FUENTES DE LACASAS QUE SON ÚTILES EN EL AGUA.

BIORREMEDIACIÓN

 Lacas fúngicas

La primera lacasa fúngica fue reportada por Bertrand [24], quien observó que esta
enzima era responsable de cambio de color en hongos del género Boletus cuando
en contacto con el aire. Una gran cantidad de hongos han sido confirmado como
productores de lacasa, con hongos de podredumbre blanca siendo el más
reconocido. Entre las especies de hongos, el basidiomicetos, específicamente
Agaricus bisporus, Pleurotus ostreatus, Trametes versicolor, Phanerochaete
Chrysosporium y Coprinus cinereus, producen varios isoformas de lacasa
(Tabla 1) [23, 25, 26].

Las lacasas fúngicas están involucradas en la esporulación, pigmento producción,

formación corporal fructífera, defensa contra el estrés, patogenia vegetal y
degradación de lignina [27, 28]. Aunque la mayoría de las lacasas purificadas son
extracelulares enzimas, hongos que pudren la madera también contienen
intracelular lacasas Se ha sugerido que la localización de lacasa probablemente
está relacionada con su fisiología funciona y determina el rango de sustratos
disponibles [29] Las lacasas existen en una variedad de estructuras; la mayoría de
ellos son monoméricos, pero algunos también están presentes en formas
homodiméricas, heterodiméricas y multiméricas. Su masa molecular varía de 50 a
140 kDa, dependiendo del organismo, aunque es un hongo típico lacasa variará
de 60 a 70 kDa con un isoeléctrico apunte alrededor de pH 4.0 [29, 30]. Las
lacasas fúngicas son generalmente glicosilada, con un aumento de masa del 10-
25%, aunque algunas lacasas presentan un aumento> 30%. Se ha demostrado la
porción de carbohidratos de las lacasas. Para asegurar su estabilidad
conformacional y para proteger la enzima de la proteólisis y la inactivación por
radicales [31, 32].
El potencial redox (E °) de las lacasas tiene una relación directa con la energía
requerida para eliminar un electrón del sustrato reductor, constituyendo uno de los
fundamentos características de estas enzimas [33]. Por lo tanto, las lacasas con
un alto E °, como las lacas fúngicas, son de interés especial en biotecnología
porque son capaces de sustratos oxidantes con alta E ° (E °> 400 mV) [33–36] Por
ejemplo, el E ° de bisfenol A (BPA), p-nonilfenol y azo dye BR114 están por
encima de 600 mV [37, 38]. Las lacasas fúngicas ayudan a la biorremediación a
través de la oxidación. de hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP) [39, 40],
plásticos y compuestos fenólicos [41–44], colorantes [44-48], y la degradación de
productos farmacéuticamente activos compuestos [49-52], entre otros (tabla 1).
Dado que las lacasas de hongos de podredumbre blanca tienen el potencial
dedegradación de compuestos fenólicos, diferentes estudios tienen implicó la
inmovilización de microorganismos, como como T. versicolor, en esponjas de
alginato de sílice y loofa como soportes para la eliminación de fenol [43]. Mientras
que el extracto crudo de Trametes pubescens se ha utilizado para la degradación
de clorofenoles (Tabla 1) [44]. Además, extracto crudo del hongo de podredumbre
blanca Trametes hirsuta, demostrado capaz de degradar el cloranfenicol (uno de
los más micro contaminantes persistentes en desechos farmacéuticos), con o sin
mediadores (tabla 1) [44, 53]. Fukuda y col. [54] utilizó una lacasa purificada libre
de Trametes villosa para degradar BPA, otro contaminante peligroso descargado
en ríos y mares, sin necesidad de mediadores. Mientras tanto, Barrios-Estrada et
al. [42] informó que la degradación de BPA (20 mg / L) ocurrió dentro del primeras
24 h cuando se usa Pycnoporus sanguineus (CS43) y T. lacasas versicolor
inmovilizadas sobre membranas cerámicas (Tabla 1). Diferentes estrógenos
esteroideos pueden ser eliminado o degradado de sistemas acuosos por el libre
lacasas de P. sanguineus o lacasas de T. versicolor o Myceliophthora thermophila
que han sido inmovilizadas sobre membranas cerámicas (Tabla 1) [55, 56]. Otro
compuestos problemáticos en efluentes de textiles y papel Las industrias incluyen
tintes sintéticos, de los cuales, muchos son tóxico para los mamíferos Por lo tanto,
se han hecho esfuerzos hacia su eliminación de las aguas residuales industriales
utilizando lacasas de T. versicolor y Trametes trogii (Tabla 1) [49, 58].
El rendimiento de lacasa de fuentes fúngicas nativas no logra satisfacer la
necesidad industrial, ya que los hospedadores naturales a menudo producen
varias isoenzimas de lacasa que dificultan el aislamiento la lacasa de interés, más
aún cuando la enzima está en silencio o no abundantemente expresado. Por lo
tanto, heterólogo la expresión de lacasa se ha convertido en una alternativa
prometedora
[23, 59-71]. Expresión heteróloga de muchas lacasas fúngicas. se ha informado en
bacterias como E. coli [60], levaduras como Pichia pastoris y Yarrowia lipolytica
[43, 61-64], hongos filamentosos como Aspergillus oryzae, A. Níger y Trichoderma
atroviride [65-67], y plantas como Arabidopsis thaliana y Zea mays (Tabla 1) [68,
69]. Las levaduras y los hongos filamentosos suelen ser más atractivos. anfitriones
para la producción de proteínas heterólogas debido a su crecimiento microbiano
más rápido, facilidad de manipulación genética, su capacidad para secretar
grandes cantidades de proteínas en el medio de crecimiento, así como la
capacidad de realizar postraducciones modificaciones [30, 49]. Las lacasas
fúngicas recombinantes también han sido ampliamente aplicado para fines de
biorremediación. Por ejemplo, el Proteínas recombinantes Lcc1 y Lcc3 de T. trogii,
producidas en P. pastoris demostró ser un biocatalizador útil para La degradación
oxidativa de varios colorantes contaminantes, como como carmín índigo, el tinte
más importante utilizado para la fabricación blue jeans [62, 70]. Además, Darvishi
et al. [71] expresó y produjo una lacasa recombinante (Lcc IIIb) de T. versicolor en
Y. lipolytica, demostrando su capacidad de decolorar cinco colorantes azoicos
fenólicos con> 40% eficiencia después de 4 h (Tabla 1). Del mismo modo, Wang
et al. [68] expresó una lacasa del hongo ectomicorrícico Laccaria bicolor en P.
pastoris y A. thaliana, que demostrado ser capaz de decolorar> 80% del cristal
violeta tinte, probado usando estudios a escala de laboratorio, proporcionando un
alternativa a la decoloración de residuos industriales. En otro estudio, Balcázar-
López et al. [67] expresó una lacasa de P. sanguineus en el hongo filamentoso T.
atroviride; la lacasa expresada heterólogamente mantenida propiedades similares
a las de la enzima nativa, aunque el recombinante mostró el potencial de eliminar>
90% de el fenantreno y el benzo [α] pireno presentes en las aguas residuales de
una planta de la industria de biocombustibles usando escala de laboratorio
estudios [67].

 Lacasas de plantas e insectos.

La primera lacasa identificada e informada de las plantas fue del árbol de laca
japonés Toxicodendron vernicifluum (Rhus vernicifera) [72]. Sin embargo, estudios
en planta Las lacasas son raras. Las lacasas de plantas comparten su molecular
Arquitectura y mecanismos de reacción con lacasas fúngicas. En general, tienen
un E ° más bajo como lacasas bacterianas (0.41 V para R. vernicifera y un pI entre
7.0 y 9.6) [22, 31, 73]. Estas proteínas muestran una mayor glucosilación. patrón
(22 45%) [74, 75], consta de 500–600 amino ácidos, y pesan aproximadamente
60-130 kDa [31]. Planta las lacasas han sido descritas y asociadas con la
biosíntesis y polimerización de lignina [76, 77], alargamiento [78-80], y la
respuesta al estrés [81-83]. Aunque las lacasas de plantas no han estado
involucradas en gran medida en bioremediación, algunos casos aplicados han sido
reportado. Wang y col. [84] presentó un sistema de fitorremediación ex planta
basada en la sobreproducción en A. thaliana de una lacasa secretoria (LAC1), que
fue Expresado de forma nativa en las raíces de Gossypium arboreum.

La expresión de LAC1 en A. thaliana confirió resistencia a varios compuestos

fenólicos tóxicos, probablemente atribuibles a la transformación inducida por

LAC1. LAC1 recombinante las plantas fueron resistentes a compuestos fenólicos

bajo condiciones de invernadero, ayudando a desintoxicar su crecimiento medio

ambiente [84]. Watharkar y col. [85] mostró que las lacasas y otras enzimas de

Asparagus densiflorus podría aplicarse en el tratamiento de textiles industriales

efluentes Para los estudios a escala de laboratorio, utilizaron un subsuelo vertical

fitoreactor de flujo basado en percolación vertical de aguas residuales a través de

capas de suelo, zona radicular y una red fondo. Para estudios a gran escala,

plantaron camas de A. densiflorus en un sistema de transpiración de alta velocidad

(HRTS), que se ha utilizado con éxito para algunas industrias. En En ambos

casos, A. densiflorus mostró la capacidad de degradarse tintes y niveles reducidos

de metales pesados tóxicos. Se han propuesto lacasas de otras plantas y probado

con éxito para la degradación del tinte usando suspensión células y lacasas

purificadas [86-90]. Huang y col. [91] identificado lacasas en arroz (Oryza sativa),

posiblemente involucradas en el catabolismo de atrazina e isoproturon (herbicidas)

o desintoxicación Las dos lacasas Oryza sativa expresadas heterólogo en P.

pastoris, condujo a una mayor resistencia de células a atrazina e isoproturon, lo

que sugiere que algunas de las lacasas podrían estar involucradas en la

desintoxicación o degradación de estos herbicidas [91]. Las plantas se han

utilizado con éxito como recombinantes. Sistemas de expresión de lacasas

fúngicas y vegetales. Chiaiese et al. [92] expresó una lacasa de P. ostreatus en

Nicotiana tabacum, capaz de reducir el 70% del total. Contenido de fenol de las

aguas residuales de la almazara (tabla 1). Otros autores han expresado hongos

laccases con industrial aplicaciones en plantas a base de arroz [93] y tabaco [94,

95], así como las semillas de maíz [69]. Por el contrario, insecto Se ha informado

que las lacasas juegan un papel importante enesclerotización de cutículas y

pigmentación, así como otros procesos como la curación de heridas y el sistema

inmunitario desarrollo y mantenimiento [96, 97]. Al mejor de según nuestro

conocimiento, no se ha reportado lacasa de insectos para procesos de

biorremediación.