FACULTAS DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

FORO DE DEBATE Y ARGUMENTACION

TITULO:
“PCR: HERRAMIENTA IMPORTANTE PARA EL DIAGNÓSTICO

DE COVID-19”

AUTOR:
Yanella Nicol García Palacios

DOCENTE:
MG. Sc. Edwin Alarcón Benavides

ASIGNATURA:
Biología Celular Y Molecular

Pimentel 01 De abril Del 2020

 1. ¿Qué son los coronavirus?
Los coronavirus (CoVs) pertenecen a la subfamilia Orthocoronavirinae,
familia Coronaviridae, en el orden Nidovirales2, son virus ARN
monocatenarios de sentido positivo poseen envoltura, son altamente
diversos y causan trastornos respiratorios, digestivos, hepáticos y
neurológicos de severidad variable, son agentes patógenos que pueden
ser transmitidos a los animales y al hombre; tienen una distribución
mundial2 donde pueden causar enfermedades graves. Los CoVs se
agrupan en cuatro géneros: Alfacoronavirus, Betacoronavirus,
Gammacoronavirus y Deltacoronavirus. Respecto a los Betacoronavirus,
dos de ellos han sido de gran interés para la comunidad científica y la
salud mundial en los últimos diecisiete años: el causante del síndrome
respiratorio agudo severo (conocido como SARS-CoV) y el causante del
síndrome respiratorio del Medio Oriente (conocido como MERS-CoV). 1

1. Cortés Manuel E. Coronavirus como amenaza a la salud pública. Rev. méd. Chile [Internet].
2020 Ene [citado  2020  Abr  30] ;  148( 1 ): 124-126. Disponible en:
https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?pid=S0034-98872020000100124&script=sci_arttext

2. Yus, E., Laviada, M. D., Moreno, L., Castro, J. M., Escribano, J. M., & Simarro, I. España.
[Internet] 2019 dic. Prevalencia de anticuerpos frente a virus influenza y coronavirus
respiratorio en cerdos de cebo en España. Journal of Veterinary Medicine, Series B, 36(1‐
10), 551-556. Disponible en:
https://revistas.udea.edu.co/index.php/iatreia/article/view/341260

2. ¿Dónde se originó la epidemia y que medidas adaptaron

para prevenirla?
El descubrimiento del nuevo coronavirus tiene su origen en un mercado
de mariscos situado en la ciudad china de Wuhan. Debido a un brote de
una enfermedad respiratoria febril debido a un coronavirus 2019-
nCoV. El primer caso notificado fue el de un trabajador del citado
mercado, que ingresó en un hospital el 26 de diciembre de 2019 con
neumonía grave e insuficiencia respiratoria. 2 Tras diversos análisis se
encontró en esta persona el séptimo coronavirus capaz de infectar a
humanos, al que se denominó SARS-CoV-2. El SARS-CoV-2 guarda
similitudes con los otros coronavirus conocidos, pero no es exactamente
igual. Su hallazgo se suma a cuatro coronavirus endémicos, conocidos
hace tiempo y causantes del 20% de los resfriados comunes, y a dos
coronavirus epidémicos aparecidos este siglo: el relacionado con el
síndrome respiratorio severo agudo (SARS-CoV), descubierto en 2003, y
el relacionado con el síndrome respiratorio de Oriente Medio (MERS-
CoV), aparecido en 2012.1 Chile ha entrado en la Etapa 4 del
Coronavirus COVID-19, en que se produce circulación viral y dispersión
comunitaria del virus. Es por eso que el Gobierno ha decidido cerrar
todas las fronteras terrestres, marítimas y áreas del país para el tránsito
de personas extranjeras, a desde el miércoles 18 de marzo de 2020. 3
 Todas las personas que quieran entrar ya sean nacionales o residentes
del país deberán someterse a la Aduana Sanitaria y a una cuarentena
obligatoria de 14 días. Así continuaron la prevención mediante los
siguientes regímenes3
 Evitar el contacto directo con animales sospechosos responsables
de la transmisión primaria (camellos, murciélagos)
 Evitar el contacto directo con personas que tengan síntomas que
indiquen una infección respiratoria, por ejemplo, fiebre, tos,
secreción nasal, dificultad respiratoria y poder prevenir, por
ejemplo, usar mascarilla quirúrgica. Evitar los servicios de
urgencias o lugares con gran aglomeración de personas
 Lavado frecuente de manos con agua y jabón, si no se dispone de
jabón la solución hidroalcohólica.
 No tocar la nariz, los ojos ni la boca con las manos, pues son
localización del virus.
 Utilizar siempre pañuelos desechables.
 En el primer momento de notar fiebre, tos, dificultad respiratoria o
cualquier síntoma respiratorio de gravedad consultar con los
servicios sanitarios quienes valoraran el uso de mascarilla.
 Todo el personal (sanitario y no sanitario) debe recibir información
a acerca de la enfermedad, el mecanismo de transmisión y las
medidas de prevención y protección.
 En el momento de la sospecha estos individuos deberán separarse
de otros sujetos, se les colocará una mascarilla quirúrgica y serán
conducidos de forma inmediata a una zona de aislamiento. El
personal que los acompañe hasta la zona de aislamiento llevará al
menos también mascarilla quirúrgica y guantes de protección.

