondientes,
seleccionando el pozo y marcando posteriormente la muestra asociada
en la ventana Assign sample (s) to the selected Wells, hasta asignar
todas las muestras.
Nota: también es posible asignar posición de las muestras en los pozos, previo a la individualización
de las muestras, esto con la finalidad de proceder con la cuantificación y optimizar tiempo. Una vez
iniciada la cuantificación deberá regresarse al área Define samples e individualizar las muestras.
l. Seleccionar la opción SAVE para guardar la plantilla, en la carpeta del

mes y año correspondientes, ingresando el nombre de la placa de
reacción según el registro FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para
cuantificación de ADN asociado a la corrida.
m. Seleccionar la opción START RUN.
n. Llenar el formulario FOR-DTC-LAB-082 Bitácora de uso de los equipos.
o. Esperar a que finalice la corrida para analizar los datos.
8.5.3 Análisis de Datos

a. Aparecerá en pantalla una alerta cuando haya finalizado la corrida.
b. Apagar el Equipo 7500 Real-Time PCR System.
c. Seleccionar la opción ANALYZE DATA.
d. Seleccionar la pestaña ANALYSIS y elegir la opción Standard Curve.
e. Verificación de la Curva estándar (Standard Curve):
i. Seleccionar los pozos correspondientes a la curva estándar para
generar la gráfica de la curva estándar.
ii. Elegir el blanco de análisis (target) que ha de evaluarse
iii. Verificar los parámetros de R2 (coeficiente de correlación) y la
pendiente de la recta (slope) según Tablas 5 y 6.
Nota: no existen tablas de comparación para el valor del intercepto-Y debido a que puede variar
dependiendo del equipo, el blanco de análisis (large/small autosomal target), entre otros.
iv. Anotar los valores de los parámetros de la curva estándar en el

formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para
cuantificación de ADN asociado.
Nota 1: valores fuera de lo esperado en la curva estándar pueden ser excluidos danto CLICK
derecho dentro de la ventana View Plate Layout y seleccionando la opción OMIT. Omitir hasta
un máximo de 2 puntos para lograr cumplir con el valor de R 2 esperado. Para incluir de nuevo
un punto omitido de la curva estándar, dar CLICK derecho dentro de la ventana View Plate
Layout y seleccionar la opción INCLUDE. Siempre que se modifique la curva estándar todos
los datos deben volver a analizarse, seleccionando la opción ANALYZE.

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Nota 2: si alguno de los parámetros anteriores no cumple con lo especificado incluso luego de
omitir puntos, deberá realizarse nuevamente la cuantificación de las muestras, utilizando un
nuevo set de diluciones seriadas para la curva estándar.
Tabla 5. Interpretación del Coeficiente de Variación -R2-
Valor de R2 Interpretación
Perfecta correlación entre la regresión lineal de la
R2 =1 curva patrón y los valores individuales de las
muestras.
Indica un ajuste muy cercano, corresponde al
R2 ≥ 0.99
valor esperado.
R2 ≤0.98 Verificar el procedimiento
NOTA: Valores del coeficiente de correlación ≤ 0.98 pueden deberse a degradación de la solución
estándar de ADN, errores o degradación del ADN en las diluciones seriadas de la solución estándar de
ADN.
Tabla 6. Límites aceptables de la pendiente para kits de cuantificación
Límite de la
Kit
Pendiente
Quantifiler® Human DNA -3.3 a -2.9
Quantifiler® Y Human Male
-3.6 a -3.0
DNA
Quantifiler® DUO DNA
-3.6 a -3.0
(Human target)
-3.6 a -3.0
(Male target)
Quantifiler® HP/Trio DNA
-3.6 a -3.0
(Small autosomal target)
Quantifiler® HP/Trio DNA
-3.7 a -3.1
(Large autosomal target)
Quantifiler® Trio DNA
-3.6 a -3.0
(Y target)

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f. Verificación de la cuantificación de las muestras:
i. En la pestaña ANALYSIS seleccionar la opción View well table para

obtener los datos de la cuantificación de cada una de las muestras.
Nota 1: el tipo y orden de la información desplegada puede ser seleccionada utilizando las
opciones disponibles en SHOW IN TABLE y GROUP BY, de esta pestaña.
Nota 2: en la ventana View Plate Layout también es posible la visualización directa de los
resultados. El tipo de información desplegada puede ser seleccionada utilizando las opciones
disponibles en SHOW IN WELLS y VIEW LEGEND, de dicha ventana.
ii. Verificar los datos de IPC para detectar muestras posiblemente

inhibidas, tomando en cuenta la tabla 7 para la interpretación de los
resultados.
Nota: en el caso que se detecten alteraciones en las muestras, se desplegará una bandera de
alerta en la muestra respectiva dentro de la ventana View Plate Layout.
Tabla 7. Interpretación de los resultados del IPC
Muestra IPC Interpretación

Hay amplificación
Con valores de CT
similares a los del CT El dato de cuantificación
Hay amplificación
de los puntos 2 al 5 es confiable
de la curva estándar
(JUN® Dye)
Hay amplificación Existe inhibición asociada
Con valores de CT a altas concentraciones
aumentados con de ADN.
Hay amplificación
respecto a los del CT El dato de la
>5ng/µL
de los puntos 2 al 5 cuantificación debe ser
de la curva estándar evaluado de acuerdo con
(JUN® Dye) el criterio del perito
Resultado negativo
No hay amplificación Hay amplificación (NO se detectó ADN
Humano)
Resultado inválido,
No hay amplificación No hay amplificación puede existir inhibición
severa
Hay amplificación No hay amplificación Inhibición de la PCR
iii. En el caso de los Kits de cuantificación Quantifiler® HP DNA y

Quantifiler® Trio DNA, es posible verificar los datos del índice de
degradación para detectar si pudiera existir degradación en las
muestras, tomando en cuenta la tabla 8 para la interpretación de los
resultados.
iv. En el caso de los Kits de cuantificación Quantifiler® HP DNA y
Quantifiler® Trio DNA, la concentración de ADN humano presente en
la muestra utilizada para realizar los cálculos de normalización, debe
ser el valor del blanco corto (Small Autosomal Target).

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Nota: debido a que en el genoma existe mayor cantidad de copias de los blancos largos de
amplificación (large autosomal target) dicho valor no refleja proporcionalmente la concentración
de los blancos autosómicos amplificados durante un análisis de STR´s.
Tabla 8. Interpretación de los resultados del índice de degradación relacionado

con el valor del IPC de las muestras
Despliegue de la
bandera de alerta Índice de
Interpretación
por alteración en degradación
el IPC
ADN no está degradado o
<1
inhibido
ADN ligera o moderadamente
degradado. Con posible
1 a 10
inhibición, pero con efecto leve
No en la amplificación.
ADN significativamente
degradado. Con posible
>10
inhibición, pero con efecto leve
en la amplificación.
Existe la posibilidad de que

exista degradación y/o inhibición.
<1 Resultado poco probable, en
Si estos casos generalmente el
valor es >1
>1 o en blanco
ADN degradado y/o inhibido
(sin valor)
8.6 Cuantificación en equipo RT-PCR 7500 Applied Biosystems con “Sequence

Detection Software versión 1.2.3”
Nota: compatible con los Kits de cuantificación Quantifiler® Human DNA, Quantifiler® DUO DNA, Quantifiler® Y
Human Male DNA.
8.6.1 Preparación del equipo 7500 Real-Time PCR System y de la computadora

asociada.
a. Verificar que la computadora este encendida, de no estarlo proceder a
encenderla:
i. Ingresar la contraseña para acceso a la sesión Administrator.
ii. Esperar unos minutos para que termine el proceso de inicio de sesión.
b. Encender el equipo 7500
Nota: debe estar iluminado el indicador donde se lee “POWER”. Se recomienda que el equipo esté
encendido por lo menos 25 minutos antes de utilizarlo.
8.6.2 Preparación de la plantilla de trabajo

a. Hacer doble clic en el ícono “7500 System Software”.
b. Seleccionar File,luego New, aparecerá la ventana NewDocument
Wizard.
c. Seleccionar los siguientes parámetros:
i. Assay: Absolute Quantification (Standard Curve)

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ii. Container: 96-Well Clear

iii. Template: elegir la plantilla correspondiente al kit a utilizar
iv. Operador: Administrator
d. Seleccionar la opción Finish y esperar hasta que se establezca la plantilla
en el programa.
e. En la pestaña Set up ingresar la identificación de la muestra
correspondiente según el formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de
muestras para cuantificación de ADN.
Nota 1: cada una de las plantillas diseñadas tiene asignada la posición de los estándares a pozos
específicos.
Nota 2: ingresar únicamente el correlativo de la muestra que identifica el caso y el número que la
individualiza, sin que sea necesario agregar GEN y el año de análisis, entendiendo que corresponden
al registro FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para cuantificación de ADN
asociado a la corrida.
Nota 3: verificar que todas las posiciones a utilizar estén activas, de lo contrario sombrear las faltantes,
mantener presionado CTRL y dar CLICK derecho dentro del área sombreada, cuando aparezca la
ventana Well Inspector activar los detectores correspondientes marcando la opción USE. Por el
contrario, si existen pozos activos que no se requieren, desactivarlos desmarcando la opción USE.
f. Seleccionar la opción SAVE para guardar la plantilla en la carpeta del mes

y año correspondientes, ingresando el nombre de la placa de reacción
según el formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para
cuantificación de ADN asociado a la corrida.
g. Una vez colocadas las muestras en el equipo, seleccionar la pestaña
Instrument.
h. Seleccionar START.
i. Llenar el formulario FOR-DTC-LAB-082 Bitácora de uso de los equipos.
j. Esperar a que finalice la corrida para analizar los datos.
k. Apagar el equipo 7500 Real-Time PCR System.
8.6.3 Análisis de Datos
a. Seleccionar la pestaña Results.

b. Dar click en el botón Analysis Settings o elegir la opción Analyze en la
ventana Analysis para iniciar el análisis de datos.
c. Para evaluar la curva estándar (Standard Curve) seleccionar la pestaña
Standard curve.
g. Verificación de la Curva estándar (Standard Curve):
i. Verificar los parámetros de R2 (coeficiente de correlación) y la
pendiente de la recta (slope) según Tablas 9 y 10.
Nota: no existen tablas de comparación para el valor del intercepto-Y debido a que puede variar
dependiendo del equipo, entre otros.
ii. Anotar los valores de los parámetros de la curva estándar en el

formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para
cuantificación de ADN asociado.

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Tabla 9. Interpretación del Coeficiente de Variación -R2-
Valor de R2 Interpretación
Perfecta correlación entre la regresión lineal de la
R2 =1 curva patrón y los valores individuales de las
muestras.
Indica un ajuste muy cercano, corresponde al
R2 ≥ 0.99
valor esperado
R2 ≤0.98 Verificar el procedimiento
Nota: valores del coeficiente de correlación ≤ 0.98 pueden deberse a degradación de la solución
estándar de ADN, errores o degradación del ADN en las diluciones seriadas de la solución estándar
de ADN.
Tabla 10. Límites aceptables de la pendiente para kits de cuantificación
Kit Límite de la Pendiente

Quantifiler® Human DNA -3.3 a -2.9
Quantifiler® Y Human Male
-3.6 a -3.0
DNA
-3.6 a -3.0
(Human target)
-3.6 a -3.0
(Male target)
iii. Si alguno de los parámetros anteriores no cumplen con lo

especificado, deberá realizarse nuevamente la cuantificación de las
muestras, utilizando un nuevo set de diluciones seriadas para la
curva estándar.
Nota: valores fuera de lo esperado en la curva estándar pueden ser excluidos, seleccionando
el pozo en la pestaña PLATE, dando doble CLICK izquierdo, aparecerá la ventana Well
inspector, activar la opción OMIT WELL y cerrar la ventana. Pueden omitirse hasta un máximo
de 2 puntos para lograr cumplir con el valor de R2 esperado. Para incluir de nuevo un punto de
la curva estándar omitido, dar doble CLICK izquierdo, y cuando aparezca la ventana Well
inspector desactivar la opción OMIT WELL. Siempre que se modifique la curva estándar
todos los datos deben volver a analizarse, seleccionando el icono ANALYZE.
h. Verificación de la cuantificación de las muestras:

i. En la pestaña RESULTS seleccionar la opción Report, en la parte
inferior se visualizara el mapa de la muestras cuantificadas.
ii. Seleccionar dando CLICK izquierdo sobre las muestras cuyos
resultados desean observarse, los cuales serán observados en la
parte superior de la pantalla.
Nota: en la opción PLATE también es posible la visualización directa de los resultados.
iii. Verificar los datos de IPC para detectar muestras posiblemente

inhibidas, tomando en cuenta la Tabla 11 para la interpretación de
los resultados.

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Tabla 11. Interpretación de los resultados del IPC

Muestra IPC Interpretación
Hay amplificación
Con valores de CT
similares a los del CT de
los puntos 4 al 8 de la
curva estándar El dato de
Hay amplificación cuantificación es
• VIC® Dye para confiable
Quantifiler® Human
DNA, y Quantifiler® Y
Human Male DNA.
• NEDTM Dye para
Hay amplificación
Con valores de CT
aumentados con Existe inhibición
respecto a los del CT de asociada a altas
los puntos 4 al 8 de la concentraciones
curva estándar de ADN.
Hay amplificación
El dato de la
>5ng/µL
• VIC® Dye para cuantificación
Quantifiler® Human debe ser evaluado
DNA, y Quantifiler® Y de acuerdo con el
Human Male DNA. criterio del perito
• NEDTM Dye para
Resultado
negativo
No hay amplificación Hay amplificación
(NO se detectó ADN
Humano)
Resultado inválido,
No hay amplificación No hay amplificación puede existir
inhibición severa
Inhibición de la
Hay amplificación No hay amplificación
PCR
8.7 Normalización de las muestras

8.7.1 Anotar los resultados en el formulario FOR-DTC-LAB-074 Control de
muestras para normalización y amplificación.
8.7.2 Tomando en cuenta la cantidad de ADN determinada en cada muestra
durante la cuantificación, ajustar la concentración de ADN según los rangos
permitidos por el kit de amplificación a utilizar.

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EN TIEMPO REAL
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9. REGISTROS
Documento Código
Control de muestras para cuantificación de ADN FOR-DTC-LAB-076
Control de muestras para normalización y
FOR-DTC-LAB-074
amplificación de ADN
Bitácora de uso de los equipos FOR-DTC-LAB-082
Control de condiciones ambientales FOR-DG-GAC-017
10. REFERENCIAS
10.1 Applied Biosystems Quantifiler® HP and Trio DNA Quantification Kits User Guide.
2014.
10.2 Applied Biosystems Quantifiler ® Kits, Quantifiler ® Human DNA Quantification Kit
and Quantifiler ® Y Human Male DNA Quantification Kit. Users Manual. 2012.
10.3 Applied Biosystems Quantifiler ® DUO DNA Quantification Kit Users Manual. 2012.
10.4 Applied Biosystems 7300/7500/7500 Fast. Real-Time PCR System. 2006.

La Dirección General, su representante autorizado o el personal designado por éste
son los responsables de resolver cualquier aspecto relacionado con este documento,
Número de Sección afectada Descripción

versión
1 Todas Elaboración del documento.
• Se modificaron los siguientes incisos: 9.
Precauciones, 11.2. Preparación de las
reacciones de cuantificación, 14.
Situaciones Excepcionales.
• Se añadieron secciones: 6.2.4. Patrones y
2 Todo el documento materiales de referencia, 7.3. Ítem a
ensayar (indicio), 7. Parámetro a ser
determinado, 10. Condiciones
Ambientales.
• Se añadió la sección 11.5 y se realizaron
cambios en la sección 11.6.

Versión: 02
AMPLIFICACIÓN DE ADN
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1. INTRODUCCIÓN
La amplificación se realiza luego de la extracción y cuantificación del Ácido Desoxirribonucleico -

ADN-. Durante esta etapa se utiliza la Reacción en Cadena de la Polimerasa -PCR-, para producir copias
de las regiones de ADN de interés. El ADN molde es desnaturalizado a temperaturas de 95°C a 100°C para
lograr el ensamble de cebadores y proceder a la replicación a través de la enzima ADN polimerasa. Una
vez completada la replicación del segmento delimitado por los dos cebadores (primer ciclo), las dos
moléculas nuevas de cadena doble se desnaturalizan por calor y se procede a un segundo ciclo de
replicación, tras disminuir la temperatura en presencia de todos los componentes necesarios para la
polimerización. La repetición de estos ciclos lleva a un aumento exponencial del número de segmentos
replicados, resultando en la obtención de hasta un millón de copias, lo que permite detectar posteriormente
secuencias que se encuentran mínimamente representadas en una muestra.
Este procedimiento describe el proceso de amplificación de ADN con diferentes kits comerciales, los
cuales permiten realizar amplificaciones a través de técnicas de PCR sencillas (amplificación de un único
locus) o múltiplex (amplificación de distintos loci simultáneamente), utilizando primers o cebadores con
un fluorocromo específico para cada uno de los marcadores de interés genético forense, esto permite
producir fragmentos amplificados que pueden ser visualizados posteriormente en el proceso de tipificación.
2. OBJETIVO
Obtener copias de fragmentos de ADN específicos a través de la Reacción en Cadena de la Polimerasa

-PCR-.
3. ALCANCE
Este procedimiento se aplica a las muestras de ADN que han sido sometidas a los procedimientos de
extracción, cuantificación y normalización.
4. RESPONSABLES

Peritos Profesionales del Laboratorio de
Genética
5. GLOSARIO

Versión: 02
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5.1. Ácido Desoxirribonucleico (ADN): molécula de ácidos nucleicos que codifica la información
genética de los organismos vivos. Esta se compone de dos hebras antiparalelas complementarias de
desoxirribonucleótidos, unidas por puentes de hidrógeno, logrando una cadena doble en forma de
hélice dextrógira. Cada nucleótido está compuesto de un azúcar desoxirribosa, un grupo fosfato y
una base nitrogenada (adenina, citosina, guanina o timina). Los nucleótidos se unen entre sí de
forma covalente.
5.2. Alelo: forma diferente de un gen en un locus determinado. Las características de una sola copia de
un gen específico, o de una sola copia de un lugar específico en un cromosoma.
5.3. Amplificación: reacción en cadena de la polimerasa mediante la cual se generan múltiples copias
de ADN a partir de una región seleccionada del genoma, siempre y cuando se conozca una parte de
su secuencia de nucleótidos.
5.4. Cebador o primer: es una cadena simple de ácido nucleico que sirve como punto de partida para
la replicación del ADN.
5.5. Control: muestras que son sometidas al mismo procedimiento de forma paralela a las muestras
experimentales.
5.6. Control blanco de reactivos (NTC): control que consiste en un tubo sin muestra que contiene todos
los componentes utilizados en el procedimiento analítico utilizado excepto la muestra.
5.7. Control positivo: muestra conocida de la que se tiene la certeza que contiene ADN y del cual se
conoce el perfil genético. Es utilizado directamente para comprobar durante la tipificación, que la
amplificación fue exitosa.
5.8. Desnaturalizar: cambiar la conformación de una molécula. En el caso del ADN consiste en la
separación de la doble hélice como resultado generalmente de la aplicación de altas temperaturas
que inducen la ruptura de los enlaces o puentes de hidrógeno presentes.
5.9. Fluorescencia: tipo particular de luminiscencia, que caracteriza a las sustancias que son capaces de
absorber energía en forma de radiaciones electromagnéticas y luego emitir parte de esa energía en
forma de radiación electromagnética en una longitud de onda específica.
5.10. Fluorocromo: sustancia química que produce fluorescencia.
5.11. Kit: conjunto de reactivos para un análisis específico.
5.12. Locus: la posición dentro de un cromosoma concreto, en la cual se sitúan los distintos alelos de un
marcador genético. El plural es loci.
5.13. Marcador: un microsatélite (STR) de localización genotípica conocida.
5.14. Microsatélites: secuencias repetidas en tándem (STR, short tandem repeat) altamente polimórficas.
Contienen una secuencia consenso de 1-6pb repetidas en tándem. Las repeticiones de 3-5pb son
utilizadas como marcadores para identificación genética.
5.15. Replicación: creación de una copia exacta. Durante la replicación del ADN cada hebra actúa como
un molde para una nueva, la hebra complementaria es sintetizada por una enzima ADN polimerasa
de acuerdo con la complementariedad de los pares de bases.
5.16. Termociclador: bloque de resistencia eléctrica que distribuye a través de una placa una temperatura
homogénea durante tiempos que pueden ser programables, normalmente con rangos de temperatura
que van de 4 °C a temperaturas mayores a 100°C.
5.17. Tipificación: identificación de componentes variables de un grupo polimórfico.
6. RECURSOS
6.1. Tecnológicos

Versión: 02
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6.1.1. Termocicladores (GeneAmp® PCR System 9700 y/o Applied Biosystems VERITI TM)
6.1.2. Minicentrífuga
6.1.3. Micropipetas de volumen variable
6.1.4. Agitador tipo vórtex
6.1.5. Estación de PCR
6.2. Logísticos
6.2.1. Materiales
a. Equipo de protección personal (bata, cofia, guantes y mascarilla)
b. Placa de reacción de 96 pozos o tubos para PCR
c. Base de placa de reacción de 96 pozos o de tubos para PCR
d. Puntas para micropipeta de volumen variable con filtro para PCR
e. Tubos para microcentrífuga de tapa plana de volumen variable
6.2.2. Reactivos
f. Agua ultrapura esterilizada
g. Kits de amplificación de ADN
a. Los materiales de referencia consisten en los controles positivos correspondientes a
los Kits de amplificación utilizados. El empleo de patrones de referencia no aplica para
este procedimiento.
7. PUNTOS CRÍTICOS
7.1. La bata debe ser de uso exclusivo para el área de pre-amplificación de ADN.
7.2. Los tubos de microcentrífuga y puntas para micropipetas deben ser estériles, libres de nucleasas
7.3. La degradación y/o presencia de inhibidores (grupo HEMO, calcio, minerales, moho, tintes, etc.)
interfieren en la amplificación adecuada de una muestra. Estos factores deben detectarse durante la
cuantificación cuando el Kit utilizado lo permita y ser tomados en cuenta para las etapas siguientes
en el análisis genético.
7.4. La preparación de la placa para PCR en el Área de Pre-Amplificación no requiere condiciones
ambientales de temperatura y humedad específicas. Sin embargo, el Área de Amplificación-
Tipificación -que es donde se encuentran los termocicladores- debe permanecer a una temperatura
entre 15-30oC y humedad relativa de entre 20-80%. Estos parámetros deberán registrarse en el
8. ACTIVIDADES
8.1. Generalidades
8.1.1. Completar el formulario FOR-DTC-LAB-074 Control de muestras para normalización
y amplificación.
8.1.2. Encender el termociclador.
8.1.3. Registrar el uso del termociclador en el formulario FOR-DTC-LAB-082 Bitácora de
uso de los equipos.
8.1.4. Descongelar los reactivos cuando se requiera. Mezclar en vórtex y centrifugar.
Nota 1: para este procedimiento mezclar en vórtex y centrifugar implica mezclar durante
3-6 segundos aproximadamente en vórtex y luego llevar a la microcentrífuga durante 2-
4 segundos aproximadamente.
Nota 2: el orden de estos pasos queda a criterio del perito analista de acuerdo con las
necesidades detectadas en el momento de proceder a ejecutarlos.
8.2. Preparación de la placa para amplificación

Versión: 02
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Combinar en un tubo para microcentrífuga los componentes de la mezcla maestra, de

acuerdo al cálculo realizado en el formulario respectivo FOR-DTC-LAB-074
Control de muestras para normalización y amplificación.
Nota 1: la cantidad total de reacciones debe contemplar cantidad total de muestras,

controles (positivo y NTC -non template control-) y de reacciones adicionales que el
perito analista considere necesarias, tomando en cuenta la pérdida de volumen que
generalmente ocurre durante el pipeteo sucesivo. Se recomienda agregar 1 reacción
extra por cada 24 muestras.
Nota 2: el volumen de cada componente en la mezcla maestra debe responder al total de

reacciones a utilizar en relación al volumen necesario de cada componente por reacción,
de acuerdo con los parámetros establecidos para cada kit en el Formulario FOR-DTC-
LAB-074 Control de muestras para normalización y amplificación.
Nota 3: si se prepara simultáneamente más de una mezcla maestra, rotular cada uno de
los tubos utilizados para realizar las mezclas.
8.2.1. Mezclar en vórtex y centrifugar el tubo con la mezcla.

8.2.2. Distribuir en una placa o tubos para PCR, el volumen de la mezcla que será utilizada por
pozo.
8.2.3. Añadir el volumen de muestra de ADN de interés y agua, así como de los controles en
los pozos respectivos, según formulario FOR-DTC-LAB-074 Control de muestras para
normalización y amplificación.
8.2.4. Tapar la placa o los tubos utilizados.
Nota: centrifugar la placa o tubos utilizados si a criterio del perito analista es necesario
eliminar burbujas presentes.
8.2.5. Trasladar la placa o tubos preparados para la amplificación al Área de Amplificación-

Tipificación.
Nota: quitar la bata, cofia y mascarilla utilizadas, únicamente llevar los guantes para el
traslado de la placa o tubos preparados.
8.2.6. Colocar en el termociclador.
8.3. Termocicladores
8.3.1. Termociclador GeneAmp® PCR System 9700
a. Verificar que el termociclador esté encendido
b. Colocar en el bloque placa o tubos preparados para amplificación
c. Seleccionar RUN
d. Seleccionar el programa según el kit a utilizar de acuerdo con el Kit de
amplificación utilizado
e. Seleccionar START
Nota: en este momento la tapadera del termociclador debe estar cerrada.
f. Esperar que finalice la reacción para proceder a la tipificación.

Nota: de ser necesario almacenar el ADN amplificado durante una semana entre
2-8 ºC.
8.3.2. Termociclador Applied Biosystems VERITITM

a. Verificar que el termociclador esté encendido
b. Colocar en el bloque la placa o tubos preparados para amplificación
c. Ingresar el usuario y clave
d. Seleccionar BROWSE/NEW METHODS
e. Seleccionar el programa según el kit a utilizar

Versión: 02
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f. Seleccionar START RUN

g. Seleccionar START RUN NOW
Nota: en este momento la tapadera del termociclador debe estar cerrada.
h. Esperar que finalice la reacción para proceder a la tipificación.

Nota: de ser necesario almacenar el ADN amplificado durante una semana entre
2-8 ºC.
9. REGISTROS

Control de muestras para
FOR-DTC-LAB-074 Indefinido
normalización y amplificación
Control de condiciones
FOR-DG-GAC-017 Indefinido
ambientales
Bitácora de uso de los equipos FOR-DTC-LAB-082 Indefinido
10. REFERENCIAS
10.1. Applied Biosystems. 2010. GeneAmp® PCR System 9700 Base Module. User´s Manual.
10.2. Applied Biosystems. 2007. VeritiTM Thermal Cycler. User Guide.
10.3. Butler, J. 2010. Fundamentals of Forensic DNA Typing. Elsevier Academic Press. USA. 500 pp.

La Dirección General, su representante autorizado o el personal designado por ésta son los
responsables de resolver cualquier aspecto relacionado con este procedimiento, que no fue considerado en
el mismo.

1 Todas Elaboración de documentos
Se realizaron modificaciones en los
siguientes incisos: 1. Introducción; 2.
Objetivo; 3. Alcance; 4. Responsables; 6.
Glosario; 7. Recursos; 9 Actividades, 10.
2 Varios
Referencias, 12. Registros.
Se agregó el inciso: 7. Puntos críticos. Se
eliminaron los incisos: 5. Lista de
Distribución; 8. Precauciones

Versión: 02
TIPIFICACIÓN PARA ANÁLISIS DE Vigente a partir de:

FRAGMENTOS DE ADN
-ELECTROFORESIS CAPILAR
3130/3130xl-
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1. INTRODUCCIÓN
La tipificación para el análisis de fragmentos de Ácido Desoxirribonucleico –ADN– es la última fase

analítica e instrumental para la obtención de perfiles genéticos. Una vez amplificado el ADN, los
fragmentos resultantes son separados en función de su tamaño y carga por medio de un proceso
fisicoquímico denominado electroforesis capilar, en donde las partículas cargadas migran a través de un
determinado soporte cuando son sometidas a un campo eléctrico. El ADN posee carga negativa la cual es
conferida por los grupos fosfato que posee en su estructura, esto permite su migración hacia el ánodo en el
campo eléctrico al que es sometido. Esto requiere la utilización de un analizador genético, que en este caso
corresponde al analizador genético 3130/3130xL.
La electroforesis capilar es llevada a cabo en un capilar de sílica de 50 µm de diámetro y de 25 a 80

cm de longitud, el cual permite aplicar altos voltajes sin que se produzcan grandes cantidades de calor. El
ingreso de las muestras al capilar se realiza por inyección electrocinética, esto se refiere a un corto período
de electroforesis donde el capilar se encuentra inmerso en la muestra. El arreglo del capilar en el que se
lleva a cabo la electroforesis se encuentra cubierto por una membrana especial excepto por una pequeña
zona denominada “ventana del capilar”, esta ventana es atravesada por un láser, lo que permite que las
muestras sean excitadas a su paso por el mismo. Las emisiones de fluorescencia son detectadas por una
cámara CCD, dichas emisiones provienen de los fluorocromos con los que se han marcado los cebadores
de los fragmentos de ADN que se desean amplificar.
Este proceso finaliza con la obtención de los datos de las emisiones producidas por los diferentes
fluorocromos, enviándolos a una computadora conectada al analizador genético, que a través de una serie
de programas informáticos asigna un número a los alelos de acuerdo al tamaño de los fragmentos,
obteniendo así un electroferograma.
2. OBJETIVO
Obtener el perfil genético de las muestras amplificadas por medio de electroforesis capilar.
3. ALCANCE
Este procedimiento se aplica para la tipificación de muestras de ADN en el analizador genético

33130/3130xL, que previamente han sido sometidas al procedimiento de amplificación.
4. RESPONSABLES

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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Peritos Profesionales del Laboratorio
de Genética
5. GLOSARIO
5.1. Ácido Desoxirribonucleico (ADN): molécula de ácidos nucleicos que codifica la información
genética de los organismos vivos. Esta se compone de dos hebras antiparalelas complementarias
de desoxirribonucleótidos, unidas por puentes de hidrógeno, logrando una cadena doble en forma
de hélice dextrógira. Cada nucleótido está compuesto de un azúcar desoxirribosa, un grupo fosfato
y una base nitrogenada (adenina, citosina, guanina o timina). Los nucleótidos se unen entre sí de
forma covalente.
5.2. Alelo: forma diferente de un gen en un locus determinado. Las características de una sola copia de
un gen específico, o de una sola copia de un lugar específico en un cromosoma.
5.3. Amplificación: reacción en cadena de la polimerasa mediante la cual se generan múltiples copias
de ADN a partir de una región seleccionada del genoma, siempre y cuando se conozca una parte
de su secuencia de nucleótidos.
5.4. Ánodo: electrodo con carga positiva.
5.5. Calibración espacial: establece una relación entre la señal emitida por cada capilar y la posición
donde esa señal cae, la cual es detectada por la cámara CCD.
5.6. Calibración espectral: realiza una matriz matemática que corrige la sobreposición de
fluorescencias presentes en el espectro de emisión de un set de fluorocromos, detectadas por la
cámara CCD.
5.7. Cámara CCD: dispositivo que detecta y graba la información emitida por las moléculas
fluorescentes a medida que pasan por delante del láser.
5.8. Cátodo: electrodo con carga negativa.
5.9. Control: muestras que sufren el mismo procedimiento de forma paralela a las muestras
experimentales.
5.10. Control blanco de reactivos (NTC): control que consiste en un tubo sin muestra que contiene
todos los componentes utilizados en el procedimiento analítico utilizado excepto la muestra.
5.11. Desnaturalizar: cambiar la conformación de una molécula. En el caso del ADN consiste en la
separación de la doble hélice como resultado generalmente de la aplicación de altas temperaturas
que inducen la ruptura de los enlaces o puentes de hidrógeno presentes.
5.12. Electroferograma: gráfico que representa los fragmentos de ADN separados por electroforesis
capilar de una muestra. Su representación se observa en forma de picos, asignándole un número de
alelo en base a la comparación con una escalera alélica.
5.13. Escalera alélica (allelic ladder): conjunto de fragmentos de ADN que representan alelos comunes
en una población determinada.
5.14. Fluorescencia: tipo particular de luminiscencia, que caracteriza a las sustancias que son capaces
de absorber energía en forma de radiaciones electromagnéticas y luego emitir parte de esa energía
en forma de radiación electromagnética en una longitud de onda específica.
5.16. Grupo de resultados (results group): componente dentro del Programa 3130 Data Collection,
versión 3.0 o Programa 3130 xl Data Collection, versión 3.1, que organiza las muestras y ajustes
de usuario bajo un único nombre. Se le llama grupo de resultados porque es utilizado para nombrar,
ordenar y personalizar las carpetas en las cuales los archivos de datos de las muestras son
almacenadas.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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5.17. Microsatélites: secuencias repetidas en tándem, altamente polimórficas. Contiene una secuencia
consenso de 1-6pb repetida en tándem. A los polimorfismos se les llama STR (short tandem repeat).
Las repeticiones de 3-5pb son utilizadas como marcadores para identificación genética.
5.18. Protocolo de instrumento (instrument protocol): parámetros del módulo de corrida y la
información del set de fluorocromos en un mismo archivo. Indica al analizador genético las
condiciones de electroforesis a utilizarse durante la corrida, donde la cámara CCD debe colectar
las emisiones de fluorescencia emitidas por los fluorocromos.
5.19. Registro de placa (plate record): indica al instrumento la posición de las muestras en una placa
y el protocolo de instrumento a utilizar. Se utiliza para definir las posiciones de los pozos, el nombre
de las muestras, el tipo de muestra, el protocolo de instrumento (módulo de corrida y set de
fluorocromos), el grupo de resultados, el orden de las inyecciones y reinyecciones.
5.20. Escalera de peso molecular (size standard): reactivo que incluye distintos tamaños de
fragmentos de ADN esperados para asignar el tamaño a fragmentos desconocidos según puntos de
corrida.
5.21. Software 3130 Data Collection, versión 3.0 o Programa 3130xL Data Collection, versión 3.1:
este programa cumple con las siguientes características: recolecta los datos crudos de las corridas
de electroforesis, genera archivos de muestras (Sample files), permite al operador el control y
monitoreo de la actividad del instrumento, crea, importa y exporta los registros de placa. Permite
editar los módulos de corrida, realiza y evalúa las calibraciones y provee la interface entre el
operador y la base de datos.
5.22. Solución amortiguadora (buffer): solución química que mantiene un pH relativamente constante,
incluso con la adición de ácidos o bases fuertes.
6. RECURSOS
6.1. Tecnológicos
6.1.1. Vórtex
6.1.2. Minicentrífuga
6.1.3. Micropipetas de volumen variable
6.1.4. Termociclador
6.1.5. Centrífuga de placas
6.1.6. Analizador genético Applied Biosystems 3130/3130xL y software asociado
6.1.7. Computadora
6.1.8. Impresora
6.2. Logísticos
6.2.1. Materiales
a. Equipo de protección personal (bata y guantes)
b. Marcadores permanentes
c. Tubos para microcentrífuga
d. Gradilla para tubos de microcentrífuga
e. Puntas para micropipeta de volumen variable con filtro para PCR
f. Placa de reacción de 96 pozos
g. Septa para placa de 96 pozos
h. Gradilla refrigerada
i. Retenedor de placa para analizador genético 3130/3130 xl
j. Soporte de placa para analizador genético 3130/3130 xl
k. Papel antiestático, Kimwipes o equivalente
l. Septa para contenedor de buffer de cátodo

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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6.2.2. Reactivos
a. Formamida altamente desionizada apta para electroforesis capilar
b. Size Standard correspondiente a los Kits de amplificación utilizados
c. Polímero POP-4
d. Buffer del ánodo
e. Buffer del cátodo
f. Agua ultrapura esterilizada

a. Los materiales de referencia consisten en las escaleras alélicas correspondientes a
los Kits de amplificación utilizados. El empleo de patrones de referencia no aplica
para este procedimiento.
7. PUNTOS CRÍTICOS
7.1. Ejecutar los mantenimientos preventivos semanales, mensuales y trimestrales del equipo con la
regularidad que se establece en el Formulario FOR-DTC-LAB-112 Mantenimiento preventivo del
analizador genético.
7.2. Antes de colocar dentro del equipo una placa ensamblada asegurarse que los pozos de la placa estén
alineados con los agujeros de la septa para evitar que se dañen los capilares y que la cubierta del
ensamblado esté debidamente encajada en la base.
7.3. Verificar que todos los componentes del equipo estén colocados adecuadamente antes de iniciar
una corrida.
7.4. Evitar el contacto directo de piel y mucosas con el polímero, buffers y formamida.
7.5. Todo proceso de tipificación de ADN debe desarrollarse en un área designada para su propósito.
El uso de reactivos, materiales y equipo debe ser única y exclusivamente para esta área.
7.6. El área designada para la tipificación debe permanecer a una temperatura entre 15-30oC y humedad
relativa de entre 20-80%. Estos parámetros deberán registrarse en el Formulario FOR-DG-GAC-
017 Control de condiciones ambientales.
8. ACTIVIDADES
8.1. Generalidades
8.1.1. Registrarse en el formulario FOR-DTC-LAB-082 Bitácora de uso de los equipos.

8.1.2. Verificar en el formulario FOR-DTC-LAB-112 Mantenimiento preventivo analizador
genético asignado al equipo y que esté activo a la fecha, si se requiere realizar cambio
de buffers, agua de lavado, agua de desecho y/o polímero. Realizarlo de ser necesario y
registrarlo en el formulario:
a. Elegir en el Panel de Navegación la opción Wizards
b. Elegir la opción Replenish Polymer Wizard y seguir las instrucciones para
cambiar el polímero (por uno del mismo tipo).
c. Para realizar el cambio de buffers y aguas:
i. Remover los contenedores del equipo
ii. Descartar el contenido de acuerdo con el Instructivo INS-DTC-LAB-
000 “Limpieza del laboratorio de genética”.
iii. Lavar los contenedores con agua ultrapura autoclaveada y secar con
papel antiestático.
iv. Preparar la dilución del buffer 10X a 1X.
v. Llenar los contenedores con agua o buffer según lo que se requiera.
vi. Instalar nuevamente en el equipo.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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Nota: el cambio de buffers y agua debe realizarse cada dos días y el

cambio de polímero cada siete días, cuando el equipo está en uso
constante.
8.1.3. Verificar visualmente que el nivel del fluido en los contenedores del polímero, agua de
lavado, agua de desecho y buffer del ánodo y del cátodo, sea el adecuado. Si está por
debajo de la línea de llenado es necesario reemplazar.
8.1.4. Verificar visualmente que no existan burbujas en el bloque de la bomba y dentro de los
canales antes y después del arreglo de capilares, si es necesario proceder a eliminarlas:
i. Elegir en el Panel de Navegación la opción Wizards
ii. Elegir la opción Bubble Remove Wizard y seguir las instrucciones.
8.1.5. Iniciar el pre-calentamiento del horno del analizador genético al menos 30 minutos antes
de iniciar la corrida.
Nota: este paso es opcional, no afecta los resultados obtenidos pero permite reducir los
tiempos analíticos.
i. En el Panel de Navegación, elegirInstrument > ga3130/ga3130xl >

INACIF >Run scheduler > Manual Control
ii. En Manual Control elegir en la celda Send Defined Command Forla
opción Oven y en la celda Command Name la opción Set Oven
temperature (Value 50.0).
8.1.6. Verificar que un termociclador se encuentre encendido para la incubación de la placa
como parte de la desnaturalización, si es necesario proceder a encenderlo.
8.1.7. Completar el formulario FOR-DTC-LAB-116 Control de muestras para tipificación.
Nota 1: incluir como mínimo una escalera alélica por inyección (3130: 1 inyección 4
pozos, 3130xL: 1 inyección 16 pozos).
Nota 2: dentro de una inyección no debe quedar ningún pozo vacío para evitar que se
produzca un arco voltáico, por lo tanto en cualquier pozo donde no se prevea colocar
muestras, controles o escaleras alélicas, deberá colocarse un mínimo de 10 µL de
formamida o de la mezcla preparada para la tipificación.
8.1.8. Descongelar la formamida y otros reactivos como el Size Standard, en los casos en que
aplique. Mezclar en vórtex y centrifugar.
8.1.9. Nota 1: para todo este procedimiento mezclar en vórtex y centrifugar implica mezclar
durante 3-6 segundos aproximadamente en vórtex y luego llevar a la microcentrífuga
durante 2-4 segundos aproximadamente.
Nota 2: el orden de estos pasos queda a criterio del perito analista de acuerdo con las
necesidades detectadas en el momento de proceder a ejecutarlos.
8.2. Preparación de la placa para análisis

8.2.1. Combinar en un tubo para microcentrífuga los componentes de la mezcla para la
tipificación, de acuerdo al cálculo realizado en el formulario FOR-DTC-LAB-116
Control de muestras para tipificación respectivo.
Nota 1: la cantidad total de reacciones debe contemplar cantidad total de muestras,
controles, escaleras alélicas y la cantidad de reacciones adicionales que el perito analista
considere necesarias, tomando en cuenta la pérdida de volumen que generalmente ocurre
durante el pipeteo sucesivo. Se recomienda agregar 1 reacción extra por cada 24
muestras.
Nota 2: el volumen de cada componente debe responder al total de reacciones a utilizar

en relación al volumen necesario de cada componente por reacción, de acuerdo con los

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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parámetros establecidos para cada kit en el Formulario FOR-DTC-LAB-116 Control de

muestras para tipificación.
Nota 3: rotular el tubo de acuerdo a la mezcla que se está preparando.
8.2.2. Mezclar en vórtex y centrifugar el tubo con la mezcla.

8.2.3. Distribuir en una placa no óptica el volumen de la mezcla que será utilizada por pozo.
8.2.4. Añadir 1 µL del producto de PCR y escaleras alélicas en los pozos respectivos, según
formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para cuantificación de ADN.
8.2.5. Colocar la septa en la placa a inyectar. Imagen 1.
Nota: si a criterio del perito analista es necesario, centrifugar la placa durante 10
segundos aproximadamente para eliminar burbujas.
8.2.6. Proceder a realizar el shock térmico como se describe a continuación:

a. Colocar la placa en un termociclador y elegir el programa “DESNAT 3 MIN”
(95oC por 3 minutos).
Nota: no cerrar el termociclador.
b. Colocar la placa durante 3 minutos en una gradilla refrigerada.
Imagen 1
Placa para tipificación y septa
Septa
Placa de reacción
8.3. Ensamblado de la placa y ubicación dentro del Analizador Genético

8.3.1. Colocar la placa en el soporte de placa y sujetar con el retenedor de placa. Imagen 2.
Nota: verificar que los agujeros del retenedor estén alineados con los de la septa.
Imagen 2
Ensamblado de la placa con septa
Los agujeros del retenedor

de la placa y los de la septa
deben de estar alineados
8.3.2. Presionar el botón Tray en el frente del analizador genético y esperar a que el
automuestreador -autosampler- se mueva hasta la parte delantera y se detenga.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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8.3.3. Abrir las puertas del analizador genético y colocar la placa ensamblada con la hendidura
hacia la parte posterior en la posición B (analizador genético 3130) o en la posición A o
B (analizador genético 3130 xl) del autosampler. Imagen 3.
8.3.4. Cerrar la puerta del instrumento, con lo que el autosampler volverá a su posición original.
Imagen 3
Disposición en el Analizador Genético
de la placa ensamblada
8.4. Creación de una nueva placa.
8.4.1. En el Programa 3130 Data Collection, versión 3.0/Programa 3130 xl Data Collection,
versión 3.1, hacer clic en GA Instrument > ga3130/ga3130xl > Plate Manager, hacer
clic en New para abrir la ventana New Plate Dialog. Imagen 4.
8.4.2. Verificar y/o completar los campos de la ventana como se indica a continuación:
a. En la celda Name ingresar el nombre de la placa designado en el formulario
CONTROL DE MUESTRAS PARA TIPIFICACIÓN FOR-DTC-
LAB-116 respectivo, el cual debe incluir la fecha seguida de guion bajo y las
iniciales del perito -ej. 13062016_ESR-.
b. En el campo Application, seleccionar GeneMapper Applied CA6830A-3130-
yGeneMapper OPTIXE-3130xl-, o la opción que se encuentre activa para el
equipo utilizado.
c. En el campo Plate Type seleccionar 96-Well.
d. Ingresar INACIF en el campo Owner Name.
e. Ingresar las iniciales del perito en el campo Operator Name.
f. Hacer clic en OK.
Imagen 4
Ventana New Plate Dialog

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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8.5. Asignación del contenido a la placa
8.5.1. En la columna Sample Name, ingresar el nombre de la placa designado en el formulario

FOR-DTC-LAB-116 CONTROL DE MUESTRAS PARA TIPIFICACIÓN respectivo,
el cual debe incluir la fecha seguida de guion bajo y las iniciales del perito -ej.
13062016_ESR-.
Nota 1: para información que se repite en un cierto número de pozos, podrá ingresarse
la misma en el primero de los pozos, sombrearse toda el área de interés y utilizando la
combinación CTRL D se copiará y pegará la misma información en toda el área.
Modificaciones adicionales podrán ser realizadas posteriormente.
8.5.2. En la columna Priority, cambiar el valor de prioridad, si se desea (menor que

100 = mayor prioridad).
8.5.3. En la columna Sample Type, seleccionar el tipo de muestra correspondiente para cada
pozo. Las opciones disponibles son muestra, control positivo, escalera alélica y control
negativo.
8.5.4. En la columna Size Standard, seleccionar la escalera de peso molecular de acuerdo con
los parámetros establecidos para cada kit en el Formulario CONTROL DE MUESTRAS
PARA TIPIFICACIÓN FOR-DTC-LAB-116.
8.5.5. En la columna Panel, seleccionar el panel correspondiente del kit empleado.
8.5.6. En la columna Result Group, seleccionar el mes y año en que se está analizando y
posteriormente presionar “duplicate” y colocar la fecha e iniciales del perito que realizó
los análisis (fecha_iniciales del perito) o crear un nuevo grupo de resultados de ser
necesario.
8.5.7. En la columna Instrument Protocolseleccionar el ensayo del instrumento según el kit
utilizado.
8.6. Inicio de corridas
8.6.1. Verificar que la calibración espectral activa coincida con el set de fluorocromos:
a. En el Panel de Navegación, elegirInstrument > ga3130/ga3130xl > INACIF
>Run scheduler > Spectral Viewer.
b. En Spectral Viewer verificar en la celda Active Calibration for Dye Set la
calibración activa para el Dye Set seleccionado. En caso de ser necesario
cambiar la calibración, buscar entre el listado disponible en la celda List of
Calibrations for Dye Set y elegir la opción Set.
8.6.2. Seleccionar Run Scheduler en el panel de navegación. Imagen 5.
8.6.3. Hacer click en Find All.
8.6.4. Encontrar y seleccionar la placa creada previamente (fecha_iniciales del perito).
8.6.5. Seleccionar en cualquier parte de la placa amarilla, que se encuentra en la parte derecha
de la pantalla (posición B en analizador genético 3130 o posición A o B en analizador
genético 3130xL).
Nota: el sombreado debe cambiar a verde y el icono de inicio de corrida de la
parte superior del menú debe activarse (color verde)

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
Página __ de __
Imagen 5
Panel de Navegación 3130/3130xL
8.6.6. Seleccionar el icono de inicio de corrida.

8.6.7. Hacer click en OK cuando se despliegue la advertencia de inicio de corrida.
9. REGISTROS

tipificación de ADN
ambientales
Mantenimiento preventivo
analizador genético
10. REFERENCIAS
10.1 Applied Biosystems. 2004. Getting Started Guide. 3130/3130xl Genetic Analyzer. USA.
10.2 Butler, J. 2010. Fundamentals of Forensic DNA Typing. Elsevier Academic Press. USA. 500 pp.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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La Dirección General, su representante autorizado o el personal designado por ésta, son los responsables
de resolver cualquier aspecto relacionado con éste procedimiento, que no fue considerado en el mismo.

• Se agregó el inciso Puntos Críticos.
Introducción; 4. Responsables; 6. Glosario; 7.
2 Todo el documento Recursos; 9. Actividades; 10. Registros; 11.
Referencias.
• Se eliminaron los siguientes incisos: 5. Lista de
distribución; 8. Precauciones.
13. ANEXOS
PARTES DEL EQUIPO
Bloque de la
Bomba de suministro de polímero (PDP)
bomba
Horno
Bloque de la celda de detección
Arreglo de capilares
Reservorio de buffer y agua
Automuestreador
Bloque inferior del polímero
Reservorio del buffer

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
3130/3130xl-
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Parte Función
Reservorio del buffer Contiene 16 mL del buffer 10x de corrida.
Cada uno contiene 16 mL del buffer 10x de corrida o
Reservorios de buffer y agua
agua.
Sostiene la placa de la muestra y los reservorios. Los
Automuestreador mueve para alinear las muestras, el agua, o el buffer con
los capilares.
Permite la separación por electroforesis de fragmentos

de ADN marcados con fluorocromos. Esta es una
unidad reemplazable compuesta de 4 o 16 capilares de
sílica.
Bloque de la celda de detección y Mantiene los capilares en el lugar adecuado para la
calefacción detección láser.
Contiene la válvula del buffer, el electrodo de ánodo y
Bloque inferior del polímero
el reservorio del buffer.
Mantiene uniforme la temperatura del arreglo de
Horno
capilares durante la corrida.
Bombea el polímero hacia el arreglo de capilares para
Bomba de suministro de polímero
ejecutar los procedimientos de mantenimiento.
Incluye la recámara de desplazamiento de la bomba, el
sello del pistón de agua, el puerto de arreglos y la
Bloque de la bomba
conexión hacia el bloque inferior del polímero a través
de un tubo interconector.

Versión: 02

TIPIFICACIÓN PARA ANÁLISIS DE
FRAGMENTOS DE ADN
-ELECTROFORESIS CAPILAR 3500xL-
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1. INTRODUCCIÓN
La tipificación para el análisis de fragmentos de Ácido Desoxirribonucleico –ADN– es la

última fase analítica e instrumental para la obtención de perfiles genéticos. Una vez amplificado
el ADN, los fragmentos resultantes son separados en función de su tamaño y carga por medio
de un proceso fisicoquímico denominado electroforesis capilar, en donde las partículas cargadas
migran a través de un determinado soporte cuando son sometidas a un campo eléctrico. El ADN
posee carga negativa la cual es conferida por los grupos fosfato que posee en su estructura,
esto permite su migración hacia el ánodo en el campo eléctrico al que es sometido. Esto requiere
la utilización de un analizador genético, que en este caso corresponde al analizador genético
3500xL.
La electroforesis capilar es llevada a cabo en un capilar de sílica de 50 µm de diámetro y de

25 a 80 cm de longitud, el cual permite aplicar altos voltajes sin que se produzcan grandes
cantidades de calor. El ingreso de las muestras al capilar se realiza por inyección electrocinética,
esto se refiere a un corto período de electroforesis donde el capilar se encuentra inmerso en la
muestra. El arreglo del capilar en el que se lleva a cabo la electroforesis se encuentra cubierto
por una membrana especial excepto por una pequeña zona denominada “ventana del capilar”,
esta ventana es atravesada por un láser, lo que permite que las muestras sean excitadas a su
paso por el mismo. Las emisiones de fluorescencia son detectadas por una cámara CCD, dichas
emisiones provienen de los fluorocromos con los que se han marcado los cebadores de los
fragmentos de ADN que se desean amplificar.
Este proceso finaliza con la obtención de los datos de las emisiones producidas por los
diferentes fluorocromos, enviándolos a una computadora conectada al analizador genético, que
a través de una serie de programas informáticos asigna un número a los alelos de acuerdo al
tamaño de los fragmentos, obteniendo así un electroferograma.
2. OBJETIVO
Obtener el perfil genético de las muestras amplificadas por medio de electroforesis capilar.
3. ALCANCE
Este procedimiento se aplica para la tipificación de muestras de ADN en el analizador

genético 3500xL, que previamente han sido sometidas al procedimiento de amplificación.
4. RESPONSABLES

Peritos Profesionales del Laboratorio 3. Conocer y ejecutar el procedimiento
1
de Genética descrito.
5. Velar por el cumplimiento del
procedimiento descrito.
2 Jefe del Laboratorio de Genética
6. Conocer y ejecutar el procedimiento
descrito.
5. GLOSARIO
5.1. Ácido Desoxirribonucleico (ADN): molécula de ácidos nucleicos que codifica la

información genética de los organismos vivos. Esta se compone de dos hebras
antiparalelas complementarias de desoxirribonucleótidos, unidas por puentes de
hidrógeno, logrando una cadena doble en forma de hélice dextrógira. Cada nucleótido

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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está compuesto de un azúcar desoxirribosa, un grupo fosfato y una base nitrogenada

(adenina, citosina, guanina o timina). Los nucleótidos se unen entre sí de forma
covalente.
5.2. Alelo: forma diferente de un gen en un locus determinado. Las características de una
sola copia de un gen específico, o de una sola copia de un lugar específico en un
cromosoma.
5.3. Amplificación: reacción en cadena de la polimerasa mediante la cual se generan
múltiples copias de ADN a partir de una región seleccionada del genoma, siempre y
cuando se conozca una parte de su secuencia de nucleótidos.
5.4. Ánodo: electrodo con carga positiva.
5.5. Calibración espacial: establece una relación entre la señal emitida por cada capilar y la
posición donde esa señal cae, la cual es detectada por la cámara CCD.
5.6. Calibración espectral: realiza una matriz matemática que corrige la sobreposición de
fluorescencias presentes en el espectro de emisión de un set de fluorocromos, detectadas
por la cámara CCD.
5.7. Cámara CCD: dispositivo que detecta y graba la información emitida por las moléculas
fluorescentes a medida que pasan por delante del láser.
5.8. Cátodo: electrodo con carga negativa.
5.9. Control: muestras que sufren el mismo procedimiento de forma paralela a las muestras
experimentales.
5.10. Control blanco de reactivos (NTC): control que consiste en un tubo sin muestra que
contiene todos los componentes utilizados en el procedimiento analítico utilizado excepto
la muestra.
5.11. Desnaturalizar: cambiar la conformación de una molécula. En el caso del ADN consiste
en la separación de la doble hélice como resultado generalmente de la aplicación de altas
temperaturas que inducen la ruptura de los enlaces o puentes de hidrógeno presentes.
5.12. Electroferograma: gráfico que representa los fragmentos de ADN separados por
electroforesis capilar de una muestra. Su representación se observa en forma de picos,
asignándole un número de alelo en base a la comparación con una escalera alélica.
5.13. Escalera alélica (allelic ladder): conjunto de fragmentos de ADN que representan alelos
comunes en una población determinada.
5.14. Escalera de peso molecular (size standard): reactivo que incluye distintos tamaños de
fragmentos de ADN esperados para asignar el tamaño a fragmentos desconocidos según
puntos de corrida.
5.15. Fluorescencia: tipo particular de luminiscencia, que caracteriza a las sustancias que son
capaces de absorber energía en forma de radiaciones electromagnéticas y luego emitir
parte de esa energía en forma de radiación electromagnética en una longitud de onda
específica.
5.17. Grupo de resultados (results group): componente dentro del Software 3500 Data
Collection que organiza las muestras y ajustes de usuario bajo un único nombre. Se le
llama un grupo de resultados porque es utilizado para nombrar, ordenar y personalizar
las carpetas en las cuales los archivos de datos de las muestras son almacenadas.
5.18. Microsatélites: secuencias repetidas en tándem, altamente polimórficas. Contiene una
secuencia consenso de 1-6pb repetida en tándem. A los polimorfismos se les llama STR
(short tandem repeat). Las repeticiones de 3-5pb son utilizadas como marcadores para
identificación genética.
5.19. Protocolo de instrumento (instrument protocol): parámetros del módulo de corrida y
la información del set de fluorocromos en un mismo archivo. Indica al analizador genético
las condiciones de electroforesis a utilizarse durante la corrida, donde la cámara CCD
debe colectar las emisiones de fluorescencia emitidas por los fluorocromos.
5.20. Registro de placa (Plate record): indica al instrumento la posición de las muestras en
una placa y el protocolo de instrumento a utilizar. Se utiliza para definir las posiciones de
los pozos, el nombre de las muestras, el tipo de muestra, el protocolo de instrumento

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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(módulo de corrida y set de fluorocromos), el grupo de resultados, el orden de las

inyecciones y reinyecciones.
5.21. Software 3500 Data Collection: este software cumple con las siguientes características:
recolecta los datos crudos de las corridas de electroforesis, genera archivos de muestras
(Sample files), permite al operador el control y monitoreo de la actividad del instrumento,
crea, importa y exporta los registros de placa. Permite editar los módulos de corrida,
realiza y evalúa las calibraciones y provee la interface entre el operador y la base de
datos.
5.22. Solución amortiguadora (buffer): solución química que mantiene un pH relativamente
constante, incluso con la adición de ácidos o bases fuertes.
6. RECURSOS
6.1. Tecnológicos
6.1.1.Vórtex
6.1.2.Minicentrífuga
6.1.3.Micropipetas de volumen variable
6.1.4.Termociclador
6.1.5.Centrífuga de placas
6.1.6.Analizador genético Applied Biosystems 3500xL y software asociado
6.1.7.Computadora
6.1.8.Impresora
6.2. Logísticos
6.2.1.Materiales
m. Equipo de protección personal (bata y guantes)

n. Marcadores permanentes
o. Tubos para microcentrífuga
p. Gradilla para tubos de microcentrífuga
q. Puntas para micropipeta de volumen variable con filtro para PCR
r. Placa de reacción de 96 pozos
s. Septa para placa de 96 pozos
t. Gradilla refrigerada
u. Retenedor de placa para analizador genético 3500/3500xL
v. Soporte de placa para analizador genético 3500/3500xL
w. Papel antiestático, Kimwipes o equivalente
x. Septa para contenedor de buffer de cátodo
6.2.2.Reactivos
g. Formamida altamente desionizada apta para electroforesis capilar

h. Size standard correspondientes a los Kits de amplificación utilizados
i. Polímero POP-4
j. Buffer del ánodo
k. Buffer del cátodo
l. Agua ultrapura esterilizada
6.2.3.Patrones y materiales de referencia
a. Los materiales de referencia consisten en las escaleras alélicas

correspondientes a los Kits de amplificación utilizados. El empleo de
patrones de referencia no aplica para este procedimiento.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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7. PUNTOS CRÍTICOS
7.1. Ejecutar los mantenimientos preventivos semanales, mensuales y trimestrales del equipo
con la regularidad que se establece en el Formulario FOR-DTC-LAB-112 Mantenimiento
preventivo del analizador genético.
7.2. Antes de colocar dentro del equipo una placa ensamblada asegurarse que los pozos de
la placa estén alineados con los agujeros de la septa para evitar que se dañen los
capilares y que la cubierta del ensamblado esté debidamente encajada en la base.
7.3. Verificar que todos los componentes del equipo estén colocados adecuadamente antes
de iniciar una corrida.
7.4. Evitar el contacto directo de piel y mucosas con el polímero, buffers y formamida.
7.5. Todo proceso de tipificación de ADN debe desarrollarse en un área designada para su
propósito. El uso de reactivos, materiales y equipo debe ser única y exclusivamente para
esta área.
7.6. El área designada para la tipificación debe permanecer a una temperatura entre 15-30oC
y humedad relativa de entre 20-80%. Estos parámetros deberán registrarse en el
8. ACTIVIDADES
8.1. Generalidades
8.1.1. Verificar el estatus de los buffers de cátodo y ánodo y del polímero.

Reemplazarlos de ser necesario y registrarlo en el formulario FOR-DTC-LAB-
112 Mantenimiento preventivo del analizador genético:
a. Ubicarse en el Área Central de Operación -Dashboard- del Software
3500 Data Collection. Imagen 1.
b. Elegir la opción Refresh y esperar a que se actualice la información
relacionada a los consumibles instalados en el equipo.
c. Verificar el estatus de los consumibles.
d. De ser necesario reemplazar el polímero y/o los buffers:
i. Proceder a desinstalar los contenedores que están dentro del
equipo.
Nota: descartar el contenido de acuerdo con el Instructivo INS-DTC-LAB-000
Limpieza del laboratorio de genética.
ii. Instalar contenedores nuevos.
iii. Elegir la opción Refresh nuevamente y esperar a que se
actualice nuevamente la información relacionada a los
consumibles.
e. De ser necesario reemplazar el polímero, incluyendo el acumulado en
los canales y otras partes internas el equipo- proceder de la siguiente
forma:
i. Elegir la opción Maintain Instrument que se encuentra en la
parte superior del Dashboard.
ii. Se desplegará un listado de opciones disponibles en la ventana
Maintenance, elegir la opción Maintenance Wizards.
iii. Elegir Replenish Polymer de entre las opciones desplegadas.
iv. Seguir los pasos del asistente.
Nota: utilizar este asistente únicamente cuando el polímero que se encuentra
instalado tiene al menos siete días dentro del equipo, sin que el equipo haya sido
utilizado durante todo ese tiempo o cuando a criterio del perito analista sea
necesario, de lo contrario proceder como se describe en el inciso 8.1.1.d.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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Imagen 1
Área Central de Operación del Data Collection –Dashboard-
Medidores
Información del Botón Start

instrumento Pre-Heat
Botón
Refresh
Consumibles
8.1.2. Verificar visualmente que el nivel del fluido en el contenedor del buffer del ánodo
y del cátodo sea el adecuado. Reemplazarlos según se describe en el inciso
8.1.1.d de ser necesario y registrarlo en el formulario FOR-DTC-LAB-082
Bitácora de uso de los equipos. Imagen 2.
Imagen 2
Verificación de volúmenes
Línea de llenado
Línea de llenado
8.1.3. Verificar visualmente que no existan burbujas en el bloque de la bomba y dentro

de los canales antes y después del arreglo de capilares, si es necesario
proceder a eliminarlas:
a. Elegir la opción Maintain Instrument que se encuentra en la parte
superior del Dashboard.
b. Se desplegará un listado de opciones disponibles en la ventana
Maintenance, elegir la opción Maintenance Wizards.
c. Elegir Remove Bubbles from the polymer pup de entre las opciones
desplegadas.
d. Seguir los pasos del asistente.
8.1.4. Iniciar el pre-calentamiento del horno del analizador genético, al menos 30
minutos antes de iniciar una corrida, eligiendo la opción Start Pre-Heat que se
encuentra en el Dashboard. Imagen 1.
Nota: este paso es opcional, no afecta los resultados obtenidos pero permite reducir los tiempos
analíticos.
8.1.5. Verificar que un termociclador se encuentre encendido para la incubación de la
placa como parte de la desnaturalización, si es necesario proceder a
encenderlo.
8.1.6. Registrarse en el formulario FOR-DTC-LAB-082 Bitácora de uso de los equipos.
8.1.7. Completar el formulario FOR-DTC-LAB-116 Control de muestras para
tipificación.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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Nota 1: incluir como mínimo una escalera alélica por inyección (1 inyección 24 pozos).
Nota 2: dentro de una inyección no debe quedar ningún pozo vacío para evitar que se produzca un
arco voltáico, por lo tanto en cualquier pozo donde no se prevea colocar muestras, controles o
escaleras alélicas, deberá colocarse un mínimo de 10 µL de formamida o de la mezcla preparada
para la tipificación.
8.1.8. Descongelar la formamida y otros reactivos como el Size Standard, en los casos
en que aplique. Mezclar en vórtex y centrifugar.
8.1.9. Nota 1: tomar en cuenta que para todo este procedimiento mezclar en vórtex y centrifugar implica
mezclar durante 3-6 segundos aproximadamente en vórtex y luego llevar a la microcentrífuga
durante 2-4 segundos aproximadamente.
Nota 2: el orden de estos pasos queda a criterio del perito analista de acuerdo con las necesidades
detectadas en el momento de proceder a ejecutarlos.
8.2. Preparación de la placa para análisis
8.2.1. Combinar en un tubo para microcentrífuga los componentes de la mezcla para

la tipificación, de acuerdo al cálculo realizado en el formulario FOR-DTC-LAB-
116 Control de muestras para tipificación respectivo.
Nota 1: la cantidad total de reacciones debe contemplar cantidad total de muestras, controles,
escaleras alélicas y la cantidad de reacciones adicionales que el perito analista considere
necesarias, tomando en cuenta la pérdida de volumen que generalmente ocurre durante el pipeteo
sucesivo. Se recomienda agregar 1 reacción extra por cada 24 muestras.
Nota 2: el volumen de cada componente debe responder al total de reacciones a utilizar en relación
al volumen necesario de cada componente por reacción, de acuerdo con los parámetros
establecidos para cada kit en el Formulario FOR-DTC-LAB-116 Control de muestras para
tipificación.
Nota 3: si se prepara simultáneamente más de una mezcla de reacción, rotular cada uno de los
tubos utilizados para realizar las mezclas.
Mezclar en vórtex y centrifugar el tubo con la mezcla.
8.2.2. Distribuir en una placa no óptica el volumen de la mezcla que será utilizada por
pozo.
8.2.3. Añadir 1 µL del producto de PCR y escaleras alélicas en los pozos respectivos,
según formulario FOR-DTC-LAB-076 Control de muestras para cuantificación
de ADN.
8.2.4. Colocar la septa en la placa a inyectar. Imagen 3.
Nota: centrifugar la placa durante 10 segundos aproximadamente para eliminar burbujas si a criterio
del perito analista es necesario.
8.2.5. Proceder a realizar el shock térmico como se describe a continuación:
a. Colocar la placa en un termociclador y elegir el programa “DESNAT 3 MIN”
(95oC por 3 minutos).
Nota: no cerrar el termociclador.
b. Colocar la placa durante 3 minutos en una gradilla refrigerada.
Imagen 3
Placa para tipificación y septa
Septa
Placa de reacción
8.3. Ensamblado de la placa y ubicación dentro del Analizador Genético
8.3.1. Colocar la placa en el soporte de placa y sujetar con el retenedor de placa.

Imagen 4.
Nota: verificar que los agujeros del retenedor estén alineados con los de la septa.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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Imagen 4
Ensamblado de la placa con septa
Retenedor de placa
Placa de reacción con septa
Soporte de placa
8.3.2. Presionar el botón Tray en el frente del analizador genético y esperar a que el
automuestreador -autosampler- se mueva hasta la parte delantera y se
detenga.
8.3.3. Abrir la puerta del analizador genético y colocar la placa ensamblada con la
etiqueta hacia el frente, en la posición A o B del autosampler.
8.3.4. Cerrar la puerta del instrumento, con lo que el autosampler volverá a su posición
original.
8.4. Creación de una placa nueva
8.4.1. En el Software 3500 Data Collection, en el Dashboard presionar el botón Create

New Plate.
8.4.2. Verificar y/o completar los campos de la ventana Plate Details. Imagen 5.
a. En la celda Name Ingresar el nombre de la placa designado en el formulario
FOR-DTC-LAB-116 Control de muestras para tipificación respectivo, el cual
debe incluir la fecha seguida de guion bajo y las iniciales del perito -ej.
13062016_ESR-.
b. En la celda Number of Wells marcar 96.
c. En la celda Plate Type seleccionar HID.
d. En la celda Capillary Lenght seleccionar 36 en la celda.
e. En la celda Polymer seleccionar POP4.
f. En la celda Owner ingresar INACIF.
g. Elegir Save Plate y posteriormente Save.
h. Elegir Assign Plate Contents. Imagen 6.
Imagen 5
Ventana Plate Details

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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8.5. Asignación del contenido de la placa
8.5.1. Para asignar el nombre de la muestra, hacer click sobre el pozo, escribir el
nombre y presionar Enter.
8.5.2. Nota: para información que se repite en un cierto número de pozos, podrá ingresarse la misma en
el primero de los pozos, sombrearse toda el área de interés y utilizando la combinación CTRL D se
copiará y pegará la misma información en toda el área. Modificaciones adicionales podrán ser
realizadas posteriormente.
8.5.3. Especificar el ensayo que se estará utilizando para la corrida, según el kit
empleado, en la parte inferior izquierda Assays -puede agregarse un ensayo
de la librería o crear uno nuevo, de acuerdo con las especificaciones del Kit de
amplificación utilizado.
8.5.4. Seleccionar los pozos para los cuales se estará utilizando el ensayo y habilitar
la casilla al lado del nombre del ensayo.
8.5.5. Crear o elegir un grupo de resultados en Results Groups, que deberá incluir el
nombre según modelo del inciso 8.4.2.a y el destino del mismo
8.5.6. Seleccionar los pozos de las muestras que deben ser guardadas en el Results
Groups elegidos y habilitar la casilla al lado del nombre del mismo.
8.5.7. En la parte inferior derecha, presionar « sobre Customize Sample Info.
8.5.8. Seleccionar en Sample Type el tipo de muestra correspondiente para cada pozo
-Sample, Positive Control, Negative Control o Allelic Ladder-.
Nota: estos parámetros también puede ser establecidos posteriormente durante el análisis e
interpretación de los electroferogramas, en el caso que no se especifiquen los Allelic Ladder el
programa brindará la opción de analizar sin dicha especificación.
8.5.9. Elegir Save Plate.
Imagen 6
Ventana Assign Plate Contents
Nombre de la
muestra
Asignar ensayo
y grupo de
resultados
Asignar tipo de
muestra
Ligar la placa
8.6. Inicio de corrida
8.6.1. En la ventana Assign Plate Contents elegir Link Plate for Run. Imagen 6.
8.6.2. Presionar OK cuando el software despliegue un mensaje indicando que la placa
ha sido cargada exitosamente.
8.6.3. Verificar que la posición en la que se colocó la placa (A o B) en el equipo,
coincide con la posición en la que se encuentra ligada según en el Software
3500 Data Collection. De ser necesario:

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
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a. Para desligar una placa presionar el botón Unlink y para ligar una placa
presionar el botón Link.
a. Para cambiar de posición la placa (A↔B) presionar sobre el ícono
b. Para crear, modificar o eliminar una lista de inyección seleccionar Create
Injection List.
c. Seleccionar Start Run para iniciar la corrida. Imagen 7.
Imagen 7
Pantalla Plate for Run
Nombre de corrida
Ligar o Desligar la placa
Cambiar de posición la placa
Información de
consumibles
Crear lista de
inyección
Iniciar corrida
8.7. Monitoreo de corrida
8.7.1. La pantalla Monitoreo de corrida es desplegada automáticamente después de

iniciar la corrida. La inyección activa se puede observar resaltada de color
verde. Imagen 8.
8.7.2. Para modificar la lista de inyección (pausar, abortar, reinyectar o duplicar) elegir
los botones correspondientes.
Imagen 8
Pantalla Monitoreo de Corrida
Inyección activa
Lista de inyecciones
Pausar Abortar Reinyectar Duplicar Inyección activa

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
Página __ de __
8.8. Verificación de la corrida
8.8.1. Para verificar que la inyección ha sido completada deberá observarse que dicha
inyección será marcada con un check blanco en fondo azul.
8.8.2. Si el software detecta un problema de calidad con las muestras, la inyección
también estará marcada con una bandera gris.
8.8.3. Si el perito analista considera necesario verificar la calidad de las muestras de
la inyección, previo al análisis de los datos, observar en la parte inferior derecha
la tabla de calidad de las muestras Flag Table. Tabla 1.
Nota: deberán ser evaluados y caracterizados por el perito posteriormente utilizando el Software
GeneMapper ID-X.
Tabla 1
Interpretación de la Tabla de Banderas
Bandera Interpretación
Todas las muestras pasaron
Al menos una muestra está en el
rango de sospecha y necesita
revisión
Al menos una muestra está fuera
de escala o en el rango de
sospecha
8.8.4. Si el perito analista considera necesario observar los datos crudos, seleccionar
una fila en la tabla de calidad y presionar la pestaña Sample que se encuentra
en la ventana Instrument Run Views. Imagen 9.
Imagen 9
Datos Crudos de la Tipificación
8.8.5. Si el perito analista considera necesario monitorear u observar las condiciones

de la corrida en función del tiempo, seleccionar la pestaña EPT -ElectroPhoresis
Telemetry-. Imagen 10.
Nota: las condiciones de corrida incluyen la potencia del láser, temperaturas, voltaje de la
electroforesis, entre otras.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
Página __ de __
Imagen 10
Pestaña EPT
9. REFERENCIAS
9.1. Life Technologies Corporation. 2010. Applied Biosystems 3500/3500xL Genetic Analyzer
User Guide.
9.2. Butler, J. 2010. Fundamentals of Forensic DNA Typing. Elsevier Academic Press. USA.
500 pp.
10. REGISTROS

tipificación de ADN
ambientales
Mantenimiento preventivo del
analizador genético

La Dirección General, su representante autorizado o el personal designado por ésta, son los
responsables de resolver cualquier aspecto relacionado con éste procedimiento, que no fue
considerado en el mismo.

• Se agregó el inciso Puntos Críticos.
Introducción; 4. Responsables; 6. Glosario; 7.
2 Todo el documento Recursos; 9. Actividades; 10. Referencias; 11.
Registros.
• Se eliminaron los siguientes incisos: 5. Lista de
distribución; 8. Precauciones.

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
Página __ de __
13. ANEXOS
Anexo 1
Partes del Analizador Genético 3500xL
Puerta de horno
Marco del arreglo de capilares
Bloque calentador de
la celda de detección
Depósito de condensación
de horno
Placa
Contenedor de buffer
de cátodo (CBC)
Automuestreador
Mecanismo de bloqueo del arreglo
Bomba de suministro
de polímero (PDP)
Trampa de agua
Palanca para instalar/remover
la bolsa de polímero
Bolsa de polímero
Válvula de chequeo (CV)

Bandeja de goteo/derrame
Contenedor de buffer de ánodo (ABC)
Válvula de aguja del buffer
Parte del equipo Función

Permite la separación por electroforesis de fragmentos de ADN marcados con
fluorocromos. Esta es una unidad reemplazable compuesta de 24 capilares de sílica.
Sostiene las placas de muestras (A y B) y el contenedor de buffer de cátodo. Se mueve
Automuestreador
para alinear las muestras y el contenedor de buffer de cátodo con el arreglo de
(autosampler)
capilares.
Bandeja de
Permite la fácil limpieza en caso exista un goteo o derrame de polímero o buffer de
goteo/derrame
ánodo.
(drip tray)

Versión: 02

FRAGMENTOS DE ADN
Página __ de __
Parte del equipo Función

Bloque calentador de la Mantiene la celda de detección en su lugar para la detección del láser. Mantiene la
celda de detección temperatura de la celda de detección en 50°C.
Incluye la recámara de desplazamiento de la bomba, la cámara de polímero, el sello
Bloque de la bomba del pistón de agua, el puerto del arreglo, el bloque inferior del polímero y la válvula de
chequeo.
Bloque inferior del Contiene la válvula del buffer, el electrodo del ánodo y el contenedor del buffer del
polímero ánodo.
Bolsa de polímero Contiene el polímero necesario para llevar a cabo la electroforesis.
Bomba de suministro de Bombea el polímero hacia el arreglo de capilares para ejecutar los procedimientos de
polímero mantenimiento.
Contenedor de buffer de Contiene buffer de corrida 1X que conduce la corriente eléctrica y mantiene el pH
ánodo correcto.
Contenedor de buffer de Contiene buffer de corrida 1X y agua para el mantenimiento, limpieza y desecho del
cátodo arreglo de capilares.
Depósito de
Colecta la condensación producida por el horno.
condensación del horno
Horno Mantiene uniforme la temperatura del arreglo de capilares.
Mecanismo de bloqueo
Mantiene el arreglo de capilares en el lugar adecuado.
de arreglo
Palanca para
Permite asegurar la bolsa de polímero una vez es instalada y la liberación de la misma
instalar/remover la bolsa
para ser removida.
de polímero

8.0 Entrega de cadáveres identificados
Se considera la última fase del proceso, cuyo propósito es el logro de la identificación de

aquellos cadáveres que ingresaron a cada sede pericial del INACIF, en condición de “XX”.
XX y/o “presunto nombre” y que a través de los diferentes métodos y disciplinas forenses
se logró establecer su identidad.
Criterios a considerar en la entrega de cadáveres identificados:
• Habiendo confirmado la identificación forense del individuo, pero no existe

identificación registral (no está inscrito en el RENAP), se debe elaborar el certificado
de defunción con el nombre proporcionado y elaborar el acta administrativa
correspondiente, advirtiendo al deudo del riesgo que corre de no poder inhumar el
cadáver en el cementerio si no logra la inscripción de la defunción en el RENAP. En
las mismas circunstancias, si el cadáver es inscrito como “XX”, debe ser inhumado
por el INACIF.
• Si se ha identificado fehacientemente a un cadáver y éste se encuentra en resguardo en

otra sede y se presenta el familiar a reclamarlo, debe realizarse la gestión de entrega de
cadáver, comunicar y enviar información a la sede que derivó el cadáver para el cierre
del caso en el Sistema de Información Nacional Forense -SINAF- de INACIF.
Para la entrega de cadáveres identificados se ha establecido la ruta según se muestra en el

siguiente esquema y procedimientos:

Versión: 01
RECEPCIÓN E INFORMACIÓN A
USUARIOS
Página 143 de 160
1. OBJETIVO
Establecer la metodología en la atención del usuario para la prestación de servicios de Información

sobre cadáveres allegados a las sedes periciales del Instituto Nacional de Ciencias Forenses INACIF
en Guatemala, asegurando una atención oportuna con calidad y calidez.
2. ALCANCE
Este procedimiento es de observancia para el personal de atención a usuarios.

Técnico Forense de atención a
usuarios
Técnico Forense 1. Realizar cada una de las actividades

1.
Técnico Forense en Tanatología
Auxiliar Administrativo
4. GLOSARIO

4.2 Cadáver No Reclamado: El Cadáver que es Reconocido pero los familiares NO
pueden retirarlo de la Institución por diferentes razones.
4.3 Cadáver xx, reconocido, no identificado y no entregado: Cadáver que es
identificado indiciariamente por su familia pero que no tramitó documento de identidad,
o que no fue inscrito en el Registro Civil de RENAP.
4.4 Inhumación: Es el proceso de enterrar o dar sepultura a los cadáveres.
4.7 Semaforización: Diferenciar mediante colores los tiempos para inhumar los
cadáveres.
4.8 Usuario: Organización, entidad o persona que recibe el servicio y/o familiar –
acompañante.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.1 Sistema de Información Nacional Forense -SINAF-
5.1.2 Sistema AFIS – RENAP.

Versión: 01
USUARIOS
Página 144 de 160
5.2 Logísticos
5.2.1 Materiales
f. Insumos de oficina.
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Debe realizarse un adecuado manejo de la documentación e información relativa a

cada caso.

Técnico Forense
de atención a
usuarios
Técnico Forense
Técnico Forense
en Tanatología
Peritos
Profesionales
(I, II y III) en:

Tanatología
Forense y
Clínica Forense; Atención de usuarios
Medicina Área • Realiza saludo de cortesía.
Patología 7.1 • Indaga sobre el motivo de la visita a la sede pericial.
Forense y • De acuerdo a lo expresado por la persona usuaria, realiza
Clínica Forense; las distintitas actividades de información y gestión.
Medicina Área
Patología
Forense y
Clínica Forense;
Medicina,
Tanatología
Forense y
Clínica Forense;
Legal,
Tanatología y
Clínica Forense.
Auxiliar
Administrativo

Versión: 01
USUARIOS
Página 145 de 160

Información y gestión para casos de cadáveres
identificados
• En los casos de usuarios que se presentan a reclamar el
cadáver de su familiar, indaga sobre los nombres y
apellidos de la persona fallecida.
Técnico Forense • Revisa en tabla de control de ingreso de cadáveres, así
de atención a como en la base del Sistema de Información Nacional
usuarios Forense -SINAF- para verificar que se encuentra el
cadáver en las instalaciones.
Técnico Forense • Verifica autenticidad de la identificación del cadáver
solicitando el DPI de la persona fallecida en mayor de
Técnico Forense edad y certificados de nacimiento para menores o sub
en Tanatología adultos.
• Si confirma que la persona fallecida se encuentra en la
Arqueólogo sede pericial, indaga sobre el parentesco y solicita el DPI
Forense original del familiar reclamante. En el caso que existan
dudas del parentesco debe solicitar apoyo con personal
Peritos técnico dactiloscopista para verificar en la autenticidad en

Profesionales el AFIS del RENAP.

(I, II y III) en: • En caso que no tenga el DPI del fallecido, solicita la
Tanatología entrega del certificado de DPI e indica al usuario que
Forense y debe tramitarlo en oficinas del RENAP. Si no tramitó DPI
Clínica Forense; solicita que tramite la certificación de asiento de cédula.
7.2
Medicina Área • Para el caso de menores indica que debe tramitar la
Patología certificación de nacimiento.
Forense y • Recibe documentación pertinente, realiza copias y
Clínica Forense; devuelve originales al familiar.
Medicina Área • Elabora registro de reclamo, identificación y entrega de
Patología cadáver FOR-DTC-MF-056, indaga con el familiar datos
Forense y específicos del familiar.
Clínica Forense; •
Medicina, • Informa al usuario de los requisitos, trámites y tiempo
Tanatología para entrega del cadáver.
Forense y
Clínica Forense; En caso de cadáveres identificados no reclamados:
Legal, • Difusión de cadáveres identificados no reclamados y
Tanatología y cadáveres inhumados.
Clínica Forense. • Gestiona a través de medios radiales o en televisión que
prestan servicio social, el anuncio de cadáveres
Técnico en identificados en RENAP/CAFIS y que no han sido
Dactiloscopia reclamados.
• Si no se logra obtener el reclamo de cadáveres, se inscribe
en el RENAP para darle de baja y se realiza procedimiento
de inhumación.
Gestiona la publicación el listado de cadáveres inhumanos a
través de periódicos.
Información y gestión para casos de cadáveres
Forense - Regional
Medicina y Clínica
Técnico Forense ingresados como XX o menores de edad y recién nacidos.

Metropolitana
de atención a • Indaga nombres y apellidos del fallecido.

usuarios 7.3 • Revisa en Tabla de control de ingreso de cadáveres, así
como en la base del Sistema de Información Nacional
Técnico Forense Forense -SINAF-, para verificar que se encuentra el
cadáver en las instalaciones.

Versión: 01
USUARIOS
Página 146 de 160

Técnico Forense • Ante coincidencia con un cuerpo ingresado como xx en
en Tanatología edad y fecha de desaparición,:
• Indaga sobre su parentesco.
• Informa al usuario la necesidad de disponibilidad de
tiempo y el conocimiento de la persona que busca
para remitirle a una entrevista técnica.
• Informa al personal responsable de turno que en la
sala se encuentra un usuario para entrevista.
Caso con resultado de entrevista Positiva:

• Indaga el parentesco y se solicita el DPI original del
familiar reclamante. En el caso que existan dudas del
parentesco debe solicitar apoyo con personal técnico
dactiloscopista para verificar en la autenticidad en el AFIS
del RENAP.
• Solicita el DPI o cédula original para adultos.
• Para el caso de menores de edad solicita el certificado de
nacimiento en original y reciente del fallecido, en el caso
que no lo tenga se solicita certificado de DPI que lo deben
tramitar en RENAP.
• Para los casos en los que el fallecido no tramitó el DPI
para mayores de edad se solicita certificación de asiento
de Cédula, para menores de edad se solicita certificación
de Nacimiento.
• Toma fotocopias y se devuelve originales al familiar.
• Elabora registro de reclamo, identificación y entrega de
cadáver FOR-DTC-MF-056 y solicita al familiar
reclamante que revise y firme el formulario.
• Finalmente procede a capturar la huella dactilar del
usuario reclamante.
• Registra el libro de actas administrativas de
reconocimiento e identificación de cadáveres ingresados
a la morgue.
• Informa al usuario de los requisitos, trámites y tiempo
para entrega del cadáver.
Casos de especímenes o neonatos nacidos muertos.
• Solicita informe de bomberos sobre el levantamiento del

neonato.
Técnico Forense • Indaga el parentesco y solicita el DPI original del familiar
de atención a reclamante.
usuarios • Realiza fotocopias y devuelve originales al familiar.
• Elabora registro de reclamo, identificación y entrega de
7.4
Técnico Forense cadáver FOR-DTC-MF-056 y solicita al familiar
reclamante que revise y firme el formulario.
Técnico Forense • Registra el libro de actas administrativas de
en Tanatología reconocimiento e identificación de cadáveres ingresados
a la morgue.
• Informa al usuario de los requisitos, trámites y tiempo
para entrega del cadáver.

Versión: 01
USUARIOS
Página 147 de 160

Gestión de documentación de cadáveres identificados.
• Registra el libro de cadena de custodia de documentos.
• En el caso que aplique, entrega al Receptor de cadáveres
los documentos del caso para alimentar el expediente del
cadáver y dar continuidad en morgue (certificado de
defunción) o lo realiza:
• Registro de reclamo, identificación y entrega de
cadáver.
• Fotocopia del documento de identidad de la persona
fallecida.
• Fotocopia del documento de identificación del

Técnico Forense
familiar reclamante.
de atención a
Gestión de documentación de cadáveres XX o
usuarios
reconocidos no identificados.
7.5 • Gestiona el libro de cadena de custodia de documentos.
Técnico Forense
• En el caso que aplique, entrega al Receptor de cadáveres
los documentos del caso para alimentar el expediente del
Técnico Forense
cadáver y dar continuidad en morgue (certificado de
en Tanatología
defunción) con la necropsia y certificado de defunción, la
documentación entregada es:
• Registro de reclamo, identificación y entrega de
cadáver.
• Entrevista orientadora para identificar persona
fallecidas para XX.
• Informe de bomberos, para el caso de neonatos.
• Registro civil de nacimiento o certificado de
nacimiento.
• Fotocopia del documento de identificación del
familiar reclamante.
Información y entrega de documentación para retiro de
cadáveres
• Finalizada la necropsia del cadáver obtiene los
documentos de certificación de defunción, carencia o no
de enfermedades infectocontagiosas.
• Realiza dos fotocopias del certificado de defunción y una

Técnico Forense del certificado de carencia o no de enfermedades
de atención a infectocontagiosas.
usuarios • Hace entrega de la documentación al familiar de:
certificado de defunción (original y copia).
7.6
Técnico Forense • Constancia de carencia o no de enfermedades
infectocontagiosas, boleta de vehículo para egreso del
Técnico Forense cadáver.
en Tanatología • Informa al familiar de los trámites a seguir.
• Adjunta al expediente del cadáver la fotocopia del
certificado de defunción y fotocopia de la constancia de
carencia o no de enfermedades infectocontagiosas.
• Hace entrega del expediente a Recepción de Cadáveres
para que procedan con el reconocimiento físico del
fallecido y entrega del mismo al familiar.

Versión: 01
USUARIOS
Página 148 de 160

Información a investigadores de MP y DICRI
• Solicita al investigador su gafete de identificación.
Indaga datos de la persona fallecida.

•
• Consulta en tabla de control de ingreso de cadáveres y
Técnico Forense
en la base del Sistema de Información Nacional Forense
de atención a
-SINAF-, para verificar que se encuentra el cadáver en
usuarios
las instalaciones.
7.7 • Proporciona siguiente información: número de patología,
Técnico Forense
nombre con el que fue identificado, edad, número de
identificación del fallecido, causa de muerte, nombre del
Técnico Forense
médico que practicó la necropsia, fecha de retiro del
en Tanatología
cadáver, nombre del familiar que retira, parentesco,
documento de identificación, edad, número de teléfono y
dirección del familiar reclamante.
Atención telefónica
Medicina y Clínica Forense -
Técnico Forense • Atiende llamadas y transfiere a quien corresponda.

de atención a • Brinda información referente a: ingreso de cadáveres,

Metropolitana
usuarios posibles cruces con XX, terminación de la necropsia para

Regional
captura de huellas dactilares (morgue central),

7.8
Técnico Forense finalización de necropsia para entrega de cadáver,
obtención de copia de protocolo de necropsia, fiscales
Técnico Forense que realizaron el levantamiento o investigación, de los
en Tanatología servicios periciales que se realizan en la institución, entre
otros según corresponda.
8. CÁLCULOS
N/A
Nombre Código
Registro de reclamo, identificación y entrega de cadáver FOR-DTC-MF-056
Libro de actas administrativas de reconocimiento e identificación de
N/A
cadáveres ingresados a la morgue
Tabla de control de ingreso de cadáveres N/A
Formulario de recolección de datos ante mortem FOR-DTC-MF-000
Libro de cadena de custodia de documentos N/A
Certificado de carencia o no de enfermedades infectocontagiosas N/A

Versión: 01
USUARIOS
Página 149 de 160
10. REFERENCIAS
32-2006.
No.002-2007
10.4 Reglamento de cementerios y tratamiento de cadáveres, Acuerdo Gubernativo N° M de S.P
y A.S. 21-70 tomo 91, pág.289. artículos 35 y 36.
N/A
12. ANEXOS
REQUISITOS Y TRÁMITES PARA ENTREGA DE CADÁVERES
Requisitos y trámites para entrega de cadáveres identificados adultos o menores de edad:
❖ Documento de identificación del fallecido.

❖ Documento de identificación del familiar que reclama.
❖ Quien reclama el fallecido debe proporcionar datos de edad, teléfono y dirección.
❖ Registrar la defunción en RENAP con el certificado de defunción.
❖ Proporcionar los datos de la funeraria.
❖ Realizar reconocimiento físico del fallecido.
❖ Ingreso de la funeraria por el cuerpo del fallecido.
Requisitos y Trámites para Entrega de Cadáver de Recién Nacido:
❖ Registro de Nacimiento, si no lo tienen realizar el Registro en RENAP y pedir una Certificación de

Partida de Nacimiento
❖ Documento de Identificación del familiar que reclama
❖ Quien reclama el fallecido debe proporcionar datos de: edad, teléfono, dirección.
❖ Registrar la defunción en RENAP con el Certificado de Defunción
❖ Proporcionar los datos de la Funeraria.
❖ Realizar reconocimiento físico del fallecido
❖ Ingreso de la funeraria por el cuerpo del fallecido
Requisitos y Trámites para Entrega de Mortinatos:
❖ Informe de Bomberos
❖ Documento de Identificación del familiar que reclama
❖ Quien reclama el fallecido debe proporcionar datos de: edad, teléfono, dirección.

Versión: 01
USUARIOS
Página 150 de 160
Requisitos para Entrega de Cadáveres Extranjeros
❖ Documento de Identificación (Pasaporte)

❖ Documento de Identificación del familiar o Cónsul que reclama
❖ Diligenciar Acta Administrativa para dar fe que se hace responsable del retiro del cuerpo del fallecido.
Requisitos para verificar si un desaparecido se encuentra en sede pericial
❖ Documento de identificación de la persona que acude por Información

❖ Proporcionar datos de la persona que buscan, como son:
o Nombres completos
o Edad
o Fecha en la que lo vieron por última vez,
o Lugar en donde lo vieron
❖ Importante que para pasar a la entrevista y revisar fotografías se cuente con información del físico de
la persona que buscan
❖ Cuando hay fallecidos que tengan mínimas coincidencias se realizará Entrevista Orientadora para
descartar o confirmar el reconocimiento con la persona que buscan, en esta entrevista el usuario debe
proporcionar información como:
o Nombres completos,
o Número del documento de identificación,
o Edad,
o Fecha en la que lo vieron por última vez,
o Lugar en donde lo vieron,
o prendas que llevaba,
o información sobre tatuajes, cicatrices, lunares, dentadura entre otros datos que hacen parte de
la entrevista.
o En lo posible fotografía
o En lo posible registro dental
o En lo posible documento que tenga huella de la persona que buscan.

Versión: 01
RECONOCIMIENTO, RECLAMO Y
ENTREGA DE CADÁVERES
Página __ de __
1. OBJETIVO
Establecer los lineamientos para la entrega de cadáveres a las personas usuarias que reclama el
mismo.
2. ALCANCE
El procedimiento aplica a los cadáveres que son remitidos por autoridad competente a las sedes
periciales del Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala -INACIF-, para realización de
necropsia. El procedimiento abarca la recepción para ingreso a sala de necropsias, su resguardo
posterior a la necropsia y entrega del cadáver a la persona que reclama el mismo.

Técnico Forense
1. Realizar cada una de las actividades conforme
1. Técnico Forense en Tanatología
lo describe el procedimiento.
Auxiliar Administrativo
4. GLOSARIO

4.2 Certificado de defunción: Documento público que se expide para acreditar la
defunción de todo individuo. En él se certifican las causas y circunstancias de muerte
de una persona
cadáveres.
acompañante.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos
5.1.2 Sistema AFIS – RENAP.

Versión: 01
Página __ de __

5.1.4 Impresora.
5.2 Logísticos
5.2.1 Camillas
5.2.2 Equipo de protección personal
5.2.3 Insumos de oficina
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Todos los cadáveres deben ser tratados y manejados como fuente de patógenos, por
lo que deben observarse las precauciones universales de bioseguridad.

Reconocimiento y reclamo de cadáveres identificados en
atención a usuarios
• El personal técnico y administrativo (según sede pericial),
son los responsables de atender a los usuarios quienes
deben:
• Atender el requerimiento de la persona que reclama el
cadáver.
• Buscar el nombre de la persona fallecida en el Sistema
de Información Nacional Forense -SINAF- y en la hoja

Técnico Forense
electrónica de control de cadáveres para verificar que el

de Atención a
cadáver se encuentra dentro de las instalaciones de la
Usuarios
sede pericial.
• Informar a la persona usuaria si el cadáver ya fue
Técnico Forense
trasladado e ingresado a la sede y si ya fue realizada
7.1
la necropsia.
Técnico Forense
• Solicitar los documentos de identificación del occiso y
en Tanatología
de la persona que se hará responsable de reclamar el
cadáver, para integrar al expediente.
Auxiliar
• Fotocopiar los documentos de identificación
Administrativo
proporcionados.
• Ingresar en el Sistema de Información Nacional Forense
-SINAF- los datos de los documentos de identificación e
imprimir el formulario de Registro de Reclamo,
Identificación y Entrega de Cadáver (FOR-DTC-MF-056).
• Gestionar y/o realizar entrevista al usuario para
obtener los datos del formulario de Registro de
Reclamo, Identificación y Entrega de Cadáver (FOR-
DTC-MF-056).

Versión: 01
Página __ de __

• Solicitar al deudo la revisión de la información
consignada en el formulario de Registro de Reclamo,
Identificación y Entrega de Cadáver (FOR-DTC-MF-
056) su firma y huella dactilar.
• Entregar el expediente de reclamo de cadáver al
Técnico Forense en recepción de cadáveres, para
integrarlo al expediente y trasladarlo al Perito
Profesional de la Medicina que realizó la necropsia
para que elabore el certificado de defunción y la hoja
de traslado de cadáveres (carencia o no de
enfermedades infectocontagiosas).
• Entregar al deudo los documentos debidamente
completados:
• Certificado de Defunción original,
• Formulario de Hoja de Traslado de Cadáveres
(carencia o no de enfermedades infectocontagiosas).
• Instruir al usuario del tiempo que la ley establece para
inscribir el Certificado de Defunción en el Registro
Nacional de las Personas -RENAP-
• Entregar al usuario el formulario en blanco de
identificación del vehículo para retiro de cadáveres,
para que anote la información requerida.
• Adjuntar el formulario de identificación del vehículo al
expediente de egreso del cadáver y trasladarlo a
recepción de cadáveres.
• Actualizar la información de la hoja electrónica de
control de cadáveres.
Entrega de cadáveres
• Ingresa datos de identificación del cadáver y de la
persona que reclama el mismo en el Sistema de
Información Nacional Forense -SINAF- y en el libro de
registro de control diario de ingreso y egreso de
cadáveres.
• Imprimir la boleta de egreso del cadáver generada por el
SINAF.
• Trasladar el cadáver del cuarto frío a la sala de entrega

de cadáveres.
• Solicitar al usuario que se dirija a la sala de entrega de
Técnico Forense
cadáveres.
7.2 • Verificar el dato de identificación del vehículo que retirará
Técnico Forense
el cadáver y, de la persona responsable de reclamar el
en Tanatología
cadáver, utilizando la información del formulario de
vehículo extendido en Atención a Deudos.
• Permite el ingreso de la persona responsable del reclamo
del cadáver a la sala de entrega de cadáveres y exponer
el rostro del cadáver o, en su defecto, la característica
individualizante que permitió la identificación para que el
deudo verifique que se le está entregando el cadáver que
ha reconocido.
• Solicita a la persona responsable del reclamo del cadáver
que firme la cadena de custodia y la boleta de egreso de
cadáver.

Versión: 01
Página __ de __

• Entregar el cadáver a la persona responsable del
reclamo.
• Anotar los datos del caso en el libro de actas para entrega
de documentos de ingreso y egreso de cadáveres a
Recepción, Control y Distribución de Indicios.
8. CÁLCULOS
N/A
Nombre Código
Libro de registro de control diario de ingreso y egreso de cadáveres N/A
Registro de reclamo, identificación y entrega de cadáver FOR-DTC-MF-056
Formulario de egreso del cadáver N/A
Certificado de carencia de enfermedades infectocontagiosas N/A
10. REFERENCIAS
32-2006.
No.002-2007
10.4 Reglamento de cementerios y tratamiento de cadáveres, Acuerdo Gubernativo N° M de S.P
y A.S. 21-70 tomo 91, pág.289. artículos 35 y 36.
N/A
12. ANEXOS
N/A

9.0 Inhumación de cadáveres
La inhumación de cadáveres procede cuando no se ha logrado por ningún método o

disciplina identificar a las personas y que solo se cuenta con algunos elementos indiciarios
para posibles futuros cotejos cuando una persona usuaria se presente a las sedes periciales
en la búsqueda de su familiar desaparecido.
Adicionalmente incluye aquellos casos de cadáveres identificados de manera fehaciente

por cotejo dactilar y que aún permanecen en cuartos fríos sin ser reclamados, las sedes
periciales después haber realizado actividades de divulgación con el fin de ubicar a
familiares o allegados y si estos cuerpos no son reclamados después del tiempo establecido,
debe realizarse la inhumación.
Criterios a considerar para la inhumación de cadáveres no identificados.
• Todo cadáver XX que ha logrado ser identificado y que no ha sido reclamado, deberá
gestionarse la difusión por medio de radios locales y otros medios de comunicación
social accesibles, para que se localice a los familiares.
• Esperar un lapso de 5 días para que sea reclamado, de lo contrario, realizar proceso
de inhumación, de acuerdo a lo reglamentado.
• En el caso de cadáveres de extranjeros, con frecuencia los cuerpos consulares
solicitan la custodia en cuartos refrigerados del INACIF por un tiempo mayor del
estipulado, con el objeto de realizar los trámites de repatriación. La toma de decisión
sobre la extensión del plazo recae en la Jefatura de Medicina y Clínica Regional y la
Jefatura de Medicina Forense Metropolitana.
• Cada sede pericial deberá remitir a la Unidad de Medicina Forense Metropolitana, la
información de cadáveres no identificados (huellas, copia del formulario de
recolección de datos post mortem debidamente diligenciado, fotografías
individualizantes del cadáver no identificado) e información de la inhumación de los
cadáveres, para optimizar el universo de búsqueda.
Para la inhumación de cadáveres se ha establecido el siguiente esquema y procedimientos:

Versión: 01
INHUMACIÓN DE CADÁVERES
Página __ de __
1. OBJETIVO
Establecer los pasos para llevar a cabo la inhumación de cadáveres identificados y no identificados
que no han sido reclamados por familiares o responsables después de una espera prudencial en
cumplimiento de lo reglamentado.
2. ALCANCE
Este procedimiento es de observancia para el personal de las sedes periciales que realizan trámites
de inhumación de cadáveres identificados y no identificados que han permanecido en cuartos fríos
de morgues sin ser reclamados.

Arqueólogo Forense
Coordinador de Sede Pericial
1. Realizar cada una de las actividades conforme
1. Técnico Forense
lo describe el procedimiento.
Técnico en Tanatología
Auxiliar administrativo
4. GLOSARIO

cadáveres.
acompañante.
5. RECURSOS
5.1 Tecnológicos

Versión: 01
Página __ de __
5.2 Logísticos
5.2.1 Materiales
a. Vehículo.
b. Insumos de oficina
6. PUNTOS CRÍTICOS
6.1 Debe garantizarse la debida individualización de los cadáveres que se inhumarán para
garantizar una fácil localización de estos cadáveres en una futura exhumación.
6.2 Gestionar de manera eficaz toda documentación relacionada al proceso de
inhumación de cadáveres.

Solicitud de listado de cadáveres en cuartos fríos,
Metropolitana
Arqueólogo
Forense –
• Diariamente solicita al área de Recepción de Cadáveres, el

Medicina
Forense
7.1 listado de cuerpos que se encuentran en cuartos fríos.
Coordinador de
• Revisa el número de cuerpos pendientes de evaluación
Sede Pericial
odontológica y dactiloscópica (en camillas).
Verificación de información relativa a cadáveres en
cuartos fríos.
• En el área de atención a usuarios, verifica los datos de cada
uno de los cadáveres que se encuentran en resguardo,
confirmando: si hay familia que reconoció el cuerpo, si fue
identificado por comparación dactilar, si es extranjero, si

Arqueólogo tienen órdenes de permanencia por jefatura de Unidad de

Forense Medicina Forense Metropolitana o Regional.
• Para cada caso verifica la siguiente información:
Coordinador de • En cadáveres identificados por medio de comparación
Sede Pericial dactilar: si no han sido reclamados y si se encuentran
7.2
con solicitud de desplegado de huella lo deja pendiente
Técnico Forense hasta que se termine la identificación.
• Si ya culminó la identificación por AFIS, solicita la
Técnico en certificación en RENAP del DPI (Documento Personal
Tanatología de Identificación) o de la Cédula de Vecindad.
• Si se realizó entrevista técnica a familiares para trámite
de identificación y retiro con resultado positivo se
descarta para inhumación.
• Si no hubo entrevista técnica para cruce de información,
se da continuidad a las actividades de inhumación de
cadáveres como XX, o identificado no reclamado.
Clínica Forense -
Técnico Forense Semaforización de los cuerpos en cuartos fríos.

Metropolitana
Medicina y
Forense –
Medicina
Regional
• Con la información recolectada en los cuartos fríos se

7.3
Técnico en ubican los cuerpos para inhumación y se realiza
Tanatología Semaforización así:

Versión: 01
Página __ de __

• Color rojo para aquellos cadáveres que requieren
tiempo de espera por análisis de ADN pendientes, a
solicitud del Ministerio Público o Consulados.
• Color amarillo para cadáveres que requieren tiempo de
espera que depende de los trámites para el retiro del
cuerpo por parte de los familiares reclamantes.
• Verde para aquellos cadáveres con expediente
completo que están listos para inhumación en
cementerios nacionales.
Inscripción de certificación de defunción en el RENAP
Arqueólogo • Verifica los datos del cadáver en el certificado de
Forense defunción entregado por el médico contra los datos de la

hoja de levantamiento, así: nombres completos, edad,

Coordinador sexo, lugar del levantamiento del cadáver, hora probable
Sede Pericial de muerte, colegiado del médico, la firma y sello.
• La persona responsable que inscribe debe presentar
Técnico Forense 7.4 boleto de ornato, fotocopia del gafete institucional y del
DPI para su debida identificación como funcionario de la
Técnico en Institución.
Tanatología • Hace entrega del certificado de defunción para su
inscripción.
Auxiliar • Recibe constancia de asiento de defunción del RENAP.
Administrativo • Se gestiona el acta para inhumación en cementerios
nacionales.
Casos especiales para la inhumación

Coordinador
• Para aquellos cadáveres inscritos como XX con

Sede Pericial
identificación forense positiva, sin identificación registral

(por carencia de documentos de identidad o que no
Arqueólogo
fueron inscritos en el Registro Civil o RENAP),se informa
Forense
vía telefónica a los deudos respectivos la fecha y lugar de
la inhumación para su conocimiento.
Técnico Forense 7.5
• Cadáveres identificados que no son reclamados en el
plazo establecido se informa vía telefónica a los deudos
Técnico en
respectivos, la fecha y lugar de la inhumación para su
Tanatología
conocimiento.
• Cadáveres de extranjeros identificados no reclamados,
Auxiliar
se informa vía telefónica al Consulado correspondiente
Administrativo
para que gestionen la repatriación de los restos.

Versión: 01
Página __ de __

Traslado para inhumación

• Realiza la individualización de cadáveres según lo
establecido en el instructivo Individualización de
cadáveres inhumados por INACIF mediante colocación

Arqueólogo
de plaquetas identificativas, INST-DTC-MF-007.
Forense
• Revisa las etiquetas y pulseras individualizantes de los
cadáveres para la inhumación.
Coordinador
• Toma fotografía digital del rostro del cadáver de la
Sede Pericial
7.6 etiqueta y pulsera.
• Gestionar cadena de custodia para el ingreso del cadáver
Técnico Forense
al vehículo.
• Realiza el traslado del cadáver para realizar la
Técnico en
inhumación del cuerpo al día siguiente de la
Tanatología
semaforización en verde (días martes, miércoles o
jueves).
• Coordina con el cementerio o la municipalidad local la
inhumación de cadáveres que se realizará.
Arqueólogo
Medicina y Clínica Forense -
Inhumación del cadáver

Forense
• Entrega documentación (original y copia de la
certificación de defunción, cadena de custodia) a la

Metropolitana
Coordinador
persona encargada del cementerio para su revisión y
Regional
Sede Pericial
7.7 firma de la cadena de custodia.
• Verifica las actividades que realiza el sepulturero para
Técnico Forense
inhumar a los cadáveres (traslado desde el vehículo,
revisión por parte del Encargado del cementerio e
Técnico en
inhumación).
Tanatología
Arqueólogo
Medicina y Clínica Forense
Entrega de documentación post inhumación

Forense
• Entrega documentación de la inhumación realizada a la

Metropolitana
persona encargada de recepción de cadáveres (hojas de

- Regional
Coordinador
levantamiento, copia de la certificación, registro con la
Sede Pericial 7.8
información final del cadáver).
Técnico Forense
• El encargado de recepción realiza la actualización en la
base de datos y en el Sistema de Información Nacional
Técnico en
Forense -SINAF-.
Tanatología
Medicina y Clínica
Medicina Forense
–Metropolitana
Limpieza y entrega de vehículo

Forense -
Regional
Encargados de • Realiza la limpieza y desinfección del vehículo utilizado

7.9
limpieza para la inhumación.
• Entrega el vehículo y registra en bitácora de uso.
8. CÁLCULOS
N/A

Versión: 01
Página __ de __
Nombre Código
Solicitud de necropsia (Ministerio Público) FOR-DTC-MF-085
Listado de cadáveres en cuartos fríos N/A
Listado de cadáveres con notas manuscritas N/A
Certificaciones de DPI o de Cédula de Vecindad N/A
Etiqueta de semaforización N/A
Hoja de solicitud/Cadena de custodia FOR-DTC-MF-000
10. REFERENCIAS
32-2006.
No.002-2007.
10.3 Reglamento de cementerios y tratamiento de cadáveres, Acuerdo Gubernativo N° M de
S.P y A.S. 21-70 tomo 91, pág.289. artículos 35 y 36.
N/A
12. ANEXOS
N/A

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2016

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala (INACIF)

Guatemala, diciembre de 2016.

INSTITUTO NACIONAL DE CIENCIAS FORENSES DE GUATEMALA (INACIF)

Dr. Jorge Nery Cabrera Cabrera

Jefe del Departamento Técnico y Científico

Dr. Sergio René Rodas Muñoz

Jefe de Medicina Forense Metropolitana

Dr. Carlos Augusto Rodas González

Jefe de Medicina Forense y Clínica Regional

Dr. Jorge Destarac Godoy

Jefe de Laboratorios de Criminalística

Licda. Ruth Oralia García Marroquín

Comité Internacional de la Cruz Roja (CICR)

Guatemala, Diciembre de 2016.

II. Objetivo del manual .................................................................................................................. 5

III. Justificación del manual ........................................................................................................... 5

IV. Presentación ............................................................................................................................... 5

V. Proceso de necroidentificación humana .................................................................................. 6

1.0 Recepción de cadáveres .................................................................................................. 9

2.0 Identificación de cadáveres por medicina forense...................................................... 14

3.0 Necroidentificación humana por medio de comparaciones dactilares ..................... 30

4.0 Necroidentificación humana por medio de odontología forense ............................... 41

5.0 Necroidentificación humana por medio de antropología forense ............................. 52

6.0 Entrevista técnica para identificación de cadáveres y búsqueda de desaparecidos 60

7.0 Necroidentificación humana por medio de genética forense ..................................... 72

8.0 Entrega de cadáveres identificados ........................................................................... 142

9.0 Inhumación de cadáveres ........................................................................................... 155

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 2

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 3

En consecuencia, durante la presente administración, se llevó a cabo un arduo trabajo de

Al mismo tiempo, se trabajó en mejorar las técnicas de entrevista y en los formularios de

Un agradecimiento especial a la Cruz Roja Internacional por su incondicional apoyo al instituto,

Dr. Jorge Nery Cabrera Cabrera

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 4

II. Objetivo del manual

Documentar el proceso de identificación humana para el Instituto Nacional de Ciencias Forenses

III. Justificación del manual

La identificación humana en el ámbito forense es una comprobación de carácter legal realizada

De la comparación de la información obtenida por medicina forense, lofoscopia, odontología y

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 5

V. Proceso de necroidentificación humana

Un proceso es un conjunto de actividades en las que intervienen diferentes unidades

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 6

Conceptualizando este proceso de identificación humana, de manera general inicia con la

quienes son registrados y asignados a peritos profesionales de la medicina, quienes en el

Para el caso de cadáveres en avanzado estado de descomposición, carbonizados, con cambios

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 7

A continuación se describen algunas posibles rutas secuenciales dentro del proceso de

• Si es adulto, debe obtenerse huellas útiles para cotejos dactiloscópicos; adicionalmente, en

En cadáveres en estado de descomposición, quemados y con cambios tafonómicos por

• Debe documentarse fotográficamente el caso, remitir a especialidades de antropología y

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 8

De acuerdo a lo descrito, se presentan los procedimientos que intervienen en estas actividades

1.0 Recepción de cadáveres

Constituye el punto de partida en el proceso de necroidentificación humana, iniciando esta

de recepción de cadáveres, osamentas y restos humanos:

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 9

No. Puestos Responsabilidad

4.1 Cadena de custodia: Conjunto de procedimientos utilizados para garantizar la

Instituto Nacional de Ciencias Forenses de Guatemala, INACIF 10

Dependencia Personal Número de

Técnico Forense Revisión de documentos e indicios.