1. Diez-Fuertes, F., Plaza-Ramos, J. A., & de Coronavirus, G. D. A. C. Origen del SARS-

Cov-2. [Internet] 8-abr-2020 [citado 2020 abr 30]. Disponible en:
https://repisalud.isciii.es/handle/20.500.12105/9559

2. Mayo Montero MªE., Cique Moya A., Cascante Burgos J., Méndez Montesinos J.R..
Prevención y control de la infección ante sujetos sospechosos de infección por el nuevo
coronavirus MERS-CoV en Unidades militares. Sanid. Mil.  [Internet]. 2015  Sep [citado 
2020  Mayo  01] ;  71( 3 ): 196-200. Disponible en: http://scielo.isciii.es/scielo.php?
pid=S188785712015000300007&script=sci_arttext&tlng=pt

3. Chile, M., 2020. Medidas De Prevención Ante El Nuevo Coronavirus - Chile En El

Exterior. [online] 1- abr. 2020 [Citado 30 abr. 2020]. Chile en el Exterior. Disponible en:
<https://chile.gob.cl/chile/medidas-de-prevencion-ante-el-nuevo-coronavirus>].

3. ¿De qué forma se puede adquirir la infección?

 El riesgo de contraer la COVID-19 de alguien que no presente ningún
síntoma es muy bajo. Sin embargo, muchas personas que contraen la
COVID-19 solo presentan síntomas leves, por lo tanto, es posible
contagiarse de alguien que, por ejemplo, solamente tenga una tos leve y
no se sienta enfermo.2 La enfermedad COVID-19 se propaga
principalmente de persona a persona a través del contacto cercano y se
transmite a través de gotas del tracto respiratorio cuando un individuo
infectado estornuda o tose, bien de modo directo, o de modo indirecto
por contacto con superficies contaminadas con el virus, que el individuo
susceptible toca con sus manos y luego se las lleva a nariz, ojos u boca. 1
El «período de incubación» es el tiempo que transcurre entre la infección
por el virus y la aparición de los síntomas de la enfermedad. La mayoría
de las estimaciones respecto al periodo de incubación de la COVID-19
oscilan entre 1 y 14 días, y en general se sitúan en torno a cinco días 2
El contagio por gotitas respiratorias ocurre cuando las personas están
muy cerca (a un metro de distancia) de una persona que tiene síntomas
como toser o estornudar. En ese caso, la persona sana recibiría gotitas
respiratorias en su mucosa (de la boca o nariz) o la conjuntiva en los
ojos. La mucosa se encuentra en la parte interna de la boca y la nariz.
Es por esto que ponerse cubrebocas dejando expuesta la nariz y ojos no
protege, pues a través de estas mucosas también se puede dar el
contagio. El otro tipo de contagio es al tocar superficies contaminadas
con el virus y después tocar la nariz, boca u ojos.3

1. Navarro, G., & Morales, J. M. M. (2020). Manejo Del Riesgo De Congagio Por
Coronavirus En Madres Y Recién Nacidos. [Internet] 12 marzo 2020 [citado 30 abril
2020] España. Disponible en: https://www.nadiecomomama.com/wp-
content/uploads/2020/03/Lactancia-y-coronavirus-2020.pdf

2. Saber, Q. D. (2020). Sobre El Coronavirus [Internet] 21 de febrero 2020 [cita 30

abril 2020] Chile. Disponible en: http://www.visionchivilcoy.com.ar/revistas/revista-
abril.pdf

3. Santana, E.(2020). Organización Mundial de la Salud actualiza datos de cómo se

contagia o no el COVID-19. [Internet] 19 de abril 2020 [citado 01 mayo 2020].
Disponible en: https://lector24.com/blog/2020/03/30/organizacion-mundial-de-la-
salud-actualiza-datos-de-como-se-contagia-o-no-el-covid-19/

4. ¿Cómo se realiza la técnica del PCR?

La reacción en cadena de la polimerasa es, sin lugar a dudas, la técnica

más importante y revolucionaria en biología molecular, debido a que
permite obtener in vitro millones de copias de un fragmento de ácido
desoxirribonucleico (ADN) a partir de una sola molécula. La PCR se
basa en la replicación celular en la que actúan varias proteínas para
sintetizar dos nuevas hebras de ADN a partir de otra que funciona como
molde.1

Recordemos que cada ciclo de la PCR se lleva a cabo en tres etapas

principales: desnaturalización, hibridación y extensión. 3
Desnaturalización. En esta etapa, las cadenas de ADN son calentadas y
separadas a una temperatura de 95 °C durante 20-30 segundos; el
tiempo depende de la secuencia del templado. 2
Hibridación. En esta etapa, los primeros se alinean al extremo 3’ del
templado previamente separado e hibridan con su secuencia
complementaria. Para que se forme el complejo templado-primeras, es
importante que la temperatura de hibridación o temperatura melting (Tm)
sea la óptima; ésta generalmente oscila entre 50-60 °C. 2
Extensión. En esta etapa, la Taq polimerasa actúa sobre el complejo
templado-primeras y empieza su función catalítica a una velocidad muy
rápida; agrega dNTP’s complementarios para crear las cadenas
completas de ADN. La extensión de las cadenas es en dirección de la
síntesis del ADN, es decir, de 5’ a 3’. La temperatura óptima para la
reacción es de 72 °C, ya que a esa temperatura la enzima es funcional. 2
PROCESO:
 El ARN del virus que se extrae de la muestra se purifica y se
mezcla con una enzima llamada transcriptasa inversa, que
convierte el ARN de una sola cadena en ADN de doble cadena. El
ADN vírico se añade a un tubo de ensayo junto con cebadores -
secciones cortas de ADN diseñadas para unirse al
virus-, nucleótidos -los bloques de construcción que componen el
ADN- y una enzima constructora del ADN.4

 La máquina PCR calienta la mezcla. Esto hace que el ADN de

doble cadena se desenrede y el cebador pueda unirse al ADN a
medida que se enfría, proporcionando un punto de partida para
que la enzima constructora de ADN lo copie. Este proceso
continúa a través de repetidos calentamientos y enfriamientos
hasta que se han creado millones de copias del ADN. 4
 Esto explica cómo la PCR amplifica el código genético del virus,
pero no cómo se detecta. Aquí es donde entran los colorantes
fluorescentes, añadidos al tubo de ensayo mientras se copia el
ADN. Se unen al ADN copiado, lo que aumenta su fluorescencia
haciendo que emitan más luz, que permite confirmar la presencia
del virus.4
 La fluorescencia aumenta a medida que se producen más copias
y, si cruza un cierto umbral, la prueba es positiva. Si el virus no
estaba presente en la muestra, la prueba PCR no habrá hecho
copias, por lo que el umbral de fluorescencia no se alcanzará y,
en ese caso, la prueba será negativa.4

1. Costa, J. (2004). Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) a tiempo

real. Enfermedades infecciosas y microbiología clínica, [Internet] 2004 [citado 01
mayo 2020] 22(5), 299-305. Disponible en:
https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0213005X0473092X
 2. Tamay de Dios, L., Ibarra, C., & Velasquillo, C. Fundamentos de la reacción en
cadena de la polimerasa (PCR) y de la PCR en tiempo real. Investigación en
discapacidad, [Internet] (2013). [citado 01 mayo 2020]. 2(2), 70-78. Disponible
en: http://ddt.inr.gob.mx/indiscap/PDFIndiscap/2013/Num2/ir132d.pdf

3. Díaz, A. S., Rentería, L. F., Cortez, J. A., & Palacios, E. S. PCR: reacción en
cadena de la polimerasa. Herramientas moleculares aplicadas en ecología:
aspectos teóricos y prácticos, [Internet] (2008). [ citado 01 mayo 2020] 53.
Disponible en: https://www.researchgate.net/profile/Alejandra_Vazquez-
Lobo/publication/280731680_Microsatelites/links/55c3903008aeca747d5fa9
8f/Microsatelites.pdf#page=69

4. Ojo Público. 2020. Eficacia Y Limitaciones De Las Pruebas Para Detectar El

Coronavirus. [online] 2020 Available at: <https://ojo-publico.com/1701/eficacia-y-
limitaciones-de-las-pruebas-para-detectar-el-coronavirus> [Accessed 1 May 2020].

5. ¿En qué instituciones del Perú se realiza el PCR?

Se trata de los centros de análisis en Tumbes, Piura, La Libertad,

Lambayeque y Cajamarca, en el norte; Loreto y San Martín, en la
Amazonía; Huánuco en el centro del país, y Ayacucho, Cusco y
Arequipa en el sur.

 Laboratorio Referencial Regional  La Libertad.

 Hospital Jamo  Tumbes
 Hospital de Apoyo II Santa Rosa Regional  Piura
 Hospital Regional Lambayeque, Dirección de Investigación,
Laboratorio de Biología Molecular. Lambayeque
 Hospital Regional Docente de Cajamarca  Cajamarca
 Hospital Regional de Loreto "Felipe Santiago Arriola Iglesias" 
Loreto
 Laboratorio Regional San Martín  San Martín
 Hospital Hermilio Valdizan  Huánuco
 Laboratorio Molecular de la Universidad Nacional Hermilio 
Ayacucho
 Hospital Regional del Cusco  Cusco
 Laboratorio Molecular el de la Universidad Nacional San
Agustín Arequipa del Sur

1. López-Ramírez Kelly Lelia, Díaz-Maldonado Kevin Colbert, Vergara Espinoza

Martha Arminda, Santamaría-Veliz Olivia, Serquén-López Luis Miguel, Canelo
Olinda Bustamante et al . Patrón de clonalidad mediante ERIC-PCR y REP-PCR de
Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae productores de betalactamasas de
espectro extendido, aisladas de pacientes con infección urinaria intrahospitalaria.
Hospital Regional Lambayeque, Perú. Horiz. Med.  [Internet]. 2018 Abr [citado 
2020  Mayo  01] ;  18( 2 ): 11-18. Disponible en:
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1727-
558X2018000200003&lng=es.  http://dx.doi.org/10.24265/horizmed.2018.v18n2.03.

6. ¿El PCR a que enfermedades ayuda a su diagnóstico?

La prueba de PCR se puede utilizar encontrar o seguir enfermedades
que causan inflamación, por ejemplo: Coronavirus, Papiloma Humano
(VHP), Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae.
 Infecciones bacterianas que causan un problema grave poniendo
en peligro la vida
 Una infección por hongos
 Enfermedad intestinal inflamatoria, que causa hinchazón
y sangrado en los intestinos
 Una trastorno autoinmune, como lupus o artritis reumatoide
 Una infección del hueso llamada osteomielitis

1. Chile, M., 2020. Medidas De Prevención Ante El Nuevo Coronavirus - Chile

En El Exterior. [online] Chile en el Exterior. [citado 1 May 2020]. Disponible
en: <https://chile.gob.cl/chile/medidas-de-prevencion-ante-el-nuevo-
coronavirus